一种复合植物多酚螯合物及其使用方法

1.本发明涉及畜牧业技术领域，具体是一种复合植物多酚螯合物及其使用方法。


背景技术：

2.植物多酚是一类广泛存在于植物体内的具有多元酚结构的次生代谢物，是具有特殊分子结构的生物类黄酮。植物多酚是天然的抗氧化剂，具有清除自由基、抗氧化、抗衰老，抗过敏、抗炎的作用，增强免疫力、抗肿瘤、防癌的作用，对心、脑血管的具有保护作用。如黄芩苷具有抑菌、利尿、抗炎、降胆固醇、抗血栓形成、缓解哮喘、泻火解毒、止血、安胎、抗变态反应及解痉作用；单宁酸在医药上曾用于治疗咽喉炎、扁桃腺炎、痔疮和皮肤疱疹等，内用可制止腹泻、肠出血等；葛根素具有退热、镇静和使冠状动脉血流量增加的作用，对垂体后叶素引起的急性心肌出血有保护作用。但是大多植物多酚由于对酯、水的溶解度较低，或者酯/水系数低而不能在人类和动物上较好地发挥生物活性功能。为了在保障人类和动物肠道健康中较好发挥植物多酚的生物活性效果，一般会根据其物理化学性质将其衍生，以期这些物质能够更好的溶于水或者酯类。动物肠道是一个水溶性体系，因此我们在现有的黄芩苷、单宁酸和葛根素的衍生物中发现黄芩苷铜、单宁酸锌、4'－丁酸酰葛根素具有易溶于水的特性，同时相对于原有植物多酚具有更好的抗氧化特性。动物饲料或饮水中添加这类有抗氧化功能的物质，将可以提高畜禽肠道功能，促进畜禽生长性能和健康水平，减少促生长剂和治疗药物的使用，为养殖业的健康可持续发展奠定基础。
3.畜禽肠道不仅是动物体内最大的消化吸收器官，同时也是体内最大的免疫器官。肠道的发育状况及其功能对畜禽的生长与健康至关重要。幼龄畜禽肠道处于快速发育之中，结构与功能不完善，养分的消化吸收与免疫屏障功能有很大的局限性。此外，各种应激、细菌和病毒会促使畜禽肠道产生过多的氧自由基，引起肠道黏膜萎缩，造成肠道上皮完整性和黏膜屏障被破坏，从而导致肠道功能紊乱。因此，畜禽养殖生产中迫切需要采取有效措施改善畜禽肠道发育状况、维护和增进肠道功能，为此，我们提出一种复合植物多酚螯合物及其使用方法。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种复合植物多酚螯合物。本复合植物多酚螯合物可有效抑制肠道细菌和病毒、增强肠道抗氧化能力和免疫功能，促进肠黏膜发育，从而增进畜禽肠道功能。使用本复合植物多酚螯合物可降低肠道疾病发生率、促进畜禽健康和提高生产性能，与饲用兽药添加剂相比具有无毒副作用、无药物残留、无污染、有益于动物和人类健康的优点。
5.本发明的另一个目的在于提供一种复合植物多酚螯合物的使用方法。
6.为解决上述问题，本发明采用如下的技术方案：
7.一种复合植物多酚螯合物，包括黄芩苷铜、4'－丁酸酰葛根素和单宁酸锌，各原料的质量比为1：3～5：4～6。
8.作为本发明的一种优选方案，所述黄芩苷铜由黄芩素－7-o-β-d－葡萄糖醛酸苷和氯化铜在甲醇介质中制取的产品，其黄芩素含量至少为75％、铜含量8.5～9.0％。
9.作为本发明的一种优选方案，所述黄芩苷铜的制备方法为：经黄芩中获得黄芩素－7-o-β-d－葡萄糖醛酸苷，将黄芩素－7-o-β-d－葡萄糖醛酸苷和氯化铜按质量比2:1在50℃甲醇溶液中反应3h获得沉渣，滤渣经低温干燥获得黄芩苷铜。
10.作为本发明的一种优选方案，所述4'－丁酸酰葛根素由8-β-d－葡萄吡喃糖－4',7－二羟基异黄酮和丁酸酰氯在丙酮和氢氧化钠介质中制取的产品，其葛根素含量至少为85％、丁酸含量为7.8～8.2％。
