氨糖复合功能性片剂的制备方法与流程

1.本发明是发明申请(202011599893.8)的分案申请。本发明属于食品技术领域，具体而言，涉及一种氨糖复合功能性片剂的制备方法。


背景技术：

2.骨关节病作为一种顽固性疾病正折磨着无数的患者，预防和治疗骨关节病刻不容缓。氨基葡萄糖和硫酸软骨素作为一种来源广泛的膳食补充剂，对于中老年人群和一些特殊人群的骨关节病具有预防和治疗作用。氨基葡萄糖能降低促炎症转录因子的浓度，增强软骨特定部位的韧性，并且通过抑制水解酶的活性和减少脂质、蛋白质的氧化来阻止胶原蛋白变性。氨基葡萄糖通过刺激黏多糖的生化合成及增加骨骼钙质的摄取量来提高骨与软骨组织的代谢功能与营养吸收，亦能改善及增强滑膜液的黏稠度，同时氨基葡萄糖也是蛋白多糖合成的基本物质，可以特异性地作用于关节软骨，恢复软骨细胞正常的代谢功能，刺激软骨细胞产生具有正常多聚体结构的蛋白多糖，亦可抑制损伤软骨的酶如胶原蛋白酶和磷脂酶a2的活性。
3.硫酸软骨素通过抑制丝裂原活化蛋白激酶p38mapk和信号调节激酶erk1/2的活性，降低核转录因子kappa b(nuclear factor-kappa b，nf-κb)的核易位，减少蛋白水解酶(基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3，mmp-3)、mmp-9、mmp-13、cathepsin b等)、炎症诱导酶(磷脂酶a2、环氧合酶-2、一氧化氮合成酶-2)以及促炎细胞因子(白细胞介素-1β)的合成来发挥作用。氨基葡萄糖和硫酸软骨素合用能促进人关节软骨细胞中ⅱ型胶原蛋白的合成，减少软骨细胞死亡，保持软骨细胞外基质的合成代谢与分解代谢的平衡。氨基葡萄糖和硫酸软骨素正是通过上述一系列作用机理来保护关节软骨细胞。
4.骨关节病的预防应该重在日常，如果能借助一日三餐的时机和食品的媒介，把氨基葡萄糖和硫酸软骨素搭配制成食品，便能达到强健骨骼和预防骨关节病的目的，氨基葡萄糖硫酸软骨素以食品的形式出现在餐桌上和日常生活中被人每日食用，不仅能满足人们的日常营养需求，更重要的是对于预防骨关节病发挥着举足轻重的作用，可达到“药食兼用，药食同疗”的目的。
5.氨基葡萄糖作为一种药物存在有许多缺点，如氨基葡萄糖高度引湿、其氨基极易氧化变色，因此氨基葡萄糖的制剂要求较高，如片剂需包衣、装于安瓿中、胶囊剂应对胶囊壳进行密封处理、并要求避湿和氧气。此外，市售的大多氨糖产品有效药物含量较少，稳定性较差，生物利用度低，目前国内外市场上针对骨关节炎或骨质损伤或骨质疏松的产品种类繁多，质量参差不齐，市场上现有的膳食补充剂都或多或少的存在着营养素成分单一、组成、搭配比例不合理或使用剂量不合理等问题，导致各种功效成分在人体内不能很好地被吸收和利用，不能达到理想的修复和治疗效果。
6.因此，开发研究新型氨糖硫酸软骨素制品取代目前现有的氨基葡萄糖和硫酸软骨素类药物对于强健骨骼和预防骨关节疾病具有重大意义。


技术实现要素：

7.本发明旨在提供一种氨糖复合功能性片剂的制备方法，该制备方法在消炎抗菌方面具有更好的功效。
8.为了实现上述目的，本发明提供了一种所述氨糖复合功能性片剂的制备方法，包括以下步骤：s1、将d-氨基葡萄糖盐酸盐、姜黄提取物、聚维酮k30混合，形成混合物a，将聚维酮k90与水混合配制成浓度为5％的浆液，将混合物a混入浆液中，充分溶解至澄清透明，将得到的混合物料投入到湿法制粒机中，搅拌混匀，得到所述氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒；s2、将乳香提取物、碳酸钙、羟丙甲纤维素混合，得到混合物b，用适量水与羟丙甲纤维素配制成浓度为1％的浆液，将所述混合物b混入浆液中，充分溶解至澄清透明，将得到的混合物料投入到湿法制粒机中，搅拌混匀，通过湿法制粒得到乳香提取物颗粒；s3、将所述氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒和所述乳香提取物颗粒与硫酸软骨素钠、七叶树提取物、黑胡椒提取物、维生素c、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、二氧化硅、交联聚维酮、硬脂酸镁充分混合，压制成片；s4、将包衣预混剂配制成浓度为20％的溶液，所述步骤s3中得到的压片进行包衣，得到片剂。
