一种氯硝柳胺哌嗪盐颗粒剂的制备方法与流程

1.本发明属于药物剂型技术领域，具体地，涉及一种氯硝柳胺哌嗪盐颗粒剂的制备方法。


背景技术：

2.氯硝柳胺是二十世纪六十年代fda批准用于治疗肠道寄生虫感染的bcsii类化合物，后也常掺于饲料中用于治疗和预防家畜的寄生虫感染。氯硝柳胺由于存在水溶性低、生物利用度不高等一系列缺陷使得它不具备理想的药代动力学特征。因此，业界利用氯硝柳胺盐来增加氯硝柳胺的溶解性能，用氯硝柳胺盐物质进行药学应用。其中常用的有氯硝柳胺乙醇胺盐。如中国专利cn105394037b公开的氯硝柳胺乙醇胺盐自乳化微乳剂及其制法，该氯硝柳胺乙醇胺盐自乳化微乳剂由氯硝柳胺乙醇胺盐、油相、乳化剂和助乳化剂配制而成，各组分之间的质量比为氯硝柳胺乙醇胺盐：油相：乳化剂：助乳化剂＝1：1～15：5～30：5～20。也有氯硝柳胺哌嗪盐的出现，如中国专利cn102432493b氯硝柳胺哌嗪盐的制备方法，提供一种反应条件温和、步骤简单、反应时间短、后处理方法简单、收率高和产品纯度高的氯硝柳胺哌嗪盐的制备方法。且氯硝柳胺哌嗪盐是一种广谱、高效、低毒的兽用驱虫药品。氯硝柳胺哌嗪盐制剂药物通过口服进入兽类动物体内，氯硝柳胺哌嗪盐主要作用部位为动物肠道部，对动物肠道部位的寄生虫进行杀虫、杀卵。因此，有必要研究出一种氯硝柳胺哌嗪盐的制剂，使其在胃部不释放或者释放很少，减少服用量和对胃的刺激，提高氯硝柳胺哌嗪盐的药效。
3.因此，本发明提供了一种氯硝柳胺哌嗪盐颗粒剂的制备方法。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种氯硝柳胺哌嗪盐颗粒剂的制备方法，以解决背景技术中提到的问题。
5.为解决氯硝柳胺哌嗪盐制剂在动物胃部不释放或者释放很少的问题，本发明人选用壳聚糖对氯硝柳胺哌嗪盐进行包裹，考虑溶液包覆生产设备复杂，且成本较高，本发明人选用干法包裹。但是，经过干法包裹以及后续壳聚糖包裹氯硝柳胺哌嗪盐模拟胃液实验发现以下两个问题：一是干法包裹制备中，壳聚糖对氯硝柳胺哌嗪盐的包裹率较低；二是壳聚糖在酸性环境下易分解，氯硝柳胺哌嗪盐在模拟胃液中有释放。因此，本发明人对壳聚糖进行强度增强改性，以降低壳聚糖在酸性环境下的分解性能，延长其分解时间；提高干法制备中壳聚糖对氯硝柳胺哌嗪盐的包裹率。
6.本发明的目的可以通过以下技术方案实现：
7.一种氯硝柳胺哌嗪盐颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：
8.步骤一、将氯硝柳胺哌嗪盐粉碎，过筛，得氯硝柳胺哌嗪盐粉末；
9.步骤二、将氯硝柳胺哌嗪盐粉末和成膜剂混合后，加入刚玉球磨机中进行球磨5-6h，得复合粉体，其中，球料比为2：1，刚玉球的转速为250-350r/min；将复合粉体和助剂加
入研磨机中，研磨20-40min，挤压过筛，干燥，得一种氯硝柳胺哌嗪盐颗粒剂。
10.进一步地，步骤一中过筛的大小为150-200目。
11.进一步地，步骤二中氯硝柳胺哌嗪盐粉末、成膜剂、助剂的质量比为40-80：5-15：5-55。
12.进一步地，所述助剂为润滑剂、粘合剂、崩解剂按照质量比1-5：1-5：1-5混合组成。
13.进一步地，所述润滑剂为滑石粉、月桂醇硫酸镁中的一种。
14.进一步地，所述粘合剂为聚维酮k30、乙基纤维素、玉米淀粉中的一种。
15.进一步地，所述崩解剂为羧甲淀粉钠、低取代羟丙基纤维素中的一种。
16.进一步地，所述成膜剂为改性壳聚糖，通过以下步骤制成：
