用于治疗炎性皮肤病的局部组合物和方法与流程

用于治疗炎性皮肤病的局部组合物和方法
1.相关申请的交叉引用
2.本技术要求2019年10月22日提交的美国临时申请第62/924,611号和2019年4月17日提交的美国临时申请第62/835,451号的权益，所述申请均通过引用以其整体并入本文。
技术领域
3.本文描述的主题涉及用于治疗患有炎性皮肤病的受试者的组合物和方法。
技术背景
4.许多炎性疾病深深影响患者的生活，并在皮肤和/或粘膜中有表现。这些疾病中的许多是靶向自身蛋白质或共生微生物群的自身炎症。这些疾病包括但不限于银屑病(ps)、特应性皮炎(ad)、接触性皮炎、化脓汗腺炎(hs)、坏疽性脓皮病(pg)、斯威特综合征(sweet’s syndrome)、pstpip-1基因中的突变(papa综合征、papsh综合征和pash综合征)、白塞氏病、大疱性类天疱疮、粘膜类天疱疮、寻常型天疱疮、皮肤克罗恩病、合征、系统性红斑狼疮、结节性痒疹(pn)、慢性苔藓样糠疹、掌跖脓疱病(ppp)、坏疽性脓皮病(pg)和红皮病(erythoderma)。在许多情况下，这些疾病的病理生理学未被很好地理解，限制了合理的治疗方法。有趣的是，这些疾病中的许多与类风湿性关节炎和炎症性肠病诸如溃疡性结肠炎或克罗恩病相关，并且可能共有以th17型反应以及浸润淋巴细胞和嗜中性粒细胞为特征的潜在病理生理学。
5.例如，hs是一种慢性滤泡闭塞性疾病，其涉及具有顶泌腺的皮肤的毛囊皮脂腺单位的滤泡部分。患者可出现复发性结节、窦道形成、脓肿和/或瘢痕形成。所述疾病可出现在任何有顶泌腺或毛囊的地方，包括腋下、腹股沟、臀部和乳房下。症状可包括充满脓液的丘疹、囊肿或结节，其可能会疼痛，并经常散发出难闻的气味。hs是无法治愈的慢性病，其对生活质量有严重的负面影响。
6.芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor，ahr)激动剂已在临床上用于治疗自身炎性疾病，包括溃疡性结肠炎、多发性硬化、特应性皮炎和银屑病。ahr激动剂包括例如化合物诸如靛青和靛青衍生物，包括靛玉红、甲异靛(meisoindigo)、natura-α(糖基化异靛青)；临床阶段药物，诸如本维莫德、利诺胺(罗喹美克)和拉喹莫德；监管机构批准的药物，诸如伊曲康唑、酮康唑、奥美拉唑和来氟米特；天然存在的化合物，诸如ficz(5,11-二氢-吲哚并[3,2-b]咔唑-6-甲醛、6-甲酰基吲哚并[3,2-b]咔唑)和吲哚衍生物；和多环芳香烃(polyaromatic hydrocarbons)，诸例如2,3,7,8-四氯二苯并-对-二噁英(tcdd)、煤焦油、精制煤焦油和烟草燃烧的成分。除了银屑病和特应性皮炎，临床上还没有使用ahr激动剂来治疗皮肤中出现的自身炎症性疾病。
[0007]
发明简述
[0008]
下面描述和说明的以下方面及其实施方案是示例性和说明性的，而不是对范围的限制。
[0009]
一方面，提供了局部组合物，其包油质化合物、溶剂和约0.001-0.3重量％的靛玉
红。
[0010]
在一些实施方案中，所述组合物任选包含蜡，并且在一个实施方案中，所述蜡是非天然存在的蜡。在一些实施方案中，当存在蜡时，蜡以约12-60重量％的含量存在于所述组合物中。在一些实施方案中，蜡在室温(约25℃)下是固体。示例性蜡包括蜂蜡、石蜡、鲸蜡醇和羊毛脂。
[0011]
在一个实施方案中，所述油质化合物在室温(约25℃)下是液体。在一个实施方案中，所述油质化合物以约8-90重量％、10-80重量％、10-65重量％、15-80重量％或20-65重量％的含量存天于所述组合物中。在一些实施方案中，所述油质化合物是具有至少约8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个或20个碳原子的合成化合物。在一个实施方案中，所述油质化合物是油酸，癸二酸二乙酯。在其它实施方案中，所述油质化合物是植物基油，诸如橄榄油或蓖麻油。在其它实施方案中，所述油质化合物是石油基油，例如矿物油。
[0012]
在一个实施方案中，所述溶剂是非质子溶剂(aprotic solvent)。在另一个实施方案中，所述溶剂的分子量小于约100g/mol。在一些实施方案中，所述溶剂以约2.5-35重量％或5-35重量％存在于所述组合物中。在其它实施方案中，所述溶剂是非油质的。
[0013]
在另一个实施方案中，所述溶剂选自二甲基亚砜、n-甲基-2-吡咯烷酮、二甘醇单乙醚、肉豆蔻酸异丙酯、甘油和/或丙二醇。在另一个实施方案中，所述溶剂是选自二甲基亚砜、n-甲基-2-吡咯烷酮、二甘醇单乙醚和肉豆蔻酸异丙酯的非质子溶剂。在另一个实施方案中，所述溶剂选自甘油和丙二醇。
[0014]
在其它实施方案中，所述溶剂是两种或更多种溶剂。在一些实施方案中，所述两种或更多种溶剂是或者包括丙二醇和二甲基亚砜。
[0015]
在其它实施方案中，所述组合物还包含表面活性剂、增稠剂或两者。
[0016]
在一些实施方案中，所述s靛玉红是合成的靛玉红。在一些实施方案中是，合成的靛玉红基本上不含杂质，诸如靛青、色胺酮(tryptanthrin)和青黛酮(qingdianone)。在一个实施方案中，所述合成的靛玉红包含少于约0.1重量％的靛青、色胺酮和青黛酮。
[0017]
在其它实施方案中，当组合物在体外或体内以10mg/cm2局部施用于人皮肤时，提供以下的一种或多种：(i)靛玉红的非治疗性的全身性血液水平，(ii)当施用于皮肤24小时时，超过约14.7ng/cm2的靛玉红进入表皮，(iii)当施用于皮肤24小时时，超过约16.9ng/cm2的靛玉红进入真皮；和(iv)相对于缺少合成靛玉红的相同组合物，皮肤中cyp1a1的上调超过100倍。
[0018]
另一方面，提供了局部组合物，其包含大于约0.01重量％且等于或小于0.2重量％的量的合成靛玉红，以及形成软膏的药学上可接受的载体，其中靛玉红基本上完全溶解在软膏中。在一个实施方案中，合成靛玉红包含少于0.1重量％的靛青、色胺酮和青黛酮，并且在其它实施方案中，以10mg/cm2在体外或体内局部施用于人皮肤时，该组合物提供了以下的一种或多种：(i)靛玉红的非治疗性的全身性血液水平，(ii)当施用于皮肤上24小时时，超过约14.7ng/cm2的靛玉红进入表皮，(iii)当施用于皮肤上24小时时，超过约16.9ng/cm2的靛玉红进入真皮；以及(iv)相对于缺少合成靛玉红的相同组合物，皮肤中cyp1a1的上调超过100倍。
[0019]
另一方面，提供了减轻与炎性皮肤病相关的症状的方法。该方法包括向受试者施
用治疗有效量的包含ahr激动剂的组合物。
[0020]
另一方面，提供了对先前已通过施用包含不是ahr激动剂的活性剂的组合物治疗过炎性皮肤病的受试者治疗炎性皮肤病的方法。该方法包括向受试者施用治疗有效量的包含ahr激动剂的组合物，从而治疗受试者的炎性皮肤病。
[0021]
在又一方面，提供了用于防止被诊断患有炎性皮肤病的受试者中与炎性皮肤病相关的症状复发，或用于降低所述受试者的炎性皮肤病的频率或用于降低所述受试者的与炎性皮肤病相关的新病变、脓肿或结节的频率的方法。该方法包括向受试者施用治疗有效量的包含ahr激动剂的组合物，从而防止所述受试者中与炎症性皮肤病相关的症状复发或降低所述受试者中炎性皮肤病的频率。
[0022]
在一个实施方案中，所述炎性皮肤病是坏疽性脓皮病。
[0023]
在另一个实施方案中，所述炎症性皮肤病是银屑病。
[0024]
