一种具有抗糖化作用的组合物及应用的制作方法

1.本发明属于食品领域，具体涉及一种具有抗糖化、延缓衰老作用的组合物。


背景技术：

2.人体衰老是在真核生物中发生的一系列的复杂过程，涉及人体的皮肤骨骼，心，肝，肾，眼，耳，皮肤等各个器官。经过科学研究发现，晚期糖基化终末产物(ages)是导致机体衰老的原因。ages是在非酶促条件下，蛋白质、氨基酸、脂类或核酸等大分子物质的游离氨基与还原糖(葡萄糖、果糖、戊糖等)的醛基经过缩合、重排、裂解、氧化修饰后产生的一组稳定的终末产物。ages包括内源性(机体产生)的ages和外源性(膳食和环境)的ages。如果组织中和循环系统中积累了过多的ages，机体就会出现病理变化。ages在许多细胞表面具有特异性受体，如巨噬细胞、神经细胞、系膜细胞、内皮细胞，通过这些受体影响细胞的功能，进而导致多种病理反应，如糖尿病及其并发症、阿尔兹海默症、动脉硬化、关节炎、皮肤化、白内障、骨质疏松等疾病。ages具有不可逆性和不可降解性，目前也没有找到可以降解它的物质。
3.现有技术如cn201910138164.3、cn201710075701.5和cn201810824613.5等中主要针对改善皮肤老化提供的组合物或护肤品，并不能够改善整个机体的抗糖化状况来延缓衰老。


技术实现要素：

4.针对现有技术中存在的不能有效抑制ages生成问题，本发明提供一种具有抗糖化作用的组合物。
5.本发明提供一种具有抗糖化作用的组合物，按重量份计，所述组合物包含植物发酵物5-80份、灭活干酵母或酵母衍生物干物质5-30份和植物提取物干物质1-30份。
6.优选地，按重量份计，所述组合物包含植物发酵物10-60份、灭活干酵母或酵母衍生物干物质10-25份和植物提取物干物质5-20份；
7.优选地，按重量份计，所述组合物包含植物发酵物30-50份、灭活干酵母或酵母衍生物干物质15-20份和植物提取物干物质8-15份。
8.优选地，所述植物发酵物为植物发酵液或植物发酵液干燥后的固体。
9.优选地，所述植物发酵液经冻干、喷雾干燥或滚筒干燥后得到植物发酵液干燥后的固体。
10.当植物发酵物为植物发酵液时，所述植物发酵物的重量份是以植物发酵液中所含固体计，优选地，植物发酵液中所含固体质量含量为30-70％。
11.本发明中所述的植物发酵物是将粉碎的植物原料经微生物发酵后得到。
12.优选地，植物发酵物的原料选自含有黄酮类、多酚类、多糖类、萜类和甾醇类的植物或所述植物提取物中的一种或两种以上，
13.优选地，所述植物发酵物的原料选自雪莲、雪莲提取物，橄榄，橄榄提取物，绿茶，
绿茶提取物，红石榴，红石榴提取物，大米，大米提取物，红葡萄，红葡萄提取物，黑生姜，黑生姜提取物，香瓜，香瓜提取物，葡萄籽，葡萄籽提取物，枸杞，枸杞提取物，人参，山楂或玫瑰中的一种或两种以上；
14.优选地，所述植物发酵物的原料选自红石榴、人参、山楂、绿茶或玫瑰中的一种或两种以上的组合；
15.优选地，所述植物发酵物的原料选自山楂或绿茶中的一种或两种。
16.优选地，植物发酵物是由乳杆菌和/或酵母菌中的一种或两种以上的组合发酵制得的发酵液干燥得到；
17.优选地，所述乳杆菌选自保藏编号为cctcc no：m 2017629的lactobacillus plantarum 001菌株和保藏编号cctcc no：m 2019568的戊糖乳杆菌rpc2b菌株(lactobacillus pentosus rpc2b)菌株中的一种或两种以上的组合；
18.优选地，所述酵母菌选自保藏编号为cctcc no：m 2017781的saccharomyces cerevisiae a3.12菌株。
19.优选地，所述灭活干酵母选自灭活干富锌酵母、灭活干富含谷胱甘肽的酵母或灭活干富硒酵母中的一种或两种以上的组合；
20.优选地，所述酵母衍生物干物质选自富锌酵母衍生物干物质、富含谷胱甘肽的酵母或富硒酵母的衍生物中的种或两种以上的组合；
21.优选地，所述酵母衍生物选自酵母抽提物、酵母多肽中的一种或两种。
22.优选地，植物提取物干物质选自白芸豆提取物干物质，桑叶提取物干物质，苦瓜提取物干物质，芦荟提取物干物质，红石榴提取物干物质，葡萄籽提取物干物质，红葡萄提取物干物质，绿茶提取物干物质，橄榄提取物干物质，香瓜提取物干物质，雪莲提取物干物质，黑生姜提取物干物质，大米提取物干物质，薏苡仁提取物干物质，针叶樱桃提取物干物质和枸杞提取物干物质中的一种或两种以上；
23.优选地，所述植物提取物干物质选自橄榄提取物干物质、香瓜提取物干物质、雪莲提取物干物质、黑生姜提取物干物质、大米提取物干物质、薏苡仁提取物干物质、针叶樱桃提取物干物质、苦瓜提取物干物质和葡萄籽提取物干物质。
