制备5-(4-((2S,5S)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1H-1,2,4-三唑-3-胺的方法与流程

制备5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的方法
发明领域
1.本发明涉及合成两种水合晶型和一种无水晶型形式的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的方法。本发明还涉及(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯，其为此方法的中间体。
2.发明背景
3.结构式1的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺最早描述于国际专利申请wo2017/037670。
[0004][0005]
式1化合物是酸性哺乳动物几丁质酶(amcase)与壳三糖苷酶1(chit-1)的双重抑制剂。此化合物可用于治疗这些酶过度表达相关病症。此类病症为哮喘和过敏反应或特发性肺纤维化(ipf)和慢性阻塞性肺病(copd)。
[0006]
专利申请wo2017/037670描述由式2的(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉合成式1化合物。此合成概述于下面流程中。
[0007][0008]
式2化合物与式3的n-(叔丁氧羰基)-4-哌啶酮、作为还原剂的三乙酰氧基硼氢化
钠和冰醋酸在1,2-二氯乙烷中反应。经过一夜后，利用萃取分离出粗的式4的4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-甲酸叔丁酯，并利用柱色谱纯化。使用氯化氢的乙酸乙酯溶液，使纯的式4化合物进行叔丁氧羰基部分的脱保护反应，得到为二盐酸盐的式5的(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基-4-(哌啶-4-基)吗啉。在下一步骤中，在乙腈中在作为碱的碳酸钾存在下，使式5化合物与n-氰基二硫代亚氨碳酸二甲酯反应。加热数小时后，加入肼一水合物，并将反应混合物进一步回流数小时。当悬浮液达环境温度时，滤出固体物质，利用硅胶柱色谱纯化浓缩滤液所得粗产物，然后沉淀，产生式1化合物。
[0009]
将式5化合物转化成式1化合物为系列的两个反应。在第一步骤中，将式5化合物转化成中间体，其最可能为式6的(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸酯。
[0010][0011]
专利申请wo2017/037670所述式1化合物的合成需要两次色谱纯化，这既不具成本效益又耗时。涉及色谱纯化的方法被认为更不适合工业化量产。且无信息显示此法所得物质为可能被认为稳定的晶型。此外，粒径分布是原料药的重要参数，其对片剂形式的药品制备有很大影响。该专利未教导使所述最终产物简单沉淀使得能够用可重复方式产生严格限定粒径的物质。由于wo2017/037670所述合成的最后一步骤需使用已知会致癌的肼，因此除了所述物质的总体纯度，还需严格控制原料药的残留肼量，其为原料药合成时各方法的关键因素。鉴于上述，尚需可放大量且有效的合成式1的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的方法，其适合制备药品。
[0012]
发明详述
[0013]
本发明提供有效且可放大量(scalable)的合成式5的(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基-4-(哌啶-4-基)吗啉的方法。相较于“发明背景”所述原有方法，将各种改变引入程序中，以提高产率并简化合成，使之可放大量制备。在0℃至回流温度下，优选为环境温度，使式2化合物与式3的n-(叔丁氧羰基)-4-哌啶酮在存有氰基硼氢化钠还原剂和添加剂(优选为氯化锌)下在溶剂(优选为醇，更优选为甲醇)中反应。当起始原料完全转化时，利用萃取分离出式4的4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-甲酸叔丁酯，将粗产物溶于溶剂优选乙酸乙酯中，并加入盐酸溶液，优选为浓盐酸。当起始原料完全转化时，将溶剂调换成极性溶剂，优选为甲醇。向溶液中加入溶剂优选丙酮，使溶液冷却至环境温度。产物冷却后即结晶，然后滤出晶体。用溶剂优选丙酮冲洗滤饼，并在空气中干燥，得为白色晶体的式5的(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基-4-(哌啶-4-基)吗啉。仔细分析所得物质显示，所得产物为二盐酸盐水合物。
[0014][0015]
合成式2化合物的关键步骤为式7和式8化合物混合物与叔丁醇钾反应生成式9酰胺。仅式8化合物环化成式9化合物。在反应条件下，式7化合物差向异构化为式8化合物，其环化成式9化合物。据此，叔丁醇钾与式7和式8化合物混合物反应只提供式9化合物。式9化合物在反应条件下差向异构化成式10化合物，其是反应副产物。接着使式9粗产物结晶，然而完全移除不需要的式10化合物很繁琐且会导致产物大量损失。式9化合物还原得到式2化合物，但当式9化合物遭式10化合物污染时，式2化合物将含有作为式10化合物还原产物得到的式11化合物。
[0016][0017]
在专利申请wo2017/037670所述条件下(三乙酰氧基硼氢化钠、乙酸和1,2-二氯乙烷)，式11化合物与n-boc-4-哌啶酮反应生成式12副产物，其可在式3化合物粗品中看到。式12的杂质可利用硅胶仔细纯化来移除，但此方式不适合千克规模(kilo-scale)。采用此专利申请所述条件时(氰基硼氢化钠、氯化锌和甲醇)，式11化合物不与n-boc-4-哌啶酮反应。由于移除叔丁氧羰基保护基后很容易利用结晶移除式11化合物，本发明涉及合成无式13杂质的式5化合物的方法。此外，非显而易见地，本技术所述条件能使用式2化合物的盐酸盐作为起始原料，此有利于方法。式2化合物是稳定性有限的油状物，意即其需保持盐形式以防止分解。反之，wo2017/037670所述反应在式2化合物的盐酸盐用作起始原料时不会进行，该盐需先转化成游离碱，其为额外操作。
[0018][0019]