11.作为本发明的一种优选方案，所述4'－丁酸酰葛根素的制备方法为：从野生葛根中制取8-β-d－葡萄吡喃糖－4',7－二羟基异黄酮，按照质量比1.5：1称取8-β-d－葡萄吡喃糖－4',7－二羟基异黄酮和丁酸酰氯，分别溶于等体积的饱和氢氧化钠溶液和丙酮溶液，将两种溶液混合均匀，在20℃条件反应2.5h，经分离过滤，获得4'－丁酸酰葛根素。
12.作为本发明的一种优选方案，所述单宁酸锌由单宁酸和氯化锌在甲醇介质中制取的产品，其单宁酸含量至少为80％、锌含量为6.0～7.0％。
13.作为本发明的一种优选方案，所述单宁酸锌的制备方法为：从五倍子中获取单宁酸，将单宁酸和氯化锌按照质量比1：1.5在45℃乙醇溶液中反应2h，经喷雾干燥获得单宁酸锌。
14.一种复合植物多酚螯合物的使用方法，将所述复合植物多酚螯合物按照0.01％～0.05％重量加入至畜禽饲料或饮水中使用；将所述复合植物多酚螯合物与水混合直接饮水使用；将所述复合植物多酚螯合物与载体混合制成预混剂，或将所述复合植物多酚螯合物与饲料添加剂和饲料原料混合制成预混料、浓缩料形式饲喂畜禽。
15.相比于现有技术，本发明的优点在于：
16.本方案可有效抑制肠道细菌和病毒、增强肠道抗氧化能力和免疫功能，促进肠黏膜发育，从而增进畜禽肠道功能；使用本复合植物多酚螯合物可降低肠道疾病发生率、促进畜禽健康和提高生产性能；与饲用兽药添加剂相比具有无毒副作用、无药物残留、无污染、有益于动物和人类健康的优点。
具体实施方式
17.下面将结合本发明实施例对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
18.一种复合植物多酚螯合物，包括黄芩苷铜、4'－丁酸酰葛根素和单宁酸锌，各原料的质量比为1：3～5：4～6；其中，黄芩苷铜由黄芩素－7-o-β-d－葡萄糖醛酸苷和氯化铜在甲醇介质中制取的产品，其黄芩素含量至少为75％、铜含量8.5～9.0％；4'－丁酸酰葛根素由8-β-d－葡萄吡喃糖－4',7－二羟基异黄酮和丁酸酰氯在丙酮和氢氧化钠介质中制取的产品，其葛根素含量至少为85％、丁酸含量为7.8～8.2％；单宁酸锌由单宁酸和氯化锌在甲醇介质中制取的产品，其单宁酸含量至少为80％、锌含量为6.0～7.0％。
19.黄芩苷铜的制备方法为：经黄芩中获得黄芩素－7-o-β-d－葡萄糖醛酸苷，将黄
芩素－7-o-β-d－葡萄糖醛酸苷和氯化铜按质量比2:1在50℃甲醇溶液中反应3h获得沉渣，滤渣经低温干燥获得黄芩苷铜；
20.4'－丁酸酰葛根素的制备方法为：从野生葛根中制取8-β-d－葡萄吡喃糖－4',7－二羟基异黄酮，按照质量比1.5：1称取8-β-d－葡萄吡喃糖－4',7－二羟基异黄酮和丁酸酰氯，分别溶于等体积的饱和氢氧化钠溶液和丙酮溶液，将两种溶液混合均匀，在20℃条件反应2.5h，经分离过滤，获得4'－丁酸酰葛根素；
21.单宁酸锌的制备方法为：从五倍子中获取单宁酸，将单宁酸和氯化锌按照质量比1：1.5在45℃乙醇溶液中反应2h，经喷雾干燥获得单宁酸锌。
22.实施例1：
23.按黄芩苷铜、4'－丁酸酰葛根素、单宁酸锌的质量比为1：4：5组合，将复合物混合均匀，得到一种复合植物多酚螯合物。
24.本例复合植物多酚螯合物按饮水灌服方式使用适合于仔猪，应用效果明显。
25.以本例复合植物多酚螯合物按饮水方式喂服仔猪。选择7日龄2.1
±
0.5kg杜长大仔猪24只，分为3个组，空白对照组饮水中不添加任何药物和保健剂，试验ⅰ组通过饮水灌服强力霉素和阿莫西林混剂0.5g/l，试验ⅱ组通过饮水接受本复合植物多酚螯合物0.5g/l，仔猪21日龄试验结束后统计体重、腹泻发生率和腹泻指数。其结果如表1所示。
