一种提高野大豆豆芽总黄酮含量的方法

1.本发明涉及豆芽制备技术领域，特别是涉及一种提高野大豆豆芽总黄酮含量的方法。


背景技术：

2.黄酮类化合物是自然界中一类重要的次生代谢成分，在植物界分布广泛，主要存在于中草药、水果蔬菜等绿色植物中。黄酮类化合物的保健功能十分显著，大量研究表明植物总黄酮具有抗氧化作用，较高浓度时能够抑制脂质的过氧化，其含有酚羟基作为供氧体能与自由基反应使之生成响应的离子或分子，可终止自由基的连锁反应，能够显著增强机体免疫能力。
3.豆芽自古以来就是我国人民的传统蔬菜，它营养丰富并且具有药效价值，可以用来预防和治疗多种疾病，而总黄酮就是其发挥药效作用的主要物质之一。因此，提高豆芽中的总黄酮含量可以提高豆芽的功效和经济价值。但是，目前并未有如何提高豆芽总黄酮含量的报道。


技术实现要素：

4.为了解决上述问题，本发明提供了一种提高野大豆豆芽总黄酮含量的方法。本发明提供的方法可以显著提高豆芽的总黄酮含量。
5.为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
6.本发明提供了一种提高野大豆豆芽总黄酮含量的方法，包括以下步骤：
7.将豆子在水中进行第一浸泡，得到初步豆芽；所述第一浸泡的时间为48～50h；
8.将所述初步豆芽在100～130mmol/l的nacl溶液中进行第二浸泡，得到高总黄酮含量的豆芽；所述第二浸泡的时间为46～48h。
9.优选的，所述第一浸泡和第二浸泡的温度分别为22～26℃。
10.优选的，所述第一浸泡的方式包括水没过豆子2～5mm，每10～12h换水一次。
11.优选的，所述第二浸泡时，nacl溶液的体积和第一浸泡中水的体积相同，每10～12h更换nacl溶液一次。
12.优选的，所述豆子浸泡前还包括清洗处理。
13.优选的，所述豆子包括野大豆。
14.有益效果：
15.本发明提供了一种提高野大豆豆芽总黄酮含量的方法，包括以下步骤：将豆子在水中进行第一浸泡，得到初步豆芽；所述第一浸泡的时间为48～50h；将所述初步豆芽在100～130mmol/l的nacl溶液中进行第二浸泡，得到高总黄酮含量的豆芽；所述第二浸泡的时间为46～48h。本发明通过将泡发适宜时间的豆子浸泡在适宜浓度的nacl溶液中，可以显著提高野大豆豆芽的总黄酮含量。
16.另外，本发明提供的方法不仅提高了野大豆豆芽中的总黄酮含量，且对野大豆豆
芽的干鲜重比影响较小，总经济价值更高。
附图说明
17.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
18.图1为不同豆芽外观形态比较；
19.图2为对比例2中绘制的标准曲线。
具体实施方式
20.本发明提供了一种提高野大豆豆芽总黄酮含量的方法，包括以下步骤：
21.将豆子在水中进行第一浸泡，得到初步豆芽；所述第一浸泡的时间为48～50h；
22.将所述初步豆芽在100～130mmol/l的nacl溶液中进行第二浸泡，得到高总黄酮含量的豆芽；所述第二浸泡的时间为46～48h。
23.本发明将豆子在水中进行第一浸泡，得到初步豆芽。在本发明中，所述豆子浸泡前优选还包括清洗处理；所述豆子优选包括野大豆。本发明对所述豆子的来源没有特殊要求，采用本领域技术人员所熟知的市售商品即可。利用野大豆制备的豆芽总黄酮含量最高，其经济价值也最高。
24.在本发明中，所述第一浸泡的时间为48～50h，优选为48h；所述第一浸泡的温度优选为22～26℃，进一步优选为23～25℃，更优选为24℃；所述第一浸泡的方式优选包括水没过豆子2～5mm，每10～12h换水一次，更优选包括水没过豆子3～4mm，每12h换水一次。本发明先将豆子在水中浸泡适宜的时间，可以使后续盐诱导后的豆芽在提高总黄酮含量的同时，降低对豆芽的干鲜比的影响。
25.得到初步豆芽后，本发明将所述初步豆芽在100～130mmol/l的nacl溶液中进行第二浸泡46～48h，得到高总黄酮含量的豆芽。在本发明中，所述nacl溶液的浓度优选为110～125mmol/l，更优选为120mmol/l。在本发明中，所述第二浸泡的时间优选为48h；所述第二浸泡的温度优选为22～26℃，进一步优选为23～25℃，更优选为24℃；所述第二浸泡时，nacl溶液的体积和第一浸泡中水的体积优选相同，优选每10～12h更换nacl溶液一次，更优选为每12h更换nacl溶液一次。本发明通过将浸泡适宜时间的豆子转入适宜浓度的nacl溶液中浸泡适宜的时间，不仅可以提高野大豆豆芽中的总黄酮含量，而且对野大豆豆芽的干鲜重比影响较小，总经济价值更高。