9.根据本发明，所述步骤s1中按照77.6wt％的d-氨基葡萄糖盐酸盐、20wt％的姜黄提取物和2wt％的聚维酮k30混合，将0.4wt％的聚维酮k90与水混合配制成浓度为5％的浆液；所述步骤s2中按照52wt％的乳香提取物、47wt％的碳酸钙、1wt％的羟丙甲纤维素混合，用适量水与羟丙甲纤维素混合配制成浓度为1％的浆液。
10.本发明的有益效果：
11.1)本发明采用氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素钠、乳香提取物、黑胡椒提取物、七叶树提取物、姜黄提取物、维生素c等中西药原料组成复方，并对复方中各原料组分之间的配比进行配伍和选择，利用各组分之间的协同作用，大大提高了生物利用度，使得产品消炎抗菌方面具有更好的功能。本发明采用姜黄提提取物中的姜黄素与黑胡椒提取物中的胡椒碱成分，对缓解炎症起至关重要的辅助作用，同时利用乳香提取物和七叶树提取物的效能，使得片剂中氨基葡萄糖含量提高，增加了营养保健功能，片剂还可以直接咀嚼使用，不影响人体吸收，溶出迅速，适于吞咽困难的患者，且稳定性好。
12.2)由于乳香提取物易吸湿，且物料本身粘结性很强，直接用于压片会出现粘冲现象，且随时间延长易吸湿使片剂表面产生斑点，鉴于该缺陷，本发明对乳香提取物颗粒的制备工艺进行创新，将乳香提取物进行制粒后，极大地改善了物料特性，避免出现粘冲现象，且在产品放置过程中延缓了斑点的产生，为产品的工业化奠定了良好的基础。
13.3)由于姜黄提取物用量大，配方中占比高，因其粉末较细，物料很蓬松，压片时会出现粘冲现象，且易造成片重不稳，本发明对氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒的制备工艺进行了创新，将氨基葡萄糖糖盐酸盐与姜黄提取物混合后制粒，既能提高片剂的可压性，解决粘冲问题，也改善了姜黄提取物的特性，减少姜黄提取物带来的粉尘污染，对质量及成本控制发挥了重要的作用。
14.4)氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物与乳香提取物、七叶树提取物和黑胡椒提取物中的活性成分具有协同作用，治疗骨关节疾病时的疗效优于单独使用氨基葡萄糖的氨糖疗法，同样优于氨基葡萄糖与其他成分组合的疗法，以及优于使用氨基葡萄糖和硫酸软骨素两种物质的混合疗法。本发明的药方中活性成分能够快速高量地直接进入骨关节部位血液
循环中，直接进入到患者的骨关节部位，起效快，并且原料均为纯天然，与人体有高度的亲和力，不含刺激类、麻醉类、激素类物质，治疗效果明显，且长效不反弹。
附图说明
15.图1为本发明的各个实验组与模型对照组对斑马鱼炎症的影响(中性粒细胞个数)比较图。
具体实施方式
16.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合本附图及实施例，对本发明做进一步的详细说明。需要强调，此处描述的具体实施例仅用于更好的阐述本发明，为本发明部分实施例，而非全部实施例，所以并不用作限定本发明。此外，下面描述的本发明实施例中涉及的技术特征，只要彼此间未构成冲突，即可以相互组合。
17.本发明采用二氧化硅作为润滑剂、助流剂，可压性好，硬度适中，口感良好，外观光滑、整洁，使用微晶纤维素、聚维酮作为粘结剂，交联羧甲基纤维素钠作为崩解剂，添加乳香提取物、七叶树提取物、黑胡椒提取物，不仅使所得氨糖咀嚼片活性成分高，溶出迅速，还使得其稳定性提高，不易变质。