24.优选地，所述组合物还包括胶原蛋白5-10份，
25.和\或鲑鱼鼻软骨复合粉1-3份，
26.和\或维生素e 0.5-1份，
27.和\或白藜芦醇0.5-1份。
28.优选地，所述组合物还包括辅料，
29.优选地，所述辅料为20-80份，优选地，所述辅料选自淀粉、蔗糖、糖醇、香精、水果粉、果汁，色素、高倍甜味剂、葡萄糖、果糖、果葡糖浆，苹果酸，柠檬酸和酒石酸中的一种或两种以上；
30.优选地，所述糖醇包括麦芽糖醇，甘露糖醇，赤藓糖醇，山梨糖醇，木糖醇和异麦芽酮糖醇中的一种或两种以上的组合；
31.优选地，所述香精包括葡萄，石榴，百香果，玫瑰，水蜜桃，芒果，荔枝，蓝莓和蔓越莓中的一种或两种以上的组合；
32.优选地，所述水果粉包括莓果，橄榄，荔枝，芒果，葡萄，石榴，水蜜桃，百香果，蓝莓
和蔓越莓中的一种或两种以上的组合；
33.优选地，所述果汁包括苹果汁，胡萝卜汁，蔓越莓，葡萄和石榴中的一种或两种以上的组合；
34.优选地，所述色素包括日落红，柠檬黄，日落红，赤藓红，胭脂红和苋菜红中的一种或两种以上的组合；
35.优选地，所述高倍甜味剂包括阿斯巴甜，三氯蔗糖，甜菊糖苷，罗汉果干，安赛蜜和糖精钠中的一种或两种以上的组合。
36.本发明还提供所述的组合物在制备如下所述产品中的应用：治疗和/或预防糖化产品、延缓衰老产品、治疗和/或预防糖尿病产品、治疗和/或预防代谢疾病产品、治疗和/或预防免疫系统损伤产品、治疗和/或预防骨质疏松产品、治疗和/或预防阿尔兹海默症产品。
37.优选地，所述产品为药品、食品或者化妆品。
38.优选地，所述药品为片剂、胶囊、口服液、粉剂或颗粒剂。
39.本发明提供的组合物能够抑制ages生成，具有延缓衰老功能的组合物，以预防糖尿病，代谢疾病，免疫系统损伤，骨质疏松，阿尔兹海默症等疾病。
40.本发明提供了一种高效、新颖、稳定的不仅具有延缓肌肤衰老功能而且还具有抗糖化、延缓整个机体衰老的健康食品，以预防糖尿病，代谢疾病，免疫系统损伤，骨质疏松，阿尔兹海默症等疾病的健康食品。本发明产品经过实验验证具延缓衰老和抗糖化的作用。相对于抗糖化的护肤品来解决肌肤的衰老来说，该组合可以由内而外的解决肌肤衰老问题的同时还可以延缓整个机体的衰老来达到预防糖尿病，代谢疾病，免疫系统损伤，骨质疏松，阿尔兹海默症等疾病的作用。
41.菌种保藏信息
42.本发明中的戊糖乳杆菌rpc2b菌株(lactobacillus pentosus rpc2b)于2019年7月19日保藏于中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏编号为cctcc no：m 2019568，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，邮政编码：430072；电话：027-68754052。
43.本发明中的lactobacillus plantarum 001于2017年10月25日保藏于中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏编号为cctcc no：m 2017629，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，邮政编码：430072；电话：027-68754052。
44.本发明中的saccharomyces cerevisiae a3.12于2017年12月11日保藏于中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏编号为cctcc no：m 2017781，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，邮政编码：430072；电话：027-68754052。
具体实施方式
45.本发明提供一种具有抗糖化作用的组合物，按重量份计，所述组合物包含植物发酵物5-80份、灭活干酵母或酵母衍生物干物质5-30份、植物提取物干物质1-30份。
46.本发明提供的组合物以抑制ages生成来实现抗糖化作用，并抵抗人体衰老。
47.本发明中所述的植物发酵物是将粉碎的植物原料经微生物发酵后得到。
48.在本发明的一种具体实施方式中，所述植物发酵液的制备方法为将粉碎的植物原料与lactobacillus plantarum 001(菌种保藏号cctcc no：m2017629)，lactobacillus pentosus rpc2b(菌种保藏号cctcc no：m2019568)，saccharomyces cerevisiae a3.12(菌