26.为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种提高野大豆豆芽总黄酮含量的方法进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
27.实施例1
28.一种提高野大豆豆芽总黄酮含量的方法，由以下步骤组成：
29.1)将野大豆洗净后置于发豆芽装置(康丽豆芽机，cb-a361)内，加水没过豆子3～4mm，每隔12h换水一次，24℃下浸泡48h，得到初步豆芽；
30.2)48h后，将发豆芽装置内的水替换为等体积的nacl溶液(nacl浓度为120mmol/l)，每隔12h更换nacl溶液一次，24℃下浸泡48h，得到高总黄酮含量的豆芽。
31.对比例1
32.一种制备豆芽的方法，具体为：将野大豆洗净后置于发豆芽装置(同实施例1)内，加水没过豆子3～4mm，每隔12h换水一次，24℃下浸泡96h，得到豆芽。
33.对比例2
34.采用对比例1的方法，分别制备黄豆豆芽、黑豆豆芽、红豆豆芽和绿豆豆芽；将发好的不同豆芽(野大豆豆芽、黄豆豆芽、黑豆豆芽、红豆豆芽和绿豆豆芽)随机挑选30株拍照(见图1)。
35.由图1可知，各种豆芽生长发育良好，但外观形态差异较大。从豆瓣上看，黄豆和黑豆豆芽豆瓣较大，野大豆、红豆和绿豆豆瓣较小；从高度上看，黄豆、绿豆和野大豆豆芽要长一些，黑豆和红豆则要短一些；从胚轴粗度上看，黄豆、黑豆和红豆豆芽胚轴较粗，野大豆和绿豆胚轴较细；总体看来，黄豆、黑豆和红豆豆芽显得较为粗壮，野大豆和绿豆豆芽显得较为细长。
36.将拍照后的豆芽置于65℃烘箱中烘烤14h，得到不同干豆芽；将不同干豆芽分别磨碎过40目筛，采用nano2—alcl3法进行总黄酮含量测定，具体方法如下：精确称取20mg干粉置于2ml离心管中，加入1ml 80％(v/v)甲醇在60℃水温下超声提取30min，然后12000rpm离心10min，取100μl上清液转移到新离心管中，加入440μlnano2(0.066mol/l)混匀，室温反应5min；然后加入60μlalcl3(0.75mol/l)混匀，室温反应6min，再加入400μlnaoh(0.5mol/l)混匀显色；立即取200μl反应液置于酶标板中，测510nm下的吸光度，根据标准曲线测算总黄酮浓度。
37.标准曲线的制作：配置0.05，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mg/ml的芦丁溶液，吸取100μl于新离心管中，nano2、alcl3、naoh的添加以及测量510nm处的吸光度步骤同上，标准曲线图见图2。
38.每种豆芽30株检测结果取平均值，检测结果见表1。
39.表1不同豆芽总黄酮含量比较
[0040][0041]
注：各个豆芽产品及重复均使用1ml 80％(v:v)的甲醇溶液萃取。
[0042]
由表1可知，在以野大豆、红豆、黄豆、黑豆和绿豆为材料制作的豆芽中，野大豆芽总黄酮含量最高，达到了3.19mg/g，保健潜力最大。其次为绿豆芽和黑豆芽，其中黄豆芽的总黄酮含量最低。
[0043]
对比例3
[0044]
一种与实施例1相似的方法，唯一区别在于，nacl浓度为60mmol/l。
[0045]
对比例4
[0046]
一种与实施例1相似的方法，唯一区别在于，nacl浓度为150mmol/l。
[0047]
对比例5
[0048]
一种与实施例1相似的方法，唯一区别在于，nacl浓度为200mmol/l。
[0049]
测定实施例1、对比例1(再次随机取30株豆芽)和对比例3～5制备的豆芽的鲜重和干重(每组随机取30株豆芽)，计算相对干鲜比(与对比例1相比)，每种豆芽30株结果取平均值，结果见表2；并采用对比例2相同的方法测定实施例1、对比例1(再次随机取30株豆芽)和对比例3～5制备的豆芽的总黄酮含量，结果见表3。
[0050]
表2不同组别豆芽的干鲜比结果
