一种含裂褶多糖的洗眼液及其制备方法与流程

1.本发明属于医药技术领域，具体涉及一种含裂褶多糖的洗眼液及其制备方法。


背景技术：

2.眼部是长时间暴露在空气中的部位，同时又是人体比较脆弱的部门，长时间受到灰尘、雾霾、化妆品的侵袭难免会引发各类眼部疾病。而眼角膜位于人眼最前端，角膜结构又分为上皮层、前弹力层、基质层、后弹力层以及内皮层，角膜上分布着大量的感觉神经，是人体痛觉最敏锐的位置之一。使用洗眼液可以在一定程度上缓解眼部不适和眼干燥等，因为洗眼液具有清凉止痒，促进眼部营养，保持眼睛湿润及卫生，避免结膜充血等作用。
3.然而，据了解，市售洗眼液的主要具有功效成分包括：马来酸氨苯那敏、软骨素硫酸钠、甘草酸二钾、维生素b6、牛磺酸、维生素b12等，看似成分多样、营养丰富，但却暗藏危机。例如：软骨素硫酸钠的副作用是偶有轻微刺激感，长期或频繁使用对眼镜的副作用明显，可以引起药物性的角膜炎等；而经常大量补充维生素b6很可能导致严重的周围神经炎。
4.而且洗眼液为了延长保质期会添加防腐剂，而且防腐剂可通过以下几种途径对眼表产生损伤：破坏角膜上皮的微绒毛；对脂质层有类似去污剂的作用，使泪液蒸发加速；间接破坏泪膜稳定性；降低角膜细胞的增长和活力；导致眼表炎性反应、结膜下纤维化等。另外，即使添加了防腐剂，也会因为防腐剂的种类、浓度、配伍及使用等因素，无法完全避免洗眼液的细菌污染。
5.此外，洗眼液里还会添加抗过敏作用的药物，例如马来酸氨苯那敏(俗称扑尔敏)，虽然其含量一般不高，但频繁使用就会造成药物依赖。不恰当地使用洗眼液、眼药水等都易破坏眼表自身的菌群环境，导致菌群失调，从而增加眼表疾病的患病风险。
6.cn111991415a公开了一种眼部护理组合物，所述眼部护理组合物包括硫酸软骨素、透明质酸和依克多因或眼科学上可接受的依克多因衍生物，其中在所述眼部护理组合物中，所述硫酸软骨素所占的质量百分比为0.05-2％，所述透明质酸所占的质量百分比为0.01-2.5％，所述依克多因或眼科学上可接受的依克多因衍生物所占的质量百分比为0.5-5％。其公开的眼部护理组合物通过将一定重量比的透明质酸、依克多因与硫酸软骨素组合能够加速角膜损伤的修复，然而，软骨素硫酸钠的副作用是偶有轻微刺激感，长期或频繁使用对眼镜的副作用明显，反而会加重角膜炎的状况；且透明质酸虽然具有较好的保湿性能，然而其对于抗菌、抗炎效果一般，无可避免地需要添加其他助剂：表面活性剂(如苯扎氯铵)和功效成分(如牛磺酸、维生素)等。
7.cn111991270a公开了一种富勒烯c60赋能润眼液及其制备方法。该润眼液由以下重量份的原料制备而成：水65-85份、edta0.01-0.05份、水透明质酸钠0.1-1.0份、牛磺酸1-10份、海藻糖1-5份、氯化钠0.1-2份、调节润眼液ph至中性的ph调节剂、功能提取物10-25份，还包括富勒烯，所述富勒烯在润眼液中的含量为0.1-0.8mg/l。其通过功效成分富勒烯、水透明质酸钠、牛磺酸、功能提取物(黄瓜果提取物、北美金缕梅提取物等)达到改善视力、缓解视力疲劳的目的。但富勒烯会对肌肤有一定的刺激性，而眼睛又是人体比较脆弱的器
官，尤其是易敏感易脆弱的人群使用前先进行耐受实验。而透明质酸虽然具有较好的保湿性能，然而其对于抗菌、抗炎效果一般，无可避免地需要添加其他助剂：表面活性剂(如苯扎氯铵)和功效成分(如牛磺酸、维生素)等。
8.因此，如何提供一种无刺激性无副作用，且更具舒适感和润滑感并能缓解眼睛干涩、充血等多种症状的洗眼液是本领域的研究重点。


技术实现要素：

9.针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种含裂褶多糖的洗眼液及其制备方法。本发明所述含裂褶多糖的洗眼液用于眼部清洗，包括眼周及眼球表面，可以除去灰尘，颗粒，花粉等异物或分泌物；且所述洗眼液具有缓解眼部疲劳、酸痛、抗辐射、保湿以及缓解眼部干燥、消除炎症和抑菌的能力，对长时间佩戴隐形眼镜引起的眼部视觉疲劳、眼干眼涩等症状具有极佳的功效。
10.为达此目的，本发明采用以下技术方案：
11.第一方面，本发明提供一种含裂褶多糖的洗眼液，所述含裂褶多糖的洗眼液包括裂褶多糖、依克多因、眼用凝胶基质、渗透压调节剂和水。
