一种可降解免疫磁珠及其制备方法

技术特征：
1.一种可降解免疫磁珠的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：s1：制备可降解磁珠微球原料取0.05-0.5g海藻酸钠，加蒸馏水至10ml，在室温和磁力搅拌下溶解0.5-1h，得0.5-5％海藻酸钠溶液；取5-10ml上述配制的海藻酸钠溶液，向其中加入2-50μl浓度为50mg/ml且粒径为100-500nm的磁珠，上下振荡，使磁珠与海藻酸钠混合均匀，作为水相；另外，取液体石蜡100-1000ml，加至烧杯中，再向烧杯中加入0.5-5ml司盘80，混合均匀，作为油相；随后将水相和油相混合，用玻棒搅拌均匀，油相简单分散水相，即得可降解磁珠微球原料；s2：采用快速膜乳化技术和步骤s1中制备的可降解磁珠微球原料制备获得海藻酸盐磁珠微球；s3：海藻酸盐磁珠微球与抗体的偶联取步骤s2制备的海藻酸盐磁珠微球置于试管中，用0.01mol/lpbs洗涤3次，最后定容到1-5ml，加入1-20mg edc和5-30mg suflo-nhs，混匀后室温反应5-30min，然后加入2-20mg 6-氨基己酸，室温旋转搅拌12-28h后，用0.01mol/l pbs洗涤3遍；取上述已连接好6-氨基己酸“手臂”分子的磁性微球于实验管中，用上述0.01mol/l pbs定容至1-10ml，加入1-20mg edc和5-30mg suflo-nhs，混匀后室温反应10-20min，然后加入200-800μg鼠抗人胰岛细胞膜蛋白单克隆抗体hpi-2，混匀后室温旋转搅拌1-4h，加入0.05-0.5mol/l甘氨酸溶液，甘氨酸溶液中含0.2％人血清白蛋白或0.2％小牛血清白蛋白，封闭10-20h，用0.01mol/lpbs洗涤3遍，加入hanks液4℃保存，即得。2.根据权利要求1所述的一种可降解免疫磁珠的制备方法，其特征在于，步骤s2用于固化的溶液为浓度为0.2-10％的cacl2溶液和浓度为0.2-10％的bacl2溶液中的任意一种或是两种。3.根据权利要求1所述的一种可降解免疫磁珠的制备方法，其特征在于，步骤s1中的海藻酸钠溶液的浓度为2％，2％海藻酸钠溶液的取用量为10ml，加入的磁珠的粒径为300nm、体积为10μl，取用的液体石蜡的体积为140ml，司盘80的加入体积为3.5ml；步骤s3中海藻酸盐磁珠微球的取用量为2mg，定容体积为2ml，随后加入的edc和suflo-nhs的质量分别为10mg和15mg，随后室温下反应时间为15min，加入6-氨基己酸的体积为10mg，之后0.01mol/lpbs定容体积为2ml，随后加入的edc和suflo-nhs的质量分别为10mg和15mg，甘氨酸溶液的加入浓度为0.2mol/l。4.权利要求1-3中任意一项所述的制备方法制备的可降解免疫磁珠。5.权利要求4所述的可降解免疫磁珠在分离人胰岛细胞团的产品中的应用。

技术总结
本发明涉及纳米磁性材料领域和生物学领域，公开了一种可降解免疫磁珠的制备方法，包括制备可降解磁珠微球原料、采用快速膜乳化技术和步骤S1中制备的可降解磁珠微球原料制备获得海藻酸盐磁珠微球、海藻酸盐磁珠微球与抗体的偶联；还公开了一种可降解免疫磁珠；还公开了可降解免疫磁珠在分离人胰岛细胞团的产品中的应用。本发明制备的免疫磁珠可特异性靶向到人胰腺中的胰岛，可实现胰岛细胞团与外分泌组织分离，可大大缩短胰岛分离的时间、提升分离效率、提高胰岛细胞团的活性和功能，提高移植效果，间接降低胰岛移植手术的成本；本发明制备的免疫磁珠毒性小、磁响应好、表面生物相容性好，且在溶液pH较高的情况下能降解。且在溶液pH较高的情况下能降解。且在溶液pH较高的情况下能降解。


技术研发人员：傅红兴 余泳华 刘成洋
受保护的技术使用者：浙江树人学院
技术研发日：2022.03.23
技术公布日：2022/7/5