一种山竹有效部位的提取方法及其应用与流程

1.本发明属于天然产物提取和化妆品领域，具体涉及山竹有效部位的提取方法及其作为天然防晒剂用于化妆品生产。
技术背景
2.随着人们生活水平的不断提高以及对紫外线过量照射危害的认识逐渐增强，特别是生活在高原地区的人们受到的紫外线照射更多，人们主要以防晒类化妆品抵御紫外线的伤害，防晒类化妆品越来越受到重视，成为化妆品研发的热点。
3.目前化妆品里使用的防晒剂主要有两种：物理防晒剂和化学防晒剂。物理防晒剂主要以二氧化钛和氧化锌为主，比如二氧化钛的强抗紫外线能力是由于其具有高折光性和高光活性，其抗紫外线能力及其机理与其粒径有关，当粒径较大时，对紫外线的阻隔是以反射、散射为主，对中波区和长波区紫外线均有作用，防晒机理是简单的遮盖，属一般的物理防晒，防晒能力较弱；随着粒径的减小，光线能透过二氧化钛的粒子面，对长波区紫外线的反射、散射不明显，而对中波区紫外线的吸收明显增强，其防晒机理是吸收紫外线，主要吸收中波区紫外线。由此可见，二氧化钛对不同波长紫外线的防晒机理不一样，对长波区紫外线的阻隔以散射为主，对中波区紫外线的阻隔以吸收为主。化学防晒剂是通过有机合成制备的小分子化合物，其特殊的分子结构能吸收紫外光的能量并进行转化，一般是以具有双键、羰基和芳香环等共轭结构的有机化合物为主，比如二苯酮类和肉桂酸酯类化合物。但是物理类防晒剂覆盖在皮肤表面容易堵塞毛孔，影响皮肤的新陈代谢，引起皮肤过敏和病变。化学防晒剂的光化学稳定性差，在紫外线的照射下化学结构发生改变，生成有毒有害的化学物质，对皮肤造成伤害，特别是二氧化钛和氧化锌等物理防晒剂与化学防晒剂联合使用会加速化学防晒剂的降解，生成有害物质损伤皮肤。
4.为克服物理防晒剂和化学防晒剂的诸多缺点，使用植物提取物作为防晒剂已经成为高端化妆品的发展趋势，安全和有效是其独特优势。
5.山竹也叫莽吉柿，是一种热带水果，东南亚国家和我国的福建、广东、广西、云南等地均有种植，我们通过研究发现山竹果壳里的脂溶性有效部位如氧杂蒽酮类化合物：α-倒捻子素、β-倒捻子素、γ-倒捻子素等因其独特的共轭结构对紫外线的uvb波段具有较强的吸收能力，有望作为防晒剂用于化妆品制备。
6.α-倒捻子素分子结构如下：
[0007][0008]
β-倒捻子素分子结构如下：
[0009][0010]
γ-倒捻子素分子结构如下：
[0011]


技术实现要素：

[0012]
本发明的目的在于提供一种山竹有效部位的提取方法以及作为防晒剂用于化妆品制备，该技术具有制备工艺简单、操作方便等优点，并且适合今后的工业化生产。
[0013]
本发明所述的山竹有效部位的提取方法，包括以下操作步骤：
[0014]
(1)将山竹果壳粉碎用正己烷提取；
[0015]
(2)提取液减压浓缩至干，加无水乙醇反复减压浓缩至干，粉碎后得山竹皮脂溶性有效部位。
[0016]
其中，步骤(1)所述的溶剂选自正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯、二甲苯、乙醚中的一种或多种溶剂。；
[0017]
其中，步骤(1)所述的提取温度为室温至每种溶剂的沸点；
[0018]
其中，步骤(2)所述的加无水乙醇反复减压浓缩至干，溶剂残留符合规定；
[0019]
其中，山竹果壳脂溶性有效部位，其主要化学成分为α-倒捻子素、β-倒捻子素、γ-倒捻子素等氧杂蒽酮类化合物。
[0020]
优选的，本发明所述的山竹有效部位的提取方法，包括以下操作步骤：
[0021]
将干燥的山竹果壳粉碎，加入5-10倍量正己烷，室温搅拌提取2-4次，合并提取液减压浓缩干，加入总量为0.1-2倍量的无水乙醇溶解后减压浓缩干，如此操作2-4次，即得。
[0022]
最优选的，本发明所述的山竹有效部位的提取方法，包括以下操作步骤：
[0023]
