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猫细小病毒VP2蛋白及所得自主组装病毒样颗粒的制作方法

2022-07-06 07:48:58 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种猫细小病毒vp2基因,其特征在于,所述猫细小病毒vp2基因具有seq id no.1所示的核苷酸序列。2.一种表达载体,其特征在于,将权利要求1所述的猫细小病毒vp2基因插入到载体中,得到表达载体。3.根据权利要求2所述的表达载体,其特征在于,所述载体包括pet28a载体。4.根据权利要求1所述的猫细小病毒vp2蛋白的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:以fvp基因序列为基础,对其进行密码子优化,合成大小为1752bp的基因片段,通过对所述基因片段进行pcr扩增,同源重组后,得到重组vp2基因;将所得重组vp2基因与经相同酶切后的pet28a载体用连接酶连接,并转化到大肠杆菌dh5α感受态细胞,经氨苄西林抗性筛选阳性克隆,提取pcr鉴定阳性菌液质粒,经酶切鉴定得到阳性重组质粒pet28a-fipv vp2;将阳性重组质粒pet28a-fipv vp2转化到e.colibl21感受态细胞,诱导表达及纯化后,得到可溶性猫细小病毒vp2蛋白。5.猫细小病毒vp2蛋白,其特征在于,通过根据权利要求4所述方法制备得到,所得猫细小病毒vp2蛋白具有seq id no.2所示的氨基酸序列。6.猫细小病毒vp2蛋白体外组装病毒样颗粒,其特征在于,采用权利要求5所述猫细小病毒vp2蛋白制备得到。7.根据权利要求6所述的体外组装病毒样颗粒,其特征在于,其直径为20-30nm。8.根据权利要求6或7所述的猫细小病毒vp2蛋白体外组装病毒样颗粒的制备方法,其特征在于,将所述猫细小病毒vp2蛋白置于组装液中进行体外组装,所述组装液组分包括50mm tris和250mm nacl,所述组装液的ph值为8.0。

技术总结
本发明提供了一种猫细小病毒VP2蛋白及所得自主组装病毒样颗粒,属于VLP疫苗领域。本发明提供的猫细小病毒VP2基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。本发明根据大肠杆菌的密码子的偏爱性,人工修饰合成了猫细小病毒VP2基因的DNA序列,应用序列表达的VP2蛋白具有良好的免疫活性,可有效保护宠物猫及猫科动物免受猫瘟病毒侵害。猫瘟病毒侵害。猫瘟病毒侵害。


技术研发人员:查丽莎 周宇杭 郑琪 傅舟宇
受保护的技术使用者:深圳赫兹生命科学技术有限公司
技术研发日:2022.02.24
技术公布日:2022/7/5
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