种保藏号cctcc no：m2017781)中的一种或两种以上的组合在25-30℃摇床中培养24-96h得到初培养物，然后加入氮源和碳源在ph6.5-7.5条件下进行厌氧培养，培养时间为24-40h，温度为36.5-37.5℃，然后80-130℃灭菌35-120min得到发酵液。
49.在本发明的一种具体实施方式中，将所述植物发酵液干燥后得到植物发酵液干燥后的固体，优选地，通过冻干、喷雾干燥或滚筒干燥。
50.在本发明的一种具体实施方式中，所述酵母衍生物的制备方法为将酵母接种于培养基中，在25～36℃温度下，培养20～45h，然后再放大接种，将其转移至发酵罐中培养20～45h得到酵母培养液，然后酶解和分离干燥即得到酵母衍生物。
51.在本发明的一种具体实施方式中，所述植物提取物的制备方法为洗净的植物原料粉碎之后，用水或者乙醇回流蒸煮，水煮的温度为100℃，乙醇回流的温度为60℃，蒸煮4-8h，然后真空浓缩得到浸膏或者是浓缩之后在喷雾干燥得到粉末。
52.为了使本领域技术人员更好的理解本发明，下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明。本领域技术人员应当理解的是，这不应被理解为对本发明权利要求范围的限定。同时需要注意的是，本发明中的试剂或仪器无特别说明的均可通过市售购买得到。
53.本发明所用试剂具体来源列于下面的表1中。
54.表1本发明所用试剂厂商
[0055][0056][0057]
实施例1一种抗糖化组合物
[0058]
雪莲提取物发酵液制备：
[0059]
将雪莲提取物粉末加入到去离子水中，配制100ml浓度为70wt％雪莲提取物溶液，将活化后的lactobacillus pentosus rpc2b种子液按照接种比例为5％(v/v)加入到雪莲提取物溶液中，在25℃摇床中培养96h得到初培养物，然后加入10g酵母抽提物和10g葡萄
糖，调节ph为6.5，在36.5℃条件下厌氧培养40h，然后120℃灭菌30min得到发酵液，发酵液中固体质量含量为65％。
[0060]
取雪莲提取物发酵液5份(以雪莲提取物发酵液中固体质量含量计)，富谷胱甘肽酵母抽提物30份，桑叶提取物1份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0061]
实施例2一种抗糖化组合物
[0062]
橄榄提取物发酵液制备：
[0063]
将橄榄提取物粉末加入到去离子水中，配制100ml浓度为50wt％橄榄提取物溶液，将活化后的lactobacillus pentosus rpc2b种子液按照接种比例为3％(v/v)加入到橄榄提取物溶液中，在30℃摇床中培养50h得到初培养物，然后加入10g酵母抽提物和10g葡萄糖，调节ph为7.5，在37.5℃条件下厌氧培养24h，然后120℃灭菌30min得到发酵液，发酵液中固体质量含量为56％。
[0064]
取橄榄提取物发酵液80份(以橄榄提取物发酵液中固体质量含量计)，酵母多肽5份，苦瓜提取物30份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0065]
实施例3一种抗糖化组合物
[0066]
绿茶提取物发酵液制备：
[0067]
将绿茶提取物粉末加入到去离子水中，配制100ml浓度为30wt％绿茶提取物溶液，将体积比为1:1的活化后的lactobacillus plantarum 001种子液、saccharomyces cerevisiae a3.12种子液加入到绿茶提取物溶液中，接种比例为5％(v/v)，在30℃摇床中培养24h得到初培养物，然后加入10g酵母抽提物和10g葡萄糖，调节ph为7，在35℃条件下厌氧培养40h，然后120℃灭菌30min得到发酵液，发酵液中固体质量含量为49％。
[0068]
取绿茶提取物发酵液70份(以绿茶提取物发酵液中固体质量含量计)，富谷胱甘肽酵母抽提物7份，葡萄籽提取物干物质3份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0069]
实施例4一种抗糖化组合物
[0070]
红石榴提取物发酵液制备：
[0071]
将红石榴提取物粉末加入到去离子水中，配制100ml浓度为20wt％红石榴提取物溶液，将活化后的lactobacillus plantarum 001种子液按照接种比例为2％(v/v)加入到红石榴提取物溶液中，在28℃摇床中培养50h得到初培养物，然后加入10g酵母抽提物和10g葡萄糖，调节ph为7.5，在36.5℃条件下厌氧培养40h，然后120℃灭菌30min得到发酵液，发酵液中固体质量含量为42％。