18.硫酸软骨素是葡糖胺聚糖一个亚族，大量存在于动物软骨中，是从中提取制备的酸性黏多糖，能促进软骨再生、修复和逆转损坏，增加关节滑液量，有效减轻关节疼痛，改善关节功能。软骨无血液供应，其所需氧供、营养及润滑作用均来自滑液，软骨素为软骨输送氧气和营养素，并排出二氧化碳和废物。关节滑膜细胞和软骨细胞分泌的基质金属蛋白酶和促炎细胞因子(如白细胞介素-1)是软骨破坏的重要介质，其异常表达对骨关节炎(osteoarthritis,oa)发生发展有预警作用。软骨素通过抑制蛋白酶等降解酶的活性，减少对软骨基质和滑液成分破坏；通过减少纤维蛋白血栓形成，改善关节滑膜和软骨下骨血液循环；通过抑制环氧化酶-2活性，防治关节炎症。构成葡糖胺聚糖需要高度硫酸化，硫酸软骨素硫酸部分的补充可抵消体内硫酸成分的减少而导致的不良影响。
19.氨基葡萄糖是天然氨基单糖，是软骨基质中合成蛋白聚糖的主要成分，能刺激软骨细胞生长和软骨基质合成，改善软骨代谢，提高损伤软骨修复能力，缓解oa疼痛症状，改善关节功能。该药具有抗炎、止痛、延缓疾病发展的作用。盐酸氨基葡萄糖价格低廉，疗效较好，能促进人体黏多糖合成，提高关节滑液黏性，改善关节软骨代谢，可有效缓解早、中期koa症状，远期疗效稳定，长期服用效果更佳。
20.乳香提取物含树脂60-70％，树胶27-35％，挥发油3-8％。可以活血止痛，治血瘀诸痛，风湿痹证，肢节疼痛，外伤瘀肿作痛。还具有消肿生肌功效，可用于疮疡初起，红肿热痛。
21.七叶树提取物现有技术中常用于药品膏霜剂或化妆品中，药品中作为膏霜剂的主要功能性成分，起表面活性保湿作用。化妆品中可以做胶体材料，增加皮肤的光洁度和柔软性，常用可以延缓皮肤的老化。本发明采用七叶树提取物作为关键组分，与其他主要组分发生协同作用，有利于抗组织水肿、减低血管通透性和预防组织内水分存积、迅速消除局部水肿引起的沉重感觉和压力，在抗炎、抗渗出、消肿胀方面作用显著，能恢复毛细血管的正常通透性，增加静脉张力。此外，本发明还发现，七叶树还具有抑制胶原蛋白酶、透明质酸酶、b－葡糖苷酸酶和弹性酶的作用，在外用配方中可发挥促进血液循环、促进创伤愈合、抗水
肿、抗炎抗渗出和血管保护作用。七叶素是七叶树果实中最主要的减轻炎症的成分，它通过填补小静脉和毛细血管微小缺口和细微可见的缝隙，能有效改善血管脉壁的完整性。
22.姜黄提取物为姜科植物姜黄curcuma longa l.干燥根茎的提取物，主要生物活性物质是姜黄素(curcumin)和姜黄酮。姜黄素及挥发油部分对金黄色葡萄球菌有较好抗菌作用。姜黄提取物对多种真菌有抑制作用；姜黄素对小鼠及大鼠的实验性炎症有明显抑制作用，对类风湿性关节炎有抗炎作用，对减轻精索水肿和触痛有一定疗效。
23.黑胡椒提取物为胡椒科植物胡椒piper nigrum l.的干燥近成熟或成熟果实提取物，含胡椒碱(c
17h19
no3)、佳味碱(c
17h19
no3)、哌啶〔(ch2)5nh〕和胡椒亭(c
19h21
o3n)等。胡椒碱可促进人体对药物的吸收，增强药物功效，减少药物的用量。具有镇静安神、解毒、舒筋活血等功用，温中散寒、开胃下气、消痰、调五脏、壮肾气。
24.根据本发明，所述氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒的组分包括d-氨基葡萄糖盐酸盐，姜黄提取物，聚维酮k30，聚维酮k90。优选地，按重量百分比计，所述氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒的组分包括77.6wt％的d-氨基葡萄糖盐酸盐、20wt％的姜黄提取物、2wt％的聚维酮k30和0.4wt％的聚维酮k90。
25.根据本发明，所述乳香提取物颗粒的组分包括乳香提取物、碳酸钙和羟丙甲纤维素。优选地，按重量百分比计，所述乳香提取物颗粒的组分包括52wt％的乳香提取物、47wt％的碳酸钙和1wt％的羟丙甲纤维素。
26.本发明提供一种氨糖复合功能性片剂的制备方法，包括以下步骤：
27.s1、将d-氨基葡萄糖盐酸盐、姜黄提取物、聚维酮k30混合，形成混合物a，将聚维酮k90与水混合配制成浓度为5％的浆液，将混合物a混入浆液中，充分溶解至澄清透明，将得到的混合物料投入到湿法制粒机中，搅拌混匀，得到所述氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒；