26.表1饮水中添加本复合植物多酚螯合物对仔猪的影响
[0027][0028]
注：同行肩标字母不同者表示差异显著(p《0.05)。以下类同。
[0029]
结果表明，应用本发明所述的饲料添加剂，与空白对照组相比，可以显著提高仔猪21日龄体重10.79％，降低腹泻发生率92.61％和腹泻指数74.07％。与药物饮水组相比，各项观测指标差异不显著。以上结果说明，本例复合植物多酚螯合物通过饮水方式饲喂仔猪，具有替代药物饮水保证仔猪生长性能。
[0030]
实施例2：
[0031]
按黄芩苷铜、4'－丁酸酰葛根素、单宁酸锌的质量比为1：5：4组合，将复合物混合均匀，得到一种复合植物多酚螯合物。
[0032]
本例复合植物多酚螯合物按饮水方式使用适合于蛋鸡，应用效果明显。
[0033]
以本例复合植物多酚螯合物按饮水方式喂服已发生肠炎的蛋鸡。选择感染支原体和杆菌引起腹泻的同日龄海兰褐蛋鸡300只，分为3个组，对照组不接受任何治疗，试验ⅰ组通过饮水接受酒石酸泰乐菌素0.5g/l治疗5天，试验ⅱ组通过饮水接受本复合植物多酚螯合物0.2g/l治疗5天，试验结束后统计生产性能、腹泻发生率和肠道评分。其结果如表2所示。
[0034]
表2饮水中添加本复合植物多酚螯合物对蛋鸡的影响
[0035][0036]
结果表明，应用本发明所述的饲料添加剂，与未经过治疗对照组相比，可以显著提高蛋鸡采食量35.46％和产蛋率51.45％，降低腹泻率降低51.6％和肠道评分45.25％。与饮水药物治疗组相比，显著提高产蛋率，降低腹泻发生率，在采食量和肠道评分上差异不显著。以上结果说明，本例复合植物多酚螯合物通过饮水方式饲喂蛋鸡，保证蛋鸡产蛋性能和采食量与药物的效果相当，对患有肠炎蛋鸡的腹泻发生率和肠道评分的缓解作用优于药物的效果。
[0037]
实施例3：
[0038]
按黄芩苷铜、4'－丁酸酰葛根素、单宁酸锌的质量比为1：3：6组合，将复合物混合均匀，得到一种复合植物多酚螯合物。
[0039]
本例复合植物多酚螯合物适合于哺乳仔猪，应用效果明显。
[0040]
以本例复合植物多酚螯合物饲喂断奶仔猪。72头10日龄乳猪分为三组，每组分三个重复(栏)，每栏8头。仔猪来源、日龄、体重接近，性别一致。每头每天饲喂基础日粮，其中，空白对照组未加本例复合植物多酚螯合物和氟苯尼考预混剂，试验ⅰ组添加100mg/kg的氟苯尼考，试验ⅱ组添加0.01％的本例复合植物多酚螯合物。饲养21天。结果见表3、表4、表5和表6。
[0041]
表3添加复合植物多酚螯合物对断奶仔猪生长性能的影响
[0042][0043]
表4添加复合植物多酚螯合物对断奶仔猪空肠黏膜免疫相关细胞数量的影响
[0044][0045]
表5添加复合植物多酚螯合物对断奶仔猪小肠绒毛高度/隐窝深度的影响
[0046][0047]
表6添加复合植物多酚螯合物对断奶仔猪肠黏膜抗氧化能力的影响
[0048][0049]
表3-6数据显示，应用本发明所述的复合植物多酚螯合物，与空白对照组相比，在饲料中添加本例复合植物多酚螯合物，仔猪日增重提高15.81％，料重比降低7.22％，腹泻率降低59.21％；空肠细胞中淋巴细胞、肥大细胞和杯状细胞数量分别提高21.87％、30.34％和32.61％；十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度与隐窝深度比值分别提高21.43％、25.74％和19.56％；肠黏膜中丙二醛(mda)含量下降24.30％，提高超氧化物歧化酶(sod)活性24.15％和过氧化氢酶(cat)活性30.64％；与