一种黄体酮软胶囊内容物中黄体酮的粒度分布的检测方法与流程

1.本技术涉及分析检测技术领域，具体涉及一种黄体酮软胶囊内容物中黄体酮的粒度分布的检测方法。


背景技术：

2.黄体酮软胶囊是一类用于治疗由黄体酮缺乏引起的机能障碍和助孕的高效药物，市场需求量大。黄体酮软胶囊内容物为油混悬液，黄体酮在该油中的粒度及粒度分布是黄体酮软胶囊的重要质量控制指标。
3.有关黄体酮软胶囊内容物的粒度及粒度分布的测试方法目前只有显微镜图像分析法。因为显微镜法的固有缺陷，该方法存在观测粒子数较少(仅1000-2000颗)、精密度较差的缺陷。并且，在原研制剂相关法定质量标准中，规定了必须使用莱卡显微镜和图像分析系统，该系统售价60-80万元，价格昂贵，推广存在问题。
4.目前粒度测试方法应用最广泛的是激光衍射法，其中又分为干法激光衍射法和湿法激光衍射法，干法激光衍射法较湿法测试更简单，测试效率更高，成本也更低。但是黄体酮悬浮在软胶囊内容物油中，将油和黄体酮颗粒分离非常困难，因此干法激光衍射法对于黄体酮软胶囊内容物(混悬液)中黄体酮的粒度分布的测试是不适宜的。湿法激光衍射法测试因黄体酮软胶囊内容物(混悬液)中的油会影响检测结果，并且难以保证黄体酮在分散过程中粒度不发生变化，故而合适的分散剂选择十分困难，一直未能用于黄体酮软胶囊内容物(混悬液)中黄体酮分布的测试。


技术实现要素：

5.针对现有技术中存在的上述问题，本发明提出一种黄体酮软胶囊内容物中黄体酮的粒度分布的检测方法，其中使用饱和轻质液体石蜡作为分散剂，溶解黄体酮直至饱和后，以得到饱和的轻质液体石蜡溶液，通过将该饱和的轻质液体石蜡溶液加入黄体酮软胶囊内容物中，由于所述饱和轻质液体石蜡溶液为饱和的黄体酮-轻质液体石蜡溶液，所以其可以溶解黄体酮软胶囊内容物(混悬液)中的油，但是在检测时间内对黄体酮几乎无溶解，故而一方面避免了黄体酮软胶囊内容物(混悬液)中的油对检测结果的影响，另一方面避免了黄体酮软胶囊内容物(混悬液)中黄体酮的溶解而导致其粒径的变化，进而使得本发明的检测方法更加准确、简单和高效。
6.本发明提供一种黄体酮软胶囊内容物中黄体酮的粒度分布的检测方法，其包括：将黄体酮软胶囊内容物加入到饱和轻质液体石蜡溶液中，超声分散均匀，通过激光粒度检测仪器进行粒度测试，得到黄体酮软胶囊内容物中黄体酮的粒度分布；
7.其中所述饱和轻质液体石蜡溶液为饱和的黄体酮-轻质液体石蜡溶液，该溶液中黄体酮的溶解达到饱和。
8.在本发明的实施方案中，轻质液体石蜡具有本领域的一般含义，简称轻蜡，其烷烃中碳原子数为c9～c13。
9.在本发明的实施方案中，所述激光粒度检测仪器为湿法激光粒度测试仪。
10.在本发明的实施方案中，所述饱和轻质液体石蜡溶液的配制方法为：将黄体酮加入轻质液体石蜡中，其中黄体酮与轻质液体石蜡的重量比为≥1:400，在室温下搅拌溶解10～24小时，过滤配制而成。
11.在本发明中，“室温”包括15～35℃的范围内的温度。
12.在本发明的实施方案中，所述过滤通过油性微孔滤膜实现。
13.在本发明的实施方案中，所述油性微孔滤膜的孔径为0.25μm以下，优选为0.22μm以下。
14.根据本发明的黄体酮软胶囊内容物中黄体酮的粒度分布的检测方法具体包括以下步骤：
15.s1.用预先配置的饱和轻质液体石蜡溶液充满激光粒度检测仪器的检测池，测试仪器背景；
16.s2.将黄体酮软胶囊内容物加入预先配置的饱和轻质液体石蜡溶液，超声分散均匀，得到样品溶液；