[0072]
取红石榴提取物发酵液8份(以红石榴提取物发酵液中固体质量含量计)，酵母多肽28份，香瓜提取物冻干浓缩粉25份，麦芽糖醇20份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0073]
实施例5一种抗糖化组合物
[0074]
以实施例4中所述方法制备红石榴提取物发酵液。
[0075]
取红石榴提取物发酵液10份(以红石榴提取物发酵液中固体质量含量计)，酵母多肽10份，桑叶提取物干物质5份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0076]
实施例6一种抗糖化组合物
[0077]
人参发酵液制备：
[0078]
将人参粉碎，以质量比为3：7的人参粉碎物和去离子水混匀，配制100g混合液，将活化后的lactobacillus plantarum 001种子液按照接种比例为5％(v/v)加入到混合液
中，在25℃摇床中培养96h得到初培养物，然后加入10g酵母抽提物和10g葡萄糖，调节ph为6.5，在36.5℃条件下厌氧培养40h，然后120℃灭菌30min得到发酵液，发酵液中固体质量含量为46％。
[0079]
取人参发酵液60份(以人参发酵液中固体质量含量计)，酵母多肽25份，黑生姜提取物20份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0080]
实施例7一种抗糖化组合物
[0081]
玫瑰发酵液制备：
[0082]
将玫瑰粉碎，以质量比为2:8的玫瑰粉碎物和去离子水混匀，配制100g混合液，将活化后的saccharomyces cerevisiae a3.12种子液按照接种比例为5％(v/v)加入到混合液中，在30℃摇床中培养24h得到初培养物，然后加入10g酵母抽提物和10g葡萄糖，调节ph为7，在36.5℃条件下厌氧培养30h，然后120℃灭菌30min得到发酵液，发酵液中固体质量含量为40％。
[0083]
取玫瑰发酵液55份(以玫瑰发酵液中固体质量含量计)，富谷胱甘肽酵母抽提物12份，枸杞提取物6份，蓝莓粉20份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0084]
实施例8一种抗糖化组合物
[0085]
雪莲发酵液制备：
[0086]
将雪莲粉碎，以质量比为1:9的雪莲粉碎物和去离子水混匀，配制100g混合液，将体积比为1:1的活化后的lactobacillus plantarum 001种子液和saccharomyces cerevisiae a3.12种子液加入到混合液中，接种比例为5％(v/v)，在30℃摇床中培养60h得到初培养物，然后加入10g酵母抽提物和10g葡萄糖，调节ph为6.5，在37℃条件下厌氧培养40h，然后120℃灭菌30min得到发酵液，发酵液中固体质量含量为30％。
[0087]
取雪莲发酵液15份(以雪莲发酵液中固体质量含量计)，酵母多肽22份，红石榴提取物17份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0088]
实施例9一种抗糖化组合物
[0089]
山楂发酵液制备：
[0090]
将山楂粉碎，以质量比为2:8的山楂粉碎物和去离子水混匀，配制100g混合液，将体积比为1:1的活化后的lactobacillus plantarum 001种子液和lactobacillus pentosus rpc2b种子液加入到混合液中，接种比例为5％(v/v)，在28℃摇床中培养70h得到初培养物，然后加入10g酵母抽提物和10g葡萄糖，调节ph为7.5，在36.5℃条件下厌氧培养40h，然后120℃灭菌30min得到发酵液，发酵液中固体质量含量为43％。
[0091]
取山楂发酵液30份(以山楂发酵液中固体质量含量计)，富谷胱甘肽酵母抽提物15份，苦瓜15份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0092]
实施例10一种抗糖化组合物
[0093]
绿茶发酵液制备：
[0094]