12.在本发明中，所述洗眼液添加有裂褶多糖和依克多因，二者相互配合，具有协同增效的作用，能进一步提高保湿、消炎、抗菌和修复功效；本发明所述含裂褶多糖的洗眼液不仅具有极佳的缓解眼部疲劳、干涩、酸痛、抗辐射、保湿以及缓解眼部干燥、消除炎症和抑菌的能力，预防角膜炎等并发症。且无需添加其他功效成分、抗生素、防腐剂等，能有效杀菌还可以增强眼抵抗力，缓解视疲劳，缓解眼部不适感等作用。
13.其中，裂褶多糖(schizophyllan，spg)是裂褶菌的主要活性成分之一，spg属于一种非离子型的水溶性高聚葡萄糖，主链由1,3-β-d-吡喃葡萄糖单元组成，每3个葡萄糖分子产生一个β-1,6-结合的d-吡喃葡萄糖分支，具有增强免疫、保湿、抗氧化等，以及提高细胞免疫功能中均有很好的作用。其易于渗透入眼角膜，从而达到消除炎症和抑菌的能力，预防角膜炎等并发症。
14.其中，依克多因(ectoin)，案名为四氢甲基嘧啶羧酸，是一种氨基酸衍生物，不仅能够平衡细胞渗透压，还能在高温、严寒、干旱、极端ph值、高压、高盐、高辐射等逆境条件下，对酶、dna、蛋白质、核酸、细胞膜及整个细胞具有良好的保护作用。此外，依克多因分子的环状结构容易与水分子形成氢键，增强水分子的缔合能力，使水分子在其周围定向排列，改变水分子的空间排布；还可以保护角膜、结膜细胞，增强细胞的防御功能，避免现有眼科制剂长期使用对眼部造成的损伤。
15.优选地，所述含裂褶多糖的洗眼液按质量百分含量计包括：
[0016][0017]
以所述含裂褶多糖的洗眼液总质量为100％计，所述裂褶多糖含量为0.1-10％，例如可以是0.1％、0.2％、0.5％、0.8％、1％、1.5％、2％、2.5％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％等。
[0018]
以所述含裂褶多糖的洗眼液总质量为100％计，所述依克多因含量为0.01-5％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％、0.2％、0.5％、0.8％、1％、1.2％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％等。
[0019]
以所述含裂褶多糖的洗眼液总质量为100％计，所述眼用凝胶基质含量为0.01-3％，例如可以是0.01％、0.02％、0.05％、0.08％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.8％、1％、1.2％、1.5％、2％、2.5％、3％等。
[0020]
以所述含裂褶多糖的洗眼液总质量为100％计，所述渗透压调节剂含量为0.01-2％，例如可以是0.01％、0.05％、0.1％、0.2％、0.5％、0.8％、1％、1.2％、1.5％、1.8％、2％等。
[0021]
以所述含裂褶多糖的洗眼液总质量为100％计，所述水含量为80-99％，例如可以是80％、82％、84％、86％、88％、90％、92％、94％、96％、98％、99％等。
[0022]
优选地，所述裂褶多糖为小分子裂褶多糖。
[0023]
优选地，所述小分子裂褶多糖的分子量为10-100kd，例如可以10kd、20kd、30kd、40kd、50kd、60kd、70kd、80kd、90kd、100kd等，优选为10-30kd。
[0024]
在本发明中，所述洗眼液优选添加分子量在10-100kd范围内的小分子裂褶多糖，这是由于小分子量裂褶多糖更容易渗入眼角膜，从而进一步提高洗眼液对于的抗真菌、抗炎及促进角膜上皮修复等多重功效；且由于分子量较小，因此制得的滴眼液水溶性强、无毒性、无副作用、且抗炎作用也能得到进一步的提高。
[0025]
优选地，所述裂褶多糖和依克多因的质量比为10:(0.5-3)，例如可以是10:0.5、10:1、10:1.5、10:2、10:2.5、10:3等。
[0026]
