肝癌标志物SOAT1单克隆抗体制备及其应用

技术特征：
1.抗soat1特异性单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区的cdr1、cdr2和cdr3的氨基酸序列分别为cdr1：sfams；cdr2：asissggamyypdsvqg；cdr3：wtyygssygamds；和所述单克隆抗体的轻链可变区的cdr1、cdr2和cdr3的氨基酸序列分别为cdr1：kssqsllssgnqknylt；cdr2：wastres；cdr3：qndytyplt。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链氨基酸序列为mnfgfsliflvlvlkgvqcevklvesgggfvkpggslklscaasgftfrsfamswvrqtpekrlewvasissggamyypdsvqgrftisrdsagnilylemsslrsedtamyycarwtyygssygamdswgqgtsvtvss；所述单克隆抗体的轻链氨基酸序列分别mesqtqvlmsllfwvsgtcgdivmtqspssltvtagekvtmsckssqsllssgnqknyltwyqqrpgqppklliywastresgvpdrftgsgsgtdftltissvqaedlavyycqndytypltfgagtklelk。3.编码权利要求1-2任一权利要求所述的单克隆抗体的核苷酸分子。4.表达载体，其特征在于，所述表达载体包含权利要求3所述的核苷酸分子。5.soat1单克隆抗体细胞株，其特征在于，其能分泌如权利要求1或2所述的抗soat1特异性单克隆抗体。6.权利要求1-2任一权利要求所述的单克隆抗体在制备检测或诊断肝癌的试剂中的用途。7.含有权利要求1-2任一权利要求所述的单克隆抗体的检测或诊断肝癌的试剂盒。

技术总结
本发明从肝癌细胞Huh-7中获取SOAT1基因，将其与表达载体pET-32a相连构建重组表达载体。经诱导表达、蛋白纯化后，以纯化重组SOAT1蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠；利用杂交瘤技术、亚克隆培养共获得5株SOAT1单克隆抗体细胞株，最终筛选到4D11能够识别肝癌细胞Huh-7及临床肝癌组织标本中的SOAT1蛋白。本发明利用重组SOAT1蛋白成功制备了抗SOAT1特异性单克隆抗体，为后续应用SOAT1蛋白制备肝癌伴随诊断试剂盒提供了原材料及建立基于SOAT1的肝癌诊断方法奠定了基础。诊断方法奠定了基础。


技术研发人员：刘如石 梁湘辉
受保护的技术使用者：湖南师范大学
技术研发日：2022.05.20
技术公布日：2022/8/26