含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物及其应用的制作方法

1.本发明属于化妆品技术领域，涉及含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，还涉及含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物在化妆品中的应用。


背景技术：

2.现代女性都极其注重护肤，然而，痤疮类皮肤病是长期困扰大众女性的一个亟待解决问题。粉刺、黑头、白头、红痘、暗痘、痤疮以及由此产生的色素沉着、痘印、痘坑、结节、瘢痕等严重影响患者的心理。资料表明，痤疮类的皮肤病是青少年损容性疾病中最严重的，对部分心理脆弱的人会引起心理障碍，对后期的生活、工作等造成严重的影响。
3.痤疮，俗称痘痘，是一种毛囊皮脂腺单位的慢性炎症性皮肤病，各个年龄段均可患病，以青少年发病率为高。痤疮的发病率具有三部曲，首先，皮肤表皮表现出“旺盛”状态，用吸油巾擦拭皮肤表面，可以清晰观察到吸油巾吸附很多油脂；然后，如不加控制，旺盛的分泌状态将持续并逐渐减少(其实是毛囊阻塞的结果)，皮肤出现暗疮或暗痘；若持续不加以干涉，有的逐渐发展为白头，随着空气阳光等外界因素的干扰，再发展成黑头，变成各种各样的粉刺。这时不针对治疗，则在粉刺部位可以检测到痤疮丙酸杆菌等微生物，最终彻底发展成为痤疮。
4.从痤疮形成步骤可以看出，控油是对正常皮肤，尤其油性皮肤或者分泌旺盛肌肤的护肤第一步，有效终止或控制皮肤油脂分泌，是保持皮肤正常生理功能的基础。其次，暗疮或暗痘的形成是毛囊导管排泄受阻的结果，不通透、阻塞的毛囊导管，势必无法阻止痤疮或粉刺的生成。对于正常肌肤不形成粉刺最为关键的步骤就是不要堵塞毛孔。最后，若痤疮一经形成，对症治疗是必不可少的，尤其是对痤疮丙酸杆菌等微生物的杀灭是最为关键的步骤。
5.而目前市面上销售的祛痘化妆品主要是按照这个机理完成的：其中水杨酸是治疗粉刺等祛痘化妆品中最为关键的成分，因为水杨酸在医学上已经明确具有通透阻塞毛囊导管的作用。目前，水杨酸主要以两种形式添加到配方中，其一是以水杨酸盐的形式加入配方中，另一种是以分子形式存在于配方中。配方的ph一般在5以上，而水杨酸治疗最佳ph是在4以下，以3为最佳。水杨酸是油溶性物质，水中几乎不溶解。正是由于这一特性，水杨酸分子可以透过皮肤表皮，而不是停留在皮肤表面，从而起到相应作用。所以水溶液中水杨酸分子的存在形式尤为重要。即配方中水杨酸是以分子形式存在才是治疗粉刺的根本。其溶剂为酒精。而酒精在痤疮治疗过程存在如下痛点：1)含有酒精的配方，在涂抹到痤疮伤口处时，会对伤口处造成较大刺激性，痛觉明显、难以忍受；2)酒精会刺激皮肤过度角质化，使皮肤容易留下色素沉着、痘印、痘坑、结节、瘢痕等损容性症状；3)会延缓痤疮的最佳治疗时间。因此，对于痘痘肌肤，开发一种能够祛痘、不留损容性症状的功效组合物用于化妆品中就显得非常重要且必需。


技术实现要素：

6.本发明的目的是提供一种水杨酸的具有控油祛痘功效的组合物，具有水溶、ph值较低、温和的特性，能有效控油、通透阻塞毛囊导管、不留损容性症状且能够杀灭痤疮丙酸杆菌等微生物的功效。
7.本发明的另一目的是提供一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物在化妆品中的应用，解决了皮肤油脂分泌过旺、毛囊阻塞、留痘印和痤疮的问题。
8.本发明所采用的技术方案是，含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物5～15份、苦参提取物2～7份、wisence gss1～10份、多元醇1～8份、柿叶提取物3～8份、麝香草提取物1～6份。
9.本发明技术方案的特征还在于，
10.还包括大黄提取物1～5份大黄、亚麻籽提取物1～7份。
11.还包括抗菌肽冻干粉2～8份。
12.柳树皮提取物7～12份、苦参提取物3～6份、wisence gss4～8份、多元醇2～6份、柿叶提取物4～7份、麝香草提取物2～5份。
13.柳树皮提取物8～11份、苦参提取物4～5份、wisence gss5～7份、多元醇3～5份、柿叶提取物5～6份、麝香草提取物3～4份、大黄提取物2～4份、亚麻籽提取物3～6份。
14.柳树皮提取物8～11份、苦参提取物4～5份、wisence gss5～7份、多元醇3～5份、柿叶提取物5～6份、麝香草提取物3～4份、大黄提取物2～4份、亚麻籽提取物3～6份、抗菌肽冻干粉4～7份。
15.wisence gss按照质量百分比由以下组分组成：水杨酸40％、peg-15椰油胺40％、硬脂酰胺丙基二甲胺20％。
16.本发明所采用的另一技术方案是，含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物在化妆品中的应用。