在另一个实施方案中，所述炎症性皮肤病是特应性皮炎。
[0025]
在又一个实施方案中，所述炎性皮肤病是接触性皮炎。
[0026]
在另一个实施方案中，所述炎性皮肤病是掌跖脓疱病
[0027]
在另一个实施方案中，所述炎性皮肤病是结节性痒疹。
[0028]
在另一个实施方案中，所述炎性皮肤病是化脓性汗腺炎。
[0029]
在其它方面，提供了用于治疗化脓性汗腺炎(hidradenitis suppurativa，hs)、坏疽性脓皮病(pyoderma gangrenosum，pg)、银屑病(psoriasis，ps)、特应性皮炎(atopic dermatitis，ad)、掌跖脓疱病(palmoplantar pustulosis，ppp)和/或结节性痒疹(prurigo nodularis，pn)的方法。该方法包括向受试者施用治疗有效量的包含芳香烃受体激动剂或调节剂的组合物，从而在受试者中治疗或预防hs、pg、银屑病和/或特应性皮炎。
[0030]
另一方面，用于缓解与hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn相关的症状的方法包括向受试者施用治疗有效量的包含芳香烃受体激动剂或调节剂的组合物，从而缓解受试者中与hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn相关的症状。
[0031]
在又一方面，提供了一种用于对已通过施用除芳基烃受体激动剂外的活性剂(例如，抗生素、类视黄醇、janus激酶抑制剂、pde-4抑制剂、补体抑制剂、抗tnf-α抗体、抗il-17抗体、抗il-23抗体、抗雄激素和/或类固醇)先前接受过hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn治疗的受试者治疗hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn的方法。该方法包括向受试者施用治疗有效量的包含芳香烃受体激动剂或调节剂的组合物，从而治疗难治性受试者的hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn。
[0032]
在又一方面，提供了用于在诊断为患有hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn的受试者中预防与hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn相关的症状复发或用于降低hs、pg、ps、ppp和/或pn的频率的方法。该方法包括向受试者施用治疗有效量的包含芳香烃受体激动剂或调节剂的组合物，从而防止受试者中hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn的症状复发或降低hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn的频率。
[0033]
在适用于本文提及的任何方面的一个实施方案中，组合物包含本维莫德(tapinarof)、靛青和/或靛青衍生物作为芳香烃受体激动剂或调节剂。在一个实施方案中，芳基烃受体激动剂是靛青的前药或靛青衍生物的前药。
[0034]
在适用于本文提及的任何方面的一个实施方案中，组合物是青黛(indigo naturalis)。在适用于本文提及的任何方面的另一个实施方案中，组合物不是青黛，组合物
不包含靛青作为ahr受体激动剂，并且/或者组合物不包含天然靛玉红含作为ahr受体激动剂。在适用于本文提及的任何方面的另一个实施方案中，组合物不包含青黛的任何成分作为ahr激动剂。相反，在一个实施方案中，本文所述的组合物包含呈碱或盐形式的合成靛玉红。
[0035]
在适用于本文提及的任何方面的一个实施方案中，将组合物局部施用于受炎性皮肤病影响的受试者上的皮肤区域。
[0036]
在适用于本文提及的任何方面的另一个实施方案中，组合物包含靛青和/或靛青衍生物。在一个实施方案中，靛青和/或靛青衍生物是靛青、靛玉红和/或靛红中的一种或多种。在一个实施方案中，包含靛青、靛玉红和/或靛红中的一种或多种的组合物不是青黛。在另一个实施方案中，包含靛青、靛玉红和/或靛红中的一种或多种的组合物是包含合成产生的靛青、靛玉红和/或靛红中的一种或多种的组合物。在另一个实施方案中，包含靛青、靛玉红和/或靛红中的一种或多种的组合物是包含靛青、靛玉红和/或靛红的合成产生的前药的一种或多种的组合物。
[0037]
在一个实施方案中，所述方法包括将所述组合物局部施用至受自身免疫性疾病或病症(例如，hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn)影响的受试者上的区域。在一个实施方案中，受所述疾病或病症影响的区域是非完整的皮肤。在另一个实施方案中，受所述疾病或病症影响的区域是完整的皮肤。
[0038]
在任何上述实施方案中，所治疗的疾病选自任何自身免疫性或自身炎性疾病，包括但不限于银屑病、坏疽性脓皮病、特应性皮炎、接触性皮炎、掌跖脓疱病和/或结节性痒疹。
[0039]
在另一个实施方案中，该方法包括每天至少约一次、每天至少约两次、每天至少三次施用该组合物。在一个实施方案中，将组合物施用至少4周、6周、8周、10周或12周的一段时间。
[0040]
在又一个实施方案中，将组合物配制成凝胶、霜剂、乳液、混悬剂、半固体、泡沫、油、漆、成膜溶液或软膏。
[0041]
在又一个实施方案中，局部组合物可导致低于ahr的ec
50
的亚治疗性血液或血浆水平。特别是对于靛玉红，局部组合物可导致血液水平低于约0.1ng/ml、低于约0.5ng/ml、低于约1ng/ml、低于约2ng/ml、低于约5ng/ml、低于约10ng/ml或低于约20ng/ml。在另一个实施方案中，由局部组合物产生的血液水平在前面句子中列举的任意两个值之间。
[0042]
在一个实施方案中，该组合物是爵床科(acanthacaea)的板蓝(baphicacanthus cusia)(nees)bremek的提取物。
[0043]
在另一个实施方案中，提取物来自板蓝(nees)bremek的茎和叶。
[0044]
在另一个实施方案中，该组合物是植物木蓝(indigofera tinctoria)、假蓝靛(indigofera suffruticosa)、蓼蓝(polygonum tinctorium)、菘蓝(isatis indigotica)中的一种或多种的提取物。
[0045]
在另一个实施方案中，该组合物包含选自靛青、靛玉红和靛红的化合物以及药学上可接受的载体，其中该组合物不是青黛。在另一个实施方案中，该组合物包含选自靛青、靛玉红和靛红的至少两种化合物，以及药学上可接受的载体，其中该组合物不是青黛。
[0046]
在一个实施方案中，相对于组合物中化合物的重量百分比，所述至少两种化合物
的重量百分比选自以下：
[0047]
(i)约55-95％靛玉红、5-45％靛青和0-40％靛红；
[0048]
(ii)约40-80％靛玉红、20-60％靛青和0-40％靛红；
[0049]
(iii)约20-60％靛玉红、40-80％靛青和0-40％靛红；
[0050]
(iv)约0-40％靛玉红、55-95％靛青和5-45％靛红；
[0051]
(v)约0-40％靛玉红、40-80％靛青和20-60％靛红；
[0052]
(vi)约0-40％靛玉红、20-60％靛青和40-80％靛红；
