一种基于外泌体的骨质疏松辅助诊断装置及应用的制作方法

1.本发明涉及医疗辅助诊断设备技术领域，具体为一种基于外泌体的骨质疏松辅助诊断装置，还包括一种基于外泌体的骨质疏松辅助诊断装置的应用。


背景技术：

2.目前很多骨质疏松患者直到骨折发生后才被诊断。因此，发展一种简便有效的诊断方法和装置成为当前的研究难点和重点。
3.外泌体是指细胞分泌的包含了复杂rna和蛋白质的小膜泡，其直径为 30-150nm，外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中，近年来。近年来，研究显示外泌体在许多慢性疾病中具有精准诊断的前景。
4.骨质疏松的临床诊断主要依赖双能x线，但是不同骨质疏松患者的发病原因并不相同，缺少个性化的靶向诊断方法。随着外泌体在骨科疾病诊疗中的不断运用，例如骨关节炎的诊断、靶向软骨肉瘤的诊断、软骨修复等手术中，而在中国专利“一种间充质干细胞外泌体在制备防治骨质疏松症药物中的应用”(公开号 cn108478600a)中也有将其运用在骨质疏松上。
5.近场直写静电纺丝技术是一种环保且安全的精准三维成型方法，可以精确控制纤维的沉积位置，有效地制备所需支架。相关研究发现，利用近场直写静电纺丝技术可制备精细、均匀的过滤网结构，用于获取提取血液中外泌体与传统的超滤方法类似，基于微流体的外泌体分离过滤方法也涉及使用纳米膜或纳米线，纳米多孔膜或纳米线允许过滤小于纳米孔或纳米线间距的颗粒，同时将其他颗粒排除在外，应用多孔硅纳米线的新型结构来分离外泌体，制造的微流体设备捕获直径在40nm到100nm之间的外泌体，同时过滤掉其他细胞外囊泡、蛋白质和细胞碎片，样品体积为30μl时，83nm脂质囊泡的保留率为60％，而直径为500 nm的较大囊泡的保留率仅为10％，将多孔硅纳米线溶解在pbs缓冲液中后，可以回收捕获的外泌体。进而，对于获得的外泌体进行特异性检测，本技术提出一种基于外泌体的骨质外泌体的骨质疏松辅助诊断装置及其使用方法解决上述问题。