本发明另提供合成式6的(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯的方法。此化合物未曾分离出或叙述过。该相关化合物可通过在溶剂(优选为乙醇、1-丙醇或2-丙醇)中在碱(优选为三烷基胺，更优选为三乙胺)存在下，使式5的(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基-4-(哌啶-4-基)吗啉与n-氰基二硫代亚氨碳酸二甲酯反应而合成。反应是在室温至回流温度优选50℃下进行。当起始原料完全转化时，使反应混合物冷却至环境温度。产物在冷却后即结晶。过滤物质，用溶剂优选乙醇、1-丙醇或2-丙醇洗涤滤饼，然后干燥而得式6化合物。
[0020][0021]
本发明还提供直接由式2化合物合成式6化合物的方法，以避免三步骤合成。此方法涉及使式2化合物与式14的4-氧代哌啶n-氰基硫代亚氨代氨基甲酸甲酯反应。式14化合物很容易由市售4,4-二羟基哌啶盐酸盐与n-氰基二硫代亚氨碳酸二甲酯在0℃至回流温度优选环境温度下，在溶剂(优选为溶剂混合物，更优选为2-丙醇与水混合物)中在碱(优选为三烷基胺，更优选为三乙胺)存在下反应获得。用6m盐酸溶液将反应混合物淬灭，并用有机溶剂优选二氯甲烷萃取。用水洗涤溶液，将溶剂调换成极性溶剂，优选为2-丙醇。在热溶液中加入非极性溶剂，优选为异丙醚，从而使产物结晶。滤出固体，用溶剂冲洗滤饼，优选为溶剂混合物，更优选为2-丙醇与异丙醚混合物，然后干燥而得呈灰白色固体的式14化合物。
[0022][0023]
在简单用式14酮化合物取代式3酮化合物后，在wo2017/037670为合成式4化合物所述条件下进行的式2化合物与式14化合物反应不会进行。此外，在简单用式14化合物替换式3化合物后，由如本技术所述的式2化合物合成式4化合物的条件会生成式6化合物与式15副产物的混合物。所以需开发直接由式2化合物合成式6化合物的新条件。
[0024]
式2化合物与式14化合物的反应是在0℃至回流温度优选环境温度下，在极性溶剂
(优选为乙醇)中在还原剂(优选为氰基硼氢化钠)和添加剂(优选为氯化锌)存在下进行。起始原料完全转化后，用1m氢氧化钠溶液使反应混合物淬灭，并用有机溶剂优选二氯甲烷萃取。将溶剂调换成有机溶剂，优选为乙醇。使溶液冷却至环境温度，从而使产物结晶。滤出固体，用溶剂优选乙醇冲洗滤饼，然后干燥，得到为白色固体的式6化合物。
[0025]
式1的目标分子可由式5化合物或式6化合物获得。此外，本专利申请描述制备式1目标分子的无水形式、两种水合形式(水合形式i与ii)和无定形形式的方法。此段落概述的方法总结于图1。
[0026]
本发明还提供由式5化合物合成式1化合物水合形式i的方法(图1的反应a)。在环境温度至沸点温度优选40℃下，使式5化合物悬浮于溶剂优选乙醇中，加入n-氰基二硫代亚氨碳酸二甲酯，然后加入碱，优选三烷基胺，更优选三乙胺。当起始原料完全转化时，加入肼一水合物，在环境温度至沸点温度优选60℃下继续进行反应。当中间体完全转化后，加入水，使溶液冷却至-20℃至环境温度，优选至5℃。滤出沉淀固体，用水与有机溶剂(优选为乙醇)混合物冲洗滤饼，然后干燥，得到为白色固体的式1化合物水合形式i。
[0027]
本发明还提供由式6化合物合成式1化合物水合形式i的方法(图1的反应b)。在环境温度至沸点温度优选60℃下，使式6化合物悬浮于溶剂优选乙醇中，加入肼一水合物。当起始原料完全转化时，加入水，使溶液冷却至-20℃至环境温度，优选至5℃。滤出沉淀固体，用水与有机溶剂(优选为乙醇)混合物冲洗滤饼，然后干燥，得到为白色固体的式1化合物水合形式i。
[0028]
本发明另提供由式6化合物合成式1化合物无水形式的方法(图1的反应c)。式6化合物与肼一水合物的反应是在环境温度至沸点温度(优选为60℃)下在有机溶剂(优选为乙腈)中进行。起始原料完全转化后，使溶液冷却至环境温度，产物在冷却后即沉淀。滤出固体，用溶剂优选乙腈冲洗滤饼，并干燥，得到为白色固体的式1化合物无水形式。
[0029]
相较于wo2017/037670，以一锅方式(one-pot approach)获得式1化合物时，非显而易见地，实行分离式6化合物的方法可以更高产率得到式1化合物无水形式(本技术为86％，而wo2017/037670为72％)。涉及式6化合物反应的第二步骤的关键因素为用作溶剂的乙腈。在极性更大的溶剂(即甲醇、乙醇或2-丙醇)中，反应产率低很多。另一方面，应用极性较小的溶剂(即二氯甲烷、甲基叔丁基醚或甲苯)时，残留肼的量让人无法接受。
[0030]
本发明又提供由其水合形式i制备无水形式的式1化合物的方法(图1的方法d)。使水合形式i的式1化合物悬浮于有机溶剂优选乙酸乙酯中，并加热悬浮液至回流。加热后，悬浮液变成澄清液。蒸馏溶液直到挥发物温度达76℃。蒸馏期间，产物沉淀。在环境温度下滤出固体。用有机溶剂优选乙酸乙酯冲洗滤饼，然后干燥而得呈白色晶体的无水形式的式1化合物。
[0031]
合成式1化合物水合形式i、随后合成式1化合物无水形式相对于wo2017/037670描述的式1化合物合成具有显著优势。在新条件下，非显而易见地，式1化合物水合形式i的沉淀能控制残留肼的量，肼被认为是基因毒性杂质，必须控制在ppm(百万分之一)水平。前段概述的方法用于合成三批无水形式的式1化合物。仔细分析该物质的纯度、残留肼量和粒径分布。
[0032][0033]
本发明还提供由其无水形式制备水合形式ii的式1化合物的方法(图1的方法e)。使式1化合物无水形式在回流下溶于甲醇。向溶液中加入水，使产物沉淀。使悬浮液冷却至-20℃至环境温度，优选至5℃。使固体老化及滤出。用水与甲醇混合物冲洗滤饼，然后干燥，得到为白色固体的式1化合物水合形式ii。
[0034]
由于式6化合物在甲醇中不稳定，因此不能和式1化合物水合形式i一样，直接由化合物6获得水合形式ii。水合形式i与ii的式1化合物都不稳定，干燥后会变成无定形形式。该干燥物质的xprd数据和从x射线结构计算的数据不同。此外，用于结构测定的式1化合物水合形式i的干燥单晶的分析显示缺少结晶结构，故可推论晶体结构在干燥后会塌陷。无定形形式的式1化合物可以更便利的方式制备：使无水形式或水合形式i或ii的式1化合物熔化，然后使物质冷却至环境温度。研磨玻璃状固体后，式1化合物的无水形式为灰白色固体。
[0035]
发明概述
[0036]
本发明提供合成固体晶态的式5的(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基-4-(哌啶-4-基)吗啉二盐酸盐水合物的方法。
