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一种YH66_04470基因突变的重组菌及其在制备精氨酸中的应用的制作方法

2022-04-30 09:05:48 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种yh66_04470突变体,是将yh66_04470蛋白质第215位氨基酸残基由苏氨酸突变为其他氨基酸残基得到的蛋白质;所述yh66_04470蛋白质为如下a1)-a3)中的任一种:a1)seq id no.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;a2)将a1)所示的氨基酸序列经过除第215位氨基酸残基以外的一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与细菌产精氨酸相关的蛋白质;a3)来源于细菌且与a1)或a2)具有95%以上同一性且与细菌产精氨酸相关的蛋白质。2.根据权利要求1所述的yh66_04470突变体,其特征在于:所述yh66_04470突变体是将yh66_04470蛋白质第215位氨基酸残基由苏氨酸突变为异亮氨酸得到的蛋白质。3.与权利要求1所述yh66_04470突变体相关的生物材料,所述生物材料为如下b1)至b4)中的任一种:b1)编码权利要求1或2所述yh66_04470突变体的核酸分子;b2)含有b1)所述核酸分子的表达盒;b3)含有b1)所述核酸分子的重组载体、或含有b2)所述表达盒的重组载体;b4)含有b1)所述核酸分子的重组微生物、或含有b2)所述表达盒的重组微生物、或含有b3)所述重组载体的重组微生物。4.根据权利要求3所述的生物材料,其特征在于:所述核酸分子为如下c1)或c2)中的任一种:c1)核苷酸序列为seq id no.3的dna分子;c2)将seq id no.3所示的核苷酸序列经过修饰和/或一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加得到的与c1)所示的dna分子具有90%以上的同一性,且具有相同功能的dna分子。5.yh66_04470蛋白质或与yh66_04470蛋白质相关的生物材料或权利要求1所述的yh66_04470突变体或权利要求2所述的生物材料在如下x1)至x4)中任一种中的应用:x1)调控细菌精氨酸产量;x2)构建产精氨酸工程菌;x3)制备精氨酸;所述yh66_04470蛋白质为权利要求1中所述yh66_04470蛋白质;与yh66_04470蛋白质相关的生物材料为如下d1)至d4)中的任一种:d1)编码所述yh66_04470蛋白质的核酸分子;d2)含有d1)所述核酸分子的表达盒;d3)含有d1)所述核酸分子的重组载体、或含有d2)所述表达盒的重组载体;d4)含有d1)所述核酸分子的重组微生物、或含有d2)所述表达盒的重组微生物、或含有d3)所述重组载体的重组微生物。6.提高yh66_04470蛋白质或yh66_04470突变体含量和/或活性的物质或提高yh66_04470基因或yh66_04470突变体基因表达量的物质在如下y1)至y4)中任一种中的应用:y1)提高细菌精氨酸产量;y2)构建产精氨酸工程菌;y3)制备精氨酸;
所述yh66_04470蛋白质为权利要求1中所述yh66_04470蛋白质;所述yh66_04470突变体为权利要求1所述yh66_04470突变体;所述yh66_04470基因为编码权利要求1中所述yh66_04470蛋白质的基因;所述yh66_04470突变体基因为编码权利要求1所述yh66_04470突变体的基因。7.一种提高细菌精氨酸产量的方法,为如下m1)或m2):所述m1)包括如下步骤:将细菌基因组中的yh66_04470基因替换为yh66_04470突变体基因,实现细菌精氨酸产量的提高;所述m2)包括如下步骤:提高细菌中yh66_04470蛋白质或yh66_04470突变体含量和/或活性,或提高细菌中yh66_04470基因或yh66_04470突变体基因表达量,实现细菌精氨酸产量的提高;所述yh66_04470蛋白质为权利要求1中所述yh66_04470蛋白质;所述yh66_04470突变体为权利要求1所述yh66_04470突变体;所述yh66_04470基因为编码权利要求1中所述yh66_04470蛋白质的基因;所述yh66_04470突变体基因为编码权利要求1所述yh66_04470突变体的基因。8.一种产精氨酸工程菌的构建方法,为如下n1)或n2):所述n1)包括如下步骤:将细菌基因组中的yh66_04470基因替换为yh66_04470突变体基因,得到所述产精氨酸工程菌;所述n2)包括如下步骤:提高细菌中yh66_04470蛋白质或yh66_04470突变体含量和/或活性,或提高细菌中yh66_04470基因或yh66_04470突变体基因表达量,得到所述产精氨酸工程菌;所述yh66_04470蛋白质为权利要求1中所述yh66_04470蛋白质;所述yh66_04470突变体为权利要求1所述yh66_04470突变体;所述yh66_04470基因为编码权利要求1中所述yh66_04470蛋白质的基因;所述yh66_04470突变体基因为编码权利要求1所述yh66_04470突变体的基因。9.按照权利要求8所述方法构建得到的产精氨酸工程菌在制备精氨酸中的应用。10.一种制备精氨酸的方法,包括如下步骤:发酵培养按照权利要求8所述方法构建得到的产精氨酸工程菌,得到所述精氨酸。

技术总结
本发明公开了一种YH66_04470基因突变的重组菌及其在制备精氨酸中的应用。本发明公开的YH66_04470突变体是将YH66_04470蛋白质第215位氨基酸残基由苏氨酸突变为异亮氨酸得到的蛋白质。本发明首先通过对YH66_04470基因进行单点突变得到YH66_04470


技术研发人员:魏爱英 赵春光 孟刚 田斌 贾慧萍 付丽霞
受保护的技术使用者:宁夏伊品生物科技股份有限公司
技术研发日:2021.12.30
技术公布日:2022/4/29
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