17.本发明的有益效果是，
18.(1)本发明组合物中大黄提取物、亚麻籽提取物与柳树皮提取物、苦参提取物、wisence gss、多元醇、柿叶提取物、麝香草提取物搭配使用，协同增效，实现了增加柳树皮提取物、苦参提取物、wisence gss、多元醇、柿叶提取物、麝香草提取物在皮肤输送上的停留时间，对控油、祛痘、恢复受损痘肌肌肤屏障和增效杀灭革兰氏阳性菌，尤其是针对杀灭抑制痤疮丙酸杆菌和抑制其繁殖有特殊功效，实现了1 1＞2的作用，可用于治疗i-iii类痤疮，且不留痘印，对iv级也有较好的作用且刺激性较低；
19.(2)本发明组合物中抗菌肽冻干粉可中和一定的水杨酸本身的酸性刺激，而其他提取物的加入，可在不改变抗菌肽冻干粉的作用机理条件下，增加抗菌肽在水中的溶解度，可以在极低的浓度下起到杀菌和抑菌效果，且可增效杀灭革兰氏阳性菌，抗菌肽对部分病毒、真菌、原虫和癌细胞等有杀灭作用，甚至能提高免疫力、加速伤口愈合过程，而祛痘过程中的抗炎、抑菌、伤口愈合都是必不可少的步骤，因此，抗菌肽冻干粉在组分中也是必不可少的组分。
具体实施方式
20.下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。
21.本发明提供一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物5～15份、苦参提取物2～7份、wisence gss1～10份、多元醇1～8份、柿叶提取物3～8份、麝香草提取物1～6份。
22.还包括大黄提取物1～5份大黄、亚麻籽提取物1～7份。
23.还包括抗菌肽冻干粉2～8份，抗菌肽冻干粉是一种活性抗菌肽，包含溶菌酶、乳链菌肽等小肽，可中和一定的水杨酸本身的酸性刺激，而其他提取物的加入，可在不改变抗菌肽冻干粉的作用机理条件下，增加抗菌肽在水中的溶解度，可以在极低的浓度下起到杀菌和抑菌效果，且可增效杀灭革兰氏阳性菌。
24.进一步地，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物7～12份、苦参提取物3～6份、wisence gss4～8份、多元醇2～6份、柿叶提取物4～7份、麝香草提取物2～5份。
25.进一步地，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物8～11份、苦参提取物4～5份、wisence gss5～7份、多元醇3～5份、柿叶提取物5～6份、麝香草提取物3～4份、大黄提取物2～4份、亚麻籽提取物3～6份。
26.进一步地，柳树皮提取物8～11份、苦参提取物4～5份、wisence gss5～7份、多元醇3～5份、柿叶提取物5～6份、麝香草提取物3～4份、大黄提取物2～4份、亚麻籽提取物3～6份、抗菌肽冻干粉4～7份。
27.本发明组合物中所涉及的组分均通过商业渠道购买，其中，柳树皮提取物、麝香草提取物、苦参提取物、柿叶提取物采购于湖州佳美生物化学制品有限公司、多元醇采购于上海言臻贸易有限公司、大黄提取物采购于南京道斯夫生物科技有限公司、抗菌肽冻干粉采购于陕西慧康生物科技有限责任公司，wisence gss、亚麻籽提取物采购于上海睿犀贸易有限公司。
28.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物的制备方法，按重量份数称取将上述组分，并在常温下搅拌混合即得。
29.本发明提供含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物在化妆品中的应用，其添加量为化妆品总质量的0.5～8.0％。
30.本发明组分中wisence gss含有40％的水杨酸、40％peg-15椰油胺、20％硬脂酰胺丙基二甲胺。多元醇是含有多羟基的醇类，一般是指丙二醇、1,3-丙二醇、甲基丙二醇、1,3-丁二醇、1,2-丁二醇、戊二醇、甘油等水溶性醇类，与wisence gss中的peg-15椰油胺、硬脂酰胺丙基二甲胺协同作用，形成分子间氢键，可以很好的增加wisence gss中水杨酸的水合，增强水杨酸在水中的溶解；而柳树皮提取物的主要成分是水杨苷，水杨苷为水杨酸与糖基单元的聚合体，在多元醇和wisence gss存在下，可以缓慢水解成水杨酸和糖类，并与wisence gss中的水杨酸形成动态平衡。三者其药理作用明显，对痤疮丙酸杆菌的抑制试验结果是：原来1
×
108的菌数，在各加入浓度为1.0％和2.0％的提取物，1h培养后残存的菌数各为1.3
×
104和2.3
×
103，抑制数据表明，它对痤疮丙酸杆菌强有力的消除性能，并且可用于粉刺的防治。而苦参提取物有抗炎、抑菌、滋养等功能，这对治疗痤疮非常关键。苦参提取物具有很强的抗菌活性，对革兰阳性菌的mic(最低抑菌浓度)在25～50ng/ml之间(痤疮丙酸杆菌为革兰氏阳性细菌)。采用二倍梯度稀释法研究苦参碱(由苦参的干燥根、植株、果实经乙醇等有机溶剂提取制成)对痤疮菌的作用，结果表明苦参碱对痤疮菌有较强的抑制作用，最低抑菌浓度为10mg/l，但杀菌效果较弱。但通过添加柿叶提取物和麝香草提取物能够
