一种残膜回收机防缠绕挑膜装置的制 一种秧草收获机用电力驱动行走机构

一种基于气相色谱-质谱仪同时测定烟熏肉制品中挥发性酚类物质的方法与流程

2022-10-29 01:01:54 来源:中国专利 TAG:
1.本发明涉及一种同时测定烟熏肉制品中挥发性酚类物的方法,属于熏制食品风味化学
技术领域
:。
背景技术
::2.烟熏是早期保存食品的一种有效方法,烟熏肉类制品很早就进入人们的食谱,随着人们生活习惯、地域的不同形成了很多具有地方独特风味的烟熏肉类食品,比如有腊肉、香肠、火腿、熏鱼等。烟熏肉制品是指以畜禽肉为原料,经过浸渍后置于烟熏室中,然后使熏材缓慢燃烧或不完全燃烧产生烟气,在一定的温度下使肉类边干燥边吸收木材烟气,熏制一段时间使其水分减少至所需含量,这样所制得肉制品即为烟熏肉制品。烟熏肉制品广泛传播于世界各地,它以烟熏特色风味得到人们的喜爱,在传统肉制品中占有重要地位。3.研究表明,挥发性酚类物质是形成烟熏肉制品风味特点的成分之一,由于生产过程中制作工艺、储藏环境等因素的差异,影响和改变了挥发性酚类物质的含量和比例,形成了独特的风味。挥发性酚类物质种类和组成是决定熏肉组织理化性质、影响熏肉的重要化学成分。烟熏制品不仅改善产品的感官质量和可贮性,挥发性酚类物质能产生能引起食欲的烟熏香味,酿成制品的独特风味,同时抑制不利微生物的生长,抗脂肪氧化酸败,延长产品货架寿命。对烟熏制品中挥发酚类物质的研究非常重要,以期能为烟熏工艺产品的改进提供理论支持。4.目前国家未有对熏肉中挥发性酚类物质的检测方法,仅对水产品中挥发性酚类物质总残留量的检测方法,方法利用挥发性酚类物质与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料,用三氯甲烷萃取,在460nm波长测定吸光度定量。但在分离挥发酚组分方面存有一定的局限性,容易受到多组分分离度的影响。当前方法仅侧重于总量定量分析,熏肉制品中多种挥发性酚类成分的同时检测缺少统一的提取方法和分析方法。鉴于挥发酚类物质与烟熏制品品味风格的重要性,建立烟熏肉制品中挥发性酚类物的检测方法,将有利于进一步推进烟熏肉品质化学和从挥发酚响应机制的前期和基础工作。技术实现要素:5.基于上述,本发明提供一种同时测定烟熏肉制品中挥发性酚类成分的方法,可以同时烟熏肉制品多种挥发性酚类物质进行检测,以克服现有技术的不足。6.本发明的技术方案是:一种同时测定烟熏肉制品中挥发性酚类成分的方法,所述方法包括以下步骤:7.s1样品制备,取烟熏肉样品放在真空冷冻干燥机中冷冻,将干燥的肉样磨碎混合制成干燥烟熏肉粉末,全部通过样品筛。8.s2样品提取,在烟熏肉粉末中加入提取溶剂,震荡、浸提、离心后取上层清液,合并于容量瓶中,定容后混匀,得提取液;9.s3样品净化,采用通入co2气体酸化处理后,加入氯化钠,用乙腈萃取净化处理,得待测液10.s4色谱检测,采用气相色谱-质谱对待测液进行检测;11.s5定量分析,选用外标法对挥发性酚类物质进行定量分析。12.可选的,所述样品制备条件为:取烟熏肉质量为50~100g,冷冻温度为ꢀ‑70℃,冷冻时间为7天,样品筛规格为40目。13.可选的,熏肉粉末样品为1~2g,提取溶剂为10~20ml,震荡20~30min,浸提12h,在4000r/min下离心5~10min,容量瓶体积为50-100ml。14.可选的,所述提取溶剂为氢氧化钠溶液。15.可选的,所述氢氧化钠浓度为0.1mol/l。16.可选的,所述净化条件为:取上述提取液于气体吸收管内,滴入几滴显色剂,通入过量co2,加入乙腈溶液,氯化钠,在旋涡振荡器上混匀后,4000转/分钟离心5min,取上清液待测。17.可选的,所述提取液的体积为10ml。18.可选的,所述乙腈的体积为2ml,所述氯化钠的质量为8g。19.可选的,其中,所述显色剂为甲基橙试剂。20.可选的,所述气相色谱-质谱的条件为。色谱条件:色谱柱:hp-ffap石英毛细柱(50m×0.250mm,0.25μm);升温程序:100℃保持1.0min,以6.0℃/min升温到200.0℃保持5.0min,再以20.0℃/min升温到210.0℃保持10.0min;载气(he)流速1.0ml/min;进样口温度(230.0℃);进样量1.0μl;质谱条件:电子轰击(ei)离子源;电子能量(70ev);气相色谱-质谱传输线温度(250℃);离子源温度(230℃);选择性(sim)模式扫描。