N-(3-(5-(嘧啶-4-基)噻唑-4-基)苯基)磺酰胺化合物及其用作BRAF抑制剂的用途

n-(3-(5-(嘧啶-4-基)噻唑-4-基)苯基)磺酰胺化合物及其用作braf抑制剂的用途
技术领域
1.本发明涉及n-(3-(5-(嘧啶-4-基)噻唑-4-基)苯基磺酰胺化合物，其可用作蛋白激酶，更具体地braf或其突变体形式的抑制剂；包含该化合物的药物组合物；以及该化合物在治疗或预防与蛋白激酶活性失调相关的疾病(诸如癌症)中的用途。


背景技术：

2.蛋白激酶代表蛋白质的一个大家族，其在调节多种细胞过程和维持对细胞功能的控制中起重要作用。蛋白激酶包括酪氨酸激酶和丝氨酸/苏氨酸激酶。已在许多疾病中观察到蛋白激酶活性失调，包括良性和恶性增殖性病症以及由免疫系统和神经系统的不当活化引起的疾病。
3.braf是具有催化能力的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(raf家族中还包括两种假激酶，ksr1和ksr2)的快速加速纤维肉瘤(raf)家族的三种同种型(和craf及araf一起)之一。braf在ras/raf/mek/erk信号级联中发挥重要作用，其也被称为促分裂原活化蛋白激酶(mapk)途径，且参与细胞增殖和生存(m.j.robinson et al.,curr.opin.cell biol.,1997,9,180-186)。在通过ras结合诱导构象变化，刺激活性raf同二聚体或异二聚体的形成后，raf改变其磷酸化状态，这触发其活化mek(mek1和mek2)的激酶活性，从而反过来磷酸化下游erk(erk1和erk2)。与raf和mek激酶相反，erk具有广泛的底物特异性且能够磷酸化数百种不同的蛋白质(r.roskoski,pharmacol.res.,2015,100,1-23)。由于ras在大约30％的人类癌症中突变，抑制剂的开发已进行了很久的研究，但未有显著成果(r.roskoski,pharmacol.res.,2018,135,239-258)。此外，braf的致癌活化组成型地且ras-独立地诱导mapk途径，导致下游信号传导的不受控制放大，其涉及增殖的增加和最终的肿瘤发生(h.davies et al.,nature,2002,417,949-954)。已鉴定了与人类癌症相关的braf基因的许多突变(》30)(p.t.c.wan et al.,cell,2004,116,855-867)。这些突变与约100％的毛细胞白血病(b.falini et al.,blood,2016,128,1918-1927)，50％的黑色素瘤，45％的甲状腺癌、10％的结肠癌和8％的卵巢癌有关(m.pulici,chemmedchem,2015,10,276-295)。占检测的braf突变病例约90％的最常见突变是在600位用谷氨酸替换缬氨酸(简称v600e)，其位于激酶结构域的活化区段内且使无活性构象不稳定。该突变导致与野生型(wt)braf相比，组成型激酶活性增加约500倍。此外，与wt相反，braf-v600e是作为单体的信号传导且对erk负反馈机制不敏感(c.a.pratilas,proc.natl.acad.sci.usa,2009,106,4519-4524)。因此，抑制braf的突变形式，例如braf-v600e，是用于癌症治疗的有前景的策略。
4.braf抑制剂，诸如维莫非尼(vermurafenib)(p.b.chapman et al.,new engl.j.med.,2011,364,2507-2516)，索拉非尼(sorafenib)(p.t.c.wan et al.,cell,2004,116,855-867)，和达拉非尼(dabrafenib)(g.t.gibney et al.,expert.opin.drug.metab.toxicol.,2013,9,893-899)被研发以阻断mapk信号传导途径并减少表达braf突变体v600e的细胞中的肿瘤细胞生长。braf-v600e的选择性靶向是用于治
疗转移性黑色素瘤的已证实的治疗策略，且药物维莫非尼和达拉非尼分别在2011和2013年被美国食品和药物管理局(fda)批准用于治疗晚期黑色素瘤(g.kim et al.；clin.cancer res.,2014,20,4994-5000；a.d.ballantyne et al.,drugs,2013,76,1367-1376；a.m.menzies et al.,clin.cancer res.,2014,20,2035-2043)。两种药物均显示braf-v600e突变体黑色素瘤患者的应答率和总体存活的改善，然而不幸的是，由于快速获得性抗性，大多数患者在一年内复发(w.zhang,curr.opin.pharmacol,2015,23,68-73)。
5.达拉非尼是braf-v600e的有效和选择性抑制剂，但已发现其生物利用度降低得非常快(半衰期为5小时)，这可能是由于其通过细胞色素p450(cyp)诱导其自身代谢。达拉非尼代谢由cyp3a4和cyp2c8介导。因此，达拉非尼被认为是与cyp2c8和/或cyp3a4的强抑制剂的药物-药物相互作用的对象。cyp3a4和cyp2b6 mrna诱导表明达拉非尼与核受体孕烷x受体(pxr)和/或组成型雄甾烷受体(car)的相互作用(c.l.denton et al.,j.clin.pharmacol,2013,53,955-961；d.a.bershas et al.,drug metab.dispos,2013,41,2215-2224；s.k.lawrence et al.,drug metab.dispos,2014,42,1180-1190；d.ouellet,j.clin.pharmacol.,2014,54,696-706；j.gil,et al.,cell biol.toxicol,2019；a.puszkiel et al.clin.pharmacokinetics,2019,58,451-467)。
6.属于nr亚家族i的孕烷x受体(pxr)作为用于异生素代谢的主要调节剂，具有异常和突出的作用。其负责生物体对外来物质的防御，因此是解毒的主要调节剂，充当具有多种不同特征(涉及组成、形状和大小)的广谱配体(内源性代谢物、药物和外源性化学物质)的传感器。不幸的是，不期望的药物与pxr的结合引起许多副作用。pxr与类视黄醇x受体α(rxra)形成异二聚体，随后与pxr应答元件结合。作为细胞色素p450酶cyp3a4(临床使用中许多药物的主要代谢酶之一)的主要转录诱导物，其充当用于诱导药物降解的关键角色且可潜在地引起不期望的药物-药物相互作用(t.m.willson et al.,nature rev.drug discov.,2002,1,259-266)。快速代谢降低了许多药物的功效，但具有活性代谢物的药物可表现出提升的药效和/或代谢毒性。不期望的药物-药物相互作用也是一种代谢问题。当两种药物通过相同的酶竞争相同的结合位点共享代谢途径时，具有较高效力的药物占优势且竞争药物的代谢降低。因为血清水平可能升高，这又反过来可导致未代谢化合物毒性作用的风险增加。pxr还在许多不同的肿瘤(乳腺、结肠、前列腺和卵巢)中广泛表达，其中已显示其涉及多药抗性的发展和增强的癌细胞侵袭性(a.geick et al.,j.biol.chem.,2001,276,14581-14587)。越来越多的药物进行了癌症的临床试验，有时其成功相当有限，且最近还表明其中的一些可能是pxr的直接配体，从而诱导其自身的代谢或共同给药的药物的代谢。pxr被分类为不需要的和有害的次级靶标，其活化需要避免以便同时避免经由cyp450酶的降解途径的活化。因此，除了药物与其主要靶点的有效结合外，还需要与pxr的有限相互作用。因此，药物的改进包括用不干扰其他重要特征(诸如稳定性、生物利用度等)但阻止pxr结合的化学变化进行微调。
7.braf抑制剂的实例公开在专利申请us 2009/0298815a1、us2011/0306625a1、wo 2011/161216a1、wo 2012/113774a1和wo2012/125981a2中，但尚未证明不存在与pxr的结合。
8.因此，仍然需要具有蛋白激酶抑制剂活性但不活化pxr的化合物。
9.发明简述
10.发明人现已成功地开发了如下所述的式i的化合物，其可作为抗癌剂用于治疗。
11.这些化合物具有抑制蛋白激酶，特别是丝氨酸/苏氨酸激酶，更特别地braf或其突变体，而不活化pxr的优势。
12.因此，本发明涉及通式i的化合物，其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及使用该化合物或包含该化合物的组合物作为蛋白激酶，特别是丝氨酸/苏氨酸激酶，更特别地braf或其突变体的抑制剂的方法。
13.在总的方面，本发明提供通式i的化合物：
[0014][0015]
其药学上可接受的盐或溶剂化物，
[0016]
其中
[0017]
x是卤素；
[0018]
r1选自下组：c1-c6-烷基、氨基-c1-c6-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基，所述氨基-c1-c6-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基通过碳原子与噻唑环相连并任选被c1-c6-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；
[0019]
r2选自下组：c1-c6-烷基、卤素和nhr5，其中r5选自下组：h、-c(o)-c1-c6-烷基、-c(o)-c1-c6-烯基和-c(o)-c1-c6-炔基；
[0020]
r3选自下组：h、c1-c6-烷基和卤素；并且
[0021]
r4选自下组：c1-c6-烷基和二卤代芳基；
[0022]
条件是当r2、r3和r4之一是c1-c6-烷基时或当r3是h时，r1不是c1-c6-烷基。
[0023]
在另一方面，本发明提供一种药物组合物，其包含至少一种根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，和至少一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂和/或佐剂。
[0024]
本发明还涉及式i的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗或预防与蛋白激酶活性失调相关的疾病。
[0025]
发明详述
[0026]
如上所述，本发明涉及式i的化合物，以及其药学上可接受的盐或溶剂化物。
[0027]
优选的式i的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物中，x、r1、r2、r3和r4中的一个或多个如下定义：
[0028]
x是卤素；特别地，x是氯或氟；更特别地，x是氟；
[0029]
r1选自下组：c1-c6-烷基、氨基-c1-c6-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基，所述氨基-c1-c6-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基通过碳原子与噻唑环相连并任选被c1-c6-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；特别地，r1选自下组：c1-c4-烷基、氨基-c1-c4-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基，所述氨基-c1-c4-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基通过碳原子与噻唑环相连并任选被c1-c4-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；更特别地，r1选自下组：c2-c4-烷基、氨基-c1-c3-烷基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、吗啉-2-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-3-基、吡咯烷-2-基、氮杂环丁烷-3-基和氮杂环丁烷-2-基，所述氨基-c1-c3-烷基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、吗啉-2-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-3-基、吡咯烷-2-基、氮杂环丁烷-3-基和氮杂环丁烷-2-基任选地被c1-c4-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；甚至更特别地，r1选自下组：叔丁基、3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基任选地被c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基n-取代；还更特别地，r1选自下组：叔丁基、3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述哌啶-4-基和哌啶-3-基任选地被环丙基或叔丁氧羰基n-取代；例如，r1选自下组：叔丁基、3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基任选地被c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基n-取代或被c1-c4-烷基c-取代；另一实例中，r1选自下组：叔丁基、3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述哌啶-4-基、哌啶-3-基和哌嗪-2-基任选地被环丙基或叔丁氧羰基n-取代，且所述吗啉-3-基被甲基c-二取代；
[0030]
r2选自下组：c1-c6-烷基、卤素和nhr5，其中r5选自下组：h、-c(o)-c1-c6-烷基、-c(o)-c1-c6-烯基和-c(o)-c1-c6-炔基；特别地，r2选自下组：c1-c4-烷基、氟、氯和nhr5，其中r5选自下组：h、-c(o)-c1-c6-烷基、-c(o)-c1-c6-烯基和-c(o)-c1-c6-炔基；更特别地，r2是nhr5，其中r5选自下组：h、-c(o)-c1-c6-烷基、-c(o)-c1-c6-烯基和-c(o)-c1-c6-炔基；甚至更特别地，r2是nhr5，其中r5选自下组：h、-c(o)-c1-c4-烷基、-c(o)-c1-c4-烯基和-c(o)-c1-c4-炔基；还更特别地，r2是nhr5，其中r5选自下组：h、-c(o)-c1-c2-烷基、-c(o)-ch＝ch2和-c(o)-c≡ch；还更特别地，r2是nhr5，其中r5选自下组：h、-c(o)me和-c(o)-ch＝ch2；
[0031]
r3选自下组：h、c1-c6-烷基和卤素；特别地，r3选自下组：h、c1-c4-烷基和卤素；更特别地，r3选自下组：h、c1-c2-烷基、氟和氯；甚至更特别地，r3是h或氯；
[0032]
r4选自下组：c1-c6-烷基和二卤代芳基；特别地，r4选自下组：c1-c6-烷基和二卤代苯基；更特别地，r4选自下组：c1-c6-烷基和2,5-二卤代苯基；甚至更特别地，r4选自下组：c2-c6-烷基、2,5-二氟苯基和2,5-二氯苯基；还更特别地，r4是c2-c4-烷基或2,5-二氟苯基；例如，r4选自下组：c4-c6-烷基和2,5-二卤代苯基；另一实例中，r4选自下组：c4-烷基和2,5-二卤代苯基；另一实例中，r4选自下组：仲丁基和2,5-二氟苯基。
[0033]
在一个实施方案中，式i的化合物中，x是氟。
[0034]
在一个实施方案中，式i的化合物中，r2是nhr5，其中r5如上文定义。
[0035]
在一个实施方案中，式i的化合物中，r2是nhr5，其中r5是h。
[0036]
在一个实施方案中，式i的化合物中，r2是nhr5，其中r5选自下组：h、-c(o)me、-c(o)-ch＝ch2和-c(o)-c≡ch，特别地r5选自下组：h、-c(o)me和-c(o)-ch＝ch2，更特别地r5是h或-c(o)me。
[0037]
在一个实施方案中，式i的化合物中，r3是h或氯。
[0038]
在一个实施方案中，式i的化合物中，r3是h。
[0039]
在一个实施方案中，式i的化合物中，r3是氯。
[0040]
在一个实施方案中，式i的化合物中，r4选自下组：c1-c6-烷基和2,5-二卤代苯基，特别地r4选自下组：c2-c6-烷基和2,5-二氟苯基，更特别地r4选自下组：c2-c4-烷基和2,5-二氟苯基；还更特别地，r4是c4-烷基或2,5-二氟苯基。
[0041]
在一个实施方案中，式i的化合物中，r4选自下组：c1-c2-烷基、c4-c6-烷基和2,5-二卤代苯基，特别地r4选自下组：c4-c5-烷基和2,5-二氟苯基，更特别地r4选自下组：c4-烷基和2,5-二氟苯基；还更特别地，r4是仲丁基或2,5-二氟苯基。
[0042]
在一个实施方案中，式i的化合物中，r4是c1-c6-烷基，特别地r4是c2-c6-烷基，更特别地r4是c2-c4-烷基，还更特别地r4是c4-烷基。
[0043]
在一个实施方案中，式i的化合物中，r4选自下组：c1-c2-烷基和c4-c6-烷基，特别地r4是c4-c6-烷基，更特别地r4是c4-c5-烷基，还更特别地r4是c4-烷基，甚至更特别地r4是仲丁基。
[0044]
在一个实施方案中，式i的化合物中，r4是2,5-二卤代苯基，特别地r4是2,5-二氟苯基。
[0045]
在一个实施方案中，式i的化合物是式ii的化合物：
[0046][0047]
或其药学上可接受的盐或溶剂化物，
[0048]
其中
[0049]
r1、r2和r3如上文中式i及其任意实施方案所定义。
[0050]
优选的式ii的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物中，r1、r2和r3中的一个或多个如下定义：
[0051]
r1选自下组：c1-c6-烷基、氨基-c1-c6-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基，所述氨基-c1-c6-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基通过碳原子与噻唑环相连并任选被c1-c6-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；
特别地，r1选自下组：c1-c4-烷基、氨基-c1-c4-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基，所述氨基-c1-c4-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基通过碳原子与噻唑环相连并任选被c1-c4-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；更特别地，r1选自下组：c2-c4-烷基、氨基-c1-c3-烷基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、吗啉-2-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-3-基、吡咯烷-2-基、氮杂环丁烷-3-基和氮杂环丁烷-2-基，所述氨基-c1-c3-烷基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、吗啉-2-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-3-基、吡咯烷-2-基、氮杂环丁烷-3-基和氮杂环丁烷-2-基任选地被c1-c4-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；甚至更特别地，r1选自下组：叔丁基、3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基任选地被c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基n-取代；还更特别地，r1选自下组：叔丁基、3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述哌啶-4-基和哌啶-3-基任选地被环丙基或叔丁氧羰基n-取代；例如，r1选自下组：叔丁基、3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基任选地被c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基n-取代或被c1-c4-烷基c-取代；另一实例中，r1选自下组：叔丁基、3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述哌啶-4-基、哌啶-3-基和哌嗪-2-基任选地被环丙基或叔丁氧羰基n-取代，且所述吗啉-3-基被甲基c-二取代；
