一种生物酶功能棉片及其制备方法与流程

1.本技术涉及生物杀菌技术领域，更具体地说，它涉及一种生物酶功能棉片及其制备方法。


背景技术：

2.宠物皮肤病一直以来都是宠物主人们比较头疼的问题，在感染皮肤病后，宠物因剧痒会不停地在身上挠痒，从而容易引发丘疹、皮屑、皮肤肥厚、掉毛等情况，甚至会引发皮肤溃烂等严重疾病。
3.常用的治疗手段是使用杀菌制剂对感染区域进行处理，而目前大多的杀菌制剂中的杀菌活性成分主要包括酒精、碘液和高锰酸钾等。上述杀菌活性成分对皮肤的刺激性较强，长期使用容易导致皮肤受损等情况，并且容易产生耐药性的问题。
4.另外，常用的杀菌制剂剂型通常为喷雾、凝胶、乳膏等，其中喷雾剂型的杀菌制剂受宠物毛发的影响，不易均匀喷涂在感染皮肤区域，且持效性较差；而凝胶类和乳膏类剂型的杀菌制剂需要用手涂抹，在不穿戴医用手套的前提下对擦药者手部皮肤有一定的卫生及感染隐患。


技术实现要素：

5.为了在保障杀菌效果的同时减少刺激性及耐药性的情况，并提供一种新的治疗形式协助治疗，本技术提供一种生物酶功能棉片及其制备方法。
6.第一方面，本技术提供一种生物酶功能棉片，采用如下的技术方案：一种生物酶功能棉片，由棉片本体负载杀菌溶液得到；所述杀菌溶液包括以下质量百分比的原料：溶葡萄球菌酶0.0001%～1%、溶菌酶0.002%～10%、纳米氧化锌0.01%～0.2%、稳定剂10%～40%、保湿剂1%～20%、协效剂0.1%～2%、余量为蒸馏水；所述稳定剂为聚乙二醇400和乙二胺四乙酸按照质量比（100～200）：1组成的混合物。
7.通过采用上述技术方案，以溶葡萄球菌酶、溶菌酶和纳米氧化锌作为杀菌活性成分，相互协同配合达到优异的杀菌效果，且不易产生耐药性的问题。其中溶葡萄球菌酶可以作用于细菌细胞壁肽聚糖五甘氨酸肽桥，从而破坏细菌细胞壁，使得细菌因细胞内容物泄露而死亡。同时溶葡萄球菌酶核心成分含锌离子，可提高局部受损皮肤和粘膜组织中锌的含量，而锌离子可促进核酸和蛋白质的生物合成，提高局部组织中碱性磷酸酶（akp）的活性，增加组织中胶原蛋白的含量，有利于表皮细胞的生长分裂，从而促进受损皮肤和粘膜组织创面的快速愈合，显著缩短粘膜愈合时间。
8.溶菌酶可以破坏细胞壁中的n-乙酰胞壁酸和n-乙酰氨基葡萄糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。同时溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，并与dna、rna、脱辅基蛋白形成复合体，使病毒失活。
9.纳米氧化锌可以在水介质中连续释放锌离子，锌离子会进入细菌细胞膜并破坏细
胞膜，在细胞内与蛋白质的某些基团反应时，破坏细菌和细胞中蛋白质的空间结构，导致细胞中的蛋白酶失活进而杀死细菌。并且破坏细菌结构后，锌离子会从细菌中游离出来，重复杀菌过程。另外，纳米氧化锌可以与细菌表面的细胞壁相互作用，破坏细菌的细胞壁，导致内容物被释放从而杀灭细菌。
10.综上，虽然溶葡萄球菌酶和溶菌酶的消毒机理都是针对细胞壁肽聚糖，但是作用位点不同，两者复配后具有显著的协同杀菌作用。而纳米氧化锌杀菌机理与溶葡萄球菌酶、溶菌酶均存在较大差异，并且存在重复杀菌的过程，即具有较好的杀菌持效性；同时纳米氧化锌所释放的锌离子与溶葡萄球菌酶中的锌离子相配合，促进受损皮肤和粘膜组织创面的快速愈合，显著缩短粘膜愈合时间。因此以溶葡萄球菌酶、溶菌酶和纳米氧化锌作为杀菌活性成分，三者之间相互协同配合，杀菌效果得到显著提高，并且对于促进创面愈合、延长药效和减少耐药性问题均有较好地积极意义。另外，三者对于生物体的毒害作用及刺激性微乎其微，实用意义较佳。