[0053]
(vii)约5-45％靛玉红、0-40％靛青和55-95％靛红；
[0054]
(viii)约20-60％靛玉红、0-40％靛青和40-80％靛红；和
[0055]
(ix)约40-80％靛玉红、0-40％靛青和20-60％靛红。
[0056]
在一个实施方案中，所述化合物是合成生产的。在另一个实施方案中，通过适当的处理，从提取物中分离该化合物或将该化合物在该提取物中富集。
[0057]
在另一个实施方案中，根据所述方法治疗的受试者选自被诊断为患有hurley i期hs、hurley ii期hs和hurley iii期hs的受试者。
[0058]
另一方面，提供了局部组合物。该组合物包含选自靛青、靛玉红和靛红的一种、两种或更多种化合物，以及药学上可接受的载体。在一个实施方案中，该组合物不是青黛。在一个实施方案中，该组合物提供了与青黛组合物所提供的治疗作用大体上相同的治疗作用。
[0059]
另一方面，组合物包含选自靛青、靛玉红、靛红及其组合的化合物和药学上可接受的载体，其中该化合物是合成产生的，并且其中该组合物提供了与青黛的组合物所提供的大体上相同的治疗hs的治疗效果。
[0060]
在一个实施方案中，与青黛的组合物提供的作用相比，该组合物在治疗自身免疫性疾病或病症方面提供了协同效果。
[0061]
在另一个实施方案中，与施用青黛后观察到的副作用相比，该组合物减少了观察到的副作用。在一个实施方案中，该组合物减少了青黛的下列副作用中的一种或多种：皮肤刺激、皮肤色素沉着、毛囊炎、皮炎、红斑、瘙痒、肝酶变化、肺部或脉管系统不良事件诸如肺动脉高压或皮肤变色或染色的发展。
[0062]
在又一个实施方案中，与载体和单独的靛青、靛玉红或靛红的组合物所提供的作用相比，该组合物在治疗自身免疫性疾病或病症方面提供了协同效果。
[0063]
在一个实施方案中，所述至少两种化合物中的至少一种以比在青黛中的量高至少10％的量存在于所述组合物中。
[0064]
在另一个实施方案中，所述至少两种化合物中的至少一种以比在青黛中的量少至少10％的量存在于所述组合物中。
[0065]
在一个实施方案中，所述至少两种化合物是靛玉红和靛青。
[0066]
在另一个实施方案中，靛玉红和靛青以约1∶30至30∶1的靛玉红与靛青的比例存在于所述组合物中。
[0067]
在一个实施方案中，所述至少两种化合物是靛玉红和靛红。
[0068]
在另一个实施方案中，靛玉红和靛红以约1∶30至30∶1的靛玉红与靛玉红比例存在于所述组合物中。
[0069]
在一个实施方案中，所述至少两种化合物是靛青和靛红。
[0070]
在另一个实施方案中，靛青和靛红以约1∶30至30∶1的靛青与靛红比例存在于组合物中。
[0071]
另一方面，提供了包含靛玉红和药学上可接受的载体的局部组合物，其中靛玉红是合成靛玉红，并且其中该组合物基本上不含靛青和/或靛红。在一个实施方案中，所述组合物包含少于约3％的靛青和/或靛红。在一个实施方案中，所述组合物包含靛玉红，并且包含少于约2.9％、2.8％、2.7％、2.6％、2.5％、2.4％、2.3％、2.2％、2.1％、2.0％、1.9％、1.8％、1.7％、1.6％、1.5％、1.4％、1.3％、1.2％、1.1％、1.0％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％、0.1％、0.09％、0.08％、0.07％、0.06％、0.05％、0.04％、0.03％、0.02％或0.01％的靛青和靛红。
[0072]
在一个实施方案中，含有合成靛玉红的组合物提供了与局部施用的青黛组合物所提供的治疗效果基本相同的治疗效果。
[0073]
在另一个实施方案中，该组合物适于局部递送。
[0074]
在一个实施方案中，局部递送是向完整或破损皮肤的局部递送。
[0075]
在一个实施方案中，局部递送是通过皮肤贴片或微针贴片。
[0076]
在一个实施方案中，局部递送是通过敷料。
[0077]
在一个实施方案中，当该组合物被局部施用时，其产生非治疗性血液水平的合成靛玉红、靛青和/或靛红。
[0078]
在另一个实施方案中，根据本文所述的用于治疗本文所述疾患的治疗方法，该组合物在局部给药后例如24小时或48小时没有产生可测量的合成靛玉红、靛青和/或靛红的全身性血液水平。在另一个实施方案中，根据本文所述的用于治疗本文所述疾患的治疗方法，该组合物在局部施用后例如24小时或48小时未产生合成靛玉红、靛青和/或靛红的生理相关全身性血液水平。
[0079]
在一个实施方案中，载体适于局部给药。
[0080]
除了以上描述的示例性方面和实施方案，通过研究以下描述，其它方面和实施方案将变得显而易见。
[0081]
从以下描述、实施例和权利要求中，本方法和组合物等的其它实施方案等将变得显而易见。正如可根据前面和下面的描述中所理解的，本文所述的每个和每一种特征以及两个或更多个这样的特征的每个和每一种组合都包括在本公开的范围内，只要包括在这样的组合中的特征不相互矛盾。另外，任何特征或特征的组合可以从任何其它实施方案中明确排除。
[0082]
附图简述
[0083]
图1a是显示如本文所述制备和测试的10种制剂在表皮(开放条)和真皮(具有交叉阴影填充的条)中回收的平均药物量(单位为ng)的条形图；
[0084]
图1b是显示了如本文所述制备和测试的10种制剂在受体溶液中的平均累积药物量(单位ng/cm2)作为时间(单位为小时)的函数；以及
[0085]
图2a至图2e是显示cypia1(图2a)、il17-α(图2b)、il1-β(图2c)、il8(图2d)和s100a7(图2e)(每一种都是ahr调节或抗炎或抗微生物反应的生物标志物)在人尸体皮肤中的活性百分比的条形图，其中活性百分比计算为与th17刺激相比，指定的生物标志物的刺
激增加或减少的百分比，对于本文中鉴定为“oo14”的局部制剂，其包含合成靛玉红，并在24小时刺激前施用到皮肤上总共16小时或40小时(在极化前40小时和16小时时施用)；制剂“bmv”是倍他米松类固醇的对照制剂，倍他米松类固醇是除抗菌肽s100a7之外的生物标志物抑制剂。
[0086]
发明详述
[0087]
i.定义
[0088]
现将在下文中更全面地描述各个方面。然而，此类方面可以以许多不同的形式体现，并且不应该被解释为局限于本文阐述的实施方案；相反，提供这些实施方案是为了使本公开彻底和完整，并将向本领域技术人员充分传达其范围。
[0089]
在提供数值范围的情况下，该范围的上限与下限之间的每个居间值以及该所述范围中的任何其它所述或居间值都旨在包含在本公开中。例如，如果陈述了1μm至8μm的范围，则意图是也明确公开了2μm、3μm、4μm、5μm、6μm和7μm，以及大于或等于1μm的数值范围和小于或等于8μm的数值范围。
[0090]
除非上下文另有明确规定，否则单数形式“一个/种(a/an)”和“所述/该”包括复数指代物。因此，例如，提及“聚合物”包括单一聚合物以及两种或更多种相同或不同的聚合物，提及“赋形剂”包括单一赋形剂以及两种或更多种相同或不同的赋形剂，等等。
[0091]
词语“约”在紧接数值之前时表示该数值的正负10％的范围，例如，“约50”表示45至55，“约25,000”表示22,500至27,500，等等，除非本公开的上下文另有说明，或者与这样的解释不一致。例如，在诸如“约49、约50、约55”的数值列表中，“约50”表示延伸到小于前一个值与后一个值之间的间隔的一半的范围，例如大于49.5至小于52.5。此外，短语“小于约”一个值或“大于约”一个值应该根据本文提供的术语“约”的定义来理解。
