一种肿瘤抗原/MHC-I复合物及其制备方法和用途与流程

技术特征：
1.肿瘤抗原/mhc-i复合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：对肿瘤细胞进行裂解，得到肿瘤细胞裂解物，所述肿瘤细胞裂解物含有肿瘤抗原/mhc-i复合物；将负载有抗体的载体与所述肿瘤细胞裂解物混合处理，得到所述肿瘤抗原/mhc-i复合物；其中，所述肿瘤抗原/mhc-i复合物负载于所述载体上，所述抗体与所述肿瘤抗原/mhc-i复合物中的mhc-i特异性结合。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括从负载有所述肿瘤抗原/mhc-i复合物的载体中分离所述肿瘤抗原/mhc-i复合物的步骤。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，以细胞裂解液对所述肿瘤细胞进行裂解；优选地，所述细胞裂解液包括3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐、tris缓冲液和nacl。4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述抗体为mhc-iβ链抗体；优选地，所述抗体标记有第一标记物，所述第一标记物选自生物素和/或第一化学偶联物。5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述载体为磁珠和/或量子点荧光微球；优选地，所述载体标记有第二标记物，所述第二标记物选自亲和素和/或第二化学偶联物。6.一种肿瘤抗原/mhc-i复合物，其特征在于，通过权利要求1-5任一项所述制备方法制备得到。7.权利要求6所述肿瘤抗原/mhc-i复合物在体外富集肿瘤抗原特异性cd8

t细胞、刺激相同来源肿瘤浸润淋巴细胞的活化、增殖和/或制备治疗肿瘤的药物中的用途。8.一种体外富集肿瘤抗原特异性cd8

t细胞的方法，其特征在于，所述方法包括：将权利要求6所述肿瘤抗原/mhc-i复合物与相同来源的肿瘤浸润淋巴细胞接触，所述肿瘤浸润淋巴细胞中的肿瘤抗原特异性cd8

t细胞与所述肿瘤抗原/mhc-i复合物结合，得到结合物，所述结合物富集有所述肿瘤抗原特异性cd8

t细胞。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述肿瘤抗原/mhc-i复合物与标记有生物素的抗体结合并共同负载于标记有亲和素的载体上，并且，在所述肿瘤抗原/mhc-i复合物与相同来源的肿瘤浸润淋巴细胞接触之前，所述肿瘤浸润淋巴细胞中添加有亲和素。10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于，在所述肿瘤抗原/mhc-i复合物与相同来源的肿瘤浸润淋巴细胞接触之前，所述肿瘤浸润淋巴细胞中还添加有酪氨酸激酶抑制剂；优选地，所述酪氨酸激酶抑制剂为达沙替尼。11.根据权利要求8-10任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括从所述结合物中分离所述肿瘤抗原特异性cd8

t细胞的步骤。12.一种肿瘤抗原特异性cd8

t细胞，其特征在于，通过权利要求8-11任一项所述方法制备得到。13.一种体外刺激相同来源肿瘤浸润淋巴细胞的活化、增殖的方法，其特征在于，所述方法包括：将权利要求6所述肿瘤抗原/mhc-i复合物与相同来源的肿瘤浸润淋巴细胞接触。14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于，将权利要求6所述肿瘤抗原/mhc-i复合物与相同来源的肿瘤浸润淋巴细胞接触的步骤中，还添加有细胞因子；优选地，所述细胞因
子选自4-1bb、il-2、il-21中的至少一种。15.一种活化的肿瘤浸润淋巴细胞，其特征在于，通过权利要求13或14所述方法制备得到。16.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括有效成分和药学上可接受的载体，所述有效成分包括权利要求12所述肿瘤抗原特异性cd8

t细胞和/或权利要求15所述活化的肿瘤浸润淋巴细胞。17.一种肿瘤的治疗方法，其特征在于，所述方法包括：将有效量的权利要求12所述肿瘤抗原特异性cd8

t细胞、权利要求15所述活化的肿瘤浸润淋巴细胞和/或权利要求16所述药物组合物与所述肿瘤接触；其中，所述肿瘤抗原特异性cd8

t细胞、所述活化的肿瘤浸润淋巴细胞以及所述药物组合物中的有效成分来源于所述肿瘤。

技术总结
本发明涉及一种肿瘤抗原/MHC-I复合物及其制备方法和用途。本发明基于鸟枪法的设计原理，从肿瘤细胞裂解物中一次性无差别抓取肿瘤细胞表达的肿瘤抗原与MHC-I的复合物，无需预先对免疫原性肿瘤抗原进行鉴定，适用范围更广，步骤更加简便，成本也更低。本发明提供的肿瘤抗原/MHC-I复合物可以特异性富集肿瘤浸润淋巴细胞中的CD8


技术研发人员：李文静 李斌 高青
受保护的技术使用者：青岛华赛伯曼医学细胞生物有限公司
技术研发日：2021.12.23
技术公布日：2022/7/9