得到明显改善。这是因为二者对组织蛋白酶有活化作用(组织蛋白酶与皮肤的炎症有关，组织蛋白酶低表明有皮肤炎症)，从而提高其杀菌效果。与其他组分协同可提供肌肤平衡和控制油脂分泌，将肌肤调理到平衡状态，通透阻塞毛囊导管、杀灭痤疮丙酸杆菌等微生物，不留痘印，从而有效实现控油、祛痘等功效。
31.实施例1
32.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物5份、苦参提取物2份、wisence gss 1份、多元醇1份、柿叶提取物3份、麝香草提取物1份。
33.本发明提供一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物的制备方法，按重量份数称取将上述组分，并在常温下搅拌混合即得。
34.实施例2
35.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物5份、苦参提取物2份、wisence gss 1份、多元醇1份、柿叶提取物3份、麝香草提取物1份。
36.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
37.实施例3
38.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物9份、苦参提取物5份、wisence gss 6份、多元醇5份、柿叶提取物6份、麝香草提取物4份。
39.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
40.实施例4
41.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物12份、苦参提取物6份、wisence gss 8份、多元醇6份、柿叶提取物7份、麝香草提取物5份。
42.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
43.实施例5
44.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物15份、苦参提取物7份、wisence gss 10份、多元醇8份、柿叶提取物8份、麝香草提取物6份。
45.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
46.实施例6
47.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物5份、苦参提取物2份、wisence gss 1份、多元醇1份、柿叶提取物3份、麝香草提取物1份、大黄提取物1份、亚麻籽提取物1份。
48.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
49.实施例7
50.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物8份、苦参提取物4份、wisence gss 5份、多元醇3份、柿叶提取物5份、麝香草提取物3份、大黄提取物2份、亚麻籽提取物3份。
51.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
52.实施例8
53.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物11份、苦参提取物5份、wisence gss 7份、多元醇5份、柿叶提取物6份、麝香草提取物4份、大黄提取物4份、亚麻籽提取物6份。
54.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
55.实施例9
56.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物15份、苦参提取物7份、wisence gss 10份、多元醇8份、柿叶提取物8份、麝香草提取物6份、大黄提取物5份、亚麻籽提取物7份。
57.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
58.实施例10
59.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物5份、苦参提取物2份、wisence gss 1份、多元醇1份、柿叶提取物3份、麝香草提取物1份、抗菌肽冻干粉2份。
60.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
