一种植物中没食子单宁的LC-MS/MS检测方法

技术特征：
1.一种植物中没食子单宁的lc-ms/ms检测方法，其特征在于，包含如下步骤：1)将植物没食子单宁样品和甲醇溶液混合后顺次进行萃取、离心，得到待测样品；2)将待测样品进行液相色谱分离，使待测样品中没食子单宁类化合物彼此分离；3)将分离的没食子单宁类化合物进行串联质谱检测，得到保留时间和ms/ms信息，建立没食子单宁类化合物的质谱数据库；4)根据ms/ms信息筛选得到mrm定量离子对，在fia模式下设置mrm定量离子对的信息和保留时间，利用植物没食子单宁样品混样一针进样得到优化mrm质谱条件；5)整合步骤3)中没食子单宁类化合物的离子对、保留时间和步骤4)的优化mrm质谱条件，实现植物中没食子单宁的定性和定量检测。2.根据权利要求1所述的lc-ms/ms检测方法，其特征在于，步骤1)所述混合之前将植物没食子单宁样品顺次进行液氮速冻、研磨；所述甲醇溶液的浓度为70～100％；所述植物没食子单宁样品和甲醇溶液的质量体积比为0.5～1.5g：8～12ml。3.根据权利要求1或2所述的lc-ms/ms检测方法，其特征在于，步骤1)所述萃取的时间为25～35min，所述离心的温度为3～5℃，离心的转速为9000～11000rpm，离心的时间为8～12min。4.根据权利要求3所述的lc-ms/ms检测方法，其特征在于，步骤2)所述液相色谱检测的条件为：色谱柱：phenomenex kinetex f5色谱柱，3.0
×
100mm，2.6μm柱温：35～45℃进样量：1～3μl流动相：包含流动相a和流动相b，流动相a为质量浓度为0.5～1.5％的甲酸溶液，流动相b为乙腈流动相流速：0.3～0.5ml/min。5.根据权利要求4所述的lc-ms/ms检测方法，其特征在于，步骤2)所述液相色谱检测中梯度洗脱程序为：0～1min，流动相b占流动相总体积的9～11％，1～3.5min，流动相b占流动相总体积的10～20％，3.5～8min，流动相b占流动相总体积的20～30％，8～15min，流动相b占流动相总体积的30～65％，15～16min，流动相b占流动相总体积的65～98％，16～18min，流动相b占流动相总体积的97～99％，18～18.1min，流动相b占流动相总体积的98～10％，18.1～20min，流动相b占流动相总体积的9～11％。6.根据权利要求4或5所述的lc-ms/ms检测方法，其特征在于，所述串联质谱检测包含质谱全扫描和中性丢失扫描，所述质谱全扫描和中性丢失扫描的条件为：扫描方式：esi负离子模式离子源温度：580～620℃离子源电压：4～5kv惰性气体：氮气
ida参数：ida采集的峰数量为top 3，mass tolerance为0.5da，离子流阈值为950～1050cpsepi参数：dp为55～65v，ce为35～45v，ces为18～22v。7.根据权利要求6所述的lc-ms/ms检测方法，其特征在于，所述质谱全扫描中，epi离子扫描范围为50～1000da，所述中性丢失扫描中，母离子扫描范围为100～1000da，epi离子扫描范围为50～1000da。8.根据权利要求7所述的lc-ms/ms检测方法，其特征在于，步骤4)所述mrm定量离子对的信息中，dp为-100～-10v，ce为-50～-2v。

技术总结
本发明属于化合物检测技术领域，本发明提供了一种植物中没食子单宁的LC-MS/MS检测方法，包含如下步骤：将植物没食子单宁样品和甲醇溶液混合后顺次进行萃取、离心，得到待测样品；将待测样品进行液相色谱分离、串联质谱检测，建立没食子单宁类化合物的质谱数据库；根据MS/MS信息筛选得到MRM定量离子对，利用植物没食子单宁样品得到优化MRM质谱条件；整合没食子单宁类化合物的离子对、保留时间和优化MRM质谱条件，实现植物中没食子单宁的定性和定量检测。本发明的检测方法对没食子单宁类化合物的检测过程不依赖于化学标准品，具有检测全面、灵敏度高、重复性好、准确度高、操作简单等优势，同时实现定性和定量分析。同时实现定性和定量分析。同时实现定性和定量分析。


技术研发人员：白章振 张延龙 郑田恬 于蕊
受保护的技术使用者：西北农林科技大学
技术研发日：2022.03.10
技术公布日：2022/7/12