技术实现要素：

6.本发明意在提供一种基于外泌体的骨质疏松辅助诊断装置及应用，以解决现有技术骨质疏松的诊断依赖双能x线导致诊断不方便和无法根据患者的发病情况做个性化诊断的问题。
7.为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
8.一种基于外泌体的骨质疏松辅助诊断装置，包括诊断盒体，所述诊断盒体设有进液口、出液口、定位口和限位口，所述诊断盒体的内侧可拆卸连接有滤网本体，所述滤网本体连接有静电纺丝滤网和定位凸起，所述静电纺丝滤网采用近场直写静电纺丝技术制成，所述静电纺丝滤网的网口直径为40nm-100nm，所述静电纺丝滤网设于所述进液口和所述出液口之间，所述定位凸起与所述定位口配合设置，所述出液口连接有密封塞，所述滤网本体
还连接有限位块，所述限位块与所述限位口配合设置。
9.进一步地，所述诊断盒体还设有加压口，所述加压口设于所述进液口一侧，所述加压口密封连通有压力控制装置，所述诊断盒体的上侧密封可拆卸连接有盒盖。
10.进一步地，所述静电纺丝滤网与所述滤网本体通过螺纹可拆卸连接。
11.一种基于外泌体的骨质疏松辅助诊断装置的应用，包括以下步骤：
12.s1：先利用常规技术手段获取患者的血液，并将血液从进液口倾倒进入诊断盒体的内侧；
13.s2：：控制压力控制装置内的压力，使得诊断盒体内侧的压力增大，促进血液的分离，使得血液中直径大于100nm的细胞等杂质被阻挡在进液口处，小于 40nm的蛋白等杂质通过有静电纺丝滤网到达出液口处，血液中直径处于40nm
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100nm的外泌体被收集在静电纺丝滤网内；
14.s3：打开盒盖，从诊断盒体内取出滤网本体，取出滤网本体后将静电纺丝滤网取下；
15.s4：从静电纺丝滤网上获取得到患者血液中的外泌体，通过对外泌体的检测获取患者骨质疏松的病症情况。
16.进一步地，在s1中，获取患者的血液为：利用常规方法采取指尖血，获取血液的方式及含量为：经超速离心后获得1ml血清。
17.进一步地，在s4中，检测外泌体的方法/参数为：cd63、cd9、cd81，外泌体的参数与骨质疏松的病症情况判断基准为：根据psmb9,aars,pcbp2和vsir 的表达来判断患者骨质疏松的病症情况。
18.本技术方案的基本原理及有益效果是：
19.1、血液从进液口进入诊断盒体后，通过反复按压压力控制装置，诊断盒体内侧的压力增大，静电纺丝滤网采用近场直写静电纺丝技术制成，得到双孔径静电纺丝滤网，血液经静电纺丝滤网后血液中直径大于100nm的细胞等杂质被阻挡在进液口处，血液中直径小于40nm的蛋白等杂质通过有静电纺丝滤网到达出液口处，血液中直径处于40nm-100nm的外泌体被收集在静电纺丝滤网内，完成对血液外泌体的分离与提取，提取外泌体的效率高，效果好；
20.2、利用本诊断装置提取患者血液的外泌体，通过对外泌体的检测，可以得到患者骨质疏松的病症情况利用外泌体的参数对骨质疏松检测，针对不同的患者均可以个性化定制检测，检测的精准性高，提供了靶向参考，操作简便快捷；
21.3、整个诊断装置使用便捷，代替了双能x线用于诊断骨质疏松病症的方式，提高了诊断的效率，降低了诊断的时间和经济成本；
22.4、本装置可以根据患者的发病情况做个性化诊断，诊断结果准确。
附图说明
23.图1为本发明一种基于外泌体的骨质疏松辅助诊断装置的结构示意图；
24.附图中的对应标记的名称为：
25.诊断盒体1、进液口2、加压口3、压力控制装置4、出液口5、滤网本体6、静电纺丝滤网7、盒盖8、密封塞9、定位口10、定位凸起11、限位块12、限位口13。
具体实施方式
26.下面结合附图和实施方式对本发明作进一步的详细说明：
27.如图1所示，一种基于外泌体的骨质疏松辅助诊断装置，包括诊断盒体1，诊断盒体1的左侧设有进液口2和加压口3，加压口3密封连通有压力控制装置 4，本是实施例压力控制装置采用塑料橡胶制成的充气加压球，诊断盒体1的下侧设有定位口10，诊断盒体1的上侧壁开设有限位口13，诊断盒体1的内侧连接有滤网本体6，滤网本体6的下侧一体成型有定位凸起11，定位凸起11与定位口10配合设置，滤网本体6的上侧通过螺纹连接有静电纺丝滤网7，静电纺丝滤网7采用近场直写静电纺丝技术制成，静电纺丝滤网7的网口直径为40nm
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100nm，静电纺丝滤网7的上侧固定连接有限位块12，限位块12与限位口13 配合设置，诊断盒体1的右侧设有出液口5，出液口5连接有密封塞9，密封塞 9为橡胶塞，诊断盒体1的上侧密封卡接有盒盖8。
28.一种基于外泌体的骨质疏松辅助诊断装置的应用，包括以下步骤：
29.s1：先利用常规技术手段获取患者的血液，并将血液从进液口2倾倒进入诊断盒体1的内侧，其中，获取患者的血液为：利用常规方法采取指尖血，获取血液的方式及含量为：经超速离心后获得1ml血清；
30.s2：反复挤压充气加压球，使得诊断盒体1内侧的压力增大，促进血液的分离，使得血液中直径大于100nm的细胞等杂质被阻挡在进液口2处，小于40nm 的蛋白等杂质通过有静电纺丝滤网7到达出液口5处，血液中直径处于40nm
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100nm的外泌体被收集在静电纺丝滤网7内；
31.s3：打开盒盖8，从诊断盒体1内取出滤网本体6，取出滤网本体6后将静电纺丝滤网7取下；
32.s4：从静电纺丝滤网7上获取得到患者血液中的外泌体，通过对外泌体的检测获取患者骨质疏松的病症情况，其中，检测外泌体的方法/参数为：cd63、cd9、cd81，外泌体的参数与骨质疏松的病症情况判断基准为：根据psmb9,aars, pcbp2和vsir的表达来判断患者骨质疏松的病症情况。
33.以上所述的仅是本发明的实施例，方案中公知的具体技术方案或特性等常识在此未作过多描述。应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明技术方案的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本技术要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准，说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。