[0037]
本发明涉及固体晶态的式6的(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯，其特征在于下列至少之一：
[0038]
(i)在10.13、10.98、12.03、13.54、13.98、14.40、14.88、16.84、18.67、20.21、20.85、21.71、22.56、22.98、24.10、24.56、25.27、27.48、29.80、30.43和33.36
°
2θ的xrpd峰；
[0039]
(ii)在2959、2926、2866、2820、2795、2167、1541、1491、1450、1431、1383、1358、1273、1215、1151、1117、1096、1070、1043、1013、988、930、862、833、806、714、665和638cm-1
的ir波段；
[0040]
(iii)于156.26℃开始，尖峰在157.51℃的dsc。
[0041]
上述特征实质上与图2至图4一致。
[0042]
本发明提供合成固体晶态的式6的(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯的方法。
[0043]
本发明还涉及固体晶态的式1的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺水合形式i，其特征在于下列至少之一：
[0044]
(i)在6.70、9.96、10.68、12.74、13.42、14.20、14.82、15.40、15.58、16.44、17.00、17.46、18.02、18.30、18.64、19.52、20.16、20.66、21.40、21.64、21.86、22.16、22.58、23.22、23.68、24.64、27.00、27.26、27.88和28.84
°
2θ的xrpd峰；
[0045]
(ii)在3318、3206、2963、2934、2859、2833、1636、1589、1553、1489、1462、1404、1346、1314、1277、1250、1151、1117、1092、1069、1013、917、868、829、800、764、725和673cm-1
的ir波段；
[0046]
(iii)于80.60℃开始，尖峰在91.32℃的dsc。
[0047]
上述特征实质上与图7至图9一致。
[0048]
本发明提供合成固体晶态的式1的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺水合形式i的方法。
[0049]
本发明更涉及固体晶态的式1的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺无水形式，其特征在于下列至少之一：
[0050]
(i)在5.81、7.39、9.95、11.53、11.97、12.39、13.13、14.07、14.60、14.81、15.11、16.09、16.45、17.15、17.67、17.85、18.21、18.68、19.21、19.84、20.75、21.22、22.24、23.00、24.22、24.98和27.48
°
2θ的xrpd峰；
[0051]
(ii)在3252、3198、3119、2955、2924、2857、2793、1666、1599、1543、1483、1456、1404、1337、1283、1248、1136、1117、1094、1072、1053、1013、908、858、795和718cm-1
的ir波段；
[0052]
(iii)于175.83℃开始，尖峰在177.59℃的dsc。
[0053]
上述特征实质上与图10至图12一致。
[0054]
本发明另提供固体晶态的式1的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺无水形式的制备。
[0055]
本发明进一步涉及固体晶态的式1的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺水合形式ii，其特征在于下列至少之一：
[0056]
(i)在10.14、12.88、13.50、13.94、15.30、15.48、16.12、16.34、17.60、17.98、18.14、18.64、18.72、19.34、19.76、20.16、20.36、21.64、22.16、22.54、22.86、23.02、23.70、24.28、25.92、26.14、26.32、27.08、27.34、27.70、30.50和39.24
°
2θ的xrpd峰；
[0057]
(ii)在3325、2963、2814、1634、1580、1553、1489、1460、1418、1389、1343、1279、1248、1206、1151、1119、1090、1069、1047、1013、991、914、866、831、797、760、665和600cm-1
的ir波段；
[0058]
(iii)两个dsc峰：第一个于60.12℃开始，尖峰在70.29℃。第二个于82.83℃开始，尖峰在90.87℃。
[0059]
上述特征实质上与图15至图17一致。
[0060]
本发明提供合成固体晶态的式1的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺水合形式ii的方法。
[0061]
本发明还涉及固态的式1的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺无定形形式，其特征在于：
[0062]
(i)在3312、3173、2968、2859、2822、1634、1551、1489、1458、1346、1277、1246、1150、1115、1094、1069、1013、920、858、804、758、719和665cm-1
的ir波段。
[0063]
上述特征实质上与图18一致。
[0064]
本发明提供制备固态的式1的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺无定形形式的方法。
[0065]
本发明提供用于合成式1化合物的工业化量产的方法。该方法可避免色谱纯化，其为方法中最繁琐的部分。在粒径分布、纯度和残留肼水平方面，能以可重复方式获得最终产物，并且符合原料药的高标准。