[0052]
r2是c1-c6-烷基或nhr5，其中r5选自下组：h、-c(o)-c1-c6-烷基、-c(o)-c1-c6-烯基和-c(o)-c1-c6-炔基；特别地，r2是c1-c4-烷基或nhr5，其中r5选自下组：h、-c(o)-c1-c6-烷基、-c(o)-c1-c6-烯基和-c(o)-c1-c6-炔基；更特别地，r2是nhr5，其中r5选自下组：h、-c(o)-c1-c6-烷基、-c(o)-c1-c6-烯基和-c(o)-c1-c6-炔基；甚至更特别地，r2是nhr5，其中r5选自下组：h、-c(o)-c1-c4-烷基、-c(o)-c1-c4-烯基和-c(o)-c1-c4-炔基；还更特别地，r2是nhr5，其中r5选自下组：h、-c(o)-c1-c2-烷基、-c(o)-ch＝ch2和-c(o)-c≡ch；还更特别地，r2是nhr5，其中r5选自下组：h、-c(o)me和-c(o)-ch＝ch2；
[0053]
r3是h或卤素；优选地，r3是h、氟或氯；更优选地，r3是h或氯。
[0054]
在一个实施方案中，式i的化合物是式iii的化合物：
[0055]
[0056]
或其药学上可接受的盐或溶剂化物，
[0057]
其中
[0058]
r1、r3和r5如上文中式i及其任意实施方案所定义。
[0059]
优选的式iii的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物中，r1、r3和r5中的一个或多个如下定义：
[0060]
r1选自下组：c1-c6-烷基、氨基-c1-c6-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基，所述氨基-c1-c6-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基通过碳原子与噻唑环相连并任选被c1-c6-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；特别地，r1选自下组：c1-c4-烷基、氨基-c1-c4-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基，所述氨基-c1-c4-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基通过碳原子与噻唑环相连并任选被c1-c4-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；更特别地，r1选自下组：c2-c4-烷基、氨基-c1-c3-烷基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、吗啉-2-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-3-基、吡咯烷-2-基、氮杂环丁烷-3-基和氮杂环丁烷-2-基，所述氨基-c1-c3-烷基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、吗啉-2-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-3-基、吡咯烷-2-基、氮杂环丁烷-3-基和氮杂环丁烷-2-基任选地被c1-c4-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；甚至更特别地，r1选自下组：叔丁基、3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基任选地被c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基n-取代；还更特别地，r1选自下组：叔丁基、3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述哌啶-4-基和哌啶-3-基任选地被环丙基或叔丁氧羰基n-取代；例如，r1选自下组：叔丁基、3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基任选地被c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基n-取代或被c1-c4-烷基c-取代；另一实例中，r1选自下组：叔丁基、3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述哌啶-4-基、哌啶-3-基和哌嗪-2-基任选地被环丙基或叔丁氧羰基n-取代，且所述吗啉-3-基被甲基c-二取代；
[0061]
r5选自下组：h、-c(o)-c1-c6-烷基和-c(o)-c1-c6-烯基；特别地，r5选自下组：h、-c(o)-c1-c4-烷基和-c(o)-c1-c4-烯基；更特别地，r5选自下组：h、-c(o)-c1-c2-烷基和-c(o)-ch＝ch2；还更特别地，r5选自下组：h、-c(o)me和-c(o)-ch＝ch2；
[0062]
r3是h或卤素；特别地，r3是h、氟或氯；更特别地，r3是h或氯。
[0063]
在一个实施方案中，式i的化合物是式iv的化合物：
[0064][0065]
或其药学上可接受的盐或溶剂化物，
[0066]
其中
[0067]
r1和r5如上文中式i及其任意实施方案所定义。
[0068]
优选的式iv的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物中，r1和r5中的一个或多个如下定义：
[0069]
r1选自下组：氨基-c1-c6-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基，所述氨基-c1-c6-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基通过碳原子与噻唑环相连并任选被c1-c6-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；特别地，r1选自下组：氨基-c1-c4-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基，所述氨基-c1-c4-烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和氮杂环丁烷基通过碳原子连接至噻唑环并任选被c1-c4-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；更特别地，r1选自下组：氨基-c1-c3-烷基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、吗啉-2-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-3-基、吡咯烷-2-基、氮杂环丁烷-3-基和氮杂环丁烷-2-基，所述氨基-c1-c3-烷基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、吗啉-2-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-3-基、吡咯烷-2-基、氮杂环丁烷-3-基和氮杂环丁烷-2-基任选被c1-c4-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；甚至更特别地，r1选自下组：3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基任选地被c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基n-取代；还更特别地，r1选自下组：3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述哌啶-4-基和哌啶-3-基任选地被环丙基或叔丁氧羰基n-取代；例如，r1选自下组：3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基任选地被c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基n-取代或被c1-c4-烷基c-取代；另一实例中，r1选自下组：3-氨基丙基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吗啉-3-基、哌嗪-2-基、吡咯烷-2-基和氮杂环丁烷-2-基，所述哌啶-4-基、哌啶-3-基和哌嗪-2-基任选地被环丙基或叔丁氧羰基n-取代且所述吗啉-3-基被甲基c-二取代；
[0070]
r5选自下组：h、-c(o)-c1-c6-烷基和-c(o)-c1-c6-烯基；特别地，r5选自下组：h、-c(o)-c1-c4-烷基、-c(o)-c1-c4-烯基；更特别地，r5选自下组：h、-c(o)me和-c(o)-ch＝ch2。
[0071]
在一个实施方案中，式i的化合物是式v的化合物：
[0072][0073]
或其药学上可接受的盐或溶剂化物，
[0074]
其中
[0075]
r1和r5如上文中式i及其任意实施方案所定义。
[0076]
优选的式v的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物中，r1和r5中的一个或多个如下定义：
[0077]
r1选自下组：c1-c6-烷基和吗啉基，所述吗啉基通过碳原子与噻唑环相连并任选被c1-c6-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；特别地，r1选自下组：c1-c4-烷基和吗啉基，所述吗啉基通过碳连接至噻唑环相连并任选被c1-c4-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；更特别地，r1选自下组：c1-c4-烷基、吗啉-3-基和吗啉-2-基，所述吗啉-3-基和吗啉-2-基任选被c1-c4-烷基、c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基取代；甚至更特别地，r1选自下组：c1-c4-烷基和吗啉-3-基，所述吗啉-3-基任选被c3-c6-环烷基或c1-c4-烷氧基羰基n-取代；还更特别地，r1是叔丁基或吗啉-3-基；
[0078]
r5是h。
[0079]
在一个实施方案中，式i的化合物是式vi的化合物：
[0080][0081]
或其药学上可接受的盐或溶剂化物，
[0082]
其中
[0083]
r1、r3和r4如上文中式i及其任意实施方案所定义。
[0084]
本发明的特别优选的化合物是下文表1中列出的化合物：
[0085]
表1
[0086][0087]
[0088]
[0089]
[0090][0091]
本发明的化合物可以用本领域技术人员已知的反应通过不同的方式制备。实施例部分中所述的反应方案以举例的方式说明了可能的不同方法。
[0092]
本发明的化合物实际上是蛋白激酶(特别是丝氨酸/苏氨酸激酶，更特别地braf或其突变体)的调节剂，特别地为抑制剂。它们还具有不活化pxr的优势。因此，本发明还提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物作为蛋白激酶，特别是丝氨酸/苏氨酸激酶，更特别地braf或其突变体的抑制剂的用途。
[0093]
因此，在特别优选的实施方案中，本发明涉及式i或其任何子式，特别是上表1的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物作为蛋白激酶(特别是丝氨酸/苏氨酸激酶，更特别地braf或其突变体)的调节剂，特别是抑制剂的用途。
[0094]
应用
[0095]
发明人已证明，根据本发明的式i或其任何子式的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物具有调节，特别是抑制蛋白激酶(特别是丝氨酸/苏氨酸激酶，更特别地braf或其突变体)而不活化孕烷x受体(pxr)的能力。
[0096]
因此，本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用于治疗或预防与蛋白激酶活性异常或失调相关的疾病或病症。因此，在其他方面，本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用于治疗或预防由蛋白激酶信号传导介导的疾病或病症。
[0097]
因此，本发明还涉及本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗或预防与蛋白激酶活性失调相关的疾病或病症。
[0098]
在一个实施方案中，本发明涉及本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗或预防与蛋白激酶活性失调相关的疾病或病症，其中所述蛋白激酶选自酪氨酸激酶、丝氨酸/苏氨酸激酶和具有双重特异性的激酶，特别地，其中所述蛋白激酶选自raf家族、egfr家族、alk、mek、fgfr1、fgfr2、fgfr3、fgfr4、flt3、igf1r、c-met、jak家族、pdgfrα和β、ret、axl、c-kit、trka、trkb、trkc、ros1、btk和syk，更特别地，其中所述蛋白激酶选自a-raf、b-raf和c-raf，还更特别地，其中所述蛋白激酶是b-raf或其突变体形式，甚至更特别地，其中所述蛋白激酶是b-raf或其突变体形式，其中所述突变体形式选自r461i、
i462s、g463e、g463v、g465a、g465e、g465v、g468a、g468e、n580s、e585k、d593v、f594l、g595r、l596v、t598i、v599d、v599e、v599k、v599r、v600e和a727v，特别地v599e和v600e，更特别地v599e。
[0099]
与本发明含义内的蛋白激酶活性失调相关的疾病包括但不限于癌症，特别是选自下组的癌症：黑色素瘤、肺癌、结直肠癌、胃肠道间质癌和胰腺癌。
[0100]
因此，提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗或预防癌症。特别地，提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗或预防选自下组的癌症：黑色素瘤、肺癌、结直肠癌、胃肠道间质癌和胰腺癌。更特别地，提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗或预防选自下组的癌症：黑色素瘤、肺癌、结直肠癌和胃肠道间质癌。
[0101]
在一个实施方案中，提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗或预防黑色素瘤，特别是转移性黑色素瘤。
[0102]
在一个实施方案中，提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗或预防肺癌，特别是小细胞肺癌(sclc)、非小细胞肺癌(nsclc)和肺腺癌。
[0103]
在一个实施方案中，提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗或预防结直肠癌。
[0104]
在一个实施方案中，提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗或预防胃肠道间质癌。
[0105]
在一个实施方案中，提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗或预防胰腺癌，特别是胰腺神经内分泌癌。
[0106]
在其他方面，本发明还涉及治疗或预防与蛋白激酶活性失调相关的疾病或病症的方法，其包括向有需要的患者施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。优选地，患者是温血动物，更优选人。与蛋白激酶活性失调相关的疾病或病症优选如上文所定义。
[0107]
本发明还涉及治疗或预防癌症的方法，包括向有需要的患者施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。优选地，患者是温血动物，更优选人。特别地，本发明涉及治疗或预防癌症的方法，所述癌症选自下组：黑色素瘤、肺癌、结直肠癌、胃肠道间质癌和胰腺癌，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
[0108]
本发明还提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗或预防与蛋白激酶活性失调相关的疾病或病症的药物中的用途。优选地，患者是温血动物，更优选人。与蛋白激酶活性失调相关的疾病或病症优选如上文所定义。
[0109]
本发明还提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗或预防癌症的药物中的用途。优选地，患者是温血动物，更优选人。特别地，本发明还提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗或预防选自下组的癌症的药物中用途：黑色素瘤、肺癌、结直肠癌、胃肠道间质癌和胰腺癌。
[0110]
根据本发明的另一特征，提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于在需要此类治疗的患者中调节，特别是抑制蛋白激酶(特别是丝氨酸/苏氨酸激酶，更特别地braf或其突变体)，包括向所述患者施用有效量的本发明的化合物或其药学上
可接受的盐或溶剂化物。在其他方面，本发明还提供了用于在需要此类治疗的患者中调节，特别是抑制蛋白激酶(特别是丝氨酸/苏氨酸激酶，更特别地braf或其突变体)的方法，所述方法包括向所述患者施用有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。优选地，患者是温血动物，甚至更优选是人。
[0111]
根据本发明，本发明的化合物可作为药物制剂以治疗有效量通过任何可接受的施用方式，优选通过静脉内或口服途径施用。
[0112]
治疗有效量的范围典型地为每天0.1-50000μg/kg体重，优选每天1000-40000μg/kg体重，这取决于多种因素，诸如待治疗疾病的严重程度、受试者的年龄和相对健康状况、化合物的效力、施用途径和形式，施用所针对的适应症，以及所涉及的执业医师的偏好和经验。治疗这类疾病的本领域普通技术人员将能够根据个人知识确定本发明抗肿瘤剂对于给定癌症的治疗有效量。
[0113]
根据一个实施方案，本发明的化合物，其药学上可接受的盐或溶剂化物可以作为联合疗法的一部分施用。因此，包括在本发明范围内的实施方案包括共同施用除本发明的化合物，其药学上可接受的盐或溶剂化物作为活性成分之外还包含治疗剂和/或活性成分的组合物和药物。这种多药物方案，通常称为联合疗法，可用于治疗或预防与蛋白激酶活性失调相关的任何疾病或病症，特别是如上文定义的。
[0114]
因此，本发明的治疗方法和药物组合物可以以单一疗法的形式使用本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，但所述方法和组合物也可以以多重疗法的形式使用，其中一种或多种式i的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物与一种或多种其他治疗剂联合施用。其他治疗剂包括但不限于其他抗癌剂、疼痛药物、抗抑郁剂或抗炎剂。
[0115]
本发明还提供了包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物和至少一种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。如上所述，本发明还涵盖药物组合物，除了含有本发明的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物作为活性成分外，其还含有其他的治疗剂和/或活性成分。