在本发明中，所述裂褶多糖和依克多因的质量比为10:(0.5-3)，在该比例内保湿性、抗真菌、抗炎及促进角膜上皮修复能力达到最佳。若裂褶多糖过多，而依克多因过少，或导致洗眼液的保湿补水能力有所下降，因而对于眼干眼涩等症状的缓解能力一般；若裂褶多糖过少，而依克多因过多，或导致洗眼液对于的抗真菌、抗炎及促进角膜上皮修复。
[0027]
优选地，所述眼用凝胶基质包括聚乙烯醇、中分子量裂褶多糖、结冷胶、泊洛沙姆、卡波姆、羟丙基甲基纤维素或黄原胶中的任意一种或至少两种的组合，优选为聚乙烯醇、中分子量裂褶多糖或羟丙基甲基纤维素中的任意一种或至少两种的组合。
[0028]
优选地，所述聚乙烯醇的分子量为50-150kd，例如可以50kd、60kd、70kd、80kd、
90kd、100kd、110kd、120kd、130kd、140kd、150kd等。
[0029]
优选地，所述中分子量裂褶多糖的分子量100-1000kd，例如可以100kd、120kd、140kd、160kd、180kd、200kd、300kd、400kd、500kd、600kd、700kd、800kd、900kd、1000kd等，优选为100-200kd。
[0030]
优选地，所述泊洛沙姆包括泊洛沙姆407、泊洛沙姆188或卡波姆934p中的任意一种或至少两种的组合。
[0031]
优选地，所述卡波姆包括卡波姆940和/或卡波姆974p。
[0032]
优选地，所述眼用凝胶基质为聚乙烯醇、中分子量裂褶多糖和羟丙基甲基纤维素的组。
[0033]
优选地，所述聚乙烯醇、中分子量裂褶多糖和羟丙基甲基纤维素的质量比为(3-10):(0.1-5):(0.1-2)；
[0034]
其中，“3-10”例如可以是3、4、5、6、7、8、9、10等；
[0035]
其中，“0.1-5”例如可以是0.1、1、2、3、4、5等；
[0036]
其中，“0.1-2”例如可以是0.1、0.5、1、1.5、2等。
[0037]
在本发明中，作为优选技术方案选择质量比为(3-10):(0.1-5):(0.1-2)的聚乙烯醇、中分子量裂褶多糖和羟丙基甲基纤维素作为眼用凝胶基质，能进一步保障在用于眼部清洗的舒适性，即当眼周及眼球表面，除去灰尘，颗粒，花粉等异物或眼部自身的分泌物被冲洗出来时，该眼用凝胶基质进一步减少眼睑对伤口的机械摩擦，减轻疼痛，有利于眼部的润湿。
[0038]
优选地，所述渗透压调节剂包括氯化钠、葡萄糖、硼砂、硼酸、甘露醇或甘油中的任意一种或至少两种的组合。
[0039]
优选地，所述含裂褶多糖的洗眼液还包括稳定剂。
[0040]
优选地，所述稳定剂包括半胱氨酸、半胱氨酸盐、枸椽酸、枸椽酸盐、酒石酸或酒石酸盐中的任意一种或至少两种的组合。
[0041]
优选地，所述稳定剂占所述含裂褶多糖的洗眼液总质量的0.01-0.15％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％、0.12％、0.15％等。
[0042]
优选地，所述含裂褶多糖的洗眼液的ph为5.5-8.0，例如可以5.5、6.0、6.2、6.4、6.6、6.8、7.0、7.2、7.4、7.6、7.8、8.0等，优选为6.0-7.0。
[0043]
第二方面，本发明提供一种如第一方面所述的含裂褶多糖的洗眼液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0044]
(1)将裂褶多糖和水混合，得到裂褶多糖溶液；
[0045]
(2)将步骤(1)得到的裂褶多糖溶液、依克多因、眼用凝胶基质和渗透压调节剂混合，得到所述含裂褶多糖的洗眼液。
[0046]
优选地，步骤(1)中，所述混合的温度为50-90℃，例如可以是50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、85℃、90℃等，所述混合的时间为10-30min，例如可以是10min、15min、20min、25min、30min等。
[0047]
优选地，步骤(1)和步骤(2)中，所述混合均在搅拌下进行，所述搅拌的转速为100-500rpm，例如可以是100rpm、150rpm、200rpm、250rpm、300rpm、350rpm、400rpm、450rpm、500rpm等。
[0048]