28.s2、将乳香提取物、碳酸钙、羟丙甲纤维素混合，得到混合物b，用适量水与羟丙甲纤维素配制成浓度为1％的浆液，将所述混合物b混入浆液中，充分溶解至澄清透明，将得到的混合物料投入到湿法制粒机中，搅拌混匀，通过湿法制粒得到乳香提取物颗粒；
29.s3、将所述氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒和所述乳香提取物颗粒与硫酸软骨素钠、七叶树提取物、黑胡椒提取物、维生素c、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、二氧化硅、交联聚维酮、硬脂酸镁充分混合，压制成片；
30.s4、将包衣预混剂配制成浓度为20％的溶液，所述步骤s3中得到的压片进行包衣，得到片剂。
31.优选地，所述步骤s1中按照77.6wt％的d-氨基葡萄糖盐酸盐、20wt％的姜黄提取物和2wt％的聚维酮k30混合，将0.4wt％的聚维酮k90与水混合配制成浓度为5％的浆液；所述步骤s2中按照52wt％的乳香提取物、47wt％的碳酸钙、1wt％的羟丙甲纤维素混合，用适量水与羟丙甲纤维素混合配制成浓度为1％的浆液。
32.本发明结合中西药成分的效能对各组分药物进行配伍，并对各组分的配比进行选择和优化完成产品制备。本发明制备的保健品增强了产品消炎抗菌方面的功能。
33.下面结合具体实施例进一步说明本发明的技术方案。
34.除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。
35.实施例1
36.制备氨糖复合功能性成分剂型，包括以下步骤：
37.1)制备氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒；按77.6wt％d-氨基葡萄糖盐酸盐、20wt％姜黄提取物，2wt％的聚维酮k30混合，得到混合物a。将0.4wt％聚维酮k90用适量水配制成浓度为5wt％的浆液，将混合物a充分溶解到浆液中至澄清透明，得到的混合物料投入到湿法制粒机中，搅拌10分钟，混匀，得到氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒。
38.2)乳香提取物湿法制粒：将52重量份的乳香提取物，47重量份的碳酸钙，1重量份的羟丙甲纤维素混合，得到混合物b。将羟丙甲纤维素用适量水配制成浓度为1wt％的浆液，将混合物b充分溶解到浆液中至澄清透明，将得到的混合物料投入到湿法制粒机中，搅拌5分钟，混匀，得到乳香提取物颗粒。
39.3)采用步骤1)中制备的氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒，步骤2)中制备的乳香提取物湿法制粒，按照以下组分配方混合压制成片：
40.氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒975g(65wt％)，硫酸软骨素钠75g(5wt％)，乳香提取物颗粒75g(5wt％)，七叶树提取物97.5g(6.5wt％)，黑胡椒提取物7.5g(0.5wt％)，维生素c15g(1wt％)，微晶纤维素126g(8.4wt％)，交联羧甲基纤维素钠7.5g(0.5wt％)，二氧化硅33g(2.2wt％)，交联聚维酮18g(1.2wt％)，硬脂酸镁3g(0.2wt％)。
41.4)取67.5g(4.5wt％)包衣预混剂，配制为浓度20wt％的包衣预混剂溶液，对步骤3)中制成的片剂进行包衣。
42.实施例2
43.1)制备氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒：按77.6wt％d-氨基葡萄糖盐酸盐、20wt％姜黄提取物，2wt％的聚维酮k30混合，得到混合物a。将0.4wt％聚维酮k90用适量水配制成浓度为5wt％的浆液，将混合物a充分溶解到浆液中至澄清透明，得到的混合物料投入到湿法制粒机中，搅拌10分钟，混匀，得到氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒。