[0066]
附图简述
[0067]
图1是合成各种形式的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的流程图。
[0068]
图2是实施例3所得(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯的xprd衍射图。
[0069]
图3是实施例3所得(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯的ft-ir(atr)光谱。
[0070]
图4是实施例3所得(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯的的dsc热谱图。
[0071]
图5是实施例3所得(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯的1h nmr谱(cdcl3，400mhz)。
[0072]
图6是实施例3所得(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯的
13
c nmr谱(cdcl3，100mhz)。
[0073]
图7是水合形式i的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的xprd衍射图，其是从由水与乙醇混合物获得的单晶的x射线分析计算而得。
[0074]
图8是实施例6所得水合形式i的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的ft-ir(atr)光谱。
[0075]
图9是实施例6所得水合形式i的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的dsc热谱图。
[0076]
图10是实施例8所得无水形式5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的xprd衍射图。
[0077]
图11是实施例8所得无水形式5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的ft-ir(atr)光谱。
[0078]
图12是实施例8所得无水形式5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的dsc热谱图。
[0079]
图13是实施例8所得无水形式5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的1h nmr(c6d6，700mhz)谱。
[0080]
图14是实施例8所得无水形式5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的
13
c nmr(c6d6，176mhz)谱。
[0081]
图15是水合形式ii的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的xprd衍射图，其是从由水与甲醇混合物获得的单晶的x射线分析计算而得。
[0082]
图16是实施例10所得水合形式ii的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的ft-ir(atr)光谱。
[0083]
图17是实施例10所得水合形式ii的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的dsc热谱图。
[0084]
图18是实施例11所得无定形形式5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-1h-1,2,4-三唑-3-胺的ft-ir(atr)光谱。
[0085]
本发明将由下面的实施例举例说明。
实施例
[0086]
以下实施例仅用于说明，而无意以任何方式限定本发明范围。
[0087]
所有市售溶剂、底物和试剂都未进一步纯化便使用。
[0088]
nmr谱是用agilent mercury 400mhz波谱仪和bruker avance 500与700mhz波谱仪(分别为dxr500和dxr700)记录。
[0089]
nmr谱都是在市售指定氘化溶剂中记录的。
[0090]
共振以百万分之一为单位，对于1h nmr，是相对四甲基硅烷(δ＝0.00ppm，cd3cl)或残余溶剂(cd3od的δ＝4.87ppm或c6d6的δ＝7.61ppm)给出，对于
13
cnmr，是相对溶剂(cd3od的δ＝49.00ppm，cdcl3的δ＝77.26ppm，或c6d6的δ＝128.06ppm)给出。数据报告如下：化学位移(δ)、多重性(s＝单峰，d＝双峰，t＝三重峰，m＝多重峰，bs＝宽单峰)、耦合常数(j，单位：hz)和积分。
[0091]
ft-ir光谱是用shimadzu irtracer-100的atr模式记录(硒化锌晶体)。
[0092]
t＝100(2)k下的x射线衍射实验是对优质单晶进行。用paratone-n油将晶体装设在mitegen微型底座上。以具cukα辐射的agilent technologies supernova dual source收集衍射数据。晶格参数是利用最小平方法拟合crysalis ccd软件收集的最佳设定反射角度而获得。使用crysalis red程序减少数据。利用scale3 abspack缩放算法执行的球谐函数，进行多次扫描经验吸收校正。结构测定程序是使用shelx软件包进行。
[0093]
实施例3与8所得化合物的xprd衍射图是用装配cu cukα辐射和vantec检测器的bruker d8 discover粉末x射线衍射仪记录。以连续模式分析样品，其中角度范围为2θ＝3-50
°
，步距为0.01222276
°
，步进时间为0.9秒。实施例6与10所得化合物的xprd衍射图是使用mercury软件从单晶x射线数据计算出。
[0094]
dsc热谱图是用mettler toledo的dsc 3以5℃/分钟的梯度记录。
[0095]
psd数据是用isopar g的malvern mastersizer 2000记录。
[0096]
纯度通过hplc-uv法测量。分析是用苯基-己基分析柱(kinetex phenyl-hexyl，2.1毫米(mm)
×