[0116]
本发明还提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于人或动物的治疗。
[0117]
本发明的另一个目的是包含至少一种本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物作为活性成分的药物。
[0118]
通常，对于药物用途，本发明的化合物可配制为药物制剂，其包含至少一种本发明的化合物和至少一种药学上可接受的赋形剂，和任选地一种或多种另外的药学活性化合物。
[0119]
通过非限制性实例的方式，该制剂可以是适于口服施用(例如为片剂、胶囊或作为可摄取的溶液)，适于肠胃外施用(诸如通过静脉内、肌内或皮下注射或静脉内输注)，适于局部施用(包括眼部)、脑内施用、舌下施用、气雾剂施用，适合于通过吸入、皮肤贴剂、植入物、栓剂等施用的形式。该适合施用形式——其可以是固体、半固体或液体，取决于施用方式——以及用于其制备的方法和载体、稀释剂和赋形剂对于本领域技术人员将是清楚的；参考最新版的remington’s pharmaceutical sciences。
[0120]
例如，本发明的化合物或包含本发明的化合物的药物组合物可以以片剂、包衣片剂、丸剂、胶囊、软明胶胶囊、口服粉末、颗粒、胚珠、酏剂、溶液或悬浮液的形式口服施用，其
可以含有调味剂或着色剂，用于立即释放、延迟释放、改性释放、持续释放、脉冲释放或受控释放施用。
[0121]
片剂可含有赋形剂(诸如微晶纤维素、乳糖、柠檬酸钠、碳酸钙、磷酸氢钙和甘氨酸)，崩解剂(诸如淀粉(优选玉米、马铃薯或木薯淀粉)、羟基乙酸淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠和某些复合硅酸盐)，粘合剂(诸如聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素(hpmc)、羟丙基纤维素(hpc)、蔗糖、明胶和阿拉伯胶)，滑润剂(诸如硬脂酸镁、硬脂酸、甘油二十二烷酸酯)。类似类型的固体组合物也可用作硬明胶胶囊中的填充剂。在这方面，优选的赋形剂包括乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、马铃薯淀粉、玉米淀粉、支链淀粉、纤维素衍生物或明胶。硬明胶胶囊可含有本发明的化合物的颗粒。
[0122]
软明胶胶囊可以用含有本发明的化合物、植物油、蜡、脂肪或用于软明胶胶囊的其他合适载体的胶囊制备。作为实例，可接受的媒介物可以为油质媒介物，诸如长链甘油三酯植物油(例如玉米油)。
[0123]
适于通过加入水的水性混悬剂制备的可分散粉末和颗粒可含有与分散剂、润湿剂和混悬剂以及一种或多种防腐剂混合的活性成分。还可以存在其他的赋形剂，例如甜味剂、调味剂和着色剂。这些组合物可以通过加入抗氧化剂(诸如抗坏血酸)来保存。
[0124]
用于口服施用的液体剂型可包括药学上可接受的溶液、乳液、悬浮液、糖浆和酏剂，其含有本领域常用的惰性稀释剂，诸如水或油性媒介物。液体剂型可作为干燥产品存在，在使用前用水或其他合适的媒介物配制。此类组合物还可包含佐剂，诸如润湿剂、乳化剂和悬浮剂，络合剂(诸如2-羟丙基-β-环糊精、磺基丁基醚-β-环糊精)，以及甜味剂、调味剂、芳香剂、着色物质或具有稀释剂(诸如水、乙醇、丙二醇和甘油)的染料，以及其组合。这些组合物可通过加入抗氧化剂(诸如丁基化羟基苯甲醚或α-生育酚)来保存。
[0125]
本发明的化合物的微细粉末可以例如通过微粉化或本领域已知的方法制备。本发明的化合物可以使用已知的研磨方法(诸如湿磨)进行研磨，以获得适于片剂制剂和其他制剂类型的粒度。
[0126]
如果本发明的化合物经肠胃外施用，那么该施用的实例包括以下中的一种或多种：静脉内、动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内或皮下施用所述药剂；和/或通过使用输注技术。
[0127]
本发明的化合物可通过胃肠外途径以现成制剂或贮库型制剂施用。
[0128]
用于胃肠外施用现成制剂的药物组合物可以是在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射水性或油性溶液或混悬液的形式，且可含有配制剂，诸如悬浮剂、稳定分散剂、润湿剂和/或络合剂，诸如环糊精，例如2-羟丙基-β-环糊精、磺基丁基醚-β-环糊精。
[0129]
用于肠胃外施用的贮库型制剂可通过常规技术用药学上可接受的赋形剂制备，所述药学上可接受的赋形剂包括但不限于生物相容的和生物可降解的聚合物(例如，聚(β-己内酯)，聚(环氧乙烷)，聚(乙醇酸)，聚[(乳酸)-共-(乙醇酸)
…
)]，聚(乳酸)
…
)，非生物可降解的聚合物(例如乙烯乙酸乙烯酯共聚物、聚氨酯、聚酯(酰胺)、聚氯乙烯
…
)，水性和非水性媒介物(例如水、芝麻油、棉籽油、大豆油、蓖麻油、杏仁油、油性酯、乙醇或分馏植物油、丙二醇、dmso、thf、2-吡咯烷酮、n-甲基吡咯烷酮、n-乙烯基吡咯烷酮)。
[0130]
或者，活性成分可以是干燥形式，诸如粉末、结晶或冻干固体，用于与合适的媒介
物组合。在无菌条件下制备合适的肠胃外制剂容易通过本领域技术人员熟知的标准制药技术完成。
[0131]
如上所述，本发明的化合物可鼻内或通过吸入施用，且可方便地以干粉吸入器或气雾剂喷雾形式从加压容器、泵、喷雾器或雾化器使用合适的抛射剂例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷(例如来自ineos fluor)、二氧化碳或其他合适的气体递送。在加压气雾剂的情况下，剂量单位可通过提供阀以递送计量的量来确定。加压容器、泵、喷雾器或雾化器可含有活性化合物的溶液或悬浮液。用于吸入器或吹入器的胶囊和药筒(例如由明胶制成)可以配制成含有化合物和合适的粉末基质(诸如乳糖或淀粉)的粉末混合物。对于适合和/或适于吸入施用的组合物，优选式(i)的化合物或盐为粒径减小的形式，更优选粒径减小的形式通过微粉化获得或可通过微粉化获得。粒径减小(例如微粉化)的化合物或盐或溶剂化物的优选粒度由约0.5-约50微米的d50值(例如使用激光衍射测量)定义。
[0132]
或者，本发明的化合物可以以栓剂或阴道栓剂的形式施用，或者其可以以凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、乳膏、软膏或扑粉的形式局部施用。本发明的化合物还可以经皮或透皮施用，例如通过使用皮肤贴剂。它们也可通过肺部或直肠途径施用。其也可通过眼部途径施用。对于眼用，可将化合物配制为在等渗，ph调节的无菌盐水中的微粉化悬浮液，或优选地配制为在等渗，ph调节的无菌盐水中的溶液，任选地与防腐剂诸如苯扎氯铵联合。或者，可将其配制成软膏，诸如凡士林。
[0133]
对于局部施用于皮肤，本发明的药剂可配制为合适的软膏，其含有悬浮或溶解于例如具有以下一种或多种的混合物中的活性化合物：矿物油、液体矿脂、白矿脂、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蜡和水。或者，可将其配制成悬浮或溶解于例如以下一种或多种的混合物中的合适洗剂或乳膏：矿物油、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、聚乙二醇、液体石蜡、聚山梨醇酯60、十六烷基酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。
[0134]
定义
[0135]
以下定义和解释是针对整个申请(包括说明书和权利要求书)中使用的术语。
[0136]
除非另有说明，否则本文中对本发明的化合物的任何提及，是指所述化合物以及其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0137]
当描述本发明的化合物时，除非另有说明，否则所用的术语应根据以下定义来解释。
[0138]
本文所用的术语“未取代的”是指原子团、基团或残基不带有取代基。术语“取代的”是指原子团、基团或残基带有一个或多个取代基。术语“n-取代”是指一个或多个取代基携带于原子团、基团或残基的n原子上。
[0139]
术语“卤代”或“卤素”是指元素周期表第17族的原子(卤素)，特别地包括氟(f)、氯(cl)、溴(br)和碘(i)原子。优选的卤素基团是氟(f)和氯(cl)，特别优选氟(f)。
[0140]
术语“烷基”本身或作为另一取代基的部分是指式c
nh2n 1
的烃基，其中n是大于或等于1的数。因此，烷基可包含1个或更多个碳原子，且通常根据本发明包含1-12个，更优选1-8个碳原子，且还更优选1-6个碳原子。在本发明含义内的烷基可以是直链或支链的。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、戊基、仲戊基、异戊基、己基和异己基。
[0141]
术语“烯基”本身或作为另一取代基的部分是指具有至少一个碳-碳双键的烃基。
烯基因此可包含2个或更多个碳原子，且通常根据本发明包含2-12个，更优选2-8个碳原子，且还更优选2-6个碳原子。
[0142]
术语“炔基”本身或作为另一取代基的部分是指包含至少一个碳-碳三键的烃基。因此，炔基可包含2个或更多个碳原子，且通常根据本发明包含2-12个，更优选2-8个碳原子，且还更优选2-6个碳原子。
[0143]
术语“烷氧基”本身或作为另一取代基的部分是指-o-烷基，其中烷基如上文所定义。烷氧基的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、仲丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、仲戊氧基和异戊氧基。
[0144]
术语“氨基烷基”本身或作为另一取代基的部分是指-烷基-nh2基团，其中烷基如上文所定义。
[0145]
术语“烷氧基羰基”本身或作为另一取代基的部分是指-c(o)-o-烷基，其中烷基如上文所定义。
[0146]
术语“卤烷基”或“卤代烷基”单独或组合地是指具有如上所定义的含义的烷基，其中一个或多个氢被如上所定义的卤素替代。该卤代烷基的非限制性实例包括氯甲基、1-溴乙基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1,1,1-三氟乙基等。
[0147]
本文所用的术语“环烷基”是单价的、饱和的或不饱和的单环或双环烃基。环烷基可在环中包含3个或更多个碳原子，且通常，根据本发明包含3-10个，更优选3-8个碳原子，且还更优选3-6个碳原子。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。
[0148]
本文所用的术语“杂原子”是指非碳或氢的任何原子。该杂原子的非限制性实例包括氮、氧、硫和磷。根据本发明的优选杂原子是氮、氧和硫。
[0149]
本文所用的术语“杂环基”，“杂环烷基”或“杂环”本身或作为另一基团的部分是指非芳族的、完全饱和或部分不饱和的环基团(例如，3-7元单环，7-11元双环，或含有总共3-10个环原子)，其在含有至少一个碳原子的环中具有至少一个杂原子。含有杂原子的杂环基团的每个环可具有1、2、3或4个选自下组的杂原子：氮、氧和/或硫原子，其中氮和硫杂原子可任选被氧化且氮杂原子可任选被季铵化。杂环基团可在化合价允许的情况下连接在环或环系的任何杂原子或碳原子上。杂环基的实例包括但不限于氮丙啶基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、氮杂环庚烷基、哌嗪基、吗啉基。根据本发明优选的杂环基是氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和吗啉基。
[0150]
本文所用的术语“芳基”是指具有单环(即苯基)或稠合在一起的多个芳环(例如萘基)的多不饱和芳族烃基，典型地含有5-12个原子；优选6-10个，其中至少一个环是芳族的。芳基的实例包括但不限于苯基、联苯基、1-萘基(或萘-1-基)、2-萘基(或萘-2-基)、蒽基、茚满基、茚基、1,2,3,4-四氢萘基。根据本发明的优选芳基是苯基。
[0151]
本文所用的术语“杂芳基”本身或作为另一基团的部分是指但不限于5-12个碳原子的芳环，或含有1-2个稠合在一起的环的环系，典型地含有5-6个原子；其中至少一个是芳族的，其中一个或多个这些环中的一个或多个碳原子被氧、氮和/或硫原子替代，其中氮和硫杂原子可以任选地被氧化，且氮杂原子可以任选地被季铵化。杂芳基的实例包括但不限于吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、三嗪基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、呋喃基、苯并呋喃基、吡咯基、吲哚基、噻吩基、苯并噻吩基、咪唑基、苯并咪唑基、吡唑基、吲唑基、噁唑基、苯
并噁唑基、异噁唑基、苯并异噁唑基、噻唑基和苯并噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、二噁唑基、二噻唑基和四唑基。本发明的优选杂芳基是噻唑基。
[0152]
术语“卤芳基”或“卤代芳基”单独或组合地是指具有如上所定义的含义的芳基，其中一个或多个氢被如上所定义的卤素替代。
[0153]
含有碱性官能团的本发明的化合物可以是药学上可接受的盐的形式。含有一个或多个碱性官能团的本发明的化合物的药学上可接受的盐特别地包括其酸加成盐。合适的酸加成盐由形成无毒盐的酸形成。实例包括乙酸盐、己二酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、肉桂酸盐、柠檬酸盐、环己胺磺酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、六氟磷酸盐、海苯酸盐(hibenzate)、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、焦谷氨酸盐、蔗糖酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐和昔萘酸盐。
[0154]
式i及子式的化合物的药学上可接受的盐，例如可按如下制备：
[0155]
(i)将式i或其任何子式的化合物与所需酸反应；或
[0156]
(ii)通过与合适的酸反应或借助于合适的离子交换柱，将式i或其任何子式的化合物的一种盐转化成另一种盐。
[0157]
所有这些反应典型地在溶液中进行。盐可从溶液中沉淀并通过过滤收集或可通过蒸发溶剂回收。盐的电离度可以从完全电离到几乎不电离变化。
[0158]
本文所用的术语“溶剂化物”用于描述包含本发明的化合物和一种或多种药学上可接受的溶剂分子(例如乙醇)的分子复合物。当所述溶剂为水时，使用术语“水合物”。本发明的化合物包括如上文定义的本发明的化合物，包括其所有多晶型物和晶习，其前药和异构体(包括光学异构体、几何异构体和互变异构体)以及同位素标记的本发明的化合物。
[0159]
此外，尽管一般情况下，就本发明的化合物的盐而言，药学上可接受的盐是优选的，但应注意，本发明在其最广泛意义上还包括非药学上可接受的盐，例如，其可用于分离和/或纯化本发明的化合物。例如，与光学活性酸或碱形成的盐可用于形成非对映异构盐，其可促进本发明的化合物的光学活性异构体的分离。
[0160]
术语“患者”是指等待或接受医疗护理，或者是，或将是医疗程序的对象的温血动物，更优选人。
[0161]
术语“人”是指两种性别和处于任何发育阶段(即新生儿、婴儿、少年、青少年、成人)的受试者。在一个实施方案中，人是青少年或成人，优选成人。
[0162]
本文所用的术语“治疗(treat/treating/treatment)”是指，包括减轻或消除病症或疾病和/或其伴随症状。
[0163]
本文所用的术语“治疗有效量”(或更简单地“有效量”或“合适的剂量”)是指足以在所施用的个体中实现期望的治疗或预防效果的活性剂或活性成分的量。
[0164]
术语“施用(administration)”或其变体(例如“施用(administering)”)是指将活性剂或活性成分单独或作为药学上可接受的组合物的部分提供给待治疗的病症、症状或疾病的患者。
[0165]“药学上可接受的”是指药物组合物的成分彼此相容且对其患者无害。
[0166]
本文所用的术语“赋形剂”是指与药物组合物或药物中的活性剂或活性成分一起配制的物质。用于治疗用途的可接受的赋形剂在药学领域中是熟知的，且描述于例如remington’s pharmaceutical sciences，第21版2011中。赋形剂的选择可以根据预期的施用途径和标准药学实践来选择。赋形剂可接受的意义是必须对其接受者是无害的。所述至少一种药学上可接受的赋形剂可以是，例如粘合剂、稀释剂、载体、润滑剂、崩解剂、润湿剂、分散剂、悬浮剂等。
[0167]
本文所用的术语“癌症”是指受试者中特征为细胞生长或死亡无序(unregulated)或失调(dysregulated)的生理状况。术语“癌症”包括实体瘤和血源性肿瘤，无论是恶性的还是良性的。
[0168]
癌症的实例包括但不限于：
[0169]
腺泡腺癌、腺泡癌、肢端黑色素瘤、光化性角化病、腺癌、腺样囊性癌、腺鳞癌、附件癌、肾上腺残基瘤、肾上腺皮质癌、醛固酮分泌癌、肺泡软部肉瘤、无黑色素性黑色素瘤、成釉细胞性甲状腺癌、血管肉瘤、顶泌腺癌、askin瘤、星形细胞瘤、基底细胞癌、基底样癌、基底鳞状细胞癌、胆管癌、骨癌、骨髓癌、葡萄状肉瘤、脑癌、乳腺癌、支气管肺泡癌、支气管腺癌、支气管癌、多形性腺瘤、子宫颈癌、绿色瘤、胆管细胞癌、软骨肉瘤、绒毛膜癌、脉络丛癌、透明细胞腺癌、结肠癌、结直肠癌、粉刺癌、皮质醇产生癌、柱状细胞癌、去分化脂肪肉瘤、前列腺导管腺癌、导管癌、原位导管癌、十二指肠癌、外分泌腺癌、胚胎癌、子宫内膜癌、子宫内膜间质癌、上皮样肉瘤、食管癌、尤文氏肉瘤、外生性癌、成纤维细胞肉瘤、纤维癌、纤维板层癌、纤维肉瘤、滤泡性甲状腺癌、胆囊癌、胃腺癌、胃肠道间质癌、巨细胞癌、巨细胞肉瘤、骨巨细胞瘤、神经胶质瘤、成胶质细胞瘤或多形性成胶质母细胞瘤、颗粒细胞癌、头颈癌、血管瘤、血管肉瘤、肝母细胞瘤、肝细胞癌、嗜酸细胞癌、回肠癌、浸润性小叶癌、炎性乳腺癌、导管内癌、表皮内癌、空肠癌、卡波西肉瘤、库肯勃瘤、kulchitsky细胞癌、库普弗细胞肉瘤、大细胞癌、喉癌、恶性痣黑色素瘤、脂肪肉瘤、肝癌、小叶癌、小叶原位癌、肺癌、淋巴上皮癌、淋巴上皮癌、淋巴肉瘤、恶性黑色素瘤、髓样癌、髓样甲状腺癌、髓母细胞瘤、脑膜癌、默克尔细胞癌、微乳头状癌、混合细胞肉瘤、粘液癌、粘液表皮样癌、粘膜黑色素瘤、粘液样脂肪肉瘤、粘液肉瘤、鼻咽癌、肾母细胞瘤、神经母细胞瘤、结节性黑色素瘤、非透明细胞肾癌、非小细胞肺癌、燕麦细胞癌、眼黑色素瘤、口腔癌、骨样癌、骨肉瘤、卵巢癌、佩吉特氏癌、胰腺癌、胰母细胞瘤、乳头状腺癌、乳头状癌、甲状腺乳头状癌、骨盆癌、壶腹周围癌、叶状瘤、垂体癌、多形性脂肪肉瘤、胸膜肺母细胞瘤、原发性骨内癌、前列腺癌、直肠癌、肾细胞癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、圆细胞脂肪肉瘤、瘢痕癌、血吸虫膀胱癌、施奈德癌、皮脂腺癌、印戒细胞癌、皮肤癌、小细胞肺癌、小细胞骨肉瘤、软组织肉瘤、梭形细胞癌、梭形细胞肉瘤、鳞状细胞癌、胃癌、浅表扩散性黑色素瘤、滑膜肉瘤、毛细血管扩张性肉瘤、末端导管癌、睾丸癌、甲状腺癌、移行细胞癌、肾小管癌、致瘤性黑色素瘤、未分化癌、脐尿管腺癌、膀胱癌、子宫癌、子宫体癌、葡萄膜黑色素瘤、阴道癌、疣状癌、绒毛状癌、高分化脂肪肉瘤、肾母细胞瘤或卵黄囊瘤。根据本发明的优选癌症是黑色素瘤、肺癌、结直肠癌、胃肠道间质癌和胰腺癌。
[0170]
本文所用的术语“抗癌剂”、“抗癌药”、“化疗剂”或“细胞毒性剂”是指用于治疗或预防癌症的化学剂，其以一个或多个周期的方案单独施用或与一种或多种药剂联合施用数天至数周。该药剂对具有高增殖速率的细胞(诸如癌细胞)有毒性。
[0171]
参考以下实施例将更好地理解本发明。这些实施例旨在代表本发明的特定实施方案，而不旨在限制本发明的范围。
具体实施方式
[0172]
缩写
[0173]
在本发明的上下文中，使用以下缩写和经验公式：
[0174]
boc：叔丁氧羰基
[0175]
c18柱：反相c18柱
[0176]
℃：摄氏度
[0177]
g：克
[0178]
h：小时
[0179]
hatu：氮杂苯并三唑四甲基脲六氟磷酸酯
[0180]
hplc：高效液相色谱
[0181]
lc/ms：液相色谱/质谱
[0182]
m：摩尔每升
[0183]
mg：毫克
[0184]
mh

