一种I型胶原羧基端肽抗体包被的磁性微粒及其制备方法与试剂盒与流程

技术特征：
1.一种i型胶原羧基端肽抗体包被的磁性微粒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)预处理：用ph7.5～8.0的0.01～0.05m pbst缓冲液进行清洗，再用ph7.5～9.5的0.01～0.05m硼酸缓冲液1进行清洗后，再用ph9.0～10.0的0.05～0.2m硼酸缓冲液2将磁性微粒稀释至5～20mg/ml；2)混悬反应：将预处理的磁性微粒与i型胶原羧基端肽抗体反应，并加入与硼酸缓冲液2具有相同ph的1～4m硫酸铵进行混悬反应，加入体积为磁珠体积的一半，再加入i型胶原羧基端肽抗体进行反应，抗体加入量为0.005～0.03mg每毫克磁珠，24～42℃震荡反应20～40小时；3)封闭处理：反应后磁珠进行清洗，用ph至7.0～8.0的0.05～0.2m硼酸缓冲液3进行清洗、混匀，每毫克磁珠再加入10ul封闭剂进行封闭反应，20～42℃震荡反应24～40小时，经清洗、稀释得i型胶原羧基端肽抗体包被的磁性微粒。2.根据权利要求1所述的i型胶原羧基端肽抗体包被的磁性微粒的制备方法，其特征在于，所述磁性微粒为粒径0.5～3μm的甲苯磺酰基磁性微粒。3.根据权利要求1所述的i型胶原羧基端肽抗体包被的磁性微粒的制备方法，其特征在于，所述封闭反应温度为20～30℃，时间为20～40h。4.根据权利要求1所述的i型胶原羧基端肽抗体包被的磁性微粒的制备方法，其特征在于，所述封闭剂包括ce210、1～5％bsa，0.5～5％鱼皮明胶、0.5～5％酪蛋白中的一种或多种。5.根据权利要求1或4所述的i型胶原羧基端肽抗体包被的磁性微粒的制备方法，其特征在于，所述封闭剂中包括质量比为1:(0.01～0.05)：(0.001～0.01)：(0.001～0.01)的ce210、bsa、鱼皮明胶、酪蛋白。6.一种i型胶原羧基端肽抗体包被的磁性微粒，其特征在于，通过如权利要求1～5所述的制备方法制得。7.一种磁微粒化学发光法测定人血中i型胶原羧基端肽的试剂盒，其特征在于，包括：如权利要求6所述的i型胶原羧基端肽抗体包被的磁性微粒、碱性磷酸酶标记的i型胶原羧基端肽抗体、i型胶原羧基端肽校准品、质控品。8.根据权利要求7所述的磁微粒化学发光法测定人血中i型胶原羧基端肽的试剂盒，其特征在于，所述i型胶原羧基端肽校准品的制备方法包括采用稀释液将i型胶原羧基端肽抗原稀释至0.01～0.02mg/ml。9.根据权利要求8所述的磁微粒化学发光法测定人血中i型胶原羧基端肽的试剂盒，其特征在于，所述每升稀释液中包括0.05～0.08mpbs、0.8～1.2g猪皮明胶、8～10gnacl、8～12g胰蛋白胨、45～55g海藻糖、0.5～0.8％表面活性剂s7、0.1～0.3％蛋白保护剂001、0.1～0.2％曲拉通405、0.2～0.5％proclin
tm
300缓冲液，ph为7.2～7.6。10.根据权利要求9所述的磁微粒化学发光法测定人血中i型胶原羧基端肽的试剂盒，其特征在于，所述蛋白保护剂001的ph为6～6.8。

技术总结
本发明涉及一种I型胶原羧基端肽抗体包被的磁性微粒及其制备方法与试剂盒，属于试剂盒技术领域。本发明公开了一种I型胶原羧基端肽抗体包被的磁性微粒的制备方法，包括如下步骤：预处理：用pH7.5～8.0的0.01～0.05M PBST缓冲液进行清洗，再用pH7.5～9.5的0.01～0.05M硼酸缓冲液1进行清洗后，再用pH9.0～10.0的0.05～0.2M硼酸缓冲液2将磁性微粒稀释至5～20mg/ml；混悬反应：将预处理的磁性微粒与I型胶原羧基端肽抗体反应，并加入与硼酸缓冲液2具有相同pH的1～4M硫酸铵进行混悬反应，加入体积为磁珠体积的一半，再加入I型胶原羧基端肽抗体进行反应，抗体加入量为0.005～0.03mg每毫克磁珠，24～42℃震荡反应20～40小时；最后进行封闭处理。最后进行封闭处理。最后进行封闭处理。


技术研发人员：王启飞 郭俊美 汪云峰 贺率 柳建敏
受保护的技术使用者：宁波海尔施智造有限公司
技术研发日：2022.06.29
技术公布日：2022/11/15