17.s3.仪器背景测试完成后，扣除背景值，将样品溶液滴加入到激光粒度检测仪器的样品池中，进行粒度测试。
18.在本发明的实施方案中，在步骤s2中所述黄体酮软胶囊内容物与饱和轻质液体石蜡溶液的质量体积比为0.03～0.05g/ml。
19.在本发明的实施方案中，在步骤s2中所述超声分散的频率为30～40khz、时间为2～5min。
20.在本发明的实施方案中，在步骤s3中，将所述样品溶液滴加入到激光粒度检测仪器的样品池中，直至折光率达到8％～15％后，进行粒度测试。
21.在本发明的实施方案中，步骤s3中合适的折光率为8％～15％。在折光率达到并稳定在该数值范围内进行检测。如前所述，由于本发明使用预先配置的饱和轻质液体石蜡溶液，所以该溶液中黄体酮的溶解已经达到饱和，故而黄体酮软胶囊内容物中的黄体酮不会继续溶解，所以不会导致折光率的降低进而影响检测结果。
22.根据本发明的黄体酮软胶囊内容物中黄体酮的粒度分布的检测方法具体包括以下步骤：
23.s1.打开激光粒度仪，预热；运行粒度测试软件，使用轻质液体石蜡清洗仪器管路，排尽后用预先配置的饱和轻质液体石蜡溶液充满检测池，调整仪器，测试仪器背景；
24.s2.取黄体酮软胶囊内容物置于容器中，加入预先配置的饱和轻质液体石蜡溶液，超声分散均匀；
25.s3.待仪器背景测试完成后，扣除背景值，将样品溶液滴加入到样品池中，直至达到合适的折光率；
26.s4.利用粒度测试软件中的测试功能按钮进行样品测试，得到粒度分布结果。
27.本发明在研发过程中主要遇到了如下困难：黄体酮软胶囊内容物(混悬液)中颗粒和液体(植物油)不能分离，植物油在水分散介质中干扰检测，黄体酮在一般的可溶解植物油的分散介质中溶解，使得折光率急剧下降，进而影响检测结果的准确性。我们通过实验筛选，选择饱和轻质液体石蜡作为分散介质，该介质可以溶解植物油，排除了植物油的干扰，
并且饱和的轻质液体石蜡在检测时间内对黄体酮几乎无溶解(折光率稳定)，解决了上述困难。
28.在本发明中，通过使用饱和轻质液体石蜡作为分散剂，溶解黄体酮直至饱和后，得到了饱和轻质液体石蜡溶液，利用该饱和轻质液体石蜡溶液，可以溶解黄体酮软胶囊内容物(混悬液)中包覆的油质，而不会溶解黄体酮软胶囊内容物中的黄体酮，进而一方面避免了黄体酮软胶囊内容物(混悬液)中的油对检测结果的影响，另一方面避免了黄体酮软胶囊内容物(混悬液)中黄体酮的溶解而导致其粒径的变化，进而使得本发明的检测方法更加准确、简单和高效。此外，相比于现有的显微镜图像分析法，本发明的方法检测样品的数量更多，检测设备相对便宜，精密度和适用性更好。进一步地，本发明的测定仪器使用广泛，实验结果直观高效，d10、d90粒径多次测量结果的相对标准偏差不大于5％，d50粒径多次测量结果的相对标准偏差不大于3％，符合中国药典中对激光粒度仪检测结果重复性的要求。
附图说明
29.为了更清楚地说明本发明，下面将对实施例所需要使用的附图做出说明，下面的附图仅仅示出本发明的一些实施例，对于本领域技术人员来讲，可以在不付出创造性劳动性的前提下，根据这些附图获得其他的附图，这些都在本发明的范围内。
30.图1示出了根据本发明实施例1的粒度分布图。
31.图2示出了根据本发明实施例1的rsd的值。
32.图3示出了根据本发明实施例2的粒度分布图。
33.图4示出了根据本发明实施例2的rsd的值。
34.图5示出了根据本发明实施例3的粒度分布图。
35.图6示出了根据本发明实施例3的rsd的值。