61.实施例11
62.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物11份、苦参提取物5份、wisence gss 7份、多元醇5份、柿叶提取物8份、麝香草提取物4份、抗菌肽冻干粉7份。
63.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
64.实施例12
65.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物15份、苦参提取物7份、wisence gss 10份、多元醇8份、柿叶提取物8份、麝香草提取物6份、抗菌肽冻干粉8份。
66.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
67.实施例13
68.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物5份、苦参提取物2份、wisence gss 1份、多元醇1份、柿叶提取物3份、麝香草提取物1份、大黄提取物1份、亚麻籽提取物1份、抗菌肽冻干粉2份。
69.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
70.实施例14
71.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物8份、苦参提取物4份、wisence gss 5份、多元醇3份、柿叶提取物5份、麝香草提取物3份、大黄提取物2份、亚麻籽提取物3份、抗菌肽冻干粉4份。
72.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
73.实施例15
74.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物11份、苦参提取物5份、wisence gss 5份、多元醇7份、柿叶提取物6份、
麝香草提取物4份、大黄提取物4份、亚麻籽提取物6份、抗菌肽冻干粉7份。
75.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
76.实施例16
77.本发明一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，由以下重量份数组分组成：柳树皮提取物15份、苦参提取物7份、wisence gss 10份、多元醇8份、柿叶提取物8份、麝香草提取物6份、大黄提取物5份、亚麻籽提取物7份、抗菌肽冻干粉8份。
78.该实施例所涉及的制备方法与实施例1相同。
79.本技术还进行了对比实验，具体对比例如下：
80.对比例1
81.一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，包含如下重量份组分：柳树皮提取物8份、wisence gss 5份、柿叶提取物5份。
82.该对比例所涉及的制备方法与实施例1相同。
83.对比例2
84.一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，包含如下重量份组分：苦参提取物4份、多元醇3份、麝香草提取物3份。
85.该对比例所涉及的制备方法与实施例1相同。
86.对比例3
87.一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，包含如下重量份组分：柳树皮提取物8份、wisence gss 5份、柿叶提取物5份、大黄提取物2份。
88.该对比例所涉及的制备方法与实施例1相同。
89.对比例4
90.一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，包含如下重量份组分：苦参提取物4份、多元醇3份、麝香草提取物3份、亚麻籽提取物3份。
91.该对比例所涉及的制备方法与实施例1相同。
92.对比例5
93.一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，包含如下重量份组分：柳树皮提取物8份、wisence gss 5份、柿叶提取物5份、大黄提取物2份、抗菌肽冻干粉4份。
94.该对比例所涉及的制备方法与实施例1相同。
95.对比例6
96.一种含水杨酸的温和且具有控油祛痘功效的组合物，包含如下重量份组分：苦参提取物4份、多元醇3份、麝香草提取物3份、亚麻籽提取物3份、抗菌肽冻干粉4份。
97.该对比例所涉及的制备方法与实施例1相同。
98.为验证本发明的有益效果，对实施例1～16及对比例1～6进行实验，实验数据具体如下：
99.1、稳定性测试
100.按照实施例1～16，对比例1～6的组分组成，分别配制成化妆品，对其稳定性进行检测，结果见表1.1、表1.2、表1.3和表1.4。