优选地，步骤(2)中，所述混合的温度为50℃以下，例如可以50℃、40℃、30℃、20℃、10℃、5℃等等，所述混合的时间为10-40min，例如可以是10min、15min、20min、25min、30min、35min、40min等。
[0049]
优选地，步骤(2)中，所述混合的具体步骤为：先将所述裂褶多糖溶液降温至40-50℃(例如可以是40℃、42℃、44℃、46℃、48℃、50℃等)后，加入眼用凝胶基质以100-200rpm(例如可以是100rpm、120rpm、140rpm、160rpm、180rpm、200rpm等)搅拌5-10min(例如可以是5min、6min、7min、8min、9min、10min等)后，再降温至20-40℃(例如可以是20℃、25℃、30℃、35℃、40℃等)加入依克多因以100-500rpm(例如可以是100rpm、200rpm、300rpm、400rpm、500rpm等)搅拌1-10min(例如可以是1min、2min、4min、6min、8min、10min等)，最后加入渗透压调节剂以100-500rpm(例如可以是100rpm、200rpm、300rpm、400rpm、500rpm等)搅拌1-10min(例如可以是1min、2min、4min、6min、8min、10min等)，得到所述含裂褶多糖的洗眼液。
[0050]
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
[0051]
(1)本发明所述含裂褶多糖的洗眼液用于眼部清洗，包括眼周及眼球表面，可以除去灰尘，颗粒，花粉等异物或分泌物等，缓解视觉疲劳的洗眼液，对眼球起到湿润、缓解疲劳、清洁等作用，增强舒适性和润滑感；
[0052]
(2)本发明所述洗眼液具有缓解眼部疲劳、酸痛、抗辐射、保湿以及缓解眼部干燥、消除炎症和抑菌的能力，对长时间佩戴隐形眼镜引起的眼部视觉疲劳、眼干眼涩等症状具有极佳的功效。
具体实施方式
[0053]
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
[0054]
实施例和对比例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购获得的常规产品或可通过现有技术进行制备得到。
[0055]
实施例1
[0056]
本实施例提供一种含裂褶多糖的洗眼液，所述含裂褶多糖的洗眼液按质量百分含量计包括如下组分：
[0057][0058]
所述含裂褶多糖的洗眼液的制备方法包括以下步骤：
[0059]
(1)按上述配比将裂褶多糖和水在80℃下以200rpm的转速混合搅拌10min，使裂褶多糖完全溶解，得到均一的裂褶多糖溶液；
[0060]
(2)先将上述得到的裂褶多糖溶液降温至45℃后，依次加入结冷胶、泊洛沙姆407、羟丙基甲基纤维素，同时以100rpm搅拌8min后，再降温至30℃加入依克多因以200rpm搅拌8min，最后加入渗透压调节剂和稳定剂以200rpm搅拌3min，得到ph为6.5，渗透压为300mosm/l的含裂褶多糖的洗眼液。
[0061]
实施例2
[0062]
本实施例提供一种含裂褶多糖的洗眼液，所述含裂褶多糖的洗眼液按质量百分含量计包括如下组分：
[0063][0064]
所述含裂褶多糖的洗眼液的制备方法包括以下步骤：
[0065]
(1)按上述配比将裂褶多糖和水在75℃下以200rpm的转速混合搅拌12min，使裂褶多糖完全溶解，得到均一的裂褶多糖溶液；
[0066]
(2)先将上述得到的裂褶多糖溶液降温至45℃后，依次加入结冷胶、泊洛沙姆188、羟丙基甲基纤维素，同时以100rpm搅拌8min后，再降温至30℃加入依克多因以200rpm搅拌8min，最后加入渗透压调节剂和稳定剂以200rpm搅拌3min，得到ph为6.6，渗透压为280mosm/l的含裂褶多糖的洗眼液。
[0067]
实施例3
[0068]
本实施例提供一种含裂褶多糖的洗眼液，所述含裂褶多糖的洗眼液按质量百分含量计包括如下组分：
[0069][0070]
所述含裂褶多糖的洗眼液的制备方法包括以下步骤：