[0051][0052][0053]
表3不同组别豆芽的总黄酮含量比较(mg/g)
[0054][0055]
注：表3中各分组豆芽及重复均使用1ml 80％(v:v)的甲醇溶液萃取。
[0056]
由表2可知，盐胁迫处理会对野大豆豆芽的生长形成抑制作用，随着盐浓度的增加，这种抑制作用会更加明显。在使用200mmol/l的nacl进行处理的野大豆豆芽干鲜比几乎只有对照的三成，而使用120mmol/l的nacl处理的野大豆豆芽其干鲜比较对照下降了约13％左右。
[0057]
由表3可知，本发明提供的方法制备的野大豆豆芽总黄酮含量达到4.24mg/g，较对比例1提高了28.88％。
[0058]
野大豆豆芽是以销售鲜重为目的的产品，使用盐胁迫处理豆芽造成的鲜重降低减少了豆芽的产量，但是其总黄酮含量得到了提高，营养价值更加丰富，因此使用120mmol/l的nacl处理的豆芽可以适当提高销售价格，在产量有限降低的同时提高销售价格会带来比对照豆芽更多的经济收益。假设常规野大豆豆芽每斤市售价格为a，使用120mmol/lnacl处理的豆芽鲜重降低了13％，总黄酮含量较常规野大豆豆芽提高了28.88％，以总黄酮含量做为市场价格的评价标的，则通过本发明获得的野大豆豆芽每斤市售价可达到1.29a(其余方面溢价暂不考虑)。如此，在相同重量的制备原料下，本发明制备的野大豆豆芽较常规野大豆豆芽总经济收益提高了12％以上。
[0059]
对比例6
[0060]
一种与实施例1相似的方法，唯一区别在于，将步骤1)中的水替换为120mmol/l的nacl溶液。
[0061]
对比例7
[0062]
一种提高野大豆豆芽总黄酮含量的方法，由以下步骤组成：
[0063]
1)将野大豆洗净后置于发豆芽装置(康丽豆芽机，cb-a361)内，加水没过豆子3～
4mm，每隔12h换水一次，24℃下浸泡24h，得到初步豆芽；
[0064]
2)24h后，将发豆芽装置内的水替换为等体积的nacl溶液(nacl浓度为120mmol/l)，每隔12h更换nacl溶液一次，24℃下浸泡72h，得到高总黄酮含量的豆芽。
[0065]
对比例8
[0066]
一种提高野大豆豆芽总黄酮含量的方法，由以下步骤组成：
[0067]
1)将野大豆洗净后置于发豆芽装置(康丽豆芽机，cb-a361)内，加水没过豆子3～4mm，每隔12h换水一次，24℃下浸泡72h，得到初步豆芽；
[0068]
2)72h后，将发豆芽装置内的水替换为等体积的nacl溶液(nacl浓度为120mmol/l)，每隔12h更换nacl溶液一次，24℃下浸泡24h，得到高总黄酮含量的豆芽。
[0069]
测定实施例1、对比例1(再次随机取30株豆芽)和对比例6～8制备的豆芽的鲜重和干重(每组随机取30株豆芽)，计算相对干鲜比(与对比例1相比)，结果见表4，每种豆芽30株结果取平均值，并采用对比例2相同的方法测定实施例1、对比例1(再次随机取30株豆芽)和对比例6～8制备的豆芽的总黄酮含量，结果见表5。
[0070]
表4nacl溶液不同添加时间对干鲜比和单位种子价格的影响
[0071][0072]
表5nacl溶液不同添加时间对总黄酮含量的影响
[0073][0074]
注：表5中各分组豆芽及重复均使用1ml 80％(v:v)的甲醇溶液萃取。
[0075]
由表4和表5可知，过早的进行盐胁迫处理(0h和24h)野大豆的总黄酮含量低于常规处理(对比例1)，并且干鲜比严重降低，从0h添加盐溶液的处理干鲜比只有常规野大豆豆芽的三成左右。过早进行处理经济效益严重降低，只有常规野大豆豆芽的20％～50％左右；而盐处理过晚(72h)，其干鲜比与常规野大豆豆芽基本持平，总黄酮含量略高于对照，但是经济效益并不显著，只比对照提高了2个百分点；而48h添加nacl胁迫虽然鲜重有所降低，但是总黄酮含量提高明显，经济效益最高。
[0076]
综上所述，本发明提供的方法不仅提高了野大豆豆芽中的总黄酮含量，且对野大豆豆芽的干鲜重比影响较小，总经济价值更高。
[0077]
虽然本发明已以较佳的实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可以做各种改动和修饰，因此本发明的保护
范围应该以权利要求书所界定的为准。