：准分子离子(质谱分析中的正离子模式)
[0185]
mhz：兆赫兹
[0186]
μl：微升
[0187]
ml：毫升
[0188]
mmol：毫摩尔
[0189]
mol：摩尔
[0190]
nmr：核磁共振
[0191]
本发明的其他特征、性质和优势将从以下描述和实施例中更清楚地体现。
[0192]
用于实施例中合成的设备和分析方法
[0193]
微波照射：
[0194]
仪器：带synergy软件的cem discover。
[0195]
方法：10或30ml密封管，功率50w，高速搅拌，照射时间15或30min。
[0196]
快速色谱：
[0197]
仪器：具有自动收集器和uv检测(2个波长)的biotage sp。
[0198]
正相柱：10、30或100g biotage外部干装载筒试剂盒，用sigma-aldrich 40-63μm硅胶填充。
[0199]
反相柱：30,120g biotage snap cartridges，kp-c18-hs。
[0200]
液相色谱：
[0201]
仪器：具有自动进样器和waters 2996二极管阵列检测器的waters alliance 2695 hplc系统。
[0202]
分析方法：
[0203]
柱：macherey-nagel nucleoshell rp18 plus(5μm,4mm x 100mm)。
[0204]
柱温：40℃。
[0205]
溶剂：a(h2o 99.9％,h2co
2 0.1％)；b(ch3cn 99.9％,h2co20.1％)。
[0206]
流速：1ml/min。
[0207]
梯度(a/b v/v)：90/10(t＝0min)，90/10(t＝1min)，0/100(t＝7min)，0/100(t＝10min)。
[0208]
检测：210-400nm范围。
[0209]
质谱仪：
[0210]
仪器：waters micromass zq(simple quad)。
[0211]
质量检测方法：电喷雾正模式(esi )，质量范围：50-800uma。
[0212]
nmr光谱仪：
[0213]
仪器：bruker 400mhz。
[0214]
方法：1h nmr光谱在dmso-d6中进行，使用dmso-d5作为内标，化学位移以百万分率(ppm)表示，信号表示如下：s＝单峰，d＝双峰，t＝三重峰，q＝四重峰，sept＝七重峰，dd＝双二重峰，dt＝双三重峰，m＝多重峰或大的单峰，br＝宽峰，h＝质子。
[0215]
实施例1：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-吗啉-3-基-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0216][0217]
步骤1：3-氨基-2-氟苯甲酸甲酯
[0218][0219]
在氩气下，将5.00g(32.2mmol)3-氨基-2-氟苯甲酸溶于50ml无水甲醇中。在0℃下缓慢添加2.47ml(33.8mmol)亚硫酰氯，且随后将反应物回流4小时。将溶液冷却至室温。减压除去溶剂。用饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应混合物并用乙酸乙酯萃取3次。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液减压浓缩并将粗产物通过快速色谱通过100g硅胶柱纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂。得到5.03g标题化合物。
[0220]
收率：92％。
[0221]
mh