11.另外按照上述比例复配得到的稳定剂可以有效提高溶葡萄球菌酶和溶菌酶的活性，保障杀菌活性成分的稳定性。具体地，聚乙二醇400可以在溶葡萄球菌酶和溶菌酶的表面形成保护膜，使其结构免受破坏；并且聚乙二醇400可以有效提高灭菌溶液的粘性，从而使得杀菌溶液更易附着在皮肤感染区域，达到持效杀菌的效果。而乙二胺四乙酸可以有效螯合钙、镁等危害酶活性的金属离子，进一步保障杀菌活性成分的稳定性。
12.同时以棉布本体作为杀菌溶液的负载媒介，可以较为便捷且均匀地将杀菌溶液转移至皮肤感染区域内，并且减少了施药者手部皮肤与感染区域的接触，感染隐患较低。
13.在一个具体的可实施方案中，所述杀菌溶液包括以下质量百分比的原料：溶葡萄球菌酶0.2%～0.7%、溶菌酶3%～8%、纳米氧化锌0.04%～0.12%、稳定剂20%～30%、保湿剂5%～10%、协效剂0.5%～1%、余量为蒸馏水；所述稳定剂为聚乙二醇400和乙二胺四乙酸按照质量比（120～150）：1组成的混合物。
14.通过采用上述技术方案，进一步优化杀菌溶液的配比，有助于进一步提高杀菌溶液的综合性能。
15.在一个具体的可实施方案中，所述棉片本体是预先浸渍在壳聚糖溶液中得到。
16.通过采用上述技术方案，首先壳聚糖具有一定的抗菌杀菌效果，并且壳聚糖可以起到类似聚乙二醇400的稳定剂作用。同时壳聚糖具有较为优异的吸湿性，预先浸渍壳聚糖溶液的棉片本体可以更好地吸附杀菌溶液；且更多的杀菌溶液不直接与棉片本体接触，而是趋向于与壳聚糖溶液结合，可以有效减少擦拭过程中棉布本体上杀菌活性成分的残留量，即在擦拭过程中更便于将杀菌溶液转移至皮肤感染区域，对于提高治疗效果具有积极意义。另外，与壳聚糖结合的杀菌活性成分具有较好的缓释效果，可以进一步延长药效。
17.在一个具体的可实施方案中，所述壳聚糖溶液的质量浓度为0.5%～1%。
18.在一个具体的可实施方案中，所述棉片本体浸渍壳聚糖溶液后的含液量为0.1～0.3倍。
19.在一个具体的可实施方案中，所述保湿剂为尿囊素和神经酰胺按照质量比1：（3.6～5.2）组成的混合物。
20.通过采用上述技术方案，尿囊素在具有较好的保湿效果的同时，还兼具一定的抗菌作用；而神经酰胺具有很强的缔合水分子能力，可以通过在角质层中形成网状结构维持
皮肤水分。两者按照上述比例复配后，保湿效果更为显著。
21.在一个具体的可实施方案中，所述协效剂为甘宝素和甲壳素按照质量比1：（1.4～2.2）组成的混合物。
22.通过采用上述技术方案，甘宝素具有较好的广谱杀菌性能，而甲壳素在具有较好的杀菌效果的同时，还兼具保湿作用；同时甘宝素与甲壳素的性质较为温和，按照上述比例复配后，协效作用更为显著。
23.另外，甘宝素和甲壳素均难溶于水，即在体系中主要以固体状态存在，擦药后所形成的膜层中固体颗粒的存在会赋予膜层更佳的透气效果。
24.第二方面，本技术提供一种生物酶功能棉片的制备方法，采用如下的技术方案：一种生物酶功能棉片的制备方法，包括以下步骤：杀菌溶液配制：预先混合聚乙二醇400、乙二胺四乙酸和蒸馏水，然后加入溶葡萄球菌酶、溶菌酶和纳米氧化锌，充分混合后得到预混液；然后将保湿剂和协效剂加入预混液中，充分混合后得到杀菌溶液；负载处理：向含有棉片本体的容器内灌装杀菌溶液，得成品生物酶功能棉片。
25.在一个具体的可实施方案中，所述负载处理步骤中，先将棉片本体浸渍在壳聚糖溶液中，再将浸渍后的棉片本体放置在容器内，接着灌装杀菌溶液，得成品生物酶功能棉片。
26.在一个具体的可实施方案中，所述负载处理步骤中，所述生物酶功能棉片的含液量为1.7～1.9倍。
27.综上所述，本技术具有以下有益效果：1、本技术以溶葡萄球菌酶、溶菌酶和纳米氧化锌作为杀菌活性成分，由于三者的杀菌作用原理存在差异，且溶葡萄球菌酶和溶菌酶作用于细菌细胞壁上的不同位点，而纳米氧化锌破坏细胞壁、细胞膜及其内部结构，因此三者复配后，存在显著的杀菌协同效果；并且纳米氧化锌在破坏细菌结构后会从细菌中游离出来，从而实现重复杀菌的效果，即药效维持时间较长。
28.2、本技术中的纳米氧化锌、甘宝素和甲壳素在体系中均倾向于以固体粉末形式存在，擦药后所形成的膜层中固体粉末的存在会赋予膜层更佳的透气效果。
