一种基于同位素内标-QuEChERS-UPLC-MS法检测中药饮片丙烯酰胺的方法与流程

技术特征：
1.一种基于同位素内标-quechers-uplc-ms法检测中药饮片丙烯酰胺的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)内标贮备溶液的制备：精密量取
13
c3丙烯酰胺内标对照品溶液，加乙腈制成每1ml含10μg的溶液，作为内标贮备溶液；(2)对照品贮备液的制备：取丙烯酰胺对照品适量，精密称定，加乙腈制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品贮备液；(3)系列对照品溶液的制备：分别精密量取上述内标贮备溶液及对照品贮备液适量，用乙腈稀释并摇匀制成质量浓度分别为5、10、50、200、500、5000、10000μg
·
l-1
含内标质量浓度为100μg
·
l-1
的系列对照品溶液；(4)供试品溶液的制备：取药材样品粉末2g，精密称定，置50ml离心管中，加无水硫酸镁4g、氯化钠0.5g、水10ml、乙腈10ml及内标溶液200μl，涡旋混匀，置摇床上剧烈振荡30分钟；离心10分钟，取上清液1ml，置预置有psa0.2 g的离心管中，涡旋混匀，离心，取上清液，即得供试品溶液；(5)线性回归方程的获得：分别精密量取上述系列浓度对照品溶液各1μl，注入液相色谱质谱联用仪，测定相应丙烯酰胺及其内标的峰面积，以各标准系列工作液的丙烯酰胺进样浓度为横坐标，以丙烯酰胺定量离子对和
13
c3丙烯酰胺内标定量离子对的峰面积比为纵坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程；(6)样品的检测：取供试品溶液进行超高效液相色谱-串联质谱检测；(7)丙烯酰胺浓度的测定：采用同位素内标法定量：根据试样中丙烯酰胺定量离子对和
13
c3丙烯酰胺内标定量离子对色谱峰的面积，采用步骤(5)的线性回归方程，计算得到丙烯酰胺的浓度。2.如权利要求1所述的一种基于同位素内标-quechers-uplc-ms法检测中药饮片丙烯酰胺的方法，其特征在于，所述步骤(4)中，所述振荡时的频率为450次/分钟。3.如权利要求1所述的一种基于同位素内标-quechers-uplc-ms法检测中药饮片丙烯酰胺的方法，其特征在于，所述步骤(4)中，所述离心10分钟时的离心频率为4000转/分钟。4.如权利要求1所述的一种基于同位素内标-quechers-uplc-ms法检测中药饮片丙烯酰胺的方法，其特征在于，所述步骤(5)和步骤(6)中，所述色谱条件为：色谱柱为phenomenex kinetex c18色谱柱(100
×
2.1mm，1.7μm；柱温：40℃；以甲醇(a)-0.1％甲酸(b)为流动相，按下表的梯度比例进行梯度洗脱，流速：1.0ml
·
min-1
；
5.如权利要求1所述的一种基于同位素内标-quechers-uplc-ms法检测中药饮片丙烯酰胺的方法，其特征在于，所述步骤(5)和步骤(6)中，所述质谱条件为：电喷雾离子源；正离子扫描方式；电离电压：4kv；离子源温度：300℃；雾化器流量：3l
·
min-1
；干燥器流量：10l
·
min-1
；监测方式：多反应监测模式；丙烯酰胺定量离子对为[m h]

，m/z 71.90/55.20；丙烯酰胺内标定量离子对为[m h]

，m/z 75.10/58.05。

技术总结
本发明公开了一种基于同位素内标-QuEChERS-UPLC-MS法检测中药饮片丙烯酰胺的方法，包括如下步骤：(1)内标贮备溶液的制备；(2)对照品贮备液的制备；(3)系列对照品溶液的制备；(4)供试品溶液的制备；(5)线性回归方程的获得；(6)样品的检测；(7)丙烯酰胺浓度的测定。本发明采用优化的QuEChERS净化前处理技术，联用同位素内标-超高压液相-质谱法，测定“浙八味”及新“浙八味”共计247批药材饮片样品中丙烯酰胺的含量，方法简便、准确且重复性好，为丙烯酰胺这一新兴的中药材和饮片中有害物质控制及相关指导原则的制定提供技术支持。质控制及相关指导原则的制定提供技术支持。质控制及相关指导原则的制定提供技术支持。


技术研发人员：郑成 周颖 方翠芬 王荣 赵维良 陈碧莲
受保护的技术使用者：浙江省食品药品检验研究院
技术研发日：2022.03.10
技术公布日：2022/6/10