：170.3。
[0222]
步骤2：3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯甲酸甲酯
[0223][0224]
在氩气下，在0℃向5.03g(29.7mmol)3-氨基-2-氟苯甲酸甲酯(如前步骤中所述)在50ml无水吡啶中的溶液中添加4.8ml(35.7mmol)2,5-二氟苯磺酰氯。将混合物在0℃搅拌
20min，然后在室温搅拌过夜。完全转化后，反应混合物减压浓缩，溶于二氯甲烷，用0.5n盐酸洗涤4次，盐水洗涤1次。有机层经无水硫酸钠干燥并过滤。滤液减压浓缩，并将粗产物通过快速色谱在100g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂。得到8.14g标题化合物。
[0225]
收率：80％。
[0226]
mh

：346.5。
[0227]
步骤3：n-{3-[2-(2-氯嘧啶-4-基)-乙酰基]-2-氟-苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0228][0229]
在-15℃、氩气下，向4g(11.6mmol)3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯甲酸甲酯(如前步骤中所述)在40ml无水四氢呋喃的溶液中缓慢添加40.5ml(40.5mmol)双(三甲基硅烷基)胺基锂溶液(1m于四氢呋喃中)。将反应物在-15℃搅拌20min，然后缓慢加入1.79g(13.8mmol)2-氯-4-甲基嘧啶在10ml无水四氢呋喃中的溶液，同时保持浴温在-20至-15℃。将反应物在该温度下再搅拌30分钟，然后在-15℃下缓慢加入15ml饱和氯化铵溶液，然后加入200ml水。分离溶液，将有机层用水洗涤3次。将合并的水层用1n盐酸酸化至ph 6-7并用乙酸乙酯萃取3次。合并所有有机层，经无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液，并将粗产物通过快速色谱在100g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂。得到4.26g标题化合物，为黄色固体。
[0230]
收率：83％。
[0231]
mh

：442.6。
[0232]
步骤4：3-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-吗啉-4-甲酸叔丁酯
[0233][0234]
在室温、氩气下，将400mg(0.91mmol)n-{3-[2-(2-氯嘧啶-4-基)-乙酰基]-2-氟-苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺(如前步骤中所述)溶解于4ml无水n,n
’‑
二甲基乙酰胺中，接着添加161mg(0.91mmol)n-溴琥珀酰亚胺，且在室温下搅拌混合物30分钟。在氩气下加入222mg(0.91mmol)3-硫代氨基甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯并将反应混合物在80℃加热30min。将溶液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释。将有机层用水洗涤两次并用盐水洗涤一次，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱法在30g硅胶柱上纯化，使用乙酸乙酯/己烷混合物为洗脱剂。得到348mg标题化合物。
氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0249][0250]
步骤1：1-环丙基哌啶-4-甲酰胺
[0251][0252]
将500mg(3.90mmol)哌啶-4-甲酰胺溶于40ml甲醇中，然后加入1.18ml(5.85mmol)(1-乙氧基环丙氧基)三甲基硅烷，随后加入0.67ml(11.7mmol)乙酸和394mg(6.24mmol)氰基硼氢化钠。将溶液在室温下搅拌10分钟并在60℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，除去溶剂，并将混合物通过快速色谱在30g硅胶柱上直接纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂。得到937mg标题化合物，为白色固体。
[0253]
收率：100％。
[0254]
mh

：169.2。
[0255]
步骤2：1-环丙基哌啶-4-硫代甲酰胺
[0256][0257]
将656mg(3.90mmol)1-环丙基哌啶-4-甲酰胺(如前步骤中所述)溶解于15ml四氢呋喃中，接着添加1.36g(3.35mmol)lawesson试剂且在60℃下搅拌混合物5小时。加入另外的0.7g(1.73mmol)lawesson试剂并将混合物在60℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温并减压除去溶剂。加入乙酸乙酯，并将溶液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次。合并的水层用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在30g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂。得到608mg标题化合物，为浅黄色固体。
[0258]
收率：85％。
[0259]
mh

：185.2。
[0260]
步骤3：n-{3-[5-(2-氯嘧啶-4-基)-2-(1-环丙基哌啶-4-基)-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0261][0262]
使用500mg(1.13mmol)n-{3-[2-(2-氯嘧啶-4-基)-乙酰基]-2-氟-苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺(如实施例1步骤3中所述)，5ml无水n,n
’‑
二甲基乙酰胺，201mg(1.13mmol)n-溴琥珀酰亚胺及208mg(1.13mmol)1-环丙基哌啶-4-硫代甲酰胺，代替3-硫代氨基甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯，通过实施例1步骤4中所述的流程获得化合物。得到142mg标题化合物，为棕色固体。
[0263]
收率：21％。
[0264]
mh

：606.8；608.8。
[0265]
步骤4：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-(1-环丙基哌啶-4-基)-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0266][0267]
将142mg(0.23mmol)n-{3-[5-(2-氯嘧啶-4-基)-2-(1-环丙基哌啶-4-基)-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺(如前步骤中所述)溶于3ml的28％氢氧化铵溶液中，并将该溶液在90℃下在微波辐射下加热1小时。将混合物在100ml饱和氯化铵溶液中稀释并用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。将粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂，接着通过另一快速色谱在30g c18柱上纯化，使用水/甲醇混合物为洗脱剂。得到38mg标题化合物，为黄色固体。
[0268]
收率：27％。
[0269]
mh

：587.8。
[0270]1h nmr(dmso-d6,400mhz)：δ10.65(br s,1h)；7.98(d,j＝5.2hz,1h)；7.61-7.36(m,4h)；7.33-7.18(m,2h)；6.75(s,2h)；5.88(d,j＝5.1hz,1h)；3.10-2.95(m,2h)；2.43-2.30(m,2h)；2.10-1.98(m,2h)；1.75-1.56(m,3h)；0.48-0.40(m,2h)；0.38-0.28(m,2h)。
[0271]
实施例3：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-哌啶-3-基-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0272][0273]
步骤1：3-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0274][0275]
使用222mg(0.91mmol)3-硫代氨基甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯代替3-硫代氨基甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯，通过实施例1步骤4中所述的流程获得化合物。得到377mg标题化合物，为黄色固体。
[0276]
收率：62％。
[0277]
mh

：666.8；670.8。
[0278]
步骤2：3-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0279][0280]
使用377mg(0.57mmol)3-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)，通过实施例1步骤5中所述的流程来获得化合物。得到259mg标题化合物，为黄色固体。
[0281]
收率：71％。
[0282]
mh

：647.9。
[0283]
步骤3：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-哌啶-3-基-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0284][0285]
使用50mg(0.077mmol)3-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)，通过实施例1步骤6中所述的流程来获得化合物。得到6mg标题化合物。
[0286]
收率：15％。
[0287]
mh

：547.7。
[0288]1h nmr(dmso-d6,400mhz)：δ8.65(br s,1h)；8.02(d,j＝5.2hz,1h)；7.50-7.40(m,1h)；7.39-7.21(m,4h)；7.01-6.89(m,1h)；6.72(s,2h)；6.07(d,j＝5.0hz,1h)；3.65-3.55(m,2h)；3.26-3.19(m,1h)；3.19-3.08(m,1h)；2.96-2.83(m,1h)；2.26-2.15(m,1h)；1.92-1.69(m,3h)。
[0289]
实施例4：n-{3-[2-(3-氨基丙基)-5-(2-氨基嘧啶-4-基)-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺三氟乙酸盐
[0290][0291]
步骤1：(3-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-丙基)-氨基甲酸叔丁酯
[0292][0293]
使用197mg(0.90mmol)(3-硫代氨基甲酰基丙基)-氨基甲酸叔丁酯代替3-硫代氨基甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯，通过实施例1步骤4中所述的流程来获得化合物。得到299mg标题化合物。
[0294]
收率：52％。
[0295]
mh

：640.8；642.8。
[0296]
步骤2：(3-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-丙基)-氨基甲酸叔丁酯
基)-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺苯甲酸(如实施例2步骤4中所述)溶于1ml无水吡啶中。然后，加入5.8μl(0.061mmol)乙酸酐，并将溶液在室温下搅拌1小时。减压除去溶剂，加入乙酸乙酯，溶液用氯化铵溶液洗涤3次。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂。得到14mg标题化合物，为黄色固体。
[0310]
收率：91％。
[0311]
mh

：629.8。
[0312]1h nmr (dmso-d6，400mhz)：δ8.04(d,j＝5.2hz,1h)；7.88-7.70(m,5h)；7.66-7.57(m,1h)；7.54(t,j＝8.1hz,1h)；6.77(s,2h)；6.16(d,j＝5.3hz,1h)；3.11-2.97(m,2h)；2.40-2.27(m,2h)；2.14-2.04(m,2h)；1.95(s,3h)；1.76-1.56(m,3h)；0.48-0.38(m,2h)；0.36-0.26(m,2h)。
[0313]
实施例6：n-(4-{4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-2-哌啶-3-基-噻唑-5-基}-嘧啶-2-基)-乙酰胺三氟乙酸盐
[0314][0315]
步骤1：3-{5-(2-乙酰氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0316][0317]
在氩气下将30mg(0.046mmol)3-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯(如实施例3步骤2中所述)溶于1ml无水吡啶中。然后，加入5.3μl(0.055mmol)乙酸酐，并将溶液在室温下搅拌1小时。减压除去溶剂，加入乙酸乙酯，并用氯化铵溶液洗涤溶液3次。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。得到36mg粗产物，不经进一步纯化直接用于下一步骤。
[0318]
收率：100％。
[0319]
mh

：689.7。
[0320]
步骤2：n-(4-{4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-2-哌啶-3-基-噻唑-5-基}-嘧啶-2-基)-乙酰胺三氟乙酸盐
[0321][0322]
将21mg(0.030mmol)3-{5-(2-乙酰氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基苯基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶于1ml二氯甲烷中，并加入0.5ml三氟乙酸。将溶液在室温下搅拌1小时。减压除去溶剂。将残余物用乙醚研磨3次并真空干燥过夜。得到14.5mg标题化合物。
[0323]
收率：80％。
[0324]
mh

：589.7(游离碱)。
[0325]1h nmr(dmso-d6,400mhz)：δ8.85-8.70(m,1h)；8.63-8.47(m,1h)；8.07(d,j＝5.2hz,1h)；7.88-7.70(m,5h)；7.67-7.52(m,2h)；6.81(s,2h)；6.18(d,j＝5.0hz,1h)；3.73-3.62(m,2h)；3.03-2.87(m,1h)；2.30-2.20(m,1h)；1.95(s,3h)；1.99-1.88(m,1h)；1.88-1.69(m,3h)。
[0326]
实施例7：n-(4-{4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-2-吗啉-3-基-噻唑-5-基}-嘧啶-2-基)-乙酰胺
[0327][0328]
步骤1：3-{5-(2-乙酰氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-吗啉-4-甲酸叔丁酯
[0329][0330]
使用30mg(0.046mmol)3-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-吗啉-4-甲酸叔丁酯(如实施例1步骤5中所述)及5.3μl(0.055mmol)乙酸酐，通过实施例6步骤1中所述的流程获得化合物。得到39mg粗产物，不经进一步纯化直接用于下一步骤。
[0331]
收率：100％。
[0332]
mh

：691.7。
[0333]
步骤2：n-(4-{4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-2-吗啉-3-基-噻唑-5-基}-嘧啶-2-基)-乙酰胺
[0334][0335]
将32mg(0.046mmol)3-{5-(2-乙酰氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-吗啉-4-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶于1ml二氯甲烷中，并加入0.5ml三氟乙酸。将溶液在室温下搅拌1小时。减压除去溶剂，残余物直接在10g硅胶柱上纯化，用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂。得到8.0mg标题化合物。
[0336]
收率：30％。
[0337]
mh