29.3、本技术中以预先浸渍壳聚糖的棉片本体作为负载杀菌溶液的媒介，更多的杀菌溶液倾向于与壳聚糖结合，便于擦药过程中杀菌溶液转移至皮肤感染区域，实用效果更佳。
具体实施方式
30.以下结合实施例和对比例对本技术作进一步详细说明，本技术涉及的原料均可通过市售获得。
31.实施例1一种生物酶功能棉片，由棉片本体负载杀菌溶液得到；杀菌溶液包括以下质量百分比的原料：溶葡萄球菌酶0.5%、溶菌酶6%、纳米氧化锌0.1%、稳定剂30%、保湿剂8%、协效剂1%、蒸馏水补足至100%；其中稳定剂为聚乙二醇400和乙二胺四乙酸按照质量比120：1组成的混合物；纳米氧化锌的粒径为30～80nm；
保湿剂为尿囊素和神经酰胺按照质量比1：4.6组成的混合物；协效剂为甘宝素和甲壳素按照质量比1：1.9组成的混合物。
32.上述生物酶功能棉片的制备方法，包括以下步骤：s1杀菌溶液配制：预先混合聚乙二醇400、乙二胺四乙酸和蒸馏水，然后加入溶葡萄球菌酶、溶菌酶和纳米氧化锌，充分混合后得到预混液；接着将保湿剂和协效剂加入预混液中，充分混合后得到杀菌溶液；s2负载处理：根据成品生物酶功能棉片的含液量为1.8倍的规格，向装有棉片本体的盒子内灌装规定量的杀菌溶液，得成品生物酶功能棉片。
33.实施例2～5与实施例1的区别之处在于各原料的配比不同，具体如下表所示。
34.表1 原料配比表实施例6本实施例与实施例1的区别之处在于，稳定剂为聚乙二醇400和乙二胺四乙酸按照质量比100：1组成的混合物。
35.实施例7本实施例与实施例1的区别之处在于，稳定剂为聚乙二醇400和乙二胺四乙酸按照质量比200：1组成的混合物。
36.实施例8本实施例与实施例1的区别之处在于，稳定剂为聚乙二醇400和乙二胺四乙酸按照质量比150：1组成的混合物。
37.实施例9本实施例与实施例1的区别之处在于，保湿剂为尿囊素和神经酰胺按照质量比1：3.6组成的混合物。
38.实施例10本实施例与实施例1的区别之处在于，保湿剂为尿囊素和神经酰胺按照质量比1：
5.2组成的混合物。
39.实施例11本实施例与实施例1的区别之处在于，保湿剂为尿囊素和神经酰胺按照质量比1：1组成的混合物。
40.实施例12本实施例与实施例1的区别之处在于，保湿剂为尿囊素和神经酰胺按照质量比1：8组成的混合物。
41.实施例13本实施例与实施例1的区别之处在于，保湿剂为尿囊素。
42.实施例14本实施例与实施例1的区别之处在于，保湿剂为神经酰胺。
43.实施例15本实施例与实施例1的区别之处在于，协效剂为甘宝素和甲壳素按照质量比1：1.4组成的混合物。
44.实施例16本实施例与实施例1的区别之处在于，协效剂为甘宝素和甲壳素按照质量比1：2.2组成的混合物。
45.实施例17本实施例与实施例1的区别之处在于，协效剂为甘宝素和甲壳素按照质量比2：1组成的混合物。
46.实施例18本实施例与实施例1的区别之处在于，协效剂为甘宝素和甲壳素按照质量比1：4组成的混合物。
47.实施例19本实施例与实施例1的区别之处在于，协效剂为甘宝素。
48.实施例20本实施例与实施例1的区别之处在于，协效剂为甲壳素。
49.实施例21本实施例与实施例1的区别之处在于，s2负载处理步骤中，先将棉片本体浸渍在质量浓度为1%的壳聚糖溶液中，浸渍后的棉片本体含液量为0.2倍；再将浸渍后的棉片本体放置在盒子内，根据成品生物酶功能棉片的含液量为1.8倍的规格，向盒子内灌装规定量的杀菌溶液，得成品生物酶功能棉片。
50.实施例22本实施例与实施例21的区别之处在于，壳聚糖溶液的质量浓度为0.5%。
51.实施例23本实施例与实施例21的区别之处在于，浸渍后的棉片本体含液量为0.1倍。
52.实施例24本实施例与实施例21的区别之处在于，浸渍后的棉片本体含液量为0.3倍。
53.实施例25