17.a1、将(3-氯丙基)三甲氧基硅烷和甲醇加入到单口烧瓶中，常温搅拌使其混合均匀，随后加入浓盐酸，40℃下800-1000r/min搅拌反应5d，使水解重排反应充分进行，反应结束后，过滤，取沉淀并用甲醇洗涤数次后，真空干燥，得氯丙基-poss，其中，(3-氯丙基)三甲氧基硅烷、甲醇、浓盐酸的用量比为0.055-0.06mol：250-270ml：8-9ml；
18.在a1反应中利用(3-氯丙基)三甲氧基硅烷在酸性条件下的水解，且该氯丙基-poss的分子结构式如下所示，该poss结构具有纳米尺寸、笼型结构，生物相容性好，且细胞毒性低，常用于医药的载体，本发明中利用该结构的刚性特性，改善壳聚糖在胃液中易分解的缺点；
[0019][0020]
a2、将氯丙基-poss、硬脂酸、三乙胺和二甲苯加入带有冷凝装置、搅拌装置的三口烧瓶中，搅拌均匀，加热回流反应8h，冷却，水洗，取油相用无水乙醚提取2-3次，合并油相，无水硫酸钠干燥过夜，过滤，减压旋蒸，得改性poss，其中，氯丙基-poss、三乙胺、硬脂酸的摩尔比为1：1.5-2：1.5-2；
[0021]
在a2反应中利用氯丙基-poss中的氯和硬脂酸中的羧基的反应，使得，poss结构中接枝有硬脂酸的长碳链，且控制氯丙基-poss和硬脂酸的摩尔比，使得poss结构中仍含有氯丙基；
[0022]
a3、将改性poss加入乙醇中，搅拌至溶液澄清透明，获得混合溶液a；将壳聚糖、去离子水加入三口烧瓶中，30℃下搅拌30min，加入三乙胺，然后用恒压滴液漏斗滴加混合溶液a，滴加速度为1-3滴/秒，30℃反应48h，冷却至室温，将反应后的混合液离心以除去沉淀，使用纤维素膜渗析袋将其在去离子水中渗析4天；将其再次离心后冷冻干燥，得改性壳聚糖，其中，改性poss、壳聚糖、三乙胺的质量比为10-20：100：4-8。
[0023]
在a3反应中，利用改性poss中的氯和壳聚糖中的氨基反应，使得壳聚糖分子上接
枝有改性poss结构。
[0024]
本发明的有益效果：
[0025]
在本发明中以改性壳聚糖为成膜剂，对氯硝柳胺哌嗪盐进行包裹，且包裹率高，降低了氯硝柳胺哌嗪盐在胃部中的释放，减少服用量和对胃的刺激，提高了氯硝柳胺哌嗪盐在肠道部位的释放量，降低了有效药剂量，其原理解释如下：
[0026]
所述改性壳聚糖为接枝有改性poss的壳聚糖，利用了poss的结构特性——笼型的硅氧键构成，具有纳米尺寸、刚性、生物相容性好的特性，利用其刚性特点(硅氧键键能高)，提高了改性壳聚糖膜的硬度，提高了包裹膜的稳定性，利用了poss结构在酸性条件下，硅氧键更易与氢离子键形成大量氢键作用，形成硅-氧-氢-硅-氧-氢的网络，阻碍水分子进一步与改性壳聚糖分子链的接触，进一步增强改性壳聚糖模的强度，降低了改性壳聚糖膜的分解，而在中性条件下，poss结构与水分子虽然可以形成硅-氧-氢-硅-氧-氢的网络，但是该网络中的氢为水分子提供，水分子仍可与改性壳聚糖膜分子链接触，使其发生分解，且氢离子为裸露的氢原子其吸电子的能力比水中氢原子吸引电子的能力强，明显地，酸性条件下形成的氢键作用强于中性条件下形成的氢键作用，因此，改性壳聚糖在酸性条件下分解慢，在中性条件下的分解快，即降低了氯硝柳胺哌嗪盐在胃部中的释放，提高了氯硝柳胺哌嗪盐在肠道部位的释放量；
[0027]
所述改性poss为接枝有硬脂酸长的碳链的poss，当改性壳聚糖和氯硝柳胺哌嗪盐粉末混合研磨时，poss结构的纳米尺寸效应，以及长的碳链对氯硝柳胺哌嗪盐粉末进行润湿和包裹，提高了改性壳聚糖对氯硝柳胺哌嗪盐的包裹率，进一步解释为poss结构的纳米尺寸效应以及易迁移特性，使得长碳链易和氯硝柳胺哌嗪盐分子进行接触，再在长碳链的缠绕和折叠特性下，对氯硝柳胺哌嗪盐进行包裹，进而带动壳聚糖大分子链对氯硝柳胺哌嗪盐颗粒包裹，提高改性壳聚糖对氯硝柳胺哌嗪盐粉末的包裹率。
具体实施方式
[0028]