：591.7。
[0338]1h nmr(dmso-d6,400mhz)：δ8.05(d,j＝5.2hz,1h)；7.85-7.71(m,4h)；7.66-7.57(m,1h)；7.54(t,j＝8.0hz,1h)；6.76(s,2h)；6.17(d,j＝5.0hz,1h)；4.21-4.14(m,1h)；4.00-3.92(m,1h)；3.77-3.69(m,1h)；3.57-3.44(m,3h)；2.96-2.83(m,2h)；1.94(s,3h)。
[0339]
实施例8：n-(4-{2-(3-氨基丙基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-5-基}-嘧啶-2-基)-乙酰胺
[0340][0341]
步骤1：(3-{5-(2-乙酰氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-丙基)-氨基甲酸叔丁酯
[0342][0343]
使用30mg(0.048mmol)(3-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-丙基)-氨基甲酸叔丁酯(如实施例4步骤2中所述)及5.5μl(0.058mmol)乙酸酐，通过实施例6步骤1中所述的流程获得化合物。得到32mg粗产物，不经进一步纯化直接用于下一步骤。
[0344]
收率：100％。
[0345]
mh

：663.7。
[0346]
步骤2：n-(4-{2-(3-氨基丙基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-5-基}-嘧啶-2-基)-乙酰胺
[0347][0348]
将32mg(0.048mmol)(3-{5-(2-乙酰氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-丙基)-氨基甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶解于1ml二氯甲烷中，且添加0.5ml三氟乙酸。将溶液在室温下搅拌1小时。减压除去溶剂，残余物直接在10g硅胶柱上纯化，用二氯甲烷/甲醇/0.5％氢氧化铵的混合物为洗脱剂。得到11.0mg标题化合物。
[0349]
收率：40％。
[0350]
mh

：563.7。
[0351]1h nmr(dmso-d6,400mhz)：δ10.75(s,1h)；7.98(d,j＝5.2hz,1h)；7.957.85(br s,1h)；7.64-7.21(m,5h)；6.75(s,2h)；5.85(d,j＝5.2hz,1h)；3.16-3.08(m,2h)；2.99(t,j＝7.6hz,2h)；1.91-1.79(m,2h)；1.79(s,3h)。
[0352]
实施例9：n-(4-{4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟-苯基]-2-吗啉-3-基-噻唑-5-基}-嘧啶-2-基)-丙烯酰胺三氟乙酸盐
[0353][0354]
步骤1：3-{5-(2-丙烯酰氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-吗啉-4-甲酸叔丁酯
[0355][0356]
在氩气下将15mg(0.023mmol)3-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-吗啉-4-甲酸叔丁酯(如实施例1步骤5中所述)溶于1ml无水
二氯甲烷中，然后加入3.8μl(0.028mmol)三乙胺和2.2μl(0.023mmol)丙烯酰氯。将溶液在室温下搅拌1小时。减压除去溶剂，加入乙酸乙酯，溶液用水洗涤3次，用盐水洗涤1次。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在30gc18柱上纯化，使用水/甲醇混合物作为洗脱剂。得到7mg标题化合物。
[0357]
收率：44％。
[0358]
mh

：703.8。
[0359]
步骤2：n-(4-{4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟-苯基]-2-吗啉-3-基-噻唑-5-基}-嘧啶-2-基)-丙烯酰胺三氟乙酸盐
[0360][0361]
将7mg(0.010mmol)3-{5-(2-丙烯酰氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-吗啉-4-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶于3ml二氯甲烷中，并加入1ml三氟乙酸。将溶液在室温下搅拌1小时。减压除去溶剂。将残余物用乙醚研磨3次并真空干燥过夜。获得2.2mg标题化合物，为浅黄色固体。
[0362]
收率：36％。
[0363]
mh

：603.7。
[0364]
实施例10：n-(4-{2-(3-氨基丙基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-5-基}-嘧啶-2-基)-丙烯酰胺三氟乙酸盐
[0365][0366]
步骤1：(3-{5-(2-丙烯酰氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-丙基)-氨基甲酸叔丁酯
[0367][0368]
在氩气下将27mg(0.043mmol)(3-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-丙基)-氨基甲酸叔丁酯(如实施例4步骤2中所述)溶于1ml
无水二氯甲烷中，然后在0℃下加入6.7μl(0.048mmol)三乙胺和3.9μl(0.048mmol)丙烯酰氯。将溶液在0℃搅拌10min并在室温搅拌1h。减压除去溶剂，加入乙酸乙酯，溶液用水洗涤3次，用盐水洗涤1次。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在30g c18柱上纯化，使用水/甲醇混合物为洗脱剂。得到19mg标题化合物。
[0369]
收率：66％。
[0370]
mh

：675.9。
[0371]
步骤2：n-(4-{2-(3-氨基丙基)-4-[3-(2,5-二氟-苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-5-基}-嘧啶-2-基)-丙烯酰胺三氟乙酸盐
[0372][0373]
将12mg(0.018mmol)(3-{5-(2-丙烯酰氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-丙基)-氨基甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶解于3ml二氯甲烷中，且添加1ml三氟乙酸。将溶液在室温下搅拌1小时。减压除去溶剂。将残余物用乙醚研磨3次并真空干燥过夜。得到8.3mg标题化合物，为浅黄色固体。
[0374]
收率：83％。
[0375]
mh

：575.8。
[0376]
实施例11：3-{5-(2-丙烯酰氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0377][0378]
在氩气下将30mg(0.046mmol)3-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯(如实施例3步骤2中所述)溶于1ml无水二氯甲烷中，然后加入7.7μl(0.055mmol)三乙胺和7.5μl(0.093mmol)丙烯酰氯。将溶液在室温下搅拌1小时。减压除去溶剂，加入乙酸乙酯，溶液用水洗涤3次，用盐水洗涤1次。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在30gc18柱上纯化，使用水/甲醇混合物为洗脱剂。得到5mg标题化合物。
[0379]
收率：13％。
[0380]
mh

：701.8。
[0381]
实施例12：丁烷-2-磺酸{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-哌啶-4-基-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-酰胺
[0382][0383]
步骤1：3-(丁烷-2-磺酰氨基)-2-氟苯甲酸甲酯
[0384][0385]
在氩气中，0℃下向1.49g(8.81mmol)3-氨基-2-氟苯甲酸甲酯(如实施例1步骤1中所述)在15ml无水吡啶中的溶液中添加1.65gml(10.6mmol)丁烷-2-磺酰氯。将混合物在0℃搅拌20min，然后在室温搅拌过夜。将混合物减压浓缩，溶于乙酸乙酯，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，用盐水洗涤1次。然后，有机层用无水硫酸钠干燥并过滤。滤液减压浓缩，粗产物通过快速色谱在30g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂，随后通过另一快速色谱在120g c18柱上纯化，使用水/乙腈混合物为洗脱剂。得到750mg标题化合物。
[0386]
收率：30％。
[0387]
mh

：290.3。
[0388]
步骤2：丁烷-2-磺酸{3-[2-(2-氯嘧啶-4-基)-乙酰基]-2-氟苯基}-酰胺
[0389][0390]
在氩气中，-15℃下向750mg(2.59mmol)3-(丁烷-2-磺酰氨基)-2-氟苯甲酸甲酯(如前步骤中所述)在7ml无水四氢呋喃中的溶液中缓慢添加9ml(9mmol)双(三甲基硅烷基)胺基锂溶液(1m于四氢呋喃中)。将混合物在-15℃搅拌20min，然后缓慢加入400mg(3.11mmol)2-氯-4-甲基嘧啶在2ml无水四氢呋喃中的溶液，同时保持浴温在-20至-15℃。将反应物在-15℃下搅拌30min，然后在-15℃下缓慢添加5ml饱和氯化铵溶液，随后添加100ml乙酸乙酯和100ml水。分离溶液，有机层用水洗涤两次。将合并的水层用1n盐酸酸化至ph 6-7并用乙酸乙酯萃取3次。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并过滤。滤液减压浓缩，且粗产物通过快速色谱在30g硅胶柱上纯化，用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂。得到882mg标题化合物，为深橙色油状物。
[0391]
收率：88％。
[0392]
mh

：386.3；388.3。
[0393]
步骤3：4-[4-[3-(丁烷-2-磺酰氨基)-2-氟苯基]-5-(2-氯嘧啶-4-基)-噻唑-2-基]-哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0394][0395]
在室温、氩气下，将100mg(0.26mmol)丁烷-2-磺酸{3-[2-(2-氯嘧啶-4-基)-乙酰基]-2-氟苯基}-酰胺(如前步骤中所述)溶解于2ml无水n,n
’‑
二甲基乙酰胺中，接着添加46mg(0.26mmol)n-溴琥珀酰亚胺且在室温下搅拌混合物30分钟。在氩气下加入63mg(0.26mmol)4-硫代氨基甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯并将反应混合物在80℃加热30min。将溶液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释。将溶液用水洗涤3次并用盐水洗涤1次，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用乙酸乙酯/己烷混合物为洗脱剂。得到80mg标题化合物。
[0396]
收率：50％。
[0397]
mh

：610.5；612.5。
[0398]
步骤4：4-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(丁烷-2-磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0399][0400]
将80mg(0.13mmol)4-[4-[3-(丁烷-2-磺酰基氨基)-2-氟苯基]-5-(2-氯嘧啶-4-基)-噻唑-2-基]-哌啶-1-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶解于3ml的28％氢氧化铵溶液中且将溶液在90℃下在微波辐射下加热1小时。将混合物在50ml饱和氯化铵溶液中稀释并用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂。得到63mg标题化合物，为黄色固体。
[0401]
收率：81％。
[0402]
mh

：591.4。
[0403]
步骤5：丁烷-2-磺酸{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-哌啶-4-基-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-酰胺
[0404][0405]
将63mg(0.11mmol)4-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(丁烷-2-磺酰基氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶解于1ml二氯甲烷中并添加0.5ml三氟乙酸。将溶液在室温下搅拌1小时。然后，除去溶剂，加入乙酸乙酯，溶液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂，接着通过另一快速色谱在30g c18柱上纯化，使用水/甲醇混合物为洗脱剂。得到13mg标题化合物。
[0406]
收率：26％。
[0407]
mh

：491.4。
[0408]1h nmr(dmso-d6,400mhz)：δ8.05(d,j＝5.2hz,1h)；7.59-7.49(m,1h)；7.30-7.20(m,2h)；6.75(s,2h)；6.09(d,j＝5.2hz,1h)；3.20-3.12(m,1h)；3.12-3.02(m,2h)；3.74-3.63(m,2h)；2.10-1.99(m,2h)；1.97-1.84(m,1h)；1.73-1.59(m,2h)；1.49-1.32(m,1h)；1.20(d,j＝6.8hz,3h)；0.88(t,j＝7.4hz,3h)。
[0409]
实施例13：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-吗啉-3-基-噻唑-4-基]-5-氯-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0410][0411]
步骤1：3-氨基-5-氯-2-氟苯甲酸甲基酯
[0412][0413]
在氩气下将500mg(2.64mmol)3-氨基-5-氯-2-氟苯甲酸溶解于5ml无水甲醇中。在0℃下缓慢添加202μl(2.77mmol)亚硫酰氯，且随后将反应物回流3小时。将溶液冷却至室温。减压除去溶剂。将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取3次。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并过滤。滤液减压浓缩，粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤。得到432mg标题化合物，为黄色固体。
[0414]
收率：80％。
[0415]
步骤2：5-氯-3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯甲酸甲基酯
2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺(如前步骤中所述)溶解于2ml无水n,n
’‑
二甲基乙酰胺中，接着添加75mg(0.42mmol)n-溴琥珀酰亚胺，且在室温下搅拌混合物30分钟。在氩气下加入103mg(0.42mmol)3-硫代氨基甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯并将反应混合物在80℃加热30min。将溶液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，然后用水洗涤两次并用盐水洗涤一次，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用乙酸乙酯/己烷混合物作为洗脱剂。得到140mg标题化合物。
[0428]
收率：47％。
[0429]
mh

：702.8；704.8；706.8。
[0430]
步骤5：3-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[5-氯-3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-吗啉-4-甲酸叔丁酯
[0431][0432]
将140mg(0.20mmol)3-[4-[5-氯-3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-5-(2-氯嘧啶-4-基)-噻唑-2-基]-吗啉-4-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶解于2ml的28％氢氧化铵中，并将该溶液在90℃下在微波辐射下加热1小时。将混合物在50ml饱和氯化铵溶液中稀释并用乙酸乙酯萃取3次。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤(92mg棕色固体)。
[0433]
收率：68％。
[0434]
mh

：683.8；685.8。
[0435]
步骤6：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-吗啉-3-基-噻唑-4-基]-5-氯-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0436][0437]
将92mg(0.13mmol)3-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[5-氯-3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-吗啉-4-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶解在1ml二氯甲烷中并添加0.5ml三氟乙酸。将溶液在室温下搅拌1小时。然后，除去溶剂，加入乙酸乙酯，并将溶液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂，接着通过另一快速色谱在30g c18柱上纯化，使用水/甲醇混合物为洗脱剂。得到33mg标题化合物，为浅橙色固体。
[0438]
收率：44％。
[0439]
mh