本实施例与实施例21的区别之处在于，浸渍后的棉片本体含液量为0.6倍。
54.实施例26本实施例与实施例21的区别之处在于，浸渍后的棉片本体含液量为0.05倍。
55.对比例1本对比例与实施例1的区别之处在于，不添加溶菌酶，余量用溶葡萄球菌酶补足。
56.对比例2本对比例与实施例1的区别之处在于，不添加溶葡萄球菌酶，余量用溶菌酶补足。
57.对比例3本对比例与实施例1的区别之处在于，不添加纳米氧化锌，余量用溶葡萄球菌酶补足。
58.对比例4本对比例与实施例1的区别之处在于，不添加稳定剂，余量用蒸馏水补足。
59.对比例5本对比例与实施例1的区别之处在于，不添加保湿剂，余量用蒸馏水补足。
60.对比例6本对比例与实施例1的区别之处在于，不添加协效剂，余量用蒸馏水补足。
61.对比例7本对比例与实施例1的区别之处在于，稳定剂为聚乙二醇400。
62.对比例8本对比例与实施例1的区别之处在于，稳定剂为乙二胺四乙酸。
63.对比例9本对比例与实施例1的区别之处在于，稳定剂为聚乙二醇400和乙二胺四乙酸按照质量比20：1组成的混合物。
64.性能检测试验方法杀菌试验：参照gb15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录c3.2进行试验，试验样品为实施例1-26和对比例1-9中制备得到的成品生物酶功能棉片。
65.稳定性试验：参照gb15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录c6进行试验，试验样品为实施例1-26和对比例1-9中制备得到的成品生物酶功能棉片，具体加速条件为置于37-40℃恒温箱内3个月，保持温度大于75%。并对加速后的各实施例与对比例中的成品生物酶功能棉片进行杀菌试验。
66.治疗效果：以实施例1-26和对比例1-9中制备得到的成品生物酶功能棉片作为治疗宠物猫毛囊炎的制剂，各实施例和对比例的成品生物酶功能棉片分别对应治疗毛囊炎症状程度相近的宠物猫，并采用同样的擦药治疗方式，每天擦药1次，持续一周。治疗过程中持续观察，以施药区域无明显炎症作为痊愈标准，毛囊炎痊愈后即停止继续施药，并观察施药区域的皮肤状况。
67.表2 试验结果表
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通过分析表2中的试验结果，并具体结合实施例1-5和对比例1-3的试验结果来看，本技术制备得到的生物酶功能棉片具有优异的杀菌效果，并且稳定性较好，在加速3个月后仍具有较好的杀菌效果。且从对比例1-3来看，溶菌酶、溶葡萄球菌酶和纳米氧化锌之间存在明显的协同配合效果，复配使用可以显著提升生物酶功能棉片的杀菌效果。
68.结合实施例1、实施例6-8、对比例4和对比例7-9的试验结果来看，稳定剂的加入可以有效提高溶菌酶和溶葡萄球菌酶的稳定性，并且对于提高杀菌效果具有积极意义。另外，聚乙二醇400和乙二胺四乙酸之间存在明显的复配协同关系，两者按照一定比例复配使用效果更为显著。
69.结合实施例1、对比例3和对比例6的试验结果来看，在不添加体系中以固体形态存在的纳米氧化锌以及协效剂的时候，擦药皮肤区域出现轻微红肿，可能是擦药后药物所形成的膜层不透气导致的，因此纳米氧化锌和协效剂在提高杀菌效果的同时，还可以有效提高药剂的透气性，实用意义较强。
70.结合实施例1和实施例21的试验结果来看，预先用壳聚糖溶液浸渍棉片本体，从实际治疗效果来看，效果明显更佳。分析可知预先浸渍壳聚糖溶液的棉片本体更便于将杀菌活性成分转移至皮肤。
71.本具体实施例仅仅是对本技术的解释，其并不是对本技术的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本
申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。