101.表1.1实施例1～5稳定性测试结果(单位：wt％)
[0102][0103][0104]
从表1.1可以看出，实施例1～5稳定性测试结果均透明且稳定。
[0105]
表1.2实施例6～9稳定性测试结果(单位：wt％)
[0106][0107][0108]
从表1.2可以看出，实施例6～9稳定性测试结果均透明且稳定。
[0109]
表1.3实施例10～16稳定性测试结果(单位：wt％)
[0110][0111]
从表1.3可以看出，实施例10～16稳定性测试结果均透明且稳定。
[0112]
表1.4对比例1～6稳定性测试结果(单位：wt％)
[0113][0114]
从表1.4可以看出，对比例1、3、5稳定性测试结果均透明且不稳定，有析出现象；对比例2、4、6稳定性测试结果均透明且稳定。
[0115]
2、控油功效测试(体外法)：
[0116]
参照测试方法：细胞内脂质含量测定
[0117]
(1)测试样品：将实施例1～16，对比例1～6的组合物添加到普通乳液外用基质中制备所得的测试样品，空白对照品为该普通乳液外用基质。其中本发明实施例1～16及对比例2、4、6的组合物占乳液总质量的5％本试验方法为体外法，适用于评估宣称通过降低人皮脂腺细胞内脂质的含量而达到控油效果的化妆品。
[0118]
(2)测试方法：细胞内脂质含量测试：取sz95细胞铺96孔板培养24h后，更换为含不同浓度受检样品的培养基，培养24h后，用4％多聚甲醛固定30min；然后用油红o染色试剂盒检测od490nm。结果如表2所示。
[0119]
表2细胞内脂质含量
[0120][0121][0122]
从表2的控油测试结果可以看出，实施例1-16和对比例2、4、6的控油效果均比较明显，但实施例1-5的效果弱于实施例6-16，细胞内脂质含量最低可达到24％，且所有实施例的控油效果均优于所有对比例。这些效果的异同是由于组分不同和组分添加量不同引起的。而这也直接说明了组合物中各组分之间的协同配合对于控油起到了更有效更直接的效果。
[0123]
3、祛痘功效测试(体外法)
[0124]
(1)测试样品：将实施例1～16，对比例2、4、6的组合物添加到普通乳液外用基质中
制备所得的测试样品，阴性对照品为该普通乳液基质，阳性对照为bpo凝胶(四川明欣药业有限责任公司)。其中其中本发明实施例1～16及对比例2、4、6的组合物占乳液总质量的8％。同时以普通乳液外用基质为对照组。
[0125]
(2)测试方法：将冻存的痤疮丙酸杆菌菌种活化后，将菌液稀释至1.0
×
106cfu/ml。以每孔100μl稀释后的菌液加至96孔板，同时加入100μl的各样品溶液；阴性对照品为100μl该普通乳液基质溶液以及阳性对照组加入100μl bpo凝胶溶液。将96孔板置于厌氧箱孵育48h后取出，用酶标仪检测各孔的od600，得出痤疮丙酸杆菌的抑菌率。结果如表3所示。
[0126]
表3样品抑菌率
[0127]
[0128][0129]
从表3的祛痘测试结果可以看出，实施例1-16和对比例2、4、6祛痘效果均比较明显，但实施例1-5的效果弱于实施例6-16，这些效果的异同是由于配方不同和配方成分添加量不同引起的。但实施例1-16的祛痘效果均优于所有对比例。实施例中最高抑菌率可达89％，而对比例最高抑菌率为45％，几乎只为实施例的一半效果。说明组合物中单独几种组分的组合，其抑菌率远远不及组分的协同发挥的抑菌效果，说明该发明在抑菌方面具有很大优势。
[0130]
4、人体安全性检验方法
[0131]
方法参照《化妆品安全技术规范》(2015年版)第七章第2节人体皮肤斑贴试验方法测试之皮肤封闭型斑贴试验。
[0132]
(1)测试样品：将实施例1～16，对比例2、4、6的组合物添加到普通乳液外用基质中制备所得的测试样品，其中本发明实施例1～16，对比例2、4、6的组合物占乳液总质量的0.5％。同时以普通乳液外用基质为对照组。
[0133]
(2)测试者选择：选择18～60岁符合试验要求的志愿者作为受试对象。有如下条件的人群不能作为受试者：近一周使用抗组胺药或近一个月内使用免疫抑制剂者；近两个月内受试部位应用任何抗炎药物者；受试者患有炎症性皮肤病临床未愈者；胰岛素依赖性糖尿病患者；正在接受治疗的哮喘或其他慢性呼吸系统疾病患者；在近6个月内接受抗癌化疗者；免疫缺陷或自身免疫性疾病患者；哺乳期或妊娠妇女；双侧乳房切除及双侧腋下淋巴结
切除者；在皮肤待试部位由于瘢痕、色素、萎缩、鲜红斑痣或其他瑕疵而影响试验结果的判定者；参加其他的临床试验研究者；体质高度敏感者；非志愿参加者或不能按试验要求完成规定内容者。
[0134]
(3)测试方法：选择合适的受试者50名，其中女30名，男20名。
[0135]
选用面积不超过50mm2、深度约1mm的合格斑试器材。将测试样品放入斑试器小室内，用量约为0.020g～0.025g。将加有测试样品的斑试器用低致敏胶带贴敷于受试者的前臂屈侧曲侧，用手掌轻压使之均匀地贴敷于皮肤上，持续24h。