44.2)乳香提取物湿法制粒：将52重量份的乳香提取物，47重量份的碳酸钙，1重量份的羟丙甲纤维素混合，得到混合物b。将羟丙甲纤维素用适量水配制成浓度为1wt％的浆液，将混合物b充分溶解到浆液中至澄清透明，将得到的混合物料投入到湿法制粒机中，搅拌5分钟，混匀，得到乳香提取物颗粒。
45.3)采用步骤1)中制备的氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒，步骤2)中制备的乳香提取物湿法制粒，按照以下组分配方混合压制成片：
46.氨基葡萄糖盐酸盐姜黄提取物颗粒450g(30wt％)，硫酸软骨素钠150g(10wt％)，乳香提取物颗粒300g(20wt％)，七叶树提取物225g(15wt％)，黑胡椒提取物3g(0.2wt％)，维生素c 75g(5wt％)，微晶纤维素178.5g(11.9wt％)，交联羧甲基纤维素钠12g(0.8wt％)，二氧化硅18g(1.2wt％)，交联聚维酮15g(1wt％)，硬脂酸镁9g(0.6wt％)。
47.4)取64.5g(4.3wt％)包衣预混剂，配制为浓度20wt％的包衣预混剂溶液，对步骤3)中制成的片剂进行包衣。
48.根据需要按照临床剂量换算到斑马鱼浓度，实施例1中的片剂(1.6g/片，每日2片)和实施例2中的片剂(每日3次，每次2片，0.85g/片)按照其临床用量换算到斑马鱼用量分别为533和850ug/ml。
49.模型制作
50.预先用供试品和阳性药物处理3dpf转基因中性粒细胞荧光斑马鱼1小时，再用硫酸铜经水溶方式继续处理2小时，建立斑马鱼炎症模型。
51.实验方法
52.随机选取受精后3天的(3dpf)转基因中性粒细胞荧光斑马鱼于六孔板中，每孔随机挑选30尾，每孔容量为3ml，用养鱼用水预先分别水溶给与实施例1中的片剂和实施例2中的片剂和吲哚美辛处理1小时，实施例1中的片剂的浓度为533ug/ml，实施例2中的片剂的浓度为850ug/ml，吲哚美辛的浓度为29ug/ml，同时设置正常对照组(即养鱼用水处理斑马鱼)与模型对照组，置于28℃培养箱中培养1小时后，用硫酸铜建立转基因中性粒细胞荧光斑马鱼炎症模型。供试品继续处理2小时后，每组随机取10尾斑马鱼在荧光显微镜下观察、拍照并保存图片；用尼康高级图像处理软件进行图像分析，计算斑马鱼炎症部位中性粒细胞数目(n)，统计学处理结果用x
±
se表示，以斑马鱼炎症中性粒细胞个数的统计学分析结果分别评价供试品对硫酸铜诱发的炎症斑马鱼的抗炎作用。
53.用方差分析和dunnett’st-检验进行统计学分析，p＜0.05表明具有显著性差异。
54.实验结果
55.模型对照组斑马鱼验证部位中性粒细胞数(19个)与正常对照组(3个)比较p＜0.001，显示硫酸铜诱发斑马鱼炎症模型成功。29μg/ml吲哚美辛斑马鱼炎症部位中性粒细胞数(11个)与模型对照组(19个)比较p＜0.001，其炎症消退作用为42.1％，提示吲哚美辛对炎症斑马鱼有明显抗炎作用。
56.实施例1中片剂的浓度为533μg/ml时，斑马鱼炎症部位中性粒细胞数(5个)与模型对照组(19个)比较p＜0.001，其炎症消退作用为73.7％。实施例2中片剂的浓度为850μg/ml时，斑马鱼炎症部位中性粒细胞数(5个)与模型对照组(19个)比较p＜0.001，其炎症消退作用为73.7％。实施例1和实施例2中的片剂对斑马鱼具有抗炎作用，并且临床换算最高剂量两者的炎症消退率相同。
57.图1为各个实验则对斑马鱼炎症的影响(中性粒细胞个数)与模型对照组比较：p＜0.001。
58.因此，在本实验浓度条件下，本发明实施例1和实施例2制备的片剂具有促进软骨再生和抗炎作用，所以对类风湿性关节炎有抗炎作用，对减轻精索水肿和触痛有一定疗效。
59.以上所述仅是本发明的优选应用实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。