[0092]
除非另有说明，否则所有百分比、份数和比例均基于局部组合物的总重量，并且所有测量均在约25℃下进行。
[0093]
如本文所用，术语“靛青”通常指具有下式的被鉴定为“靛青”的化合物。
[0094]“靛青衍生物”是指靛青的衍生物，诸如由下面鉴定为无色-靛青(leuco-indigo)、无色-靛玉红(leuco-indirubin)、靛玉红(indirubin)、甲异靛(meisoindigo)和/或靛红(靛青分子一半的氧化形式)的化合物举例说明的那些：
[0095][0096]
靛青衍生物的其它非限制性实例包括硫靛青(thioindigo)、靛胭脂(indigo carmine)、靛玉红-3
’‑
单肟(indirubin-3
’‑
monoxime)、靛玉红-5-磺酸(indirubin-5-sulphonic acid)或5-氯-靛玉红(5-chloro-indirubin)、溴靛玉红-3-肟(bromoindirubin-3-oxime)、5-卤代靛玉红(5-halogenoindirubin)、n-乙基-靛玉红(n-ethyl-indirubin)、n-甲基异靛青(n-methylisoindigo)、美国专利申请公布第2017/0304381号(其通过引用并入本文)中所述的化合物、hubbard,t.d.等人，drug metabolism and disposition,43:1522-1535(2015)(其通过引用并入本文)中所示的化合物。除非明确提及“靛青的前药”或“靛青衍生物的前药”，否则术语“靛青衍生物”不包括靛青和靛青衍生
物的前药。
[0097]“青黛”或in，是指含有靛青和其它靛青衍生物的植物提取物。该提取物可以是粗的,或高度纯化以富集靛青和/或靛青衍生物。所述植物提取物可以来自木蓝(indigofera tinctoria)、假蓝靛(indigofera suffruticosa)、蓼蓝(polygonum tinctorium)、菘蓝(isatis indigotica)、板蓝(baphicacanthus cusia)或其它含有靛青的植物或酵母或细菌。
[0098]
术语“抑制”或“减少”是指与患有病症的受试者的未治疗对照群体相比，抑制或减少患有所述病症的群体中该病症的临床症状的方法。
[0099]
短语“药学上可接受的”在本文中用来指在合理的医学判断范围内，适合用于与人类和/或其它哺乳动物的组织接触，而没有过度毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症，与合理的效益/风险比相称的那些化合物、盐、组合物、剂型等。在某些方面，“药学上可接受的”是指由联邦或州政府的监管机构批准，或在美国药典或其它公认的药典中列出用于哺乳动物(例如动物)，更具体地说，用于人。
[0100]“药学上可接受的盐”表示药物或活性成分、或具有至少一个适于盐形成的基团的其它成分的盐形式，其不会对患者造成显著的不良毒理学影响。提及ahr激动剂化合物，诸如靛玉红，意指包括其药学上可接受的盐，以及其溶剂化物和水合物。药学上可接受的盐包括通过与无机酸、有机酸、碱性氨基酸或酸性氨基酸反应制备的盐，这取决于药物中官能团的性质。合适的药学上可接受的盐包括酸加成盐，其可以例如通过将碱性药物的溶液与能够形成碱性药物的药学上可接受的盐形式的酸(诸如盐酸、碘酸、富马酸、马来酸、琥珀酸、乙酸、柠檬酸、酒石酸、碳酸、磷酸、硫酸等)的溶液混合而形成。当呈质子化形式时，碱性药物的典型阴离子包括氯、硫酸根、溴、甲磺酸根、马来酸根、柠檬酸根和磷酸根。合适的药学上可接受的盐形式和鉴定此类盐的方法可见于例如handbook of pharmaceutical salts:properties,selection and use,weinheim/z
ü
rich:wiley-vch/vhca,2002；p.h.stahl和c.g.wermuth编辑。
[0101]“大体上”或“基本上”是指几乎全部或完全，例如给定量的95％或更多。
[0102]
术语“治疗”在本文中用于例如指治疗炎性皮肤病症的方法，并且通常包括施用化合物或组合物，相对于未接受所述化合物或组合物的受试者，所述化合物或组合物降低了受试者的医学疾患(例如，hs)症状的频率或延迟了其发作。这可包括以改善或稳定受试者的疾患的方式逆转、减轻、缓解或阻止病症的症状、临床体征和/或潜在病理。
[0103]
术语“局部组合物”是指包含药学上可接受的成分(包括活性靛青剂)的材料，其用于向动物或人受试者施用，并应用于皮肤表面，与口服或通过静脉内(皮下)注射施用的材料形成对比。局部组合物通常旨在在施用部位具有其预期作用，并且不会导致血流或其它组织中药物的显著浓度(例如透皮组合物就是这种情况)。本文提供的局部组合物通常用于缓解与皮肤病或疾患相关的症状、治疗皮肤病或疾患或者预防皮肤病或疾患。
[0104]
涉及某一特征或实体的术语“大体上”或“基本上”是指在很大程度上或几乎完全(即，达到85％或更大的程度)涉及该特征或实体。
[0105]
本公开的组合物可包含所公开的组分、基本上由或由所述组分组成。
[0106]
通过保留排除或排除可以根据范围或以任何类似的方式要求保护的任何这样的组(包括组内的任何子范围或子范围的组合)的任何个体成员的权利，可出于任何原因要求
保护少于本公开的全部内容。另外，通过保留排除或排除任何单个取代基、类似物、化合物、配体、结构或其组，或所要求保护的组的任何成员的权利，可以出于任何原因要求保护少于本公开的全部内容。
[0107]
贯穿本公开，引用了各种专利、专利申请和出版物。这些专利、专利申请和出版物的全部公开内容通过引用以其整体并入本公开，以便更全面地描述截至本公开的日期本领域技术人员已知的现有技术状态。在引用的专利、专利申请和出版物与本公开之间存在任何不一致的情况下，以本公开为准。
[0108]
为了方便起见，此处收集了说明书、实施例和权利要求中使用的某些术语。除非另有定义，否则本公开中使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。
[0109]
ii.治疗方法
[0110]
提供了用于治疗自身炎性皮肤病、用于缓解与自身炎性皮肤病相关的症状、用于防止与自身炎性皮肤病相关的症状复发和/或用于降低自身炎性皮肤病的频率的方法。该方法包括向受试者施用治疗有效量的组合物，该组合物包含芳香烃受体激动剂或调节剂以及药学上可接受的载体。该方法部分基于以下发现：芳香烃受体(ahr)系统可以调节免疫反应，并且ahr的激动剂是治疗自身免疫性疾病的有用治疗剂。下文描述了用于该方法的组合物、施用该组合物的方法以及与该方法相关的其它细节。
[0111]
a.组合物
[0112]
用于本文所述方法的组合物包含ahr激动剂或调节剂。
[0113]
ahr激动剂的例子包括本维莫德(本维莫德)(3，5-二羟基-4-异丙基-反式-二苯乙烯；smith等人，j.invest.dermatol.,137(1):2110-2119(2017))；3-甲基胆蒽、二噁英、3',4'-二甲氧基-a-萘黄酮(dimnf)、3,3
’‑
二吲哚基甲烷(devi)、白藜芦醇、姜黄素、靛青和靛青衍生物。其它示例性ahr激动剂描述于hubbard,t.d.等人，drug metabolism and disposition,43:1522-1535(2015)和wo 2012/015914中，所述文献通过引用并入本文。例如，如wo2016/168685中所述可以鉴定激动ahr的化合物。