将干燥的山竹果壳100公斤粉碎，每次加入8倍量正己烷，室温搅拌提取三次，合并提取液减压浓缩干，然后每次加入20公斤无水乙醇溶解后减压浓缩干以除掉残留溶剂，如此操作三次得山竹果壳提取物6.2公斤，经检测α-倒捻子素含量64.5％，β-倒捻子素含量2.8％，γ-倒捻子素含量2.5％；溶剂残留经检测，正己烷未检出，乙醇0.12％。
[0024]
为了检测山竹果壳提取物中α-倒捻子素、β-倒捻子素、γ-倒捻子素的含量，本发明提供了检测方法,检测过程如下：
[0025]
1.所需仪器和设备
[0026]
agilent1200高效液相色谱仪(配有：四元泵、柱温箱、dad检测器)；梅特勒-托利多ms205du十万分之一电子天平；艾科浦aml-0502-m型纯水制备机；kq-250db型超声波脱气
机。
[0027]
2.所需试剂
[0028]
α-倒捻子素对照品(含量≥98％，购自四川省维克奇生物科技有限公司，批号：210420)；β-倒捻子素对照品(含量≥98％，购自四川省维克奇生物科技有限公司，批号：210312)；γ-倒捻子素(含量≥98％，购自四川省维克奇生物科技有限公司，批号：210326)；甲醇(色谱纯，批号：210106，天津市科密欧化学试剂有限公司)；水为超纯水，自制。
[0029]
3.溶液配制
[0030]
标准溶液：分别精密称取一定质量的α-倒捻子素、β-倒捻子素、γ-倒捻子素对照品置于容量瓶中，以甲醇超声溶解并定容，摇匀，即得对照品溶液。
[0031]
样品溶液：精密称取山竹果壳提取物于容量瓶中，以甲醇超声溶解并定容，配制成一定浓度的溶液，使之浓度在线性范围之内。
[0032]
4.测定步骤
[0033]
①
高效液相色谱条件
[0034]
色谱柱：agilent zorbax eclipse plus c18(4.6mm
×
100mm，3.5μm)；
[0035]
流动相：甲醇：水＝88:12；流速：1.0ml/min；检测波长：317nm；柱温：30℃。
[0036]
本发明的另一个目的在于提供了一种山竹果壳提取物中溶剂残留的检测方法，检测过程如下：
[0037]
1.所需仪器和设备
[0038]
agilent7697a气相色谱仪；顶空自动进样器；梅特勒-托利多ms205du十万分之一电子天平；
[0039]
2.所需试剂
[0040]
邻二氯苯甲苯(色谱纯，批号：210306；天津市科密欧化学试剂有限公司)；(色谱纯，批号：210312；天津市科密欧化学试剂有限公司)；乙醇(色谱纯，批号：210409；天津市科密欧化学试剂有限公司)；正己烷(色谱纯，批号：210311；天津市科密欧化学试剂有限公司)；二氯甲烷(色谱纯，批号：210102；天津市科密欧化学试剂有限公司)；乙酸乙酯(色谱纯，批号：210105；天津市科密欧化学试剂有限公司)；甲苯(色谱纯，批号：210108；天津市科密欧化学试剂有限公司)；邻二甲苯(色谱纯，批号：210412；天津市科密欧化学试剂有限公司)；间二甲苯(色谱纯，批号：210302；天津市科密欧化学试剂有限公司)；对二甲苯(色谱纯，批号：210409；天津市科密欧化学试剂有限公司)；
[0041]
3.测定方法
[0042]
取本品100mg，精密称定，置20ml顶空瓶中，精密加入邻二氯苯，密封，摇匀，作为供试品，另取乙醇、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯、邻二甲苯、间二甲苯、对二甲苯、乙醚，精密称定，用甲苯定量稀释成混合溶液，精密量取10ml置顶空瓶中密封，作为对照品溶液，照溶剂残留测定法(中国药典2015年版四部通则0861第二法)测定，以聚乙二醇(peg-20m)(或极性相近)为固定液的毛细管色谱柱；初始柱温为40℃,保持2分钟，以每分钟5℃速率升至100℃，保持2分钟，然后以每分钟50℃速率升至200℃，保持5分钟；进样口温度为200℃，检测器温度为250℃，顶空瓶平衡温度为100℃，平衡时间30分钟；取对照品溶液顶空进样，记录色谱图，按外标法计算。
