一种采收微藻的方法

7.0-7.1，光照/黑暗比12h:12h。
10.进一步的，步骤(1)所述对数期菌浓为108个/ml。
11.进一步的，所述步骤(2)所述真菌选自：
12.1号真菌aspergillus fumigatus；
13.2号真菌penicillium glaucoroseum；
14.3号真菌aspergillus fumigatus。
15.进一步的，所述真菌来源包括：
16.本实验所用的真菌来自东平镇柳溪重金属废水水样
17.①
真菌分离纯化：丝状真菌经过含有重金属cd(ii)与cr(vi)的pda平板筛选获得。先将采集的废水样(200ul)分别涂布至含有5mg/l cd(ii)与cr(vi)的固体平板上。将平板放入30℃恒温培养箱中培养5-7天，待长出单菌落后，再划线至新鲜的含有重金属的pda平板上，至少重复5次，最终获得单一的丝状真菌。将分离得到的不同真菌分别选择pdb培养基与牛肉膏培养基这两种液体培养基进行成球试验，在恒温摇床内进行成球试验，控制培养条件为转速120r/min，温度为30℃，初始孢子接种量为104个/ml，比较丝状真菌在不同液体培养基中的成球情况。
18.②
将分离得到的3株真菌挑取菌丝制成菌悬液后分别移至装有100ml真菌液体培养基，置于恒温摇床中培养48h，设置温度30℃，转速150r/min，观察培养基中不同真菌的成球情况，通过简单过滤的方式分离菌丝球，用灭菌后的蒸馏水冲洗菌丝球3次避免其表面残余的培养基影响后续结果。提取dna送至测序，通过blast基因库将测序结果与ncbi数据库进行比较，使用mega6.06将菌株的测序结果用于构建系统发育树。
19.③
经菌种鉴定分别为：1号真菌aspergillus fumigatus、2号真菌penicillium glaucoroseum、3号真菌aspergillus fumigatus。
20.进一步的，步骤(2)所述摇床震荡条件为温度25-30℃，转速180rpm/min。
21.进一步的，步骤(2)所述定时为0.5-24h。
22.本发明的有益效果在于：
23.本发明操作简单，对设备要求较低，有效降低了微藻采收技术中的高能耗和高成本问题。
附图说明
24.图1为聚丙烯酰胺在不同时间点的对微藻采收的效果图；
25.图2为硫酸铝在不同时间点的对微藻采收的效果图；
26.图3为琼脂在不同时间点的对微藻采收的效果图；
27.图4为壳聚糖在不同时间点的对微藻采收的效果图；
28.图5为氢氧化钙在不同时间点的对微藻采收的效果图；
29.图6为氢氧化钠在不同时间点的对微藻采收的效果图；
30.图7为真菌1号在不同时间点的对微藻采收的效果图；
31.图8为真菌2号在不同时间点的对微藻采收的效果图；
32.图9为真菌3号在不同时间点的对微藻采收的效果图。
具体实施方式
33.下面结合具体实例对分发明进行详细说明。应指出的是，以下的实施实例只是对本发明的进一步说明，但本发明的保护范围并不限于一下实施例。
34.实施例1
35.一种采收微藻的方法，包括：
36.(1)将5％微藻接种至灭菌后的bg-11培养基，于光照强度2000lux，温度28℃，ph7.1，光照/黑暗比12h:12h条件下培养至菌浓为108个/ml；
37.(2)将烟曲霉1号(aspergillus fumigatus真菌)培养48h形成菌丝球后，分离菌丝球，用灭菌生理盐水冲洗干净加入(1)的微藻培养液中，于摇床震荡培养，温度28℃，转速150rpm/min，0.5-24h间定时观察菌丝球对微藻固定效果。
38.实施例2
39.一种采收微藻的方法，包括：
40.(1)将6％微藻接种至灭菌后的bg-11培养基，于光照强度2000lux，温度30℃，ph7.0，光照/黑暗比12h:12h条件下培养至菌浓为108个/ml；
41.(2)将青霉2号(penicillium glaucoroseum真菌)培养48h形成菌丝球后，分离菌丝球，用灭菌生理盐水冲洗干净加入(1)的微藻培养液中，于摇床震荡培养，温度30℃，转速180rpm/min，0.5-24h间定时观察菌丝球对微藻固定效果。
42.实施例3
43.一种采收微藻的方法，包括：
44.(1)将8％微藻接种至灭菌后的bg-11培养基，于光照强度2000lux，温度30℃，ph 7.1，光照/黑暗比12h:12h条件下培养至菌浓为108个/ml；
45.(2)将烟曲霉3号(aspergillus fumigatus真菌)培养48h形成菌丝球后，分离菌丝球，用灭菌生理盐水冲洗干净加入(1)的微藻培养液中，于摇床震荡培养，温度30℃，转速160rpm/min，0.5-24h间定时观察菌丝球对微藻固定效果。
46.对比例
47.一种采收微藻的方法，包括：
48.(1)将5％微藻接种至灭菌后的bg-11培养基，于光照强度2000lux，温度30℃，ph7.1，光照/黑暗比12h:12h条件下培养至菌浓为108个/ml；
49.(2)将0.15g/100ml的聚丙烯酰胺(对比例1组)、硫酸铝(对比例2组)、琼脂(对比例3组)、壳聚糖(对比例4组)、氢氧化钙(对比例5组)、氢氧化钠(对比例6组)分别加入微藻培养液中，0.5-24h间观察絮凝固定效果。
50.试验例1
51.系统效果测定分析
52.对实施例1～3与对比例1～6中微藻采收效果进行统计分析，具体结果见图1与表1。
53.表1实施例1～3与对比例1～6中微藻采收效果进行统计分析
54.分组0.5h3h12h24h聚丙烯酰胺(d1)90.08％95.56％136.55％109.92％硫酸铝(d2)4.58％1.45％-3.13％-3.61％
琼脂(d3)103.78％101.03％92.44％93.81％壳聚糖(d4)102.56％100.77％76.98％80.56％氢氧化钙(d5)1.60％9.89％-2.67％-3.48％氢氧化钠(d6)12.77％2.55％-5.47％-5.11％真菌1号(s1)14.53％100.63％101.88％101.88％真菌2号(s2)14.06％35.78％101.09％100.31％真菌3号(s3)25.00％88.59％95.94％102.19％
55.根据图1与表1的结果可以看出，图1～6中的6种工业絮凝剂对微藻的固定24h后，仅以硫酸铝(对比例2，图2)，氢氧化钙(对比例5，图5)，氢氧化钠(对比例6，图6)表现出了良好的絮凝效果，但上述三种工艺絮凝剂都会造成微藻液体变黄，说明微藻很大程度接近死亡，对于微藻的采收效果并没有表现出明显的优势。而真菌1号(实施例1，图7)、2号(实施例2，图8)、3号(实施例3，图9)固定微藻24h后，培养液颜色趋于澄清透明，菌丝球吸附大量微藻细胞变成绿色，由此可见，采用真菌1号、2号与3号对微藻进行采收，不仅能达到很好的固定采收效果，同时能避免传统工业絮凝剂造成的微藻死亡，进一步提升了微藻的采收数量与质量。
56.以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合，这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容，均属于本发明的保护范围。