[0114]
在一些情况下，ahr激动剂可包括批准的药物、批准药物的盐或者分解或代谢为具有ahr激动剂活性的批准药物的前药，包括伊曲康唑、酮康唑、奥美拉唑和来氟米特。
[0115]
在一个实施方案中，该组合物包含本维莫德、其盐或前药以及可接受的载体。下文描述了示例性载体。
[0116]
在一个实施方案中，该组合物包含靛青和/或靛青衍生物以及可接受的载体。在一个实施方案中，该组合物是青黛。在其它实施方案中，包含靛青和/或靛青衍生物的组合物不是青黛，而是包含靛青、靛玉红和/或靛红中的一种或多种的组合物。例如，该组合物可以是富含靛青或靛青衍生物(诸如靛玉红和/或靛红)中的一种或多种的提取物。或者，该组合物可以是由合成生产的靛青和/或靛青衍生物中的一种或多种组成的制剂。现在描述靛青和靛青衍生物的示例性组合物，作为具有ahr激动剂的组合物的说明。
[0117]
由青黛或其提取物组成的组合物预期用于该方法。青黛(也叫qing dai)是由植物木蓝、假蓝靛、蓼蓝和/或菘蓝的干燥和发酵的材料制备的。一种示例性的青黛组合物是高度富含靛玉红的爵床科板蓝(nees)bremek的提取物。在一些情况下，提取物来自板蓝(nees)bremek的茎和叶。
[0118]
将青黛组合物局部施用用于治疗hs，并且如果需要，可以与载体一起配制以方便局部施用和/或增强渗透。示例性载体描述如下。
[0119]
在另一个实施方案中，设想了不是青黛或青黛提取物并且由靛青和/或靛青衍生物组成的组合物。在这些组合物中，靛青和/或靛青衍生物可以合成生产、从植物中提取和/或分离，或者通过发酵或生物反应器制备。靛青和/或靛青衍生物的化学合成和生物合成描述于在例如ensley等人，science,167(1983)中。加工植物以使提取物富含靛青和/或靛青衍生物中的一种或多种是另一种生产组合物的方法，该组合物不是青黛，而是由靛青和/或靛青衍生物组成。
[0120]
在第一实施方案中，组合物包含选自靛青、靛玉红、靛红及其组合的化合物以及药学上可接受的载体，其中该组合物提供了在治疗hs方面与青黛组合物提供的基本相同的治疗作用。或者，与青黛组合物提供的作用相比，该组合物在治疗hs方面可以提供协同作用。或者，与施用青黛后观察到的副作用相比，该组合物可以减少观察到的副作用和/或提高疗效。在局部施用青黛或青黛提取物时观察到的副作用的实例可以是，例如，皮肤刺激、皮肤色素沉着变化、红斑、瘙痒、毛囊炎、皮炎和/或皮肤变色或染色。或者，与单独由载体和靛青、靛玉红或靛红的组合物提供的作用相比，该组合物在治疗hs方面提供了协同作用。
[0121]
在一个实施方案中，组合物中的活性剂化合物，例如靛青、靛玉红和/或靛红，是合成产生的或合成的化合物。在另一个实施方案中，组合物中的活性剂化合物，例如靛青、靛玉红和/或靛红，是从植物提取物中分离的和/或由加工植物提取物(以获得由所述一种或多种化合物组成的精制提取物)得到的。也就是说，该加工技术从提取物中除去除明确需要的化合物外的具有治疗活性的化合物。所述治疗活性化合物，无论是合成产生的还是从植物提取物的加工技术中获得的，都与药学上可接受的载体结合以提供组合物。
[0122]
在一些实施方案中，包含单一治疗性化合物的组合物包含基于所述组合物的总重量约0.001-15重量％、0.001-10重量％、0.001-5重量％、0.001-3重量％、0.001-0.1重量％、0.001-0.3重量％、0.001-0.2重量％、0.01-15重量％、0.01-10重量％、0.01-5重量％、0.05-15重量％、0.05-10重量％、0.05-5重量％、0.1-15重量％、0.1-10重量％、0.1-5重量％、0.2-15重量％、0.2-10重量％、0.2-5重量％、0.3-15重量％、0.3-10重量％、0.3-5重量％、0.4-15重量％、0.4-10重量％、0.4-5重量％、0.5-15重量％、0.5-10重量％、0.5-5重量％、0.6-15重量％、0.6-10重量％、0.6-5重量％、0.7-15重量％、0.7-10重量％、0.7-5重量％、0.8-15重量％、0.8-10重量％、0.8-5重量％、0.9-15重量％、0.9-10重量％、0.9-5重量％、1-15重量％、1-10重量％或1-5重量％的所述单一治疗性化合物。所述治疗性化合物可以是靛青、靛青衍生物或任何其它ahr激动剂。在一个实施方案中，该化合物是合成化合物，不是来自植物的提取物或发酵植物产品。
[0123]
在组合物包含选自靛青、靛玉红和/或靛红的至少两种化合物的实施方案中，在一些实施方案中，基于组合物中活性剂(治疗性)化合物的重量(例如，不基于组合物的总重量)，化合物以下列重量百分比之一存在：
[0124]
(i)约55-95％靛玉红、5-45％靛青和0-40％靛红；
[0125]
(ii)约40-80％靛玉红、20-60％靛青和0-40％靛红；
[0126]
(iii)约20-60％靛玉红、40-80％靛青和0-40％靛红；
[0127]
(iv)约0-40％靛玉红、55-95％靛青和5-45％靛红；
[0128]
(v)约0-40％靛玉红、40-80％靛青和20-60％靛红；
[0129]
(vi)约0-40％靛玉红、20-60％靛青和40-80％靛红；
[0130]
(vii)约5-45％靛玉红、0-40％靛青和55-95％靛红；
[0131]
(viii)约20-60％靛玉红、0-40％靛青和40-80％靛玉红；或者
[0132]
(ix)约40-80％靛玉红、0-40％靛青和20-60％靛红。
[0133]
在一些由靛青、靛玉红和/或靛红组成的组合物中，至少一种化合物以比在青黛中存在的量高至少10％、15％、20％或25％的量存在于该组合物中。在一些由靛青、靛玉红和/或靛红组成的组合物中，至少一种所述化合物存在于组合物中，其中至少一种所述化合物以比在青黛中存在的量低至少10％、15％、20％或25％的量存在于组合物中。
[0134]
在一个实施方案中，组合物中的活性剂包含靛玉红和靛青、或靛玉红和靛红、或靛青和靛红，基本上由或由其靛玉红和靛青、或靛玉红和靛红、或靛青和靛红组成。当靛玉红和靛青存在于组合物中时，它们以约1:30至30:1、1:25至25:1、1:20至20:1、1:15至15:1、1:10至10:1的靛玉红与靛青的比例存在。当靛玉红和靛红存在于组合物中时，它们以约1:30至30:1、1:25至25:1、1:20至20:1、1:15至15:1、1:10至10:1的靛玉红与靛红的比例存在。当靛青和靛红存在于组合物中时，它们以约1:30至30:1、1:25至25:1、1:20至20:1、1:15至15:1、1:10至10:1的靛玉红与靛红的比例存在。或者，活性剂的各种组合可以是比例为约10:1至50:1、15:1至50:1、20:1至50:1、25:1至50:1、15:1至45:1、20:1至45:1、25:1至45:1、30:1至45:1、20:1至30:1、20:1至35:1、20:1至40:1或30:1至35:1的第一活性剂与第二活性剂。在另一个实施方案中，第一活性剂与第二活性剂的比例为约10:1、11:1、12:1、13:1、14:1、15:1、16:1、17:1、18:1、19:1、20:1、21:1、22:1、23:1、24:1、25:1、26:1、27:1、28:1、29:1、30:1、31:1、32:1、33:1、34:1、35:1、36:1、37:1、38:1、39:1、40:1、41:1、42:1、43:1、44:1、45:1、46:1、47:1、48:1、49:1、50:1、51:1、52:1、53:1、54:1、55:1、56:1、57:1、58:1、59:1或60:1。
