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一种检测大肠菌群的方法

2022-06-01 04:57:23 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种检测大肠菌群的方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)将异丙基-β-d-硫代半乳糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-d-吡喃半乳糖苷、酵母浸粉及磷酸盐缓冲液混合均匀,配制得到检测溶液体系;其中,酵母浸粉、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-d-吡喃半乳糖苷、异丙基-β-d-硫代半乳糖苷的浓度分别为0.01~0.5g/l、0.01~2g/l、0.024~2.4g/l;(2)将待测样品和步骤(1)中检测溶液体系混匀,恒温培养1-12h,测量655nm处的吸光度;(3)根据测得的吸光度结合标准曲线,得出样品中大肠菌群数目。2.根据权利要求1所述一种检测大肠菌群的方法,其特征在于:所述的酵母浸粉的浓度为0.05~0.2g/l;所述的5-溴-4-氯-3-吲哚-β-d-吡喃半乳糖苷的浓度为0.1~0.3g/l;所述的异丙基-β-d-硫代半乳糖苷的浓度为0.024~0.36g/l。3.根据权利要求1或2所述一种检测大肠菌群的方法,其特征在于:所述的标准曲线的绘制包括如下步骤:(1)将异丙基-β-d-硫代半乳糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-d-吡喃半乳糖苷、酵母浸粉及磷酸盐缓冲液混合均匀,配制得到检测溶液体系;(2)配制5组大肠菌群标准溶液,其中每组标准溶液的大肠菌群浓度分别为107、106、105、104、103cfu/ml;(3)将标准溶液和检测溶液体系混匀,37℃下培养9h,测量655nm处的吸光度;(4)根据测得的吸光度绘制标准曲线。4.根据权利要求3所述一种检测大肠菌群的方法,其特征在于:所述的恒温培养的温度为37℃,时间为4-9h。5.根据权利要求4所述一种检测大肠菌群的方法,其特征在于:所述的酵母浸粉的浓度为0.1g/l;所述的5-溴-4-氯-3-吲哚-β-d-吡喃半乳糖苷的浓度为0.2g/l;所述的异丙基-β-d-硫代半乳糖苷的浓度为0.024g/l。6.根据权利要求4或5所述一种检测大肠菌群的方法,其特征在于:检测溶液体系的检测范围为103~107cfu/ml。7.根据权利要求6所述一种检测大肠菌群的方法,其特征在于:大肠菌群为大肠埃希氏菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌中的任一种或两种以上。8.权利要求1-7任一项所述的一种检测大肠菌群的方法在检测食品中的大肠菌群的应用。9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述的食品为水、牛奶或果汁。

技术总结
本发明属于大肠菌群的检测领域,具体公开了一种检测大肠菌群的方法,方法中的检测溶液体系包含以下质量的组分:磷酸盐缓冲液、酵母浸粉、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷及异丙基-β-D-硫代半乳糖苷。具体包括以下步骤:取待测样品添加至上述检测溶液体系(IPTG-YET-X-Gal),通过测量OD


技术研发人员:肖性龙 刘西敏 王璐莹 李晓凤 余以刚
受保护的技术使用者:华南理工大学
技术研发日:2022.01.07
技术公布日:2022/5/31
再多了解一些

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