[0043]
本发明的提取方法相对于现有的提取方法，在提取溶剂上进行了改进。之前的提
取方法是以化学防晒剂甲氧基肉桂酸乙基己酯作为溶剂，只关注提取α-倒捻子素，本发明考虑到山竹果壳的有效部位是α-倒捻子素、β-倒捻子素、γ-倒捻子素等氧杂蒽酮天然有机化合物，都具有防晒作用，分子极性偏弱，宜选用中极性至弱极性的常用有机溶剂提取，如正己烷、二氯甲烷、甲苯、二甲苯、乙醚等，这类溶剂提取的有效部位杂质少，α-倒捻子素、β-倒捻子素、γ-倒捻子素等氧杂蒽酮类化合物含量高，防晒效果好。
具体实施方式
[0044]
通过以下具体的实例对本发明作进一步的解释和说明，但不作为本发明的限制使用。
[0045]
实施例1
[0046]
将干燥的山竹果壳100公斤粉碎，每次加入8倍量正己烷，室温搅拌提取三次，合并提取液减压浓缩干，然后每次加入20公斤无水乙醇溶解后减压浓缩干以除掉残留溶剂，如此操作三次得山竹果壳提取物6.2公斤，经检测α-倒捻子素含量64.5％，β-倒捻子素含量2.8％，γ-倒捻子素含量2.5％；溶剂残留经检测，正己烷未检出，乙醇0.12％。
[0047]
实施例2
[0048]
将干燥的山竹果壳100公斤粉碎，每次加入10倍量二氯甲烷，加热回流提取三次，合并提取液减压浓缩干，然后每次加入20公斤无水乙醇溶解后减压浓缩干以除掉残留溶剂，如此操作三次得山竹果壳提取物6.7公斤，经检测α-倒捻子素含量63.6％，β-倒捻子素含量2.6％，γ-倒捻子素含量2.4％；溶剂残留经检测，二氯甲烷未检出，乙醇0.10％。
[0049]
实施例3
[0050]
将干燥的山竹果壳100公斤粉碎，每次加入8倍量甲苯，加热回流提取三次，合并提取液减压浓缩干，然后每次加入20公斤无水乙醇溶解后减压浓缩干以除掉残留溶剂，如此操作三次得山竹果壳提取物8.9公斤，经检测α-倒捻子素含量58.4％，β-倒捻子素含量2.4％，γ-倒捻子素含量2.3％；溶剂残留经检测，甲苯未检出，乙醇0.12％。
[0051]
试验例1、防晒效果测试
[0052]
依据防晒化妆品类标准qb/t2410-1998防晒效果评价方法，使用紫外分光光度计作为紫外光源，测定山竹提取物在uvb区(280-320nm)的紫外吸光度。具体为：将3m医用透气胶带裁剪为4cm
×
1cm大小的条形，然后准确称取6mg山竹果壳提取物用0.5ml无水乙醇溶解后将样品于胶带上防止流挂，涂敷均匀后放置30min后贴在比色皿透光面一侧进行检测，通过吸光度的大小确定其防晒能力。
[0053][0054]
数据显示山竹提取物能有效吸收紫外线照射，适合广大人群特别是户外工作者使用，防护夏日阳光照射，防止对皮肤造成损害。
[0055]
现有的山竹果壳提取物是用甲氧基肉桂酸乙基己酯作为溶剂只提取了α-倒捻子素，并以此混合物作为防晒剂，忽略了β-倒捻子素和γ-倒捻子素的防晒剂作用，由于是混合物且作为提取溶剂的甲氧基肉桂酸乙基己酯本身就是化学防晒剂，所以此产品不是真正的天然防晒剂。
[0056]
本发明是以常用有机溶剂提取山竹果壳中的有效部位，此有效部位包括α-倒捻子素、β-倒捻子素、γ-倒捻子素等氧杂蒽酮类天然有机化合物，是真正的天然防晒剂，不但有较强的防晒作用而且对人体皮肤不造成损害，适合广大人群使用。
[0057]
试验例2、溶剂的筛选
[0058]
本发明对不同极性的提取溶剂进行了筛选，结果如下：
[0059][0060]
通过以上数据发现弱极性至中极性溶剂提取的有效部位中α-倒捻子素、β-倒捻子素、γ-倒捻子素含量高，有效成分含量高防晒效果才更好。选择正己烷为溶剂，有效成分的含量最高。