：583.7；585.7。
[0440]1h nmr(dmso-d6,400mhz)：δ8.07(d,j＝5.2hz,1h)；7.55-7.34(m,4h)；7.18-7.04(m,1h)；6.77(s,2h)；6.07(d,j＝5.1hz,1h)；4.41-4.29(m,1h)；4.05-3.95(m,1h)；3.82-3.73(m,1h)；3.60-3.47(m,2h)；3.04-2.89(m,2h)。
[0441]
实施例14：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-叔丁基-噻唑-4-基]-5-氯-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0442][0443]
步骤1：n-{3-[2-叔丁基-5-(2-氯嘧啶-4-基)-噻唑-4-基]-5-氯-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0444][0445]
在室温、氩气下，将100mg(0.21mmol)n-{5-氯-3-[2-(2-氯嘧啶-4-基)-乙酰基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺(如实施例13步骤3中所述)溶解在1ml无水n,n
’‑
二甲基乙酰胺中，接着添加38mg(0.21mmol)n-溴琥珀酰亚胺，且在室温下搅拌混合物30分钟。在氩气下加入25mg(0.21mmol)2,2-二甲基硫代丙酰胺，将反应混合物在80℃加热30min。将溶液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释。将溶液用水洗涤两次并用盐水洗涤一次，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用乙酸乙酯/己烷混合物作为洗脱剂。得到70mg标题化合物。
[0446]
收率：61％。
[0447]
mh

：573.6；575.6；577.6。
[0448]
步骤2：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-叔丁基-噻唑-4-基]-5-氯-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0449][0450]
将70mg(0.12mmol)n-{3-[2-叔丁基-5-(2-氯嘧啶-4-基)-噻唑-4-基]-5-氯-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺(如前步骤中所述)溶于2ml的28％氢氧化铵中，并将该液在90℃下在微波辐射下加热1小时。将混合物在50ml饱和氯化铵溶液中稀释并用乙酸乙酯萃取3
次。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂，接着通过另一快速色谱在30g c18柱上纯化，使用水/乙腈混合物为洗脱剂。得到18mg标题化合物。
[0451]
收率：26％。
[0452]
mh

：554.7；556.7。
[0453]1h nmr(dmso-d6,400mhz)：δ11.01(br s,1h)；8.04(d,j＝5.2hz,1h)；7.63-7.37(m,5h)；6.76(s,2h)；5.99(d,j＝5.1hz,1h)；1.40(s,9h)。
[0454]
实施例15：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氮杂环丁烷-2-基-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0455][0456]
步骤1：2-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0457][0458]
在室温、氩气下，将200mg(0.46mmol)n-{3-[2-(2-氯嘧啶-4-基)-乙酰基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺(如实施例1步骤3中所述)溶解于2ml无水n,n
’‑
二甲基乙酰胺中，接着添加80mg(0.46mmol)n-溴琥珀酰亚胺，且在室温下搅拌混合物30分钟。在氩气下，加入98mg(0.46mmol)2-硫代氨基甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯并将反应混合物在80℃加热30min。将溶液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释。将有机层用水洗涤两次并用盐水洗涤一次，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱法在10g硅胶柱上纯化，使用乙酸乙酯/己烷混合物为洗脱剂。得到157mg标题化合物。
[0459]
收率：55％。
[0460]
mh

：638.8；640.9。
[0461]
步骤2：2-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
[0462][0463]
将157mg(0.24mmol)2-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶解于2ml的28％氢氧化铵中，并将该溶液在90℃下在微波辐射下加热1小时。将混合物在50ml饱和氯化铵溶液中稀释并用乙酸乙酯萃取3次。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤(152mg)。
[0464]
mh

：619.9。
[0465]
步骤3：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氮杂环丁烷-2-基-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0466][0467]
将152mg(0.24mmol)2-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶解于1ml二氯甲烷中并添加0.5ml三氟乙酸。将溶液在室温下搅拌1小时。然后，除去溶剂，加入乙酸乙酯，溶液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂，接着通过另一快速色谱在30gc18柱上纯化，使用水/甲醇混合物为洗脱剂。得到24mg标题化合物，为浅黄色固体。
[0468]
2步收率：19％。
[0469]
mh

：519.7。
[0470]1h nmr(dmso-d6,400mhz)：δ8.00(d,j＝5.2hz,1h)；7.52-7.30(m,4h)；7.10(t,j＝7.8hz,1h)；7.06-6.97(m,1h)；6.72(s,2h)；5.98(d,j＝5.1hz,1h)；5.20(t,j＝8.0hz,1h)；3.76(q,j＝8.0hz,1h)；3.41-3.31(m,1h)；2.71-2.61(m,1h)；2.46-2.35(m,1h)。
[0471]
实施例16：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-吡咯烷-2-基-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0472]
[0473]
步骤1：2-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
[0474][0475]
在室温、氩气下，将191mg(0.43mmol)n-{3-[2-(2-氯嘧啶-4-基)-乙酰基]-2-氟-苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺(如实施例1步骤3中所述)溶解在2ml无水n,n
’‑
二甲基乙酰胺中，接着添加77mg(0.43mmol)n-溴琥珀酰亚胺，并将混合物在室温下搅拌30分钟。在氩气下加入100mg(0.43mmol)2-硫代氨基甲酰基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，将反应混合物在80℃加热30min。将溶液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释。将有机层用水洗涤两次并用盐水洗涤一次，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用乙酸乙酯/己烷混合物为洗脱剂。得到205mg标题化合物。
[0476]
收率：72％。
[0477]
mh

：652.9；654.9。
[0478]
步骤2：2-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
[0479][0480]
将205mg(0.31mmol)2-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶于2ml 28％氢氧化铵溶液中，并将该溶液在90℃下在微波辐射下加热1小时。将混合物在50ml饱和氯化铵溶液中稀释并用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤(198mg)。
[0481]
mh

：633.9。
[0482]
步骤3：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-吡咯烷-2-基-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0483]
[0484]
将198mg(0.31mmol)2-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶于1ml二氯甲烷中并加入0.5ml三氟乙酸。将溶液在室温下搅拌1小时。然后，除去溶剂，加入乙酸乙酯，并将溶液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂，接着通过另一快速色谱在30g c18柱上纯化，使用水/甲醇混合物为洗脱剂。得到30mg标题化合物，为浅黄色固体。
[0485]
2步收率：18％。
[0486]
mh

：533.7。
[0487]1h nmr(dmso-d6,400mhz)：δ7.98(d,j＝5.2hz,1h)；7.52-7.31(m,4h)；7.19-7.05(m,2h)；6.71(s,2h)；5.93(d,j＝5.1hz,1h)；4.62-4.55(m,1h)；3.10-2.95(m,2h)；2.29-2.17(m,1h)；1.96-1.84(m,1h)；1.84-1.74(m,2h)。
[0488]
实施例17：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-哌啶-2-基-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0489][0490]
步骤1：2-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟-苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0491][0492]
在室温、氩气下，将180mg(0.41mmol)n-{3-[2-(2-氯嘧啶-4-基)-乙酰基]-2-氟-苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺(如实施例1步骤3所述)溶于2ml无水n,n
’‑
二甲基乙酰胺中，然后加入72mg(0.41mmol)n-溴代琥珀酰亚胺，并将混合物在室温搅拌30min。在氩气下加入100mg(0.41mmol)2-硫代氨基甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯并将反应混合物在80℃加热30min。将溶液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释。将溶液用水洗涤两次并用盐水洗涤一次，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用乙酸乙酯/己烷混合物为洗脱剂。得到169mg标题化合物。
[0493]
收率：62％。
[0494]
mh

：666.9；668.9。
[0495]
步骤2：2-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟-苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0496][0497]
将169mg(0.25mmol)2-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟-苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶解于2ml的28％氢氧化铵溶液中，并将该溶液在90℃下在微波辐射下加热1小时。将混合物在50ml饱和氯化铵溶液中稀释并用乙酸乙酯萃取3次。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤(163mg)。
[0498]
mh

：648.0。
[0499]
步骤3：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-哌啶-2-基-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0500][0501]
将163mg(0.25mmol)2-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟-苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶解于1ml二氯甲烷中并添加0.5ml三氟乙酸。将溶液在室温下搅拌1小时。然后除去溶剂，加入乙酸乙酯，溶液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂，接着通过另一快速色谱在30g c18柱上纯化，使用水/甲醇混合物为洗脱剂。得到62mg标题化合物，呈黄色固体。
[0502]
2步收率：45％。
[0503]
mh

：547.8。
[0504]1h nmr(dmso-d6,400mhz)：δ8.02(d,j＝5.2hz,1h)；7.51-7.31(m,4h)；7.09(t,j＝7.8hz,1h)；7.03-6.93(m,1h)；6.75(s,2h)；6.00(d,j＝5.1hz,1h)；4.35-4.24(m,1h)；3.19-3.09(m,1h)；2.88-2.77(m,1h)；2.16-2.06(m,1h)；1.86-1.76(m,1h)；1.70-1.43(m,4h)。
[0505]
实施例18：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-哌嗪-2-基-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0506][0507]
步骤1：2-氨基甲酰基哌嗪-1,4-二羧酸二叔丁酯
[0508][0509]
在氩气下将229mg(1.00mmol)2-氨基甲酰基哌嗪-1-甲酸叔丁酯溶于3ml无水四氢呋喃中，然后加入229mg (1.05mmol)二碳酸二叔丁酯并将混合物在室温下搅拌1小时。然后，用乙酸乙酯稀释溶液。有机层用饱和碳酸氢钠溶液洗涤两次，用盐水洗涤一次。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂。得到329mg标题化合物，呈白色固体泡沫。
[0510]
收率：定量。
[0511]
mh

：330.6。
[0512]
步骤2：2-硫代氨基甲酰哌嗪-1,4-二羧酸二叔丁酯
[0513][0514]
将360mg(1.09mmol)2-氨基甲酰基哌嗪-1,4-二羧酸二叔丁酯(如前步骤中所述)溶于4ml四氢呋喃中，然后加入380mg(0.94mmol)lawesson试剂并将混合物在60℃搅拌4h。将反应混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将残余物用饱和碳酸氢钠溶液淬灭，并用乙酸乙酯萃取。合并的有机物用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂。得到261mg标题化合物，呈白色固体。
[0515]
收率：70％。
[0516]
mh

：346.7。
[0517]
步骤3：2-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌嗪-1,4-二羧酸二叔丁酯
[0518][0519]
在室温、氩气下，将191mg(0.43mmol)n-{3-[2-(2-氯嘧啶-4-基)-乙酰基]-2-氟-苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺(如实施例1步骤3中所述)溶解在2ml无水n,n
’‑
二甲基乙酰胺中，接着添加78mg(0.43mmol)n-溴琥珀酰亚胺，并将混合物在室温下搅拌30分钟。在氩气下加入150mg(0.43mmol)2-硫代氨基甲酰哌嗪-1,4-二羧酸二叔丁酯(如前步骤中所述)并将反应混合物在80℃加热30min。将溶液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释。将溶液用水洗涤两次并用盐水洗涤一次，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用乙酸乙酯/己烷混合物为洗脱剂。得到132mg标题化合物，呈白色固体。
[0520]
收率：40％。
[0521]
mh

：768.0；770.0。
[0522]
步骤4：2-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌嗪-1,4-二羧酸二叔丁酯
[0523][0524]
将132mg(0.17mmol)2-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌嗪-1,4-二甲酸二叔丁酯(如前步骤中所述)溶解于2ml的28％氢氧化铵溶液中，且在90℃下在微波辐射下加热1小时。将混合物在50ml饱和氯化铵溶液中稀释并用乙酸乙酯萃取3次。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤(122mg)。
[0525]
mh

：749.2。
[0526]
步骤5：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-哌嗪-2-基-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0527]
[0528]
将122mg(0.16mmol)2-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-哌嗪-1,4-二甲酸二叔丁酯(如前步骤中所述)溶解于1ml二氯甲烷中且添加0.5ml三氟乙酸。将溶液在室温下搅拌1小时。然后除去溶剂，加入乙酸乙酯，溶液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂，接着通过另一快速色谱在30g c18柱上纯化，使用水/甲醇混合物为洗脱剂。得到14mg标题化合物，呈浅黄色固体。
[0529]
2步收率：16％。
[0530]
mh

：548.6。
[0531]1h nmr(dmso-d6,400mhz)：δ8.00(d,j＝5.2hz,1h)；7.51-7.42(m,1h)；7.34-7.20(m,3h)；6.92(t,j＝7.8hz,1h)；6.71(s,2h)；6.69-6.62(m,1h)；6.05(d,j＝5.1hz,1h)；4.27-4.18(m,1h)；3.47-3.36(m,1h)；3.12-3.00(m,2h)；2.99-2.77(m,3h)。
[0532]
实施例19：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-(6,6-二甲基吗啉-3-基)噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0533][0534]
步骤1：5-氨甲酰基-2,2-二甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯
[0535][0536]
在氩气下将150mg(0.580mmol)6,6-二甲基吗啉-3,4-二甲酸4-叔丁酯溶解于3ml无水四氢呋喃中，接着添加200μl(1.16mmol)n,n
’‑
二异丙基乙胺和220mg(0.580mmol)hatu，并将混合物在室温下搅拌15分钟。加入2.9ml(1.16mmol)0.4m氨的二噁烷溶液，将混合物在室温下搅拌3小时。然后，将溶液用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，然后用饱和nh4cl溶液洗涤，最后用盐水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂。得到182mg标题化合物，呈无色油状物。
[0537]
收率：定量。
[0538]
mh

：259.5。
[0539]
步骤2：2,2-二甲基-5-硫代氨基甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯
[0540][0541]
在氩气下，将172mg(0.666mmol)5-氨甲酰基-2,2-二甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶解于3ml无水四氢呋喃中，接着添加232mg(0.573mmol)lawesson试剂，将混合物在60℃下搅拌2h 30。将反应混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将残余物用饱和碳酸氢钠溶液淬灭，并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物在通过2次连续的快速色谱10g硅胶柱上纯化：a/二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂，b/乙酸乙酯/己烷混合物为洗脱剂。得到70mg标题化合物，呈无色凝胶。
[0542]
收率：38％。
[0543]
mh