[0136]
分别于去除测试样品斑试器后30min(待压痕消失后)、24h和48h按表3标准观察皮肤反应。并记录观察结果，结果如表4.1、4.2所示。
[0137]
表4.1皮肤封闭型斑贴试验皮肤反应分级标准
[0138][0139]
表4.2斑贴测试得分表
[0140]
[0141][0142]
从表4.2的斑贴结果可以看出，实施例1～16与对比例2、4、6均存在一定的刺激性，实施例1～16均出现的为1级微弱反应，而对比例2、4、6出现了大范围的2级反应及少数的3级反应，说明虽然均存在刺激性，但对比例安全隐患远远大于所有实施例，实施例随着时间的增长其反应人数也逐步降低，而对比例中2级反应人数随着时间渐渐增多，这可能源于对比例2、4、6的组分和配比不同引起的。结合功效测试和安全测试结果可以看出，对比例2、4、6尽管在控油和祛痘功效测试中表现出有一定的效果，但其效果不存在显著性，与实施例效果相差甚远，且在人体安全性存在很大隐患，如果作为祛痘产品使用，还需要进一步完善。
[0143]
5、人体控油功效测试
[0144]
参照t zhca 002-2018化妆品控油功效测试方法测试。
[0145]
(1)测试样品：将实施例1～16，对比例2、4、6的组合物添加到普通乳液外用基质中制备所得的测试样品，对照品为该普通乳液外用基质。其中本发明实施例1～16及对比例2、4、6的组合物占乳液总质量的5％。
[0146]
(2)受试者选择：
[0147]
受试者人数：有效受试者220人，每组10人。年龄在18岁～65岁之间。
[0148]
志愿者用碱性皂基清洁产品清洁面部，清水冲洗干净后用无屑吸水干纸巾吸干，在符合标准的测试环境中静坐，前额暴露，保持放松，避免触碰前额。使用皮肤表面皮脂测试仪sebumeter测量前额的皮肤表面皮脂量，志愿者前额皮脂量在8h内超过120μg/cm2者作为受试者。
[0149]
不能选择有以下情况者作为受试者：近一个月使用影响皮脂分泌制剂者；近一周使用抗组胺药或近一个月内使用免疫抑制剂者；近两个月内受试部位应用任何抗炎药物者；受试者患有炎症性皮肤病临床未治愈者；胰岛素依赖性糖尿病患者；正在接受治疗的哮喘或其他慢性呼吸系统疾病患者；近六个月内接受抗癌化治疗者；免疫缺陷或自身免疫性疾病者；哺乳期或妊娠妇女；双侧乳房切除及双侧腋下淋巴结切除者；在皮肤待试部位由于瘢痕、色素、萎缩、鲜红斑痣或其他瑕疵而影响试验结果的判定者；参加其他的临床试验研究者；体质高度敏感者；非志愿参加者或不能按试验要求完成规定内容者。
[0150]
(3)测定步骤
[0151]
测试前的准备
[0152]
受试部位为前额。样品涂抹区域和对照区域随机分布在前额左、右侧，样品涂抹区域和对照区域面积一致，各区域面积至少3cm
×
3cm，区域间隔至少1cm，确保样品涂抹区域和对照区域在统计学上达到平衡。
[0153]
正式测试前应该在符合标准的房间内静坐至少20min，不能喝水和饮料，受试者前额暴露，保持放松，避免触碰受试部位。
[0154]
测定
[0155]
按照皮肤表面皮脂测试仪使用说明进行测试。
[0156]
测定方法：在测试人员管理下，受试者用碱性皂基清洁产品清洁受试部位，清水冲洗干净后用无屑吸水干纸巾吸干。3min内，分别测量样品涂抹区域和对照区域的皮肤表面皮脂量，在各区域内不同位置测量3次，测量结果以3次测量平均值表示，作为初始值。
[0157]
样品按(2.0
±
0.1)mg/cm2的用量进行单次涂抹，通过注射器或相当者进行定量取样，使用乳胶指套将样品均匀规定区域内，并记录实际涂样量；在设定的测量时间点，分别在样品涂抹区域和对照区域内不同位置测量3次，获得各区域皮肤表面皮脂量，测量结果以3次测量的平均值表示；设定的测量时间点间隔应不少于1h，设定时间为4h、8h；不同测量时间点测量时，避开已测量过的位置；测试期间，受试者前额暴露，避免触碰受试部位；同一个受试者的测试必须使用同一仪器由同一测试人员完成；化妆品测试时，对照区域为空白对照；样品使用期间如受试者皮肤出现不良反应，应立即中止测试，并对受试者进行适当医治。对不良反应予以记录。
[0158]
(4)计算结果
[0159]
描述性统计
[0160]
对样品涂抹区域和对照区域的测量值进行描述性统计。
[0161]
差异性分析
[0162]
分别计算样品涂抹区域和对照区域的初始值与其他时间点测量值之间的差值，然后利用此差值，统计分析不同测量时间点样品涂抹区域和对照区域的差别。
[0163]
如测试数据为正态分布,则采用t检验方法进行统计分析；如测试数据为非正态分布，则釆用秩和检验方法进行统计分析
[0164]
统计方法均采用双尾检验，检验水准α＝0.05
[0165]
(5)结果判定
[0166]