100毫米；2.6微米(μm))在20℃下进行，流动相流速为0.3毫升/分钟(ml/min)。流动相为溶剂a(900ml水、100ml甲醇、1g甲酸铵)与溶剂b(100ml水、900ml甲醇、1g甲酸铵)的混合物。洗脱是在梯度洗脱下进行(60％的溶剂b：0.0-2.0min，接着60％-85％的溶剂b：2.0-2.5min，然后85％的溶剂b：2.5-5.5min，然后85％-100％的溶剂b：5.5-6.0min，而后100％的溶剂b：6.0-8.0min，接着100％-60％的溶剂b：8.0-8.2min，然后60％的溶剂b：8.2-13.0min)。利用uv在225nm检测记录峰。
[0097]
通过hplc-uv法测定残留肼水平。如下制备样品：将75mg溶于1ml甲醇。加入1ml的1m hcl溶液，然后加入1ml的苯甲醛溶液(0.6g/ml，在1/1(v/v)的甲醇/水中)，涡旋混合溶液。加入1ml的正庚烷，涡旋混合二相系统并高速离心。将上层相(5μl)进样进行分析。色谱(hplc-uv)分析是用c18分析柱(lumisep c18，2.1mm
×
50mm；3μm)进行且维持在40℃，流动相流速为0.5ml/min。流动相由溶剂a(900ml水、100ml乙腈、1g甲酸铵)与溶剂b(100ml水、900ml乙腈、1g甲酸铵)的混合物组成。洗脱是在等度条件下进行(55％的溶剂b，直到完成6min的运行)。利用在305nm的uv检测记录峰。苯甲醛腙的保留时间为约2.43min。
[0098]
boc代表叔丁氧羰基保护基。
[0099]
反应产率以摩尔％表示。
[0100]
hplc纯度以曲线下方面积％表示。
[0101]
karl fischer法测得水含量和干燥减重以重量％表示。
[0102]
实施例1
[0103]
由(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉(2)制备(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基-4-(哌啶-4-基)吗啉二盐酸盐水合物(4，二盐酸盐水合物)。
[0104]
将(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉(2，13.06g)、n-boc-4-哌啶酮(3，17.30g)和氯化锌(7.89g)溶于甲醇(130ml)。分批加入氰基硼氢化钠(5.45g)，并搅拌反应过夜。将反应混合物在乙酸乙酯(240ml)和1m氢氧化钠溶液(240ml)间分配。用乙酸乙酯(240ml)萃取水层，用半饱和氯化钠溶液(240ml)洗涤合并的萃取物，然后干燥。将溶液浓缩成约200ml，加入浓盐酸(40ml)。半小时后，使用dean-stark去水器(trap)蒸馏掉水。将乙酸乙酯调换成甲醇，并浓缩成体积约100ml。向溶液中慢慢加入丙酮(300ml)，使产物沉淀。使悬浮液冷却至环境温度及老化1小时。滤出固体，用丙酮(2
×
100ml)冲洗滤饼，然后在空气中干燥，得到(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基-4-(哌啶-4-基)吗啉二盐酸盐水合物(4，二盐酸盐水合物，20.92g，两步后产率为90％，hplc纯度为99.5％)，其呈白色固体。
[0105]1h nmr(500mhz,cd3od)δ7.40
–
7.30(m,4h),4.08
–
3.98(m,1h),3.96
–
3.83(m,2h),3.82
–
3.74(m,1h),3.69(d,j＝13.3hz,1h),3.67
–
3.54(m,3h),3.29
–
3.06(m,5h),2.60
–
2.50(m,2h),2.26
–
2.11(m,2h),和1.32(d,j＝6.2hz,3h)ppm.
[0106]
13
c nmr(125mhz,cd3od)δ135.2,134.4,132.5,130.1,71.7,65.7,58.0,57.6,50.4,43.7,43.5,28.4,25.2,25.0和18.7ppm.
[0107]
实施例2
[0108]
由(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉盐酸盐(2，盐酸盐)制备(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基-4-(哌啶-4-基)吗啉二盐酸盐水合物(4，二盐酸盐水合物)。
[0109]
将(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉(2，盐酸盐，9.99g)、n-boc-4-哌啶酮(3，11.39g)和氯化锌(5.23g)溶于甲醇(80ml)中。分批加入氰基硼氢化钠(3.71g)，并搅拌反应过夜。将反应混合物在乙酸乙酯(240ml)和1m氢氧化钠溶液(240ml)间分配。用乙酸乙酯(240ml)萃取水层，用半饱和氯化钠溶液(240ml)洗涤合并萃取物，并干燥。将溶液浓缩至干，使残留物溶于在乙酸乙酯中的3m氢氯酸溶液。一小时后，将溶液浓缩至干，并在回流下溶于meoh(30ml)。向澄清液中加入丙酮(30ml)，使混合物冷却至环境温度以沉淀出产物。向悬浮液中加入第二份丙酮(20ml)，使悬浮液老化1小时。滤出固体，用丙酮(2
×
30ml)冲洗滤饼，然后在空气中干燥，得到(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基-4-(哌啶-4-基)吗啉二盐酸盐水合物(4，二盐酸盐水合物，12.51g，两步产率为86％，hplc纯度为98.9％)，其为白色固体。
[0110]1h nmr(500mhz,cd3od)δ7.40
–
7.30(m,4h),4.08
–
3.98(m,1h),3.96
–
3.83(m,2h),3.82
–
3.74(m,1h),3.69(d,j＝13.3hz,1h),3.67
–
3.54(m,3h),3.29
–
3.06(m,5h),2.60
–
2.50(m,2h),2.26
–
2.11(m,2h),和1.32(d,j＝6.2hz,3h)ppm.
[0111]
13
c nmr(125mhz,cd3od)δ135.2,134.4,132.5,130.1,71.7,65.7,58.0,57.6,50.4,43.7,43.5,28.4,25.2,25.0,和18.7ppm.