21.可选的,所述外标法为外标峰面积标准曲线法。22.气相色谱-质谱法由于色谱分离效果较好,且质谱检测器较为稳定和普遍,是同时检测多种挥发性成分的有效手段之一,可克服当前方法由于分离度不够、物质成分单一、方法稳定性差等系列问题。23.本发明的有益效果是:本发明采用样品经冷冻粉碎处理后,用氢氧化钠溶液浸泡提取,再通入过量co2气体酸化处理后,加入氯化钠,用乙腈萃净化,,并与气相色谱-质谱检测器相结合,实现了烟熏肉中多种挥发性酚类物质的便捷、准确、快速、高效、以及同时检测。与现有技术相比,本发明具有以下几个优点:24.1、实用性较强。本发明仅需少量熏肉粉末样品,无需复杂前处理步骤,仅采用碱性环境提取、酸性环境净化技术,选择性较好,同时采用气相色谱-质谱检测法,无需专门的色谱柱或者特殊检测器。25.2、分离度好。本发明通过气相色谱-质谱检测器进行分离,能一次性分离烟熏肉中挥发性酚类物质,且分离度好。26.3、重复性好。本发明方法通过方法学验证后,重复性好,灵敏度高。27.4、提取效率高。本发明方法采用碱性条件提取、酸性条件净化技术,首先采用0.1mol/l氢氧化钠提取样品中的挥发酚成分,将酚类物质转化为溶于水的酚钠溶解于水中,然后再通入过量co2进行酸化处理,将酚钠转化为不溶于水的酚,最后用乙腈萃取分离。比常见的直接提取方法效率更高、定量更准。28.综上可知,本发明方法能同时对烟熏肉中多种挥发性酚类进行分离与定量检测,且样品用量少、前处理简单、色谱分离度好,适合于大批量样品的快速分析。附图说明29.图1为9种挥发酚标准样品gc-ms色谱图;其中:1.愈创苯酚、2.4-甲基愈创苯酚、3.2-甲酚、4.苯酚、5.4-乙愈创苯酚、6.对甲苯酚、7.间甲苯酚、8.对乙基苯酚、9.2,3-二氢苯并呋喃具体实施方式30.为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面结合附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施,本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进,因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。31.实施例1:烟熏肉中挥发性酚类物质的测定一、试剂与仪器32.tracegcultra-dsqms气相色谱质谱联用仪(配ei源)美国赛黙飞世尔);milli-q超纯水器美国millipore公司;乙腈(色谱纯),美国赛默飞世尔科技有限公司;氯化钠(分析纯)、甲基橙试剂(分析纯),国药集团化学试剂有限公司;纯水(一级水);co2气体(≥99.99%);愈创苯酚、4-甲基愈创苯酚、4-乙愈创苯酚、2,3-二氢苯并呋喃、对乙基苯酚、苯酚、2-甲酚、对甲苯酚、间甲苯酚(德国dr)。二检测方法33.s1样品制备:取50-100g烟熏肉样品在-70℃的真空冷冻干燥机中冷冻7天,将干燥的肉样磨碎混合后全部通过样品筛,待分析。34.s2样品提取:准确称取2.0g(精确到0.002g)试样,于100ml离心管中,加入20ml0.1mol/l的氢氧化钠溶液,混匀后静置12h,4000转/分钟离心5min,取上清液于50ml容量瓶中,用20ml水分2次清洗残渣,4000转/分钟离心5min,取上清液合并于50ml容量瓶中,定容后混匀,待净化用。35.s3样品净化:取10ml上述提取液于气体吸收管内,滴入几滴甲基橙试剂,通入co2,当溶液显红色时,持续通入过量co2,3分钟停止通气;将提取液转移至20ml离心管中,加入2ml乙腈溶液,在旋涡振荡器上混匀2min后,加入8g氯化钠,在旋涡振荡器上混匀2min后,4000转/分钟离心5min,取上清液,过滤膜后供gc-ms分析。