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
[0029]
实施例1
[0030]
改性壳聚糖的制备：
[0031]
a1、将0.055mol(3-氯丙基)三甲氧基硅烷和250ml甲醇加入到单口烧瓶中，常温搅拌使其混合均匀，随后加入8ml浓盐酸，40℃下800r/min搅拌反应5d，使水解重排反应充分进行，反应结束后，过滤，取沉淀并用甲醇洗涤数次后，真空干燥，得氯丙基-poss，浓盐酸的浓度为37％；
[0032]
a2、将0.01mol氯丙基-poss、0.015mol硬脂酸、0.015mol三乙胺和二甲苯加入带有冷凝装置、搅拌装置的三口烧瓶中，搅拌均匀，加热回流反应8h，冷却，水洗，取油相用无水乙醚提取2次，合并油相，无水硫酸钠干燥过夜，减压旋蒸，得改性poss；
[0033]
a3、将10g改性poss加入60ml乙醇中，搅拌至溶液澄清透明，获得混合溶液a；将100g壳聚糖、350ml去离子水加入三口烧瓶中，30℃下搅拌30min，加入4g三乙胺，然后用恒
压滴液漏斗滴加混合溶液a，滴加速度为1滴/秒，30℃反应48h，冷却至室温，将反应后的混合液离心以除去沉淀，使用纤维素膜渗析袋将其在去离子水中渗析4天；将其再次离心后冷冻干燥，得改性壳聚糖。
[0034]
实施例2
[0035]
改性壳聚糖的制备：
[0036]
a1、将0.06mol(3-氯丙基)三甲氧基硅烷和270ml甲醇加入到单口烧瓶中，常温搅拌使其混合均匀，随后加入9ml浓盐酸，40℃下1000r/min搅拌反应5d，使水解重排反应充分进行，反应结束后，过滤，取沉淀并用甲醇洗涤数次后，真空干燥，得氯丙基-poss，浓盐酸的浓度为37％；
[0037]
a2、将0.01mol氯丙基-poss、0.02mol硬脂酸、0.02mol三乙胺和二甲苯加入带有冷凝装置、搅拌装置的三口烧瓶中，搅拌均匀，加热回流反应8h，冷却，水洗，取油相用无水乙醚提取3次，合并油相，无水硫酸钠干燥过夜，减压旋蒸，得改性poss；
[0038]
a3、将20g改性poss加入100ml乙醇中，搅拌至溶液澄清透明，获得混合溶液a；将100g壳聚糖、350ml去离子水加入三口烧瓶中，30℃下搅拌30min，加入8g三乙胺，然后用恒压滴液漏斗滴加混合溶液a，滴加速度为3滴/秒，30℃反应48h，冷却至室温，将反应后的混合液离心以除去沉淀，使用纤维素膜渗析袋将其在去离子水中渗析4天；将其再次离心后冷冻干燥，得改性壳聚糖。
[0039]
实施例3
[0040]
一种氯硝柳胺哌嗪盐颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：
[0041]
步骤一、将氯硝柳胺哌嗪盐粉碎，过150目筛，得氯硝柳胺哌嗪盐粉末；
[0042]
步骤二、称取40g氯硝柳胺哌嗪盐粉末、5g成膜剂、55g助剂；将氯硝柳胺哌嗪盐颗粒和成膜剂混合后，加入刚玉球磨机中进行球磨5h，得复合粉体，其中，球料比为2：1，刚玉球的转速为250r/min；将复合粉体和助剂加入研磨机中，研磨20min，挤压过筛，干燥，得一种氯硝柳胺哌嗪盐颗粒剂，其中，所述助剂为润滑剂、粘合剂、崩解剂按照质量比1：3：1混合组成；所述润滑剂为滑石粉；所述粘合剂为聚维酮k30；所述崩解剂为羧甲淀粉钠，所述成膜剂为实施例1制备的改性壳聚糖。
[0043]
实施例4
[0044]
一种氯硝柳胺哌嗪盐颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：
[0045]
步骤一、将氯硝柳胺哌嗪盐粉碎，过180目筛，得氯硝柳胺哌嗪盐粉末；
[0046]