阳性结果：与对照区域相比，样品涂抹区域皮脂测量值的差值呈显著性差异p＜0.050，表示该受试产品有控油效果；
[0167]
阴性结果：与对照区域相比，样品涂抹区域皮脂测量值的差值无显著性差异p≥0.050，表示该受试产品无控油效果；
[0168]
测试结果见表5。
[0169]
表5测试样在0h、4h、8h的皮肤油脂含量
[0170]
[0171][0172]
对表5的实验结果进行统计分析使用4h、8h实施例1～16的皮肤油脂含量与0h对比均有所降低，且与对照组对比均具有显著性差异，p《0.001；说明持续使用本发明组合物制成的乳液，实施例1～16的配方对皮肤油脂含量有抑制作用。对比例2、4、6的配方对皮肤油
脂含量有抑制作用。使用4h、8h实施例1～16的皮肤油脂含量与对比例2、4、6比较，控油效果中实施例1～16均优于对比例2、4、6。说明本发明组合物中各组分协同增效，具有良好的控油作用。
[0173]
6、人体祛痘功效测试
[0174]
参考(t/tdca 004-2021)方法
[0175]
(1)测试样品：将实施例1～16，对比例2、4、6的组合物添加到普通乳液外用基质中制备所得的测试样品。其中本发明实施例1～16及对比例2、4、6组合物占乳液总质量的8％。
[0176]
(2)受试者选择
[0177]
受试者人数：有效受试者220人，每组10人。
[0178]
使用前后对照：按受试者入选和排除标准选择合格的受试者确保最终完成有效例数每组不少于10人。
[0179]
入选标准
[0180]
年龄在18岁～40岁之间，健康女性或男性；面部皮肤有一定数量粉刺者，不能是临床制剂难以改善的结节或囊肿等；无过敏性疾病，无化妆品及其它外用制剂过敏史；面部皮肤应无胎记、抓痕、白斑、色素痣等影响试验的现象；能够理解试验过程，自愿参加试验并签署书面知情同意书者。
[0181]
排除标准
[0182]
计划怀孕或妊娠或哺乳期以及产后六个月内的妇女；有严重系统性疾病，免疫缺陷或自身免疫性疾病者；近一周使用抗组胺药或近一个月使用过免疫抑制剂者；近两个月受试部位使用任何抗炎药物者；近三个月受试部位参加过其他临床试验者；正在接受治疗的呼吸道疾病患者；正在接受皮肤科治疗的人群；胰岛素依赖性糖尿病患者。
[0183]
受试者限制
[0184]
在试验期间受试者必须使用试验机构提供的试验产品和对照产品，不能使用其他任何具有控油祛痘、温和功效或者对测试结果产生影响的产品；
[0185]
在试验期间受试者应保持生活规律，注意健康饮食。
[0186]
(3)测试步骤
[0187]
试验流程
[0188]
自身前后对照试验流程
[0189]
首次到访，对受试者进行试验说明，签署书面知情同意书。根据入选和排除标准等询问受试者一系列关于疾病史、健康状况等问题，同时对面部粉刺状况进行符合性评估，并记录。
[0190]
合格受试者，在工作人员指导下使用碱性皂基清洁产品清洁面部，清洁后用无屑吸水干纸巾擦拭干净。在符合要求的房间内静坐至少30分钟，期间不能喝水和饮料。
[0191]
由皮肤科医生或实验室研究者对受试者面部粉刺进行计数。
[0192]
用皮肤图像拍摄系统拍摄标准图像。用图像分析软件分析受试部位皮肤的a*值，a*值越小，粉刺炎症越轻，反之越重。
[0193]
工作人员将试验产品发放给受试者，并提供产品使用说明，明确产品的使用方法(包括使用部位、使用方式、每次使用量、使用频次、注意事项等)，确保受试者正确、连续使用产品至测试周期结束。
[0194]
受试者在设定的时间点返回实验室，在相同的试验条件下，按照步骤进行评估和测试，可根据产品评价需要设定多个测试时间点，整个测试周期通常不超过4周。
[0195]
每次回访时，受试者需将试验产品带回，对试验产品使用量进行称重和记录。
[0196]
产品使用期间如受试者皮肤出现不良反应，应立即终止测试，并对受试者进行适当医治。对不良反应应予以记录。
[0197]
(4)计算结果
[0198]
应用统计分析软件进行数据的统计分析后进行正态分布检验，符合正态分布要求，自身前后的比较采用配对t检验，否则采用两个相关样本秩和检验。
[0199]
统计方法均采用双尾检验，显著性水平为α＝0.05。
[0200]
(5)结果判定
[0201]
使用产品前后任一访视时点视觉评估或图像分析相关参数中任一参数的变化结果显著改善(p《0.05)，表示试验产品有祛痘功效，否则认为试验产品无祛痘功效，结果见表6。
[0202]
表6测试样在使用前与d28的visia-cr痘痘面积占比
[0203][0204][0205]
对表6的实验结果进行统计分析，实施例1～16使用28天痘痘面积占比和使用前基
础值对比有所降低，且具有显著性差异，p《0.001，说明持续使用本发明组合物制成的乳液实施例1～16的配方对皮肤痘痘问题有显著改善作用；对比例2、4、6痘痘面积占比的降低率明显低于实施例1～16，说明实施例1～16祛痘效果均优于对比例2、4、6。综上所述说明本发明组合物中各组分协同增效，具有良好的祛痘功效，达到持久祛痘的效果。