36.图7示出了根据本发明对比例1的粒度分布图。
37.图8示出了根据本发明对比例1的rsd的值。
38.图9示出了根据本发明对比例2的粒度分布图。
具体实施方式
39.下面将对本发明实施例中的实施方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
40.饱和轻质液体石蜡的配制方法为：将5g黄体酮加入2000g轻质液体石蜡(购于湖南尔康制药股份有限公司，执行标准《中国药典》2020版第4部)混合，搅拌溶解10～24小时，用0.22μm的油性微孔滤膜过滤配制而成。
41.实施例1
42.批号为21081501的黄体酮软胶囊内容物样品，其粒度分布的测试方法如下：使用丹东百特仪器有限公司bettersize2600智能激光粒度仪，打开仪器，预热半小时。运行粒度测试软件，使用轻质液体石蜡清洗仪器管路，排尽后在检测器内灌注饱和轻质液体石蜡，设定循环转速2000rpm。在软件窗口中调节仪器对中，测试仪器背景。取黄体酮软胶囊内容物
0.5g置50ml烧杯中，用饱和轻质液体石蜡稀释至10ml，搅拌使分散，超声频率36khz，超声时间3mim配置供试品。将供试品滴加入到样品池中，直至折光率为12％左右，点击软件中的测试按钮进行样品测试，检测5次，测试完成后计算机自动给出测试结果，计算五次检测结果的rsd值。粒度分布图如图1所示，检测结果的rsd值如图2所示。
43.由图2可知，d10、d50、d90五次检测结果rsd值分别为0.13％、0.10％和0.26％，满足chp2020通则(chinese pharmacopoeia 2020，中国药典2020)0982粒度和粒度分布测定法中第三法对标准粒子检验平行检验重复性的要求(d10、d90的rsd值≤5.0％，d50的rsd值≤3.0％)，证明了该实施例中检测方法平行检验样品重复性符合行业要求。
44.实施例2
45.批号为21081501的黄体酮软胶囊内容物样品，其粒度分布的测试如下：使用丹东百特仪器有限公司bettersize2600智能激光粒度仪，打开仪器，预热半小时。运行粒度测试软件，使用轻质液体石蜡清洗仪器管路，排尽后在检测器内灌注饱和轻质液体石蜡，设定循环转速2000rpm。在软件窗口中调节仪器对中，测试仪器背景。取黄体酮软胶囊内容物0.3g置50ml烧杯中，用饱和轻质液体石蜡稀释至10ml，搅拌使分散，超声频率36khz，超声时间3mim配置供试品。将供试品滴加入到样品池中，直至折光率为12％左右，点击软件中的测试按钮进行样品测试，检测5次，测试完成后计算机自动给出测试结果，计算五次检测结果的rsd值。粒度分布图如图3所示，检测结果的rsd值如图4所示。
46.由图4可知，d10、d50、d90五次检测结果rsd值分别为0.03％、0.11％和0.24％，满足chp2020通则0982粒度和粒度分布测定法第三法对标准粒子检验平行检验重复性的要求(d10、d90的rsd值≤5.0％，d50的rsd值≤3.0％)，证明了该实施例中检测方法平行检验样品重复性符合行业要求。
47.实施例3