步骤二、称取60g氯硝柳胺哌嗪盐粉末、12g成膜剂、28g助剂；将氯硝柳胺哌嗪盐颗粒和成膜剂混合后，加入刚玉球磨机中进行球磨5h，得复合粉体，其中，球料比为2：1，刚玉球的转速为300r/min；将复合粉体和助剂加入研磨机中，研磨30min，挤压过筛，干燥，得一种氯硝柳胺哌嗪盐颗粒剂，其中，所述助剂为润滑剂、粘合剂、崩解剂按照质量比3：2：1混合组成；所述润滑剂为月桂醇硫酸镁；所述粘合剂为玉米淀粉；所述崩解剂为低取代羟丙基纤维素，所述成膜剂为实施例2制备的改性壳聚糖。
[0047]
实施例5
[0048]
一种氯硝柳胺哌嗪盐颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：
[0049]
步骤一、将氯硝柳胺哌嗪盐粉碎，过200目筛，得氯硝柳胺哌嗪盐粉末；
[0050]
步骤二、称取80g氯硝柳胺哌嗪盐粉末、15g成膜剂、5g助剂；将氯硝柳胺哌嗪盐颗
粒和成膜剂混合后，加入刚玉球磨机中进行球磨6h，得复合粉体，其中，球料比为2：1，刚玉球的转速为350r/min；将复合粉体和助剂加入研磨机中，研磨40min，挤压过筛，干燥，得一种氯硝柳胺哌嗪盐颗粒剂，其中，所述助剂为润滑剂、粘合剂、崩解剂按照质量比5：1：5混合组成；所述润滑剂为滑石粉；所述粘合剂为乙基纤维素；所述崩解剂为羧甲淀粉钠，所述成膜剂为实施例1制备的改性壳聚糖。
[0051]
对比例1
[0052]
改性壳聚糖的制备：
[0053]
a1、将0.055mol(3-氯丙基)三甲氧基硅烷和250ml甲醇加入到单口烧瓶中，常温搅拌使其混合均匀，随后加入8ml浓盐酸，40℃下800r/min搅拌反应5d，使水解重排反应充分进行，反应结束后，过滤，取沉淀并用甲醇洗涤数次后，真空干燥，得氯丙基-poss，浓盐酸的浓度为37％；
[0054]
a2、将10g氯丙基-poss加入60ml乙醇中，搅拌至溶液澄清透明，获得混合溶液a；将100g壳聚糖、350ml去离子水加入三口烧瓶中，30℃下搅拌30min，加入4g三乙胺，然后用恒压滴液漏斗滴加混合溶液a，滴加速度为1滴/秒，30℃反应48h，冷却至室温，将反应后的混合液离心以除去沉淀，使用纤维素膜渗析袋将其在去离子水中渗析4天；将其再次离心后冷冻干燥，得改性壳聚糖。
[0055]
对比例2
[0056]
与实施例3相比，将改性壳聚糖替换为对比例1制备，其余相同。
[0057]
对比例3
[0058]
与实施例4相比，将改性壳聚糖替换成壳聚糖，其余相同。
[0059]
实施例6
[0060]
包裹率测试：
[0061]
利用autosorb-iq型比表面分析仪测试实施例3-5和对比例2-3中步骤二中制得的复合粉体的比表面积分布曲线，测得复合粉体的比表面积峰值和峰值(峰值
±
0.2)面积占比率如表1所示。
[0062]
表1
[0063][0064]
从表1中可以看出，实施例3-5使用的改性壳聚糖对氯硝柳胺哌嗪盐的包裹率高于对比例2-3使用的改性壳聚糖和壳聚糖，这是因为当成膜剂(改性壳聚糖或壳聚糖)对氯硝柳胺哌嗪盐的包裹率高，复合粉体的比表面积分布曲线较窄，表现为单一的峰值，且峰值
(峰值
±
0.2)面积占比率高，若成膜剂(改性壳聚糖或壳聚糖)对氯硝柳胺哌嗪盐的包裹率低，复合粉体的比表面积分布曲线较宽，表现为多个峰值，且峰值(峰值
±
0.2)面积占比率低。
[0065]
实施例7
[0066]
模拟肠胃缓释试验：
[0067]
将实施例3-5和对比例2-3获得的氯硝柳胺哌嗪盐颗粒制剂分散在不同ph的水溶液中，平均分成12份等体积的溶液，间隔30min、1h、2h、4h、6h后，测试氯硝柳胺哌嗪盐的释放率(释放量与氯硝柳胺哌嗪盐总质量的比值)；
[0068]