[0112]
实施例3
[0113]
由(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基-4-(哌啶-4-基)吗啉二盐酸盐水合物(4，二盐
酸盐水合物)制备(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯(6)。
[0114]
使(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基-4-(哌啶-4-基)吗啉二盐酸盐水合物(4，二盐酸盐水合物，5.82g)和n-氰基二硫代亚氨碳酸二甲酯(2.34g)悬浮于乙醇(60ml)。在悬浮液中加入三乙胺(6.1ml)，及加热反应混合物达40℃。加热后，悬浮液变成澄清液。3小时后，使溶液冷却至环境温度以沉淀出产物。使悬浮液老化，并滤出固体。用乙醇(5ml)冲洗滤饼，然后干燥，得到(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯(6，5.48g，产率为92％，hplc纯度为99.2％)，其为白色蓬松固体。
[0115]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.28
–
7.22(m,2h),7.13
–
7.08(m,2h),4.45
–
4.34(m,2h),3.68
–
3.54(m,2h),3.46(dd,j＝11.5,2.7hz,1h),3.32(dd,j＝12.1,2.8hz,2h),3.01(dd,j＝12.9,10.8hz,1h),2.88
–
2.77(m,2h),2.76(s,3h),2.71
–
2.62(m,2h),2.36(dd,j＝11.8,10.3hz,1h),2.07
–
1.94(m,2h),1.68
–
1.47(m,2h),和1.21(d,j＝6.2hz,3h)ppm.
[0116]
13
c nmr(100mhz,cdcl3)δ168.7,138.3,132.0,130.8,128.8,115.4,72.5,67.8,55.8,55.4,50.0,46.9,30.3,29.8,27.5,19.3,和16.4ppm.
[0117]
ft-ir(atr):2959,2926,2866,2820,2795,2167,1541,1491,1450,1431,1383,1358,1273,1215,1151,1117,1096,1070,1043,1013,988,930,862,833,806,714,665,和638cm-1
.
[0118]
实施例4
[0119]
制备4-氧代哌啶n-氰基硫代亚氨代氨基甲酸甲酯(14)。
[0120]
将n-氰基二硫代亚氨碳酸二甲酯(15.02g)和4,4-二羟基哌啶盐酸盐(19.72g)溶于2-丙醇(60ml)与水(90ml)的混合物中。向溶液中加入三乙胺(17.3ml)。2小时后，用6m盐酸溶液(30ml)来淬灭反应，并用ch2cl2萃取(4
×
75ml)。用水(75ml)洗涤合并的有机层，加入2-丙醇(90ml)。在大气压下将溶液浓缩成体积为90ml，然后向沸腾溶液中分批加入异丙醚(90ml)，维持回流。使产物沉淀，使悬浮液冷却至环境温度。使悬浮液老化，并滤出固体。用2-丙醇(20ml)与异丙醚(20ml)的混合物冲洗滤饼，然后干燥，得到4-氧代哌啶n-氰基硫代亚氨代氨基甲酸甲酯(14，17.94g，产率为88％)，其为灰白色固体。
[0121]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ4.11(t,j＝6.4hz,4h),2.85(s,3h),2.60(t,j＝6.3hz,4h)ppm.
[0122]
13
c nmr(100mhz,cdcl3)δ204.8,169.7,114.5,46.4,40.2,16.4ppm.
[0123]
实施例5
[0124]
直接由(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉(2)制备(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯(6)。
[0125]
使(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉(2，5.23g)、4-氧代哌啶n-氰基硫代亚氨代氨基甲酸甲酯(14，6.86g)和氯化锌(3.16g)悬浮于乙醇(52ml)中。使略微混浊的溶液冷却至0℃，分批加入氰基硼氢化钠(2.19g)。在环境温度下搅拌悬浮液，计24小时。加入1m氢氧化钠溶液(60ml)以淬灭反应，并用二氯甲烷(60ml，然后2
×
30ml)萃取。用水(30ml)洗涤合并的有机层，将溶剂调换成乙醇。调换期间，产物沉淀。使悬浮液冷却至环境温度，并滤出固体。用乙醇(18ml)冲洗滤饼，然后干燥，得到(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯(6，7.80g，产率为83％，hplc纯度为99.5％)，其为灰
白色固体。
[0126]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.28
–
7.22(m,2h),7.13
–
7.08(m,2h),4.45
–
4.34(m,2h),3.68
–
3.54(m,2h),3.46(dd,j＝11.5,2.7hz,1h),3.32(dd,j＝12.1,2.8hz,2h),3.01(dd,j＝12.9,10.8hz,1h),2.88
–
2.77(m,2h),2.76(s,3h),2.71
–
2.62(m,2h),2.36(dd,j＝11.8,10.3hz,1h),2.07
–
1.94(m,2h),1.68
–
1.47(m,2h),和1.21(d,j＝6.2hz,3h)ppm.
[0127]
13
c nmr(100mhz,cdcl3)δ168.7,138.3,132.0,130.8,128.8,115.4,72.5,67.8,55.8,55.4,50.0,46.9,30.3,29.8,27.5,19.3,和16.4ppm.
[0128]
ft-ir(atr):2959,2926,2866,2820,2795,2167,1541,1491,1450,1431,1383,1358,1273,1215,1151,1117,1096,1070,1043,1013,988,930,862,833,806,714,665,和638cm-1
.