[0135]
在另一个实施方案中，该组合物包含选自靛青、靛玉红和靛红的至少两种化合物，以及药学上可接受的载体，其中该组合物不是青黛。
[0136]
在实施方案中，基于组合物中活性剂的总重量，第一活性剂(例如，任何ahr激动剂)的重量百分比为约25至99重量％、25至98重量％、25至96重量％、25至95重量％、25至90重量％、25至85重量％、25至75重量％、25至70重量％、25至65重量％、25至60重量％、25至55重量％、25至50重量％、25至45重量％、25至40重量％或25至35重量％。在其它实施方案中，基于组合物中活性剂的总重量，第二活性剂(例如，不同于第一ahr激动剂的任何ahr激动剂)的重量百分比为约25-99重量％、25-98重量％、25-96重量％、25-95重量％、25-90重量％、25-85重量％、25-75重量％、25-70重量％、25-65重量％、25-60重量％、25-55重量％、25-50重量％、25-45重量％、25-40重量％或25-35重量％。
[0137]
在本文所述的任何组合物中，靛青和靛青衍生物可被硼、h3或放射性部分取代。在本文所述的任何组合物中，靛青和/或靛青衍生物可以是药学上可接受的盐形式。
[0138]
在另一个实施方案中，ahr激动剂化合物是靛青或靛青衍生物的前药，其分解或代谢成靛青和/或靛青衍生物或其它ahr激动剂。此类前药的实例包括尿蓝母(indican)、吲哚酚(indoxyl)、无色靛青等。在一个实施方案中，该组合物包含靛青、靛青衍生物、靛青的前药、靛青衍生物的前药和/或任何前述物质的组合。在另一个实施方案中，该组合物包含靛
青、靛青衍生物、靛青的前药和/或其组合，不包括靛青衍生物的前药。在另一个实施方案中，该组合物包含靛青衍生物、靛青的前药、靛青衍生物的前药和/或其组合，不包括靛青衍生物靛玉红的前药。
[0139]
在本文所述的任何组合物中，ahr激动剂化合物可呈固体形式。这种固体可以是高度结晶的，或者与从溶液中结晶出来或蒸发成固体的无机和有机物质结合。这种材料可被加工成粉末。粉末可具有均匀或广泛分布的平均粒度。粒度可以是纳米级、微米级或更大。基于其晶体结构或缺乏晶体结构、表面积、共晶或同种型，均匀粒度的粉末可具有不同的溶解度或生物利用度。这种相对生物利用度或缺乏该相对生物利用度可使这些药剂更容易用特定浓度的药物溶液配制，在接受治疗的疾病患者中更有效、不太有效或更安全或不太安全。特别是，较大的粒度或减小的表面积可能较难溶解，因此生物利用度较低，导致较少的全身性暴露，因此在保持局部活性和功效的同时具有更好的安全性。特别是，与生物利用度更高的颗粒(诸如可存在于青黛中的颗粒)相比，用由这些形式中的一些制成的制剂治疗患者可以降低肝脏毒性、降低血清素水平或降低肺部压力或降低患肺动脉高压的机会。
[0140]
ahr激动剂化合物(诸如靛青和/或靛青衍生物)的固体颗粒可以具有小于约5000nm、小于3000nm、小于2000nm或小于1500nm的平均粒度。在其它实施方案中，靛青和/或靛青衍生物的固体颗粒可具有等于或大于约1500nm、2000nm、2500nm、3000nm或5000nm的平均粒度。在一些实施例中，大于约60％、70％、75％、80％、85％或90％的颗粒大于约1500nm、2000nm、2500nm、3000nm或5000nm。在一些实施方案中，大于约60％、70％、75％、80％、85％或90％的颗粒小于约1500nm、2000nm、2500nm、3000nm或5000nm。在一些实施方案中，颗粒可包含或任选包含表面稳定剂，或者可以不包含表面稳定剂。颗粒可含有悬浮或完全溶解的药物。颗粒可包含呈晶型或无定形形式的ahr激动剂化合物。
[0141]
在一些实施方案中，可将ahr激动剂化合物，诸如靛青和/或靛青衍生物，与含有碳酸钙、纤维素、有机树脂、无机树脂、粘土或沸石的颗粒结合或混合。在一些实施方案中，靛青和靛青衍生物可以不含碳酸钙或纤维素。
[0142]
在一些实施方案中，固体粉末在同一颗粒或同一颗粒群中包含多种活性剂，诸如靛青和/或一种或多种靛青衍生物。在一些实施方案中，固体粉末包含不同颗粒的混合物，每个颗粒包含靛青或特定靛青衍生物的活性剂。在一些实施例中，颗粒的纯度至少约为95％、96％、97％、98％或99％，或者纯度超过99.9％。固体颗粒可以各自具有相同的平均粒度，或者可具有不同的平均粒度。在其它实施方案中，固体颗粒可以在选定的溶剂(例如，水或乙醇)中具有相同的溶解度，或者可以具有相同的生物利用度。
[0143]
在一些实施方案中，该组合物在溶解度或生物利用度上不同于含有相同量的给定活性剂(例如，ahr激动剂化合物，诸如靛青或靛青衍生物或其前药)的青黛。这种溶解度的差异可在包括水、低ph值水或某些配制溶剂(诸如乙醇、n-甲基吡咯烷酮、聚乙二醇或二甲基亚砜)在内的溶剂中看到。溶解度或生物利用度的这种差异可归因于给定制剂中包含的颗粒或赋形剂的颗粒表面积、粒度、颗粒形状、污染物、纯度和/或疏水性。
[0144]
ahr激动剂化合物，诸如靛青、靛青衍生物和/或其前药，可以不含杂质或具有显著减少的杂质。例如，当ahr激动剂化合物是靛青、靛青衍生物和/或其前药时，其不含存在于青黛中的杂质。在某些情况下，杂质可以是过敏原或毒素。在一些实施方案中，杂质可以是丁二酸、靛红、2,3-二氢-4-羟基-2-氧代-1h-吲哚-3-乙酸、脱氧桂皮酮(deoxyvascinone)、
10h-吲哚并[3,2-b]喹诺酮、3-(2-羟基苯基)-4-(3h)-喹唑啉酮、10h-吲哚并[3,2-b]喹诺酮-11-羧酸酰胺、色胺酮(tryptanthrin)、紫丁香苷、3-(2-羧基苯基)-4(3h)-喹唑啉酮、靛青、靛苷、靛玉红、2-[氰基(3-吲哚基)亚甲基]-3-吲哚酮、十八烷酸、十八烷酸、双靛青、青黛酮(qingdianone)、肉毒杆菌毒素、柳杉酚、鱼藤醇、谷甾醇、胡萝卜甾醇、桐甾醇(clerosterol)、吲哚美辛和/或3-硝基丙酸酯。在一些实施方案中，杂质可以是无机的，或者可以是重金属，诸如砷、镉、铅和/或汞。杂质也可以是杀虫剂、除草剂、黄曲霉毒素、溶剂(诸如水、乙醇、乙醇、thf、石油醚、氯仿或乙酸)、二氧化硅、石灰石、纤维素或碳酸钙。在一个实施方案中，靛青和/或靛青衍生物基本上不含一种或多种此类杂质。在一个实施方案中，设想了包含合成靛玉红的组合物，其中该组合物包含少于约0.1重量％的杂质靛青、色胺酮和青黛酮。在另一个实施方案中，设想了包含合成靛玉红的组合物，其中合成靛玉红大于98重量％的纯合成靛玉红。也就是说，合成靛玉红包含小于约2重量％的杂质。在其它实施方案中，本文描述的组合物不含细菌和提取溶剂。
[0145]
在一些实施方案中，还考虑了靛青、靛青衍生物和/或其前药每克含有的生物负荷(bioburden)可能低于青黛。例如，与青黛的制剂或提取物相比，靛青和/或靛青衍生物可以具有减少的细菌计数、减少的酵母计数、减少的霉菌计数、减少的大肠杆菌属计数和/或减少的沙门氏菌属计数。在一些实施方案中，靛青和靛青衍生物可对微生物的生长更具抗性。在一些实施方案中，靛青和/或靛青衍生物每克可具有少于约15,000个、25,000个、35,000个或50,000个菌落形成单位。在一些实施方案中，靛青和靛青衍生物可以是无菌的。在一些实施方案中，靛青和靛青衍生物可包含防腐剂，其抑制细菌和/或微生物随着时间的生长。