48.批号为21081501的黄体酮软胶囊内容物样品，其粒度分布的测试如下：使用丹东百特仪器有限公司bettersize2600智能激光粒度仪，打开仪器，预热半小时。运行粒度测试软件，使用轻质液体石蜡清洗仪器管路，排尽后在检测器内灌注饱和轻质液体石蜡，设定循环转速2000rpm。在软件窗口中调节仪器对中，测试仪器背景。取黄体酮软胶囊内容物0.5g置50ml烧杯中，用饱和轻质液体石蜡稀释至10ml，搅拌使分散，超声频率36khz，超声时间3mim配置供试品。将供试品滴加入到样品池中，直至折光率为15％左右，点击软件中的测试按钮进行样品测试，测试完成后计算机自动给出测试结果。检测5次，测试完成后计算机自动给出测试结果，计算五次检测结果的rsd值。粒度分布图如图5所示，检测结果的rsd值如图6所示。
49.由图6可知，d10、d50、d90五次检测结果rsd值分别为4.12％、1.86％和0.84％，满足chp2020通则0982粒度和粒度分布测定法第三法对标准粒子检验平行检验重复性的要求(d10、d90的rsd值≤5.0％，d50的rsd值≤3.0％)，证明了该实施例中检测方法平行检验样品重复性符合行业要求。
50.对比例1
51.与实施例3相比，饱和轻质液体石蜡由葵花籽油替代。
52.批号为21081501的黄体酮软胶囊内容物样品，其粒度分布的测试如下：使用丹东百特仪器有限公司bettersize2600智能激光粒度仪，打开仪器，预热半小时。运行粒度测试
软件，使用葵花籽油清洗仪器管路，排尽后在检测器内灌注葵花籽油，设定循环转速2000rpm。在软件窗口中调节仪器对中，测试仪器背景。取黄体酮软胶囊内容物0.5g置50ml烧杯中，用葵花籽油稀释至10ml，搅拌使分散，超声频率36khz，超声时间3mim配置供试品。将供试品滴加入到样品池中，直至折光率为12％左右，点击软件中的测试按钮进行样品测试，测试完成后计算机自动给出测试结果。检测5次，测试完成后计算机自动给出测试结果，计算五次检测结果的rsd值，粒度分布图如图7所示，检测结果的rsd值如图8所示。
53.由图8可知，d10、d50、d90五次检测结果rsd值分别为2.35％、5.54％和4.34％，不满足chp2020通则0982粒度和粒度分布测定法第三法对标准粒子检验平行检验重复性的要求(d10、d90的rsd值≤5.0％，d50的rsd值≤3.0％)。这证明了该对比例中检测方法平行检验样品重复性不符合行业要求。而且，从图7结果来看，检测粒径偏大，推测为颗粒团聚未完全分散，检测结果重复性较差。
54.对比例2
55.与实施例3相比，饱和轻质液体石蜡由轻质液体石蜡替代。
56.批号为21081501的黄体酮软胶囊内容物样品，其粒度分布的测试如下：使用丹东百特仪器有限公司bettersize2600智能激光粒度仪，打开仪器，预热半小时。运行粒度测试软件，使用轻质液体石蜡清洗仪器管路，排尽后在检测器内灌注轻质液体石蜡，设定循环转速2000rpm。在软件窗口中调节仪器对中，测试仪器背景。取黄体酮软胶囊内容物0.5g置50ml烧杯中，用轻质液体石蜡稀释至10ml，搅拌使分散，超声频率36khz，超声时间3mim配置供试品。将供试品滴加入到样品池中，直至折光率为12％左右，点击软件中的测试按钮进行样品测试，测试完成后计算机自动给出测试结果。检测5次，测试完成后计算机自动给出测试结果，计算五次检测结果的rsd值。粒度分布图如图9所示。所检测粒径分布明显小于使用饱和液体石蜡，可以得知，样品在液体石蜡中，因为颗粒溶解，所以粒径检测值变小。
57.可以理解的是，以上实施方式仅仅是为了说明本发明的原理而采用的示例性实施方式，然而本发明并不局限于此。对于本领域内的普通技术人员而言，在不脱离本发明的精神和实质的情况下，可以做出各种变型和改进，这些变型和改进也视为落入本发明的保护范围之内。