将绿茶粉碎，以质量比为2:8的绿茶粉碎物和去离子水混匀，配制100g混合液，将质量比为1:1:1的活化后的lactobacillus plantarum 001种子液、lactobacillus pentosus rpc2b种子液和saccharomyces cerevisiae a3.12种子液加入到混合液中，接种比例为5％(v/v)，在25℃摇床中培养60h得到初培养物，然后加入10g酵母抽提物和10g葡萄糖，调节ph为7.5，在37.5℃条件下厌氧培养24h，然后120℃灭菌30min得到发酵液，发酵液
中固体质量含量为39％。
[0095]
取绿茶发酵液50份(以绿茶发酵液中固体质量含量计)，富谷胱甘肽酵母抽提物20份，葡萄籽提取物8份，阿斯巴甜20份，百香果粉10份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0096]
实施例11一种抗糖化组合物
[0097]
以实施例7中所述方法制备玫瑰发酵液。
[0098]
取玫瑰发酵液40份(以玫瑰发酵液中固体质量含量计)，酵母多肽20份，橄榄提取物7份，香瓜提取物2份，白藜芦醇1份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0099]
实施例12一种抗糖化组合物
[0100]
以实施例9中所述方法制备山楂发酵液。
[0101]
取山楂发酵液20份(以山楂发酵液中固体质量含量计)，绿茶发酵浓缩粉15份，酵母多肽20份，雪莲提取物10份，黑生姜提取物2份，鲑鱼鼻软骨复合粉3份，维生素e1份，白藜芦醇0.5份，山梨糖醇80份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0102]
实施例13一种抗糖化组合物
[0103]
以实施例9中所述方法制备山楂发酵液。
[0104]
取山楂发酵液10份(以山楂发酵液中固体质量含量计)，绿茶发酵浓缩粉30份，富谷胱甘肽酵母抽提物20份，黑生姜提取物2份，大米提取物12份，胶原蛋白5份，鲑鱼鼻软骨复合粉1份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0105]
实施例14一种抗糖化组合物
[0106]
以实施例9中所述方法制备山楂发酵液。
[0107]
取山楂发酵液25份(以山楂发酵液中固体质量含量计)，绿茶发酵浓缩粉25份，酵母多肽15份，黑生姜提取物干物质5份，薏苡仁提取物干物质5份，针叶樱桃提取物干物质4份，胶原蛋白10份，维生素e 0.5份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0108]
对比例1
[0109]
以实施例9中所述方法制备山楂发酵液。
[0110]
取山楂发酵液1份(以山楂发酵液中固体质量含量计)，富谷胱甘肽酵母抽提物35份，白芸豆提取物35份混匀，制备得到100g组合物。
[0111]
对比例2
[0112]
以实施例10中所述方法制备绿茶发酵液。
[0113]
取绿茶发酵液50份(以绿茶发酵液中固体质量含量计)，酵母多肽2份，白芸豆提取物0.5份混匀，制备得到100g组合物。
[0114]
对比例3
[0115]
取山楂25份(以山楂固体质量含量计)，绿茶浓缩粉25份，酵母多肽15份，黑生姜提取物干物质5份，薏苡仁提取物干物质5份，针叶樱桃提取物干物质4份，胶原蛋白10份，维生素e 0.5份混匀，制备得到100g抗糖化组合物。
[0116]
实施例15不同抗糖化组合物对体外非酶糖化的抑制作用
[0117]
1、检测方法
[0118]
取实施例1-15和对比例1-3中提供的抗糖化组合物，检测本发明提供的抗糖化组合物对体外非酶糖化产物的抑制作用，检测方法如下。
[0119]
ages的测定：用荧光分光光度计在激发波长370nm、发射波长440nm、狭缝5nm条件
下测定各组反应液的荧光强度f。
[0120]
组合物对体外非酶糖化的抑制作用：在无菌条件下，用含有8mmol/ledta、100u/ml青霉素和100u/ml链霉素的0.1mol/l、ph＝7.4的pbs缓冲液分别配置终浓度为20g/l的牛血清白蛋白溶液和400mmol/l葡萄糖溶液，在上述蛋白质非酶糖化反应体系中分别加入受试物和氨基胍硫酸盐(阳性对照组)，使其终浓度分别为1mg/ml至37℃恒温干燥箱中避光孵育。20d后测定各管530nm处吸光度a，40d后测定各管荧光强度f，计算ages的抑制率。
[0121]
2、结果
[0122]
2.1受试物对ages生成的影响
[0123]
表2受试物对ages生成的抑制率
[0124][0125][0126]
不同浓度的不同组合物对ages抑制效果由表4可知，实施例的组合物的效果优于对比例组合物的效果，说明该组合物对于ages的抑制有很好的效果。