[0071]
(1)按上述配比将裂褶多糖和水在70℃下以300rpm的转速混合搅拌20min，使裂褶多糖完全溶解，得到均一的裂褶多糖溶液；
[0072]
(2)先将上述得到的裂褶多糖溶液降温至45℃后，依次加入结冷胶、泊洛沙姆188、羟丙基甲基纤维素，同时以100rpm搅拌5min后，再降温至28℃加入依克多因以100rpm搅拌10min，最后加入渗透压调节剂以100rpm搅拌10min，得到ph为6.3，渗透压为300mosm/l的含裂褶多糖的洗眼液。
[0073]
实施例4
[0074]
本实施例提供一种含裂褶多糖的洗眼液，与实施例1的区别仅在于，添加的裂褶多糖的平均分子量为100kd；且步骤(1)需要和水在85℃下以500rpm的转速混合搅拌30min，使裂褶多糖完全溶解，得到均一的裂褶多糖溶液。
[0075]
实施例5
[0076]
本实施例提供一种含裂褶多糖的洗眼液，与实施例1的区别仅在于，裂褶多糖的含量为1.1％，依克多因的含量为0.01％，其他组分含量及制备方法同实施例1。
[0077]
实施例6
[0078]
本实施例提供一种含裂褶多糖的洗眼液，与实施例1的区别仅在于，裂褶多糖的含量为0.5％，依克多因的含量为0.6％，其他组分含量及制备方法同实施例1。
[0079]
实施例7
[0080]
本实施例提供一种含裂褶多糖的洗眼液，与实施例1的区别仅在于，眼用凝胶基质中不添加聚乙烯醇，裂褶多糖(平均分子量为100kd)含量增至0.8％，羟丙基甲基纤维素含量增至0.5％，其他组分含量及制备方法同实施例1。
[0081]
实施例8
[0082]
本实施例提供一种含裂褶多糖的洗眼液，与实施例1的区别仅在于，眼用凝胶基质中不添加裂褶多糖(平均分子量为100kd)，聚乙烯醇含量增至1.0％，羟丙基甲基纤维素含量增至0.3％，其他组分含量及制备方法同实施例1。
[0083]
实施例9
[0084]
本实施例提供一种含裂褶多糖的洗眼液，与实施例1的区别仅在于，眼用凝胶基质中不添加羟丙基甲基纤维素，裂褶多糖(平均分子量为100kd)含量增至0.5％，其他组分含量及制备方法同实施例1。
[0085]
实施例10
[0086]
本实施例提供一种含裂褶多糖的洗眼液，与实施例1的区别仅在于，将眼用凝胶基质完全替换为0.8％的卡波姆974p和0.5％的羟丙基甲基纤维素的组合，其他组分含量及制备方法同实施例1。
[0087]
实施例11
[0088]
本实施例提供一种含裂褶多糖的洗眼液，与实施例1的区别仅在于，将眼用凝胶基质完全替换为1.3％的裂褶多糖(平均分子量为100kd)，其他组分含量及制备方法同实施例1。
[0089]
实施例12
[0090]
本实施例提供一种含裂褶多糖的洗眼液，与实施例1的区别仅在于，将眼用凝胶基质完全替换为1.3％的聚乙烯醇(平均分子量为100kd)，其他组分含量及制备方法同实施例1。
[0091]
对比例1
[0092]
本对比例提供一种洗眼液，与实施例1的区别仅在于，不添加裂褶多糖，依克多因含量增至1.2％，其他组分含量及制备方法同实施例1。
[0093]
对比例2
[0094]
本对比例提供一种洗眼液，与实施例1的区别仅在于，将1.0％平均分子量为10kd的裂褶多糖替换为1.0％的分子量为10kd的微分子透明质酸钠，其他组分含量及制备方法同实施例1。
[0095]
对比例3
[0096]
本对比例提供一种洗眼液，与实施例1的区别仅在于，将1.0％平均分子量为10kd的裂褶多糖替换为1.0％的分子量为20kd的乙酰化透明质酸钠，其他组分含量及制备方法同实施例1。
[0097]
对比例4
[0098]
本对比例提供一种洗眼液，与实施例1的区别仅在于，将1.0％平均分子量为10kd的裂褶多糖替换为1.0％的分子量为100kd的透明质酸钠，其他组分含量及制备方法同实施例1。；且步骤(1)需要和水在70℃下以50rpm的转速混合搅拌40min，使裂褶多糖完全溶解，得到均一的裂褶多糖溶液。
[0099]
对比例5
[0100]
本对比例提供一种洗眼液，与实施例1的区别仅在于，不添加依克多因，裂褶多糖含量增至1.2％，其他组分含量及制备方法同实施例1。
[0101]