[0146]
靛青、靛青衍生物和/或前药的颜色可与青黛不同，并且可能更呈紫色、红色、深蓝色、浅蓝色或淡黑色。在一些实施方案中，靛青和靛青衍生物可以是略带紫色的、淡红色的、浅橙色的、粉红色的或深棕色的。在一些实施方案中，靛青、靛青衍生物和/或前药的颜色可以较浅、可为白色或透明的。靛青、靛青衍生物和/或前药可被还原成它们的还原形式，从而改变它们的颜色或使它们颜色变浅，甚至无色或成白色。在一些实施方案中，靛青、靛青衍生物和/或前药可以具有在纳米范围内的粒度，或者可具有独特的结构，与在青黛中发现的或从合成制剂中纯化的相比，该结构改变了它们的颜色。
[0147]
靛青和靛青衍生物及其前药是示例性的ahr激动剂。如上所述，组合物包含ahr激动剂化合物，并且在一个实施方案中，ahr激动剂化合物具有小于约10nm、8nm、6nm、5nm、4nm、3nm、2nm,1nm、0.5nm或0.25nm的半最大有效浓度(ec
50
)。
[0148]
在一个实例中，ahr激动剂可以内源性地存在于人体的血浆、肝脏、尿液中、皮肤上或肠道中。这些内源性ahr激动剂可由人体通过食物代谢、前体对紫外线(包括uvb)的暴露或通过生活在人体上或人体内的微生物产生。
[0149]
靛青和靛青衍生物及其前药是示例性的激酶和转录因子抑制剂。上述组合物可包含也抑制激酶或转录因子的药剂。这些激酶或转录因子可呈翻译后修饰或未修饰的形式，包括但不限于呈磷酸化或未磷酸化的形式。它们可以是游离的，也可以作为复合物的一部分与其它酶或辅因子结合。在一个实施方案中，所述药剂可以是信号转导子的抑制剂和转录激活因子(stat)诸如stat3、janus激酶(jak)诸如jak2、丝裂原活化蛋白激酶(mapk)(其包括胞外信号调节激酶(erk)诸如erk2)、酪氨酸蛋白激酶诸如c-src酪氨酸激酶、酪蛋白激酶诸如酪蛋白激酶1、细胞周期蛋白依赖性激酶(cdk)诸如cdk1、cdk2或cdk5，或糖原合成酶
激酶(gsk)诸如半最大有效浓度(ic50)小于约100μm、50μm、25μm、10μm、5μm或1μm的gsk3b。
[0150]
靛青和靛青衍生物(及其前药)也可对快速分裂的细胞有细胞毒性。上述组合物可包含在小于约100μm、50μm、25μm、10μm、5μm或1μm的半最大有效浓度(ic50)下对快速分裂细胞诸如cd4 t细胞具有细胞毒性的药剂。
[0151]
如上所述，组合物还包含载体或药学上可接受的媒介物或赋形剂，以便于局部敷用或施用。在一个实施方案中，局部施用是优选的。在其它实施方案中，组合物可以是口服的，并且选择载体用于这种口服施用。关于局部组合物，载体将根据所需的组合物而变化，其可以采取多种不同的形式，包括例如溶液、液体、喷雾剂、泡沫、乳液、凝胶等。优选地，局部组合物是液体，具有良好的稳定性，粘附到皮肤上，并且具有平滑的感觉。关于合适制剂的信息可见于例如“remington:the science and practice of pharmacology”，第22版，(pharmaceutical press,2013)中。
[0152]
该组合物还可含有相对少量的，例如少于约10％(w/w)的一种或多种适合局部使用的辅助赋形剂，包括但不限于ph调节剂、防腐剂、增稠剂、凝胶形成剂、乳化剂、抗氧化剂、香味剂等。适合掺入的化合物可见于r.c.rowe等人,handbook of pharmaceutical excipients(第4版),pharmaceutical press,london,2003中。
[0153]
可用于组合物中的胶凝剂包括因其胶凝性质而众所周知的常规胶凝剂，例如纤维素醚，诸如羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素等；乙烯醇；乙烯基吡咯烷酮；天然树胶，诸如刺梧桐树胶、刺槐豆胶、瓜尔胶、格兰胶(gelan gum)、黄原胶、阿拉伯胶、黄蓍胶、角叉菜胶、果胶、琼脂、海藻酸、海藻酸钠等，以及甲基丙烯酸酯，诸如可以以商品名从rohm pharma获得的那些。其它胶凝剂包括聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(泊洛沙姆)，诸如可以以商品名为获得的那些，等等。优选胶凝剂是不含游离羧基的那些，例如羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、甲基纤维素、有机/冷水可溶性纤维素、羟乙基甲基纤维素、乙基纤维素、乙基(羟乙基)纤维素。在一些实施方案中，对于取代的纤维素，中度至高度取代是优选的。优选取代度至少为1.0，或优选在1.2至6.0的范围内，或更优选在2.5至4.5的范围内。
[0154]
该组合物还可以含有抗氧化剂。抗氧化剂(如果存在的话)的量通常为按重量计约0.005％至约3.0％的组合物。说明性范围包括按重量计约0.01％至约2.5％的抗氧化剂、按重量计约0.05％至约2％的抗氧化剂和按重量计约0.1％至约1.5％的抗氧化剂。合适的抗氧化剂包括例如丁酸化羟基茴香醚(butylated hydroxyanisole，bha)、抗坏血酸棕榈酸酯、丁酸化羟基苯甲醇(butylated hydroxytoluene，bht)、叔丁基氢醌、没食子酸丙酯、α-生育酚、焦亚硫酸钠等。
[0155]
该组合物还可包含一种或多种防腐剂，其量通常为按重量计为组合物的约0.01％至约2.0％。示例性的防腐剂包括，例如，苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、苯甲醇等。其它气味包括阿米里斯、calone、香豆素、鸡蛋花(frangipani)、铃兰香精(muguet)、narciussus等。一些气味可以衍生自化学物质，诸如桉油精、丁香酚、乙酸香叶酯、芳樟醇、橙花叔醇、麝香草酚或苯基乙醇等。
[0156]
该组合物还可包含少量，诸如按重量计0.1％至10％的一种或多种有效引入有利气味、香味或香气的化合物，诸如天然油或其它合适的药剂。合适的精油包括，例如，来自桉树、乳香、广藿香、薄荷、柠檬、薰衣草、橙子、玫瑰果、迷迭香、茶树、茉莉花等的植物精油。
[0157]
设想了呈凝胶形式的组合物。凝胶是通过在胶状固体颗粒网络中截留大量含水或含水酒精液体形成的。这些胶体通常以小于10％w/w的浓度存在，也称为胶凝剂或增稠剂，也在上面提到过。胶凝剂的实例包括羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、甲基纤维素、海藻酸钠、海藻酸、果胶、角叉菜胶、琼脂、粘土、硅酸铝、卡波姆等。示例性胶凝剂是羟丙基纤维素。重均分子量为约50,000至150,000道尔顿，或约60,000至约125,000道尔顿，或优选约80,000至约100,000道尔顿的羟丙基纤维素是示例性的。
[0158]
可向组合物中加入各种其它结构基质成形剂(former)，例如烃类，诸如白矿脂(凡士林、)、黄矿脂(凡士林)、石蜡(石蜡、硬石蜡)、微晶蜡、地蜡(矿物蜡、纯化的地蜡)；硅酮，诸如气相二氧化硅(fumed silica)(cab-o-sil)、膨润土(胶体硅酸铝)和硅酸镁铝(胶体硅酸铝)；多元醇和聚乙二醇，诸如固体聚乙二醇；甾醇和甾醇酯，诸如胆固醇、羊毛脂、无水羊毛脂和半合成羊毛脂；和酯类或聚酯，诸如蜂蜡、白蜂蜡(漂白的蜂蜡)、巴西棕榈蜡、胆固醇酯(硬脂酸酯)、猪油或氢化油。
