一种含干扰素α的融合蛋白、表达该融合蛋白的重组菌株及其制备方法与流程

技术特征：
1.一种含干扰素α的融合蛋白，其特征在于：该融合蛋白由以下模块依次串联得到：猪血清白蛋白rpoalb、冠状病毒nsp5切割位点nsp5 site、干扰素α融合蛋白ifnα依次串联构成。2.根据权利要求1所述的一种含干扰素α的融合蛋白，其特征在于：所述rpoalb的核酸序列如序列表中seq id no.3所示；所述nsp5 site的核酸序列如序列表中seq id no.4所示；所述ifnα的核酸序列如序列表中seq id no.5所示。3.根据权利要求1所述的一种含干扰素α的融合蛋白，其特征在于：该融合蛋白的核酸序列如序列表中seq id no.1所示；该融合蛋白的氨基酸序列如序列表中seq id no.2所示。4.一种表达权利要求1所述融合蛋白的重组菌株，其特征在于：所述重组菌株为重组毕赤酵母。5.根据权利要求4所述的重组菌株，其特征在于：所述重组毕赤酵母的保藏号为cctcc no：m 20211522。6.权利要求1所述融合蛋白的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括一级种子繁殖、二级种子繁殖、一级发酵、二级发酵、纯化。7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述一级种子繁殖，将表达融合蛋白的重组毕赤酵母冻干菌种，接种于ypd液体培养基，27-29℃、200-250r/min摇床振荡培养过夜，作为一级种子；所述冻干菌种与ypd液体培养基的质量体积比为1g：45-55ml。8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述二级种子繁殖，将一级种子按1.5%的体积比接种于ypd液体培养基，27-29℃、200-250r/min摇床振荡培养23-25h，作为二级种子。9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述一级发酵，将二级种子按照2%（v/v）的接种量接入含0.05%（v/v）的bmgy培养基中，接种后将溶氧控制30%～100%，通风量1:1～1:1.5，转速200-250rpm，发酵温度为27.5-28.5℃，发酵至od值长到1.2以上。10.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述二级发酵，将一级发酵后的液体全部接种到含0.05%（v/v）的bmmy培养基中，接种后将溶氧控制30%～100%，通风量1:1～1:1.5，转速200-250rpm，温度全程控制到27.5-28.5℃，全程控制ph 5.7-5.8，培养到19-21h流加1%（v/v）甲醇，培养到67-69h，得到二级发酵液。

技术总结
本发明提供一种含干扰素α的融合蛋白，该融合蛋白由以下模块依次串联得到：猪血清白蛋白rpoALB、冠状病毒nsp5切割位点nsp5 site、干扰素α融合蛋白IFNα依次串联构成；本发明还提供表达所述融合蛋白的重组菌株以及上述融合蛋白的制备方法。本发明的rpoALB-nsp5 site-IFNα融合蛋白，抗病毒活性高，半衰期长，可以降低感染病毒后仔猪的发病率和死亡率。可以降低感染病毒后仔猪的发病率和死亡率。可以降低感染病毒后仔猪的发病率和死亡率。


技术研发人员：郭海岩 刘刚 王兴业 韩国英 苗玉和 韩法杰 王红军 孙秀丽
受保护的技术使用者：山东仙普爱瑞科技股份有限公司
技术研发日：2022.03.02
技术公布日：2022/5/30