试验例1
[0102]
刺激性试验
[0103]
测试方法：取眼部检查无损伤的健康新西兰兔54只，随机分为18组，3只/组，第1组左右眼给生理盐水作为对照组，第2-18组左眼也给生理盐水作为自身对照，右眼分别给实施例1-12提供的含裂褶多糖的洗眼液和对比例1-5提供的洗眼液。将洗眼液缓慢滴于家兔眼结膜囊内，压迫鼻泪管，并使眼睛被动闭合，早中晚各3次，连续洗眼28d，每次用药量1ml，观察角膜、虹膜、结膜、水肿、分泌物的刺激情况，并按下表1所示给每组的各兔分别进行打分：
[0104]
表1
[0105]
[0106][0107]
具体结果如下表2所示：
[0108]
表2
[0109]
[0110]
[0111][0112]
由表1测试数据可知，本发明所述洗眼液不含防腐剂，无刺激性，无副作用，可在眼
部吸收，避免了由于防腐剂等添加剂引起的潜在危险及对眼睛的毒副作用，并且具备高的稳定性。
[0113]
试验例2
[0114]
润湿试验
[0115]
测试样品：实施例1-12提供的含裂褶多糖的洗眼液和对比例1-5提供的洗眼液；
[0116]
测试原理：阿托品阻断m胆碱受体，使瞳孔括约肌和睫状肌松弛，但过量或长期连续施用会出现以眼睛干涩为主要症状的泪液分泌障碍性眼病，常见之症状包括眼睛干涩、容易疲倦、眼痒、有异物感、痛灼热感、分泌物黏稠、怕风、畏光、对外界刺激很敏感；即使用过阿托品组泪液分泌量明显减少，通过施用洗眼液判断是否能够缓解阿托品导致的干眼症，泪液分泌量越高代表缓解效果越好；
[0117]
测试方法：
[0118]
(1)10周龄取眼部检查无损伤的健康新西兰兔54只，随机分为18组，3只/组，适应性饲养2天后，进行schirmer试验，测定泪液分泌情况，具体为，取泪液检测滤纸条，一端折叠5mm，置于兔子眼睛下睑中外1/3处，5min后取出测量自折叠处的湿润长度，并记录为正常泪液分泌情况，然后开始施用1wt％的硫酸阿托品滴眼液，连续施用2周，每天3次，各组兔模型均出现泪液分泌量(泪腺湿润长度)明显减少的现象，表明了对阿托品致干燥性角/结膜炎的兔模型组建模成功；
[0119]
(2)于施用硫酸阿托品滴眼液7d后，第1组左右眼给生理盐水作为对照组，第2-18组左眼也给生理盐水作为自身对照，右眼分别对应给实施例1-12提供的含裂褶多糖的洗眼液和对比例1-5提供的洗眼液；具体为，将洗眼液缓慢滴于家兔眼结膜囊内，压迫鼻泪管，并使眼睛被动闭合，早中晚各3次，连续洗眼14d，每次用药量1ml，记录泪液分泌情况，并计算泪液分泌增长率；其中，泪液分泌增长率(％)＝(给药后湿润长度-给药前湿润长度)/给药前湿润长度
×
100％；
[0120]
具体结果如下表3所示：
[0121]
表3
[0122][0123][0124]
由表2测试数据可知，施用本发明所述含裂褶多糖的洗眼液泪液分泌增长率均达到80％以上，而作为本发明最为优选的实施例1-3组的兔模型泪液分泌增长率更是达到97％以上。说明本发明所述含裂褶多糖的洗眼液各组分相互配合，具有协同增效的作用，能进一步提高干涩、保湿以及缓解眼部干燥的能力。
[0125]
试验例3
[0126]
抗炎试验
[0127]
测试样品：实施例1-12提供的含裂褶多糖的洗眼液和对比例1-5提供的洗眼液；
[0128]
测试原理：
[0129]
(1)il-6：采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(elisa)；往预先包被兔白细胞介素6(il-6)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、hrp标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物tmb显色，tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的兔白细胞介素6(il-6)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(od值)，计算样品浓度；
[0130]