36.s4仪器条件:将步骤3中的上清液用气相色谱-质谱进行定性定量分析即可,其中,所述气相色谱-质谱定性定量分析的条件为:色谱条件:色谱条件色谱柱:hp-ffap石英毛细柱(50m×0.250mm,0.25μm);升温程序:100℃保持1.0min,以6.0℃/min升温到200.0℃保持5.0min,再以20.0℃/min升温到210.0℃保持10.0min;载气(he)流速1.0ml/min;进样口温度(230.0℃);进样量1.0μl;质谱条件:电子轰击(ei)离子源;电子能量(70ev);气相色谱‑ꢀ质谱传输线温度(250℃);离子源温度(230℃);选择性(sim)模式扫描。9种挥发酚质谱分析经过系统的选择和优化。选择离子监测(sim)模式,扫描离子及定量离子见表1,sim色谱图见图1。37.s5定量分析,选用外标法对挥发性酚类物质进行定量分析。表1.9种挥发性酚类成分保留时间、选择性扫描离子量38.三、验证例:回收率、精密度、线性及检测限分析39.按实施例1中的方法,制成空白样液,配置一系列挥发酚标准工作溶液。量取上清液1ml,置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至近干,分别加入混合标准工作液,摇匀,用微孔滤膜(0.22μm)滤过,即得系列基质混合对照品溶液,上机测试,以挥发酚定量离子的峰面积y为纵坐标,以质量浓度x(μg/ml)为横坐标绘制标准曲线并进行线性拟合,得到线性回归方程和相关系数r2(表2)。结果表明各成分在上述条件下分析检测时,相关系数r2不小于0.99,浓度在0.02~10.00μg/ml范围内具有很好的线性关系。表29种挥发性酚类成分工作标准曲线table2workingstandardcurveofninevolatilephenolicconstituentsconstituents40.利用空白基质样品,添加三个浓度水平(200μg/kg,500μg/kg,1000μg/kg)的添加样品做回收率实验,每个浓度水平重复6次。方法的精密度用6次平行测定的相对标准偏差(rsd)表示。以200μg/kg添加浓度水平为依据,特征离子质量色谱峰性噪比rsn=3计算检出限。结果表明,各成分平均回收率为81.6~92.0%,相对标准偏差(rsd,n=6)为1.4~8.2%,方法检出限为5~15μg/kg,见表3表3方法检出限、精密度和回收率及rsd(n=6)table3detectionlimits,precisiontestsandrecoveriestestsofthemethod41.上述表1结果表明,相关系数r2均在0.99以上,表明烟熏肉中的9中挥发性酚类物质在一定浓度范围内呈现良好的线性关系,同时最低检测限也表明了本发明方法具有较好的灵敏度。此外,本发明方法的回收率与精密度分别为81.6~92.0%和1.4~8.2%之间,均满足于同时检测烟熏肉中的9中挥发性酚类物质的定量要求。42.应用例:烟熏肉实际样品的挥发性酚类物质检测43.采用如实施例1的方法对实际样品进行分析,每个样品平行重复检测3次。10个市售样品中均有挥发性酚类成分检出,对检出值计算相对标准偏差(rsd,n=3),结果见表4,实际样品检测相对标准偏差小于8.0%,结果表明建立气相色谱质谱测定烟熏肉制品中挥发性酚类物质的方法,达到了定性定量分析的要求,同时该方法设计简单,结果稳定可靠,可对批量样品进行检测与分析。表4烟熏肉中挥发性酚的含量(μg/kg)table4thecontentofvolatilephenolsinmaotai-flavorliquors44.分析检测结果可知,市售10个烟熏肉中所测9种挥发性酚类的含量总量在1784.7-5280.0μg/kg,大于2000μg/kg的样品有8只,大于4000μg/kg的样品有4种,挥发性酚类物质的含量较高,其中平均含量较高的两种组分为苯酚和4-乙愈创苯酚。45.以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。当前第1页12当前第1页12
再多了解一些

本文用于创业者技术爱好者查询,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。

发表评论 共有条评论
用户名: 密码:
验证码: 匿名发表

相关文献