：275.5。
[0544]
步骤3：5-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-2,2-二甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯
[0545][0546]
在室温，氩气下，将110mg(0.249mmol)n-{3-[2-(2-氯嘧啶-4-基)-乙酰基]-2-氟-苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺(如实施例1步骤3中所述)溶于2ml无水n,n
’‑
二甲基乙酰胺中，然后加入44mg(0.247mmol)n-溴代琥珀酰亚胺，并将混合物在室温搅拌30分钟。在氩气下加入68mg(0.248mmol)2,2-二甲基-5-硫代氨基甲酰基-吗啉-4-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)并将反应混合物在80℃加热30min。将溶液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释。将溶液用水/盐水(1/1)的混合物洗涤5次，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用乙酸乙酯/己烷混合物为洗脱剂。获得98mg的标题化合物，呈灰白色固体。
[0547]
收率：26％。
[0548]
mh

：696.6；698.6。
[0549]
步骤4：5-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-2,2-二甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯
[0550][0551]
将96mg(0.138mmol)5-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟-苯基]-噻唑-2-基}-2,2-二甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶解于1.5ml的28％氢氧化铵中，然后在90℃下在微波辐射下搅拌1小时。将混合物在水/盐水(1/1)的混合物中稀释并用乙酸乙酯萃取3次。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤(58mg标题化合物，橙色固体)。
[0552]
mh

：677.7。
[0553]
步骤5：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-(6,6-二甲基吗啉-3-基)-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0554][0555]
将58mg(0.160mmol)n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-(6,6-二甲基-吗啉-3-基)-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺(如前步骤中所述)溶于1ml二氯甲烷中并加入0.5ml三氟乙酸。将溶液在室温下搅拌1小时。然后，除去溶剂，将残余物与饱和碳酸氢钠溶液混合。使用乙酸乙酯萃取该含水混合物3次。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂，接着通过另一快速色谱在30gc18柱上纯化，使用水/甲醇混合物为洗脱剂。最后进行第三次柱色谱(10g硅胶，乙酸乙酯/己烷)。得到10mg标题化合物，呈黄色固体。
[0556]
2步收率：13％。
[0557]
mh

：577.6。
[0558]1h nmr(dmso-d6,400mhz)：δ10.74(br s,1h)；7.99(d,j＝5.1hz,1h)；7.67-7.00(m,6h)；6.74(s,2h)；5.88(s,1h)；4.06-3.98(m,1h)；3.80-3.73(m,1h)；3.66-3.57(m,1h)；2.74(d,j＝12.2hz,1h)；2.69(d,1h)；1.25(s,3h)；1.14(s,3h)。
[0559]
实施例20：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-(4-环丙基哌嗪-2-基)-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0560][0561]
步骤1：4-环丙基哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯2-甲酯
[0562][0563]
在氩气下将500mg(2.05mmol)哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯2-甲酯溶于35ml无水甲醇中。加入617μl(3.07mmol)(1-乙氧基环丙氧基)-三甲基硅烷，351μl(6.14mmol)乙酸和206mg(3.27mmol)氰基硼氢化钠，将混合物在60℃搅拌16h。减压除去溶剂，残余物通过快速色谱在10g硅胶柱上直接纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗脱剂。通过将纯化的化合物溶解在饱和碳酸氢钠溶液中并用乙酸乙酯萃取3次来除去剩余的痕量乙酸。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。得到569mg标题化合物，呈无色凝胶。
[0564]
收率：98％。
[0565]
mh

：285.6。
[0566]
步骤2：4-环丙基哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯
[0567][0568]
将569mg(2.00mmol)4-环丙基哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯2-甲酯(如前步骤中所述)溶于12ml甲醇/水(1/1)混合物中。加入105mg(4.4mmol)氢氧化锂，并将混合物在室温下搅拌16小时。将混合物减压浓缩，用水稀释并用二氯甲烷萃取3次。用2n的hcl将水层酸化至ph 2-3，然后用氯化钠饱和并用乙酸乙酯萃取18次。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤(492mg标题化合物，无色凝胶)。
[0569]
收率：91％。
[0570]
mh

：271.5。
[0571]
步骤3：2-氨基甲酰基-4-环丙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯
苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺(如实施例1步骤3中所述)溶于1ml无水n,n
’‑
二甲基乙酰胺中，然后加入79mg(0.445mmol)n-溴代琥珀酰亚胺，并将混合物在室温搅拌30min。在氩气下加入127mg(0.445mmol)4-环丙基-2硫代氨基甲酰基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)并将反应混合物在80℃加热30min。将溶液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释。将溶液用水/盐水(1/1)的混合物洗涤5次，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用乙酸乙酯/己烷混合物为洗脱剂。得到158mg标题化合物，呈黄色凝胶。
[0584]
收率：50％。
[0585]
mh

：707.7；709.7。
[0586]
步骤6：2-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-4-环丙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0587][0588]
将58mg(0.223mmol)2-{5-(2-氯嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-4-环丙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶解于5ml的28％氢氧化铵溶液中，并在90℃下在微波辐射下加热1h20。将混合物在水/盐水(1/1)的混合物中稀释并用乙酸乙酯萃取3次。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤(110mg标题化合物，黄色凝胶)。
[0589]
mh

：688.7。
[0590]
步骤7：n-{3-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-(4-环丙基哌嗪-2-基)-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,5-二氟苯磺酰胺
[0591][0592]
将110mg(0.160mmol)2-{5-(2-氨基嘧啶-4-基)-4-[3-(2,5-二氟-苯磺酰氨基)-2-氟苯基]-噻唑-2-基}-4-环丙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(如前步骤中所述)溶解在3ml二氯甲烷中并添加1.5ml三氟乙酸。将溶液在室温下搅拌1小时。然后，除去溶剂，残余物用饱和碳酸氢钠溶液淬灭。用乙酸乙酯萃取该含水混合物3次。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过快速色谱在10g硅胶柱上纯化，使用二氯甲烷/甲醇混合物为洗
脱剂，接着通过另一快速色谱在30g c18柱上纯化，使用水/甲醇混合物为洗脱剂。得到56mg标题化合物，为黄色固体。
[0593]
2步收率：43％。
[0594]
mh

：588.7。
[0595]1h nmr(dmso-d6,400mhz)：δ7.99(d,j＝5.2hz,1h)；7.55-7.35(m,4h)；7.27-7.17(m,2h)；6.73(s,2h)；5.90(d,j＝5.1hz,1h)；4.10-4.03(m,1h)；3.11-3.04(m,1h)；2.97-2.89(m,1h)；2.82-2.70(m,2h)；2.44-2.30(m,2h)；1.72-1.63(m,1h)；0.47-0.27(m,4h)。
[0596]
实施例21：braf结合测定
[0597]
为评估化合物结合braf的能力，根据制造商的说明用来自life technologies的lanthascreen生化激酶结合测定。简言之，使用含有160nl100x化合物在100％dmso中的溶液，3.84μl激酶缓冲液，8.0μl 2xbraf/eu-抗-gst混合物和4.0μl 4x示踪剂的白色384孔板。将板振荡30秒并在室温下孵育60分钟。使用读板器读取荧光。在该测定中，使用浓度为5nm的braf酶和浓度为2nm的eu-抗-gst抗体。使用浓度为20nm(20nm的kd)的示踪剂178。激酶缓冲液由50mm hepes ph7.5，0.01％brij-35，10mm mgcl2，1mm egta组成。用3倍连续稀释(10点两次重复)测定化合物ic
50
。
[0598]
所选化合物的braf结合(“braf ic
50”)如下报告在表2中：
[0599]
所有测试的化合物表现出结合braf激酶的能力。
[0600]
特别地，标为“a”活性的化合物提供ic
50
值《10nm。标为“b”活性的化合物提供ic
50
值为10nm-25nm。标为“c”活性的化合物提供ic
50
值为25nm-50nm。标为“d”活性的化合物提供ic
50
值为50nm-100nm。标为“e”活性的化合物提供ic
50
值》100nm。
[0601]
表2：所选化合物的braf结合效力(ic
50
)
[0602]
化合物braf ic
50
13a14a
[0603]
实施例22：braf v599e结合测定
[0604]
为评估化合物结合braf v599e的能力，根据制造商的说明使用来自life technologies的lanthascreen生化激酶结合测定。简言之，使用含有160nl 100x化合物在100％dmso中的溶液，3.84μl激酶缓冲液，8.0μl 2x braf v599e/eu-抗-gst混合物和4.0μl 4x示踪剂的白色384孔板。将板振荡30秒并在室温下孵育60分钟。使用读板器读取荧光。在该测定中，使用浓度为5nm的braf v599e酶和浓度为2nm的eu-抗-gst抗体。使用浓度为20nm(kd为33nm)的示踪剂178。激酶缓冲液由50mm hepes ph 7.5，0.01％brij-35，10mm mgcl2，1mm egta组成。用3倍连续稀释(10点滴定，两次重复)测定化合物ic
50
。
[0605]
所选化合物的braf v599e结合(“braf v599e ic
50”)如下报告在表3中：
[0606]
所有测试的化合物表现出结合braf v599e激酶的能力。
[0607]
特别地，标为“a”活性的化合物提供ic
50
值《10nm。标为“b”活性的化合物提供ic
50
值为10nm-25nm。标为“c”活性的化合物提供ic
50
值为25nm-50nm。标为“d”活性的化合物提供ic
50
值为50nm-100nm。标为“e”活性的化合物提供ic
50
值》100nm。
[0608]
表3：所选化合物的braf v599e结合效力(ic
50
)
[0609]
化合物braf v599e ic
50
1a2a3a4a8a13a14a15a16a17a18a
[0610]
实施例23：细胞系增殖测定
[0611]
如先前所述(delfosse et al.,2012)，使用标准mtt测定评估a375细胞增殖。
[0612]
简言之，将a375细胞以每孔500个细胞的密度孵育在96孔组织培养板中并在测试培养基中生长。孵育后24小时加入测试化合物。将细胞系在37℃下孵育4天。孵育期后，除去含有测试化合物的培养基，并用含有0.4mg/ml mtt的测试培养基替换。孵育(4小时)后，活细胞将mtt四唑环裂解成深蓝色甲臜反应产物，而死细胞保持无色。轻轻去除含mtt的培养基，向每个孔中加入dmso。振荡后，板在吸光度540nm读取。在至少3个独立实验中四次重复进行测试。数据表示为不存在配体时获得的最大活性％。
[0613]
所选化合物的细胞增殖(“braf v599e ic
50”)相对于参照化合物达拉非尼报告于表4中。
[0614]
大多数测试化合物表现出抑制a375细胞增殖的能力，与参照化合物相比达到几乎相同或稍低的水平。
[0615]
表4：a375细胞增殖抑制报告为所选化合物相比参照化合物达拉非尼效力的效力比值(ic
50
)。
[0616][0617]
实施例24：pxr反式激活测定
[0618]
使用已建立的hg5ln gal4-hpxr报告细胞系表征pxr活性(lemaire et al.,
2007)。简言之，通过在hela细胞中整合gal4-应答基因(gal4re5-bglob-luc-sv-neo)获得hg5ln细胞(seimandi et al.,2005)。通过用质粒[psg5-gal4(dbd)-hpxr(lbd)-puro]转染hg5ln细胞获得hg5lngal4(dbd)-hpxr(lbd)-puro]细胞系，其使得酵母激活剂gal4(met1-ser147)的dna结合域的表达与hpxr(met107-ser434)的配体结合域融合并赋予对嘌呤霉素的抗性。
[0619]
hg5ln和hg5ln gal4-hpxr细胞在37℃的5％co2潮湿气氛中在dulbecco's modified eaglemedium中培养：含有酚红的营养混合物f-12(dmem/f-12)和1g/l葡萄糖，并补充有5％胎牛血清，100单位/ml青霉素，100μg/ml链霉素和1mg/ml遗传霉素。在补充有0.5μg/ml嘌呤霉素的相同培养基中培养hg5ln gal4-hpxr细胞。
[0620]
对于反式激活实验，将hg5ln和hg5ln-pxr以25,000个细胞/孔的密度孵育于96孔白色不透明组织培养板(greiner cellstar)中的dulbecco's modified eaglemedium中：不含酚红的营养混合物f-12(dmem/f-12)和1g/l葡萄糖，补充有5％剥离胎牛血清，100单位/ml青霉素，100μg/ml链霉素(试验培养基)。24小时后加入待测试的化合物，并将细胞在37℃下孵育16小时。在培养期结束时，用含有0.3mm荧光素的测试培养基替换培养基。使用microbeta wallac光度计(perkinelmer)在完整的活细胞中测量荧光素酶活性2s。在至少3个独立实验中四次重复进行测试。数据表示为不存在配体(hg5ln细胞)或用sr12813 3μm(hg5ln pxr细胞)获得的最大活性％。
[0621]
相对于参照化合物达拉非尼，表5中报道了所选化合物的pxr反式激活。
[0622]
与参照化合物达拉非尼相比，所有测试的化合物，除达拉非尼的氯化类似物(gl214)，均在报告测定中表现出低得多的pxr活化。
[0623]
表5：pxr活化报告测定
[0624]