(2)tnf-α：采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(elisa)；往预先包被兔肿瘤坏死因子α(tnf-α)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、hrp标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物tmb显色，tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的兔肿瘤坏死因子α(tnf-α)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(od值)，计算样品浓度；
[0131]
测试方法：在试验例2的schirmer试验结束后，各组处死新西兰兔取施用过洗眼液的右眼组织，匀浆后提取蛋白至4mg/l，然后采用兔白细胞介素6(il-6)试剂盒(品牌：通蔚生物，目录号：tw10766)、兔肿瘤坏死因子α(tnf-α)试剂盒(品牌：通蔚生物，目录号：tw11454)；
[0132]
具体结果如下表4所示：
[0133]
表4
[0134][0135][0136]
由表4测试数据可知，施用本发明所述含裂褶多糖的洗眼液泪液后相对于空白组，对炎症因子il-6的抑制率可达到60％以上，对炎症因子tnf-α的抑制率可达到50％以上；特别地，作为本发明最为优选的实施例1-3对炎症因子il-6的抑制率可达到70％以上，对炎症因子tnf-α的抑制率可达到60％以上。说明本发明所述含裂褶多糖的洗眼液各组分相互配
合，具有协同增效的作用，能进一步提高洗眼液的抗炎能力。
[0137]
试验例4
[0138]
抗菌试验
[0139]
测试样品：实施例1-12提供的含裂褶多糖的洗眼液和对比例1-5提供的洗眼液；
[0140]
测试菌种：金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌、大肠杆菌；
[0141]
测试方法：将实施例1-12提供的含裂褶多糖的洗眼液和对比例1-5提供的洗眼液用已融化的琼脂培养基作系列稀释，分别稀释为2、4、8、16、32倍，倾注成含不同洗眼液稀释倍数药物浓度的平板培养基。将接种试验菌液的平板置37℃培养箱内培养24h，观察记录各菌株在不同药物浓度培养基的生长情况。本发明洗眼液采用倍比稀释法测定滴眼剂的最低抑菌浓度(mic)，用其表示体外抑菌强度；
[0142]
具体结果如下表5所示，“﹢”代表无细菌生长，
“‑”
代表有细菌生长：
[0143]
表5
[0144]
[0145]
由表5测试数据可知，本发明所述洗眼液无需添加抗菌剂，仍然有着极佳的抑菌能力，因此能够很好地避免抑菌剂对眼部的刺激，提高用药舒适感，使用方便、剂量准确、能较长时间在眼角膜表面均匀分布、无过敏、无刺激性、不引起糊视并有效延长药物与眼角膜作用时间的优点。
[0146]
试验例5
[0147]
临床试验
[0148]
测试样品：实施例1-12提供的含裂褶多糖的洗眼液和对比例1-5提供的洗眼液；
[0149]
测试人员：志愿者18～40岁，共85人，分为17组，每组5人；
[0150]
测试方法：使每组志愿者佩戴同款隐形眼镜(具体度数根据志愿者平时使用情况进行选择)，均佩戴4h后，志愿者均出现不同程度的视觉疲劳、眼干眼涩等症状；4h后每组5人分别采用对应样品进行洗眼，用药量为1ml；
[0151]
疗效判定标准如下表6所示：
[0152]
表6
[0153][0154]
具体测试结果如表7所示：
[0155]
表7
[0156][0157]
由表7测试结果可知，本发明所述含裂褶多糖的洗眼液可对眼球起到很好的湿润、缓解疲劳、清洁等作用，且舒适性和润滑感，对长时间佩戴隐形眼镜引起的眼部视觉疲劳、眼干眼涩等症状具有极佳的功效。
[0158]
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的含裂褶多糖的洗眼液及其制备方法，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。