测试方法：溶液在37℃的磁力搅拌器上搅拌，18000g离心10min，取上清液，测试上清液中的氯硝柳胺哌嗪盐的含量(释放量)，12份取平均值，其中，不同ph值为1.0、6.8、7.2；
[0069]
氯硝柳胺哌嗪盐含量的确定以氯硝柳胺的量和哌嗪盐的量和为计，利用滴定方法测定哌嗪盐的量，再利用高效液相色谱法测定氯硝柳胺的量；
[0070]
其中，滴定方法测定哌嗪盐的量的具体操作如下：
[0071]
精确称取约450mg样品，加入70.0ml冰醋酸，在80-100℃加热搅拌至溶解，用0.1mol/l高氯酸溶液滴定此热溶液，以0.1％萘酚苯基甲醇5滴作为指示剂，1ml0.1mol/l高氯酸相当于4.307mgc4h
10
n2；
[0072]
哌嗪盐含量＝(样品滴定数-空白滴定数)
×
高氯酸浓度
×
0.004307/(称量(g)
×
0.1)*100％；
[0073]
高效液相色谱法测定氯硝柳胺的量的具体操作如下：
[0074]
用辛基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾1g，加水300ml溶解，加入1ml磷酸，用水稀释至1000ml)-甲醇(30∶70)为流动相，检测波长为236nm；
[0075]
对照溶液的制备：各精密称取氯硝柳胺、2-氯-4-硝基苯胺、5-氯水杨酸、至100ml容量瓶中加入50ml甲醇，超声使其溶解，放冷，并用甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液；
[0076]
供试品的制备：精密称取供试品20mg至100ml容量瓶中加入50ml甲醇，超声使其溶解，放冷，并用甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液；
[0077]
氯硝柳胺的量＝(a样
×
m标
×
c标/(a标
×
m样))
×
1.132；
[0078]
上述测试数据如表2-4所示。
[0079]
表2同ph值为1.0
[0080][0081][0082]
表3同ph值为6.8
[0083] 实施例3实施例4实施例5对比例2对比例330min6.6％7.2％6.9％16.8％14.2％1h11.2％11.8％11.4％21.6％24.5％2h22.8％23.1％22.6％32.9％40.1％4h45.8％46.5％45.9％55.7％63.6％6h67.9％68.6％68.4％79.4％87.1％
[0084]
表4同ph值为7.2
[0085] 实施例3实施例4实施例5对比例2对比例330min8.1％8.5％8.7％18.9％13.4％1h14.4％14.9％15.1％25.4％22.7％2h27.3％27.9％28.4％39.6％38.6％4h52.8％53.0％53.2％78.4％60.1％6h80.7％81.5％81.8％95.4％83.5％
[0086]
从表2-4中的数据可以看出，实施例3-5获得的氯硝柳胺哌嗪盐颗粒制剂在酸性条件下释放速率小，在中性条件下氯硝柳胺哌嗪盐释放速率大；而对比例3在酸性下氯硝柳胺哌嗪盐的释放速率要快于中性条件下的释放速率，说明本发明提供的氯硝柳胺哌嗪盐颗粒对胃的刺激小。
[0087]
在说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
[0088]
以上内容仅仅是对本发明所作的举例和说明，所属本技术领域的技术人员对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，只要不偏离发明或者超越本权利要求书所定义的范围，均应属于本发明的保护范围。