[0129]
实施例6
[0130]
由(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基-4-(哌啶-4-基)吗啉二盐酸盐水合物(4，二盐酸盐水合物)制备5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺水合形式i(1，水合形式i)。
[0131]
使(2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基-4-(哌啶-4-基)吗啉二盐酸盐水合物(4，二盐酸盐水合物，9.03g)和n-氰基二硫代亚氨碳酸二甲酯(3.80g)悬浮于1-丙醇(72ml)。加入三乙胺(9.9ml)，使澄清液回流3小时。加入肼一水合物(3.5ml)，使反应在60℃下再额外进行2小时。将水(144ml)加至热溶液中，使之冷却至环境温度，接种结晶物质，并放入冰箱，计24小时。滤出沉淀物，用水(2
×
40ml)冲洗滤饼，然后在空气中干燥，得到粗产物(14.3g)，其为白色固体的水合形式i的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺(1，水合形式i，7.06g，干燥减重25％，干基产率为80％，hplc纯度为99.4％)。
[0132]
所用晶种结晶物质是从粗反应混合物获得。将反应混合物在减压下浓缩至干，利用硅胶色谱纯化残留物(etoac：meoh＝1：0
→
200：1
→
100：1
→
50：1
→
20：1
→
10：1)。合并含有产物的级分(fractions)，在减压下浓缩至干。在回流下使残留物溶于乙腈(10ml/1g产物)。使溶液冷却至环境温度以沉淀出产物。滤出固体并用乙腈冲洗，得到晶种。
[0133]1h nmr(500mhz,cd3od)δ7.29
–
7.25(m,2h),7.21
–
7.16(m,2h),3.67
–
3.54(m,2h),3.47(d,j＝11.5hz,1h),3.01
–
2.72(m,6h),2.72
–
2.63(m,1h),2.35(dd,j＝12.0,10.5hz,1h),2.10
–
1.95(m,2h),1.58
–
1.39(m,2h),和1.19(d,j＝6.2hz,3h)ppm.
[0134]
13
c nmr(125mhz,cd3od)δ140.1,132.9,132.0,129.6,73.7,68.5,57.6,56.7,50.9,46.7,30.4,29.9,28.1,和19.4ppm.
[0135]
ft-ir(atr):3318,3206,2963,2934,2859,2833,1636,1589,1553,1489,1462,1404,1346,1314,1277,1250,1151,117,1092,1069,1013,917,868,829,800,764,725,和673cm-1
.
[0136]
实施例7
[0137]
由(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯(6)制备5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺水合形式i(1，水合形式i)。
[0138]
使(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸
甲酯(6，7.51g)悬浮于乙醇(37ml)，加入水合肼(2.67ml)。加热悬浮液达60℃，以得澄清液。2小时后，加入水(113ml)，冷却至环境温度后，产物即沉淀。滤出固体，用水(37ml)冲洗滤饼，然后干燥，得到水合形式i的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺(1，水合形式i，15.82g，干燥减重36％，产率为133％，hplc纯度为99.7％)，其呈白色固体。
[0139]1h nmr(500mhz,cd3od)δ7.29
–
7.25(m,2h),7.21
–
7.16(m,2h),3.67
–
3.54(m,2h),3.47(d,j＝11.5hz,1h),3.01
–
2.72(m,6h),2.72
–
2.63(m,1h),2.35(dd,j＝12.0,10.5hz,1h),2.10
–
1.95(m,2h),1.58
–
1.39(m,2h),和1.19(d,j＝6.2hz,3h)ppm.
[0140]
13
c nmr(125mhz,cd3od)δ140.1,132.9,132.0,129.6,73.7,68.5,57.6,56.7,50.9,46.7,30.4,29.9,28.1,和19.4ppm.
[0141]
ft-ir(atr):3318,3206,2963,2934,2859,2833,1636,1589,1553,1489,1462,1404,1346,1314,1277,1250,1151,117,1092,1069,1013,917,868,829,800,764,725,和673cm-1
.
[0142]
实施例8
[0143]
由5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺水合形式i(1，水合形式i)制备5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺无水形式(1，无水形式)。
[0144]
使5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺水合形式i(1，水合形式i，按干基计为6.62g)悬浮于乙酸乙酯(66ml)，加热悬浮液至回流。加热后，悬浮液变成澄清液。使用dean-stark去水器蒸馏掉水，直到达沸点76℃。蒸馏期间，产物沉淀。使悬浮液冷却至环境温度，滤出固体。用乙酸乙酯(13ml)冲洗滤饼，然后干燥，得到无水形式的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺(1，无水形式，6.38g，产率为83％，hplc纯度》99.9％)，其为白色晶体。
[0145]1h nmr(700mhz,c6d6/cd3od)δ7.13(d,j＝8.2hz,2h),6.89(d,j＝8.2hz,2h),3.99(br s,2h),3.66(br s,3h),3.56(d,j＝11.4hz,1h),3.54
–
3.46(m,1h),3.37(d,j＝11.4hz,1h),2.90
–
2.80(m,3h),2.68(d,j＝10.4hz,1h),2.40(d,j＝11.9hz,2h),2.32
–
2.25(m,1h),2.05(t,j＝11.2hz,1h),1.81(d,j＝12.5hz,1h),1.65(d,j＝12.5hz,1h),1.54
–
1.46(m,1h),1.46
–
1.37(m,1h),和1.11(d,j＝6.2hz,3h)ppm.
[0146]
13
c nmr(175mhz,c6d6)δ139.0,132.1,131.2,129.0,128.1,72.6,67.8,56.5,55.7,50.1,48.9,45.8,45.7,29.7,29.2,27.7,和19.3ppm.
[0147]
ft-ir(atr):3252,3198,3119,2955,2924,2857,2793,1666,1599,1543,1483,1456,1404,1337,1283,1248,1136,1117,1094,1072,1053,1013,908,858,795,和718cm-1
.