[0206]
表7为测试样使用前与d28的a*值比较
[0207][0208][0209]
对表7的实验结果进行统计分析，实施例1～16使用28天面部红区a*值和使用前基
础值对比均有所降低，且具有显著性差异，p《0.001，说明持续使用本发明组合物制成的乳液实施例1～16的配方对皮肤炎症改善问题有显著作用；对比例2、4、6面部红区a*值变化明显低于实施例1～16，说明实施例1～16面部炎症改善效果优于对比例2、4、6。综上所述，说明本发明组合物中各组分协同增效，具有良好的消炎祛痘功效。
[0210]
7、祛痘印色素沉积测试
[0211]
(1)测试样品
[0212]
将实施例1～16，对比例2、4、6的组合物添加到普通乳液外用基质中制备所得的测试样品。其中本发明实施例1～16及对比例2、4、6组合物占乳液总质量的8％。
[0213]
(2)使用方法
[0214]
由工作人员发放试验产品，并根据使用说明对受试者进行使用指导，确保受试者正确、连续使用产品4周。
[0215]
(3)受试者的选择
[0216]
按受试者入选和排除标准选择合格的受试者，确保最终完成有效受试者220人，每组10人。
[0217]
入选标准
[0218]
18～60岁，健康女性或男性；受试部位至少有一个明显痘印；无过敏性疾病，无化妆品及其它外用制剂过敏史；既往无光感性疾病史，近期内未使用影响光感性的药物；受试部位皮肤应无胎记、炎症、瘢痕、多毛等现象；能够理解试验过程，自愿参加试验并签署书面知情同意书者。
[0219]
排除标准
[0220]
妊娠或哺乳期妇女，或近期有备孕计划者；患有银屑病、湿疹、异位性皮炎、严重痤疮等皮肤病史者；或患有其他慢性系统性疾病者；近1个月内口服或外用过皮质类固醇激素等抗炎药物者；近2个月内使用过果酸、水杨酸等任何影响皮肤颜色的产品或药物(如氢醌类制剂)者；近3个月内试验部位使用过维a酸类制剂或进行过化学剥脱、激光、脉冲光等医美治疗者；不可避免长时间日光暴露者；近2月内参加过其他临床试验者；其他临床评估认为不适合参加试验者。
[0221]
受试者限制
[0222]
在试验期间受试部位必须使用试验机构提供的试验产品或对照产品，不能使用其他任何具有祛色素沉积功效或者可能对测试结果产生影响的产品；在试验期间不能有暴晒情况，并应做好试验部位的防晒工作。
[0223]
(4)试验部位：面部。
[0224]
(5)仪器设备：皮肤黑素检测仪：具有基于光谱吸收的原理检测皮肤mi值的仪器。
[0225]
(6)试验流程
[0226]
按照要求招募入组志愿受试者，签署书面知情同意书。入组前根据入选和排除标准等询问受试者一系列关于疾病史、健康状况等问题，同时对试验部位痘印色素沉积等皮肤状况进行符合性评估和筛选，并记录。
[0227]
对入组的合格受试者进行产品使用前皮肤基础值评估和测试，包括视觉评估、仪器测试和标准图像拍摄，并记录；产品使用后4周再次进行相同的评估和测试。在访视时点，用皮肤黑素测试仪测量试验组试验部位痘印色素沉淀区皮肤的mi值，每个测试区测试三
次，并记录；测试区mi值越小，肤色越浅，反之越深。
[0228]
(7)计算结果
[0229]
应用统计分析软件进行数据的统计分析和进行正态分布检验，符合正态分布要求，自身前后的比较采用配对t检验，否则采用两个相关样本秩和检验；等级资料使用前后的比较，采用两个相关样本秩和检验；试验产品和对照组之间比较采用独立样本t检验或秩和检验。上述统计分析均为双尾检验，显著性水平为α＝0.05。
[0230]
使用产品前后任一访视时点视觉评估、仪器测试或图像分析相关参数中任一参数的变化结果相差显著(p《0.05)，则认定试验产品有祛痘印色素沉积功效，否则认为试验产品无祛痘印色素沉积功效，结果见表8。
[0231]
表8测试样在使用前与d28的mi值
[0232]
[0233][0234]
对表8的实验结果进行统计分析，实施例1～16使用28天面部mi值和使用前基础值对比均有所降低，且具有显著性差异，p《0.001，说明持续使用本发明组合物制成的乳液实施例1～16的配方对皮肤祛痘印色素沉积有显著改善作用；对比例2、4、6的mi值的降低率明显低于实施例1～16，说明实施例1～16改善色素沉积效果优于对比例1～6。说明本发明组合物中各组分协同增效，具有良好的祛痘印色素沉积功效。
[0235]
综上所述，本发明通过柳树皮提取物、苦参提取物、wisence gss、多元醇、柿叶提取物、麝香草提取物、大黄提取物、亚麻籽提取物、抗菌肽冻干粉这几种天然活性物之间的协同作用，无论是在稳定性测试、控油还是祛痘功效测试中，结果均达到预期，可在皮肤无损伤的基础上能更强效更有力的起到祛痘及不留痘印，也在一定程度上证明了该发明的组合物在协同作用下发挥了比对比例更好的作用且保持了原有的优势，使得水杨酸本身优势放大且弥补了其缺点。