一种生产3-氨基异丁酸的酶突变体的制作方法

技术特征：
1.一种甲基转移酶突变体c24mtgm-m11，其特征在于，所述酶突变体源自序列为seq id no：1的野生型酶c24mtgm，其中135位置的脯氨酸被丙氨酸取代，136位置的白氨酸被丙氨酸代替，213位置的苯丙氨酸被丝氨酸取代。2.根据权利要求1所述的甲基转移酶突变体c24mtgm-m11，其特征在于，所述甲基转移酶突变体包括氨基酸序列seq id no:3。3.根据权利要求1所述的甲基转移酶突变体c24mtgm-m11，其特征在于，编码酶突变体c24mtgm-m11的多核苷酸包括核酸序列seq id no：4。4.一种甲基转移酶突变体的表达载体，其特征在于，包括权利要求3所述的多核苷酸。5.根据权利要求4所述的载体，其特征在于，所述载体为psu-laciqtrc-c24mtgm-m11质粒，其包括权利要求3的多核苷酸。6.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包括权利要求4或5的载体。7.根据权利要求6所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为大肠杆菌mg1655(δptsgδfumacδfumb,pand,aspa,c24mtgm-m11)。8.一种权利要求1所述的甲基转移酶突变体c24mtgm-m11的应用。9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述应用为生产3-氨基异丁酸。10.一种权利要求4所述载体的应用。11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于，所述应用为生产3-氨基异丁酸。12.一种权利要求6所述宿主细胞的应用。13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述宿主细胞为大肠杆菌mg1655δptsgδfumacδfumb,pand,aspa,c24mtgm-m11)。14.根据权利要求13所述的应用，其特征在于，所述应用为生产3-氨基异丁酸。15.根据权利要求14所述的应用，其特征在于，所述生产3-氨基异丁酸的方法为发酵。16.根据权利要求14所述的应用，其特征在于，所述应用包括以下步骤：将权利要求13的宿主细胞接种到培养基中，然后添加葡萄糖为基质，并通过宿主细胞转化形成3-氨基异丁酸。17.根据权利要求15所述的应用，其特征在于，所述发酵培养基由以下成分组成：硫酸铵15g/l、磷酸二氢钾5.0g/l、十二水磷酸氢二钠15g/l、七水硫酸镁1.0g/l、酵母萃取物1.0g/l、葡萄糖20g/l、ph值7.0。

技术总结
本发明公开了一种S-腺苷基-L-甲硫氨酸δ24-固醇-C-甲基转移酶突变体C24MTgm-M11。根据酶突变体的编码多核苷酸构建菌株MG1655(ΔptsGΔfumACΔfumB,panD,aspA,C24MTgm)，菌株MG1655(Δpts GΔfumACΔfumB,panD,aspA,C24MTgm-M11)可以在摇瓶发酵下产生480mg/L的3-氨基异丁酸。相较野生型菌株C24MTgm，含有突变体C24MTgm-M11的菌株显着提高5.8倍的3-氨基丁酸产量。基丁酸产量。


技术研发人员：廖琪林 张健
受保护的技术使用者：南京纽邦生物科技有限公司
技术研发日：2019.11.27
技术公布日：2022/7/9