紫菜丝状体保存方法

1.本发明涉及一种紫菜丝状体保存方法，用于紫菜丝状体保存，属种质保存技术领域。


背景技术：

2.紫菜是全球重要的经济海藻，生活史中有叶状体和丝状体两个异型的世代，其中丝状体可以通过人为的方法得到自由丝状体，鉴于其可室内培养，体积小便于操作等优势，可作为紫菜种质保存、扩繁的用途，在科学研究、育种等方面具有独特的优势，而且生产上也越来越多的使用丝状体作为生产种源。紫菜自由丝状体一般分为营养生长阶段和发育生长阶段，其中营养生长阶段又被称为营养藻丝阶段，其特征是藻体细长，色泽偏蓝黑，而发育生长阶段又称膨大藻丝，特征是藻体较营养藻丝直径明显变宽，藻体颜色偏红。以种质储存为目的的丝状体保存，一般选择营养藻丝。
3.目前丝状体保存技术是通过三角瓶等器皿，加入海水后维持藻丝慢速生长，并定期更换新鲜海水，这样相对频繁的更换海水操作容易带来杂藻、杂菌等污染；另外有一种固相丝状体保存技术，尽管更换营养液周期变长，但是在需要取丝状体进行扩繁时，操作繁琐，也会带来丝状体的损耗。


技术实现要素：

4.本发明的目的是提供一种紫菜丝状体保存方法，该方法可操作性强，成本低，且保存时间长。
5.为达到上述目的，本发明的技术方案：
6.紫菜丝状体保存方法，在无菌条件下，将10ml的灭菌海水加入带盖容器中，选取处于营养藻丝阶段的紫菜丝状体，挑取0.5
×
0.5cm大小的藻球2～3个放入其中，旋盖密封；保存环境为温度4～6℃，光照强度30～50lx，光周期为14l:10d。
7.具体地，所述灭菌海水为暗沉淀1个月后的海水，加入5g/l浓度的碳酸氢钠，经高压灭菌锅处理后所得海水。所述带盖容器为透光性好的玻璃质容器，容器体积15～20ml，使用前用5％盐酸浸泡2小时，清洗干净并80℃烘干，高压灭菌锅处理后备用。所述营养藻丝阶段的紫菜丝状体为不存在杂藻、细菌污染的健康紫菜自由丝状体。
8.本发明形成了成熟的紫菜丝状体长期保存方法，为紫菜种质资源的管理提供了科学规范的操作方法，本发明方法可操作性强，成本低，保存时间长(连续保存12个月)。
具体实施方式
9.紫菜丝状体保存方法，包括：
10.灭菌海水的处理：暗沉淀1个月后的海水，调节比重至1.016～1.018(20℃)，加入碳酸氢钠(浓度为5g/l)，经300目筛绢过滤，分装于1l三角瓶中，加透气封口膜，高压灭菌锅处理，冷却至室温后待用。
11.无菌操作台内进行接种操作，将10ml灭菌海水加入容器中，挑取0.5
×
0.5cm大小的藻球2～3个放入其中，再加入2-4个紫菜丝状体小藻球，旋盖密封。
12.将容器放入冷藏柜，设定温度4～6℃，光照强度特征至30～50lx范围，光周期设定为14l:10d。
13.海水更换：正常情况12个月更换一次保存液，每个种质保持5个备份，发现污染或种质异常及时处理。
14.对比例：
15.灭菌海水处理方法与上述实施例相同。
16.采用150ml三角瓶，加入80ml海水，倒入0.5
×
0.5cm大小的藻球10个左右，盖上封口膜并用皮筋扎紧。
17.放置在18℃，光照强度调整至100～200lx，光周期为12l:12d，需要1个月进行一次海水的更换。
18.对比本发明保存方法，对比例这种常规丝状体保存方法存在更换海水过于频繁，导致杂菌、杂藻污染率极高，尤其是硅藻和绿藻的污染时常发生，不利于种质的保存。
19.上述实施例不以任何方式限制本发明，凡是采用等同替换或等效变换的方式获得的技术方案均落在本发明的保护范围内。


技术特征：
1.紫菜丝状体保存方法，其特征在于：在无菌条件下，将10ml的灭菌海水加入带盖容器中，选取处于营养藻丝阶段的紫菜丝状体，挑取0.5
×
0.5cm大小的藻球2～3个放入其中，旋盖密封；保存环境为温度4～6℃，光照强度30～50lx，光周期为14l:10d。2.根据权利要求1所述的紫菜丝状体保存方法，其特征在于：所述灭菌海水为暗沉淀1个月后的海水，加入5g/l浓度的碳酸氢钠，经高压灭菌锅处理后所得海水。3.根据权利要求1所述的紫菜丝状体保存方法，其特征在于：所述带盖容器为透光性好的玻璃质容器，容器体积15～20ml，使用前用5％盐酸浸泡2小时，清洗干净并80℃烘干，高压灭菌锅处理后备用。4.根据权利要求1所述的紫菜丝状体保存方法，其特征在于：所述营养藻丝阶段的紫菜丝状体为不存在杂藻、细菌污染的健康紫菜自由丝状体。

技术总结
本发明公开了紫菜丝状体保存方法，在无菌条件下，将10ml的灭菌海水加入带盖容器中，选取处于营养藻丝阶段的紫菜丝状体，挑取0.5


技术研发人员：吴子璇 葛舒琳 张涛
受保护的技术使用者：常熟理工学院
技术研发日：2022.04.21
技术公布日：2022/6/7