药物组相比，在饲料中添加本例复合植物多酚螯合物，仔猪日增重提高4.06％；料重比降低1.64％；腹泻率降低10％；空肠细胞中淋巴细胞、肥大细胞和杯状细胞数量分别提高8.30％、11.53％和19.60％；十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度与隐窝深度比值分别提高10.57％、13.40％和9.27％；肠黏膜中丙二醛(mda)含量无差异，分别提高超sod、cat活性9.05％和17.01％。
[0050]
总之，以上结果表明本例复合植物多酚螯合物具有改善仔猪小肠黏膜结构、增进肠道抗氧化能力，提高肠道黏膜免疫细胞数量，优于抗生素的作用，因此可以取代抗生素在仔猪饲料中促进肠道免疫和抗氧化功能，从而提高仔猪的生产力。
[0051]
实施例4：
[0052]
按黄芩苷铜、4'-丁酸酰葛根素、单宁酸锌的质量比为1：5：4组合，将复合物混合均
匀，得到一种复合植物多酚螯合物。
[0053]
同时，首先将1份75％黄芩苷溶于1份含铜8.5％的氯化铜水溶液，65℃烘干获得一个混合物；其次将1份85％葛根素和1份含8％的丁酸水溶液，65℃烘干获得第二个混合物；然后将1份80％单宁酸和1份含6％的氯化锌水溶液，65℃烘干获得第三个混合物；最后将其三个复合物按照质量比为1：5：4的进行混合，获得本例复合植物多酚螯合物组成一致的混合物(以下简称混合物)。
[0054]
以本例复合植物多酚螯合物进行肉鸡饲养试验。同一批孵化出的817肉仔鸡360只，分为3组，每组分8个重复(栏)，每栏15只。三组基础日粮营养水平一致，其中饲料中黄曲霉毒素含量500μg/kg，空白对照组未加本发明的复合植物多酚螯合物和混合物，试验ⅰ组添加0.04％的与本例复合植物多酚螯合物组成一致的混合物，试验ⅱ组添加0.04％本例复合植物多酚螯合物。饲养35天。结果见表7、8、9。
[0055]
表7添加复合植物多酚螯合物对肉鸡生长性能的影响
[0056][0057]
表8添加复合植物多酚螯合物对肉鸡肠空场黏膜抗氧化能力和slga表达量的影响
[0058][0059]
表9添加复合植物多酚螯合物对肉鸡小肠绒毛高度/隐窝深度的影响
[0060][0061]
结果表明，在日粮含有500μg/kg黄曲霉毒素下，应用本发明所述的复合植物多酚螯合物，与空白对照组相比，肉鸡日增重和采食量分别提高20.35％和15.95％、降低料重比3.59％；十二指肠和空肠回肠的绒毛高度与隐窝深度比值分别提高44.95％和38.14％；空肠黏膜中丙二醛(mda)含量降低49.35％，提高超cat活性90.07％和黏膜slga表达量33.35％。与饲喂本例复合植物多酚螯合物组成一致的混合物的试验ⅱ组相比，肉鸡日增重和采食量分别提高9.52％和7.38％、降低料重比2.08％；十二指肠和空肠回肠的绒毛高度与隐窝深度比值分别提高30.57％和24.43％；空肠黏膜中丙二醛(mda)含量降低30.49％，
提高超cat活性35.31％和黏膜slga表达量18.92％。
[0062]
总之，以上结果表明本例复合植物多酚螯合物具有改善肉鸡小肠黏膜结构，增进肠道抗氧化能力，提高肠道黏膜siga表达量，从而提高肉鸡生产性能，且效果优于与本例复合植物多酚螯合物组成一致的混合物。
[0063]
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其改进构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围内。