[0148]
实施例9
[0149]
由(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯(6)制备5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺无水形式(1，无水形式)。
[0150]
使(z)-4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)-n-氰基哌啶-1-硫代甲亚氨酸甲酯(6，5.05g)悬浮于乙腈(50ml)中，加入水合肼(1.78ml)。加热悬浮液达60℃，以得澄清液。2小时后，使溶液冷却至环境温度，产物即沉淀。滤出固体，用乙腈(12.5ml)冲洗滤饼，得
无水形式5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺(1，无水形式，4.39g，产率为90％，hplc纯度为98.7％)，其为白色晶体。
[0151]1h nmr(700mhz,c6d6/cd3od)δ7.13(d,j＝8.2hz,2h),6.89(d,j＝8.2hz,2h),3.99(br s,2h),3.66(br s,3h),3.56(d,j＝11.4hz,1h),3.54
–
3.46(m,1h),3.37(d,j＝11.4hz,1h),2.90
–
2.80(m,3h),2.68(d,j＝10.4hz,1h),2.40(d,j＝11.9hz,2h),2.32
–
2.25(m,1h),2.05(t,j＝11.2hz,1h),1.81(d,j＝12.5hz,1h),1.65(d,j＝12.5hz,1h),1.54
–
1.46(m,1h),1.46
–
1.37(m,1h),和1.11(d,j＝6.2hz,3h)ppm。
[0152]
13
c nmr(175mhz,c6d6)δ139.0,132.1,131.2,129.0,128.1,72.6,67.8,56.5,55.7,50.1,48.9,45.8,45.7,29.7,29.2,27.7,和19.3ppm。
[0153]
ft-ir(atr):3252,3198,3119,2955,2924,2857,2793,1666,1599,1543,1483,1456,1404,1337,1283,1248,1136,1117,1094,1072,1053,1013,908,858,795,和718cm-1
。
[0154]
实施例10
[0155]
由5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺无水形式(1，无水形式)制备5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺水合形式ii(1，水合形式ii)。
[0156]
在回流下使5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺无水形式(1，无水形式，5.03g)溶于甲醇(20ml)。慢慢加入水(30ml)，维持回流。加入后，产物沉淀。使悬浮液冷却至环境温度，并老化1小时。滤出固体，用甲醇与水混合物(25ml，2：3体积/体积)冲洗滤饼，然后在空气中干燥过夜，得到水合形式ii的5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺(1，水合形式ii，5.44g，karl-fischer测得水含量为8.2％，干基产率为99％，hplc纯度》99.9％)，其为白色固体。
[0157]
实施例11
[0158]
由5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺无水形式(1，无水形式)制备5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺无定形形式(1，无定形形式)。
[0159]
把覆盖有5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺无水形式(1，无水形式，5.02g)的培养皿放到加热板上并加热达200℃。当物质熔化时，使培养皿冷却至环境温度。在研钵中研磨玻璃状物质，得到5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺无定形形式(1，无定形形式，4.82g，产率为96％，hplc纯度》99.9％)，其呈白色固体。
[0160]1h nmr(700mhz,c6d6/cd3od)δ7.13(d,j＝8.2hz,2h),6.89(d,j＝8.2hz,2h),3.99(br s,2h),3.66(br s,3h),3.56(d,j＝11.4hz,1h),3.54
–
3.46(m,1h),3.37(d,j＝11.4hz,1h),2.90
–
2.80(m,3h),2.68(d,j＝10.4hz,1h),2.40(d,j＝11.9hz,2h),2.32
–
2.25(m,1h),2.05(t,j＝11.2hz,1h),1.81(d,j＝12.5hz,1h),1.65(d,j＝12.5hz,1h),1.54
–
1.46(m,1h),1.46
–
1.37(m,1h),和1.11(d,j＝6.2hz,3h)ppm.
[0161]
13
c nmr(175mhz,c6d6)δ139.0,132.1,131.2,129.0,128.1,72.6,67.8,56.5,55.7,50.1,48.9,45.8,45.7,29.7,29.2,27.7,和19.3ppm.
[0162]
ft-ir(atr):3312,3173,2968,2859,2822,1634,1551,1489,1458,1346,1277,
1246,1150,1115,1094,1069,1013,920,858,804,758,719,和665cm-1
.
[0163]
实施例12
[0164]
由5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺水合形式i或ii(1，水合形式i或ii)制备5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺无定形形式(1，无定形形式)。
[0165]
把覆盖有5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺水合形式i或ii(1，水合形式i或ii，5.01g)的培养皿放到加热板上并加热达125℃。当物质熔化时，使培养皿冷却至环境温度。在研钵中研磨玻璃状物质，得到5-(4-((2s,5s)-5-(4-氯苄基)-2-甲基吗啉代)哌啶-1-基)-4h-1,2,4-三唑-3-胺无定形形式(起始为水合形式i：1，无定形形式，4.49g，产率为90％，hplc纯度》99.99％；起始为水合形式ii：1，无定形形式，4.41g，产率为88％，hplc纯度》99.9％)，其为白色固体。
[0166]1h nmr(700mhz,c6d6/cd3od)δ7.13(d,j＝8.2hz,2h),6.89(d,j＝8.2hz,2h),3.99(br s,2h),3.66(br s,3h),3.56(d,j＝11.4hz,1h),3.54
–
3.46(m,1h),3.37(d,j＝11.4hz,1h),2.90
–
2.80(m,3h),2.68(d,j＝10.4hz,1h),2.40(d,j＝11.9hz,2h),2.32
–
2.25(m,1h),2.05(t,j＝11.2hz,1h),1.81(d,j＝12.5hz,1h),1.65(d,j＝12.5hz,1h),1.54
–
1.46(m,1h),1.46
–
1.37(m,1h),和1.11(d,j＝6.2hz,3h)ppm.
[0167]
13
c nmr(175mhz,c6d6)δ139.0,132.1,131.2,129.0,128.1,72.6,67.8,56.5,55.7,50.1,48.9,45.8,45.7,29.7,29.2,27.7,和19.3ppm.
[0168]
ft-ir(atr):3312,3173,2968,2859,2822,1634,1551,1489,1458,1346,1277,1246,1150,1115,1094,1069,1013,920,858,804,758,719,和665cm-1