核酸寡聚物的制造方法与流程

技术特征：
1.核酸寡聚物的稳定化方法，其特征在于，将与包含式(1)所示的核酸寡聚物的溶液接触的气氛设为氧浓度10％以下的非活性气体气氛，所述溶液为从反相柱层析中洗脱的级分，[化学式1]式(1)中，b
c
各自独立地表示相同或彼此不同的核酸碱基，r相同或彼此不同，各自独立地表示氢原子、氟原子或oq基，q相同或彼此不同，各自独立地表示氢原子、甲基、2-甲氧基乙基、与核糖的4’位的碳原子键合的亚甲基、与核糖的4’位的碳原子键合的亚乙基、或与核糖的4’位的碳原子键合的乙叉基，x相同或彼此不同，各自独立地表示氧原子或硫原子，y表示氢原子或羟基的保护基，g表示铵离子、烷基铵离子、碱金属离子、氢离子或羟基烷基铵离子，n为满足式(2)的整数，并且，n个x中至多20％是硫原子，60≤n
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(2)。2.经稳定化的纯化核酸寡聚物溶液的制造方法，其包括：使利用亚磷酰胺法生成的所述式(1)所示的核酸寡聚物的粗产物经过反相柱层析，得到包含式(1)的核酸寡聚物的已纯化的洗脱级分的工序；以及将与权利要求1中记载的所述洗脱级分接触的气氛设为氧浓度10％以下的非活性气体气氛的工序。3.纯化核酸寡聚物的制造方法，其还包括：利用权利要求2中记载的工序制造纯化核酸寡聚物溶液的工序；和从所述纯化核酸寡聚物溶液中分离已纯化的核酸寡聚物的工序。4.如权利要求1～3中任一项所述的方法，其中，氧浓度为5％以下。5.如权利要求1～4中任一项所述的方法，其中，氧浓度为2.5％以下。6.如权利要求2～5中任一项所述的方法，其中，所述反相柱层析为使用包含选自由单烷基铵盐及二烷基铵盐组成的组中的至少1种铵盐的流动相作为流动相的反相柱层析。
7.如权利要求2～6中任一项所述的方法，其中，所述反相柱层析为使用包含选自由二烷基铵盐组成的组中的至少1种铵盐的流动相作为流动相的反相柱层析。8.如权利要求2～7中任一项所述的方法，其中，所述反相柱层析为使用包含选自由醇系水溶性有机溶剂及腈系水溶性有机溶剂组成的组中的至少1种水溶性有机溶剂的流动相作为流动相的反相柱层析。9.如权利要求3所述的方法，其包括：将所述经稳定化的纯化核酸寡聚物溶液与具有至少1个氧原子的c1-c4的有机溶剂进行混合，并分离所析出的核酸寡聚物。10.如权利要求1～9中任一项所述的方法，其中，所述式(1)中，r各自独立地表示羟基或甲氧基。11.如权利要求1～9中任一项所述的方法，其中，r为羟基。

技术总结
本发明的目的在于提供具有硫代磷酸酯键的核酸寡聚物溶液的稳定化方法及纯化核酸寡聚物的制造方法。本发明提供核酸寡聚物的稳定化方法及由下述洗脱级分制造纯化核酸寡聚物的方法，其特征在于，将与通过对包含式(1)(式中，标记与说明书中记载的相同)所示的核酸寡聚物的粗核酸寡聚物进行反相柱层析处理而得到的洗脱级分接触的气氛设为氧浓度10％以下的非活性气体气氛。的非活性气体气氛。的非活性气体气氛。


技术研发人员：森山悠也
受保护的技术使用者：住友化学株式会社
技术研发日：2021.03.31
技术公布日：2022/11/18