构建产L-缬氨酸的重组微生物的方法及其所用核酸分子和生物材料与流程

技术特征：
1.一种构建重组微生物的方法，其特征在于，所述方法包括至少下述任一种：f1)将编码蛋白质的核酸分子导入目的微生物，得到所述重组微生物，所述蛋白质为下述任一种：a1)氨基酸序列是seq id no.4的蛋白质，a2)将seq id no.4所示的氨基酸序列经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与a1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有相同功能的蛋白质，a3)在a1)或a2)的n端和/或c端连接标签得到的具有相同功能的融合蛋白质；f2)将seq id no.1所示的dna分子导入目的微生物，得到所述重组微生物；f3)利用基因编辑手段对seq id no.1所示的dna分子进行编辑，使目的微生物中含有seq id no.3所示的dna分子。2.权利要求1中所述的任一蛋白质。3.核酸分子，其特征在于，所述核酸分子为下述任一种：b1)编码权利要求1或2中所述任一蛋白质的核酸分子；b2)编码序列是seq id no.3所示的dna分子；b3)核苷酸序列是seq id no.3所示的dna分子。4.生物材料，其特征在于，所述生物材料为下述任一种：c1)含有权利要求3所述任一核酸分子的表达盒；c2)含有权利要求3所述任一核酸分子的重组载体、或含有c1)所述任一表达盒的重组载体；c3)含有权利要求3所述任一核酸分子的重组微生物、或含有c1)所述任一表达盒的重组微生物、或含有c2)所述任一重组载体的重组微生物。5.d1)-d8)中任一项的下述任一种应用：g1)d1)-d8)中任一项在调控微生物的l-缬氨酸的产量中的应用；g2)d1)-d8)中任一项在构建产l-缬氨酸的基因工程菌中的应用；g3)d1)-d8)中任一项在制备l-缬氨酸中的应用；其中，所述d1)-d8)为：d1)权利要求1或2中所述的任一蛋白质；d2)权利要求3所述的任一核酸分子；d3)权利要求4所述的任一生物材料；d4)核苷酸序列为seq id no.1的dna分子；d5)seq id no.1所示的核苷酸序列经过修饰和/或一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加得到的与seq id no.1所示的dna分子具有90％以上的同一性，且具有相同功能的dna分子；d6)含有d4)或d5)中所述dna分子的表达盒；d7)含有d4)或d5)中所述dna分子的重组载体、或含有d6)所述表达盒的重组载体；d8)含有d4)或d5)中所述dna分子的重组微生物、或含有d6)所述表达盒的重组微生物、或含有d7)所述重组载体的重组微生物。6.一种提高微生物中l-缬氨酸的产量的方法，其特征在于，所述方法包括下述任一种：e1)提高目的微生物中的权利要求3所述任一核酸分子的表达量或含量，得到l-缬氨酸
的产量高于所述目的微生物的微生物；e2)提高目的微生物中的权利要求5中d4)或d5)所述dna分子的表达量或含量，得到l-缬氨酸的产量高于所述目的微生物的微生物；e3)对所述目的微生物中的核苷酸序列为seq id no.1的dna分子进行突变，得到l-缬氨酸的产量高于所述目的微生物的微生物。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述突变为将seq id no.1所示dna分子编码的氨基酸序列的第397位的甘氨酸残基突变为另一种氨基酸残基。8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述突变为将seq id no.1所示dna分子编码的氨基酸序列的第397位的甘氨酸残基突变为酪氨酸残基。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述突变是通过定点突变方法将seq id no.1所示dna分子中第1189-1190位的核苷酸gg突变为ta。10.一种制备l-缬氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括利用权利要求1和/或权利要求4和/或权利要求5中所述的任一重组微生物生产l-缬氨酸。

技术总结
本发明公开了构建产L-缬氨酸的重组微生物的方法及其所用核酸分子和生物材料。具体地公开了突变蛋白质CEY17_RS14810


技术研发人员：孟刚 魏爱英 齐晓琴 贾慧萍 赵春光 蔡卫卫
受保护的技术使用者：宁夏伊品生物科技股份有限公司
技术研发日：2022.02.15
技术公布日：2022/5/31