[0159]
该组合物也可呈霜剂的形式。霜剂是油质物质和水(即载体)的乳液。霜剂可以是其中水相分散在油相中的油包水(w/o)，或者是其中油分散在水基中的水包油(o/w)。
[0160]
还设想了软膏，其通常比o/w霜剂更粘稠，并且可以不含水。常规软膏基质(即载体)包括烃类(凡士林、蜂蜡等)、植物油(例如，菜籽油、橄榄油)、脂肪醇(胆固醇、羊毛脂、羊毛醇、硬脂醇等)、peg或硅酮。软膏可将药物完全处于溶液中或者完全或部分处于悬浮液中。
[0161]
糊剂是一种类型的制剂，其中添加了高百分比(高达按重量计50％)的不溶性颗粒固体。可使用不溶性固体，诸如淀粉、氧化锌、碳酸钙或滑石。在一个实施方案中，组合物不包含橄榄油、蜡或凡士林中的一种或多种。在另一个实施方案中，组合物不是软膏。
[0162]
局部组合物也可以是泡沫或者雾化的或可雾化的组合物。可将该制剂溶解在推进剂和助溶剂诸如乙醇、丙酮、十六醇等中。可以掺入发泡剂来产生摩丝或香波。
[0163]
该组合物也可被制备成固体形式，诸如可以擦到皮肤上的杆或棍。该组合物，无论是液体、霜剂、软膏还是固体，都可以用于允许将该组合物施用到皮肤上的目标部位的施用装置中。例如，可使用一种装置，该装置允许在不首先将组合物施用到手指上的情况下施用组合物。合适的装置包括药刀、棉签、无针注射器、硬膏剂和粘性贴片。使用刮刀或拭子等可能需要将该装置插入包含组合物的容器中。使用注射器或刷子或拭子可以通过用制剂填充注射器或刷子或拭子来实现。该组合物然后可以通过该装置局部铺展，或者可以从该装置排出到人皮肤的期望位置。
[0164]
多种方法可用于制备上述组合物。广义地说，可以通过在足以提供药物有效且优良的组合物的温度和时间下将组分组合在一起来制备所述组合物。如本文所用，术语“组合在一起”是指可以大约同时将组合物的所有组分组合和混合在一起。术语“组合在一起”也意味着各种组分可以以一种或多种顺序组合以提供所需的产品。根据最终剂型的形式，制剂可以基于重量/重量(w/w)或重量/体积(w/v)来制备。
[0165]
通过制备包含合成靛玉红作为模型ahr激动剂的示例性组合物来进行研究。该组合物是通过将靛玉红掺入适合局部应用于皮肤的载体中来制备的。在实施例2中详述的第一项研究中，制备了二十种局部制剂。制剂组分概括于表a中，组分的细节示于实施例2的表2-1、表2-2和表2-3中。
[0166]
表a：示例性组合物
[0167][0168][0169]
所述制剂的制备方法是：首先将合成靛玉红和任何抗氧化剂加入到所述非油性溶剂中，以便在加入其他组分之前将合成靛玉红溶解或悬浮在溶剂中，并在加入之前先将油性组分和蜡组分加热至约75℃。示例性制剂包含约0.001-0.5重量％、0.001-0.4重量％、0.001-0.3重量％、0.001-0.25重量％、0.002-0.5重量％、0.002-0.4重量％、0.002-0.3重量％、0.002-0.25重量％、0.005-0.5重量％、0.005-0.4重量％、0.005-0.3重量％、0.005-0.25重量％、0.01-0.5重量％、0.01-0.4重量％、0.01-0.3重量％、0.01-0.25重量％靛玉红
(合成的或天然的)。在一个实施方案中，组合物包含大于约0.01重量％的靛玉红和等于或小于约0.4重量％、0.3重量％或0.2重量％的靛玉红。
[0170]
在制剂编号oo14和po03(其各自包含至少约20重量％的二甲基亚砜作为溶剂)中，靛玉红呈溶解形式。也就是说，合成靛玉红完全溶解在组合物中。包含0.025重量％靛玉红和约18重量％溶剂体系(二甘醇单乙醚、n-甲基-2-吡咯烷酮和肉豆蔻酸异丙酯)的制剂编号oo02也提供了最终组合物，其中靛玉红以溶液形式(或完全溶解)存在于组合物中(在23-25℃的室温下)。在一个实施方案中，局部组合物包含约0.025-0.30重量％、0.25-0.25重量％、0.075-0.30重量％或0.75-0.25重量％的合成靛玉红，其中靛玉红基本上完全溶解、基本上全部溶解或者完全溶解或全部溶解在所述组合物中。换句话说，靛玉红以溶液形式存在于组合物中，如例如当用人眼和/或显微镜检查时没有可见的药剂颗粒所证明的。在一个实施方案中，该组合物包含约2.5-50重量％、2.5-35重量％、5-50重量％、50-35重量％、15-35重量％、17-32重量％、18-32重量％、19-31重量％或20-30重量％的选自二甲基亚砜、n-甲基-2-吡咯烷酮、二甘醇单乙醚、肉豆蔻酸异丙酯、甘油和/或丙二醇的溶剂。
[0171]
因此，在一些实施方案中，组合物包含油性液体(或油质化合物)和/或聚乙二醇聚合物(优选分子量约为2500-10,000道尔顿、2500-8000道尔顿、2500-7500道尔顿、2500-6000道尔顿、2500-5000道尔顿、3000-4500道尔顿或3500-4500道尔顿)。在一个实施方案中，油性液体是例如合成油、植物油或动物脂肪。在某些实施方案中，油性液体是矿物油、油酸、橄榄油、蓖麻油、霍霍巴油或羊毛脂。在一个实施方案中，油性液体(或油质化合物)在环境温度(例如，23-25℃)下是液体。示例性油性液体包括油酸和癸二酸二乙酯。在一个实施方案中，油质化合物是石化基化合物。也就是说，其不属于动物或植物来源。在另一个实施方案中，油质化合物是包含至少9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个或20个碳原子的合成化合物或石化基化合物。在一个实施方案中，组合物不包含橄榄油。在一个实施方案中，组合物不包含蓖麻油。在一个实施方案中，油性液体以约8-90重量％、15-80重量％、15-75重量％、15-70重量％、15-65重量％、20-80重量％、20-75重量％、20-65重量％、20-60重量％或20-55重量％的量存在于组合物中。
[0172]
在一个实施方案中，组合物中任选包含蜡组分。当组合物中存在蜡组分时，蜡组分的量为约8-65重量％、10-55重量％、12-60重量％、12-50重量％、12-45重量％、12-40重量％、12-35重量％、12-25重量％、15-60重量％、15-55重量％、15-50重量％、15-45重量％、15-40重量％、15-35重量％、15-25重量％、16-55重量％、16-50重量％、16-45重量％、16-40重量％、16-35重量％或16-25重量％。在一个实施方案中，蜡组分在环境温度(例如，23-25℃)下是固体。在一个实施方案中，蜡组分选自蜂蜡、石蜡(例如，cnh2
n 2
,n＝20-30)、十六醇、烷基硅酮和羊毛脂蜡。在一个实施方案中，组合物不包含蜂蜡。在另一个实施方案中，蜡组分是合成蜡；也就是说，蜡不是自然产生的，而是在实验室或工业过程中化学制造的。
[0173]
在另一个实施方案中，设想的组合物由至少约25重量％且小于约99重量％的油性液体和蜡组分组成。在某些实施方案中，油性液体和蜡组分占组合物的少于约95重量％、90重量％、85重量％、75重量％、70重量％、65重量％或55重量％，并且占组合物的多于约25重量％、30重量％、35重量％、40重量％、45重量％或50重量％。
[0174]
在一个实施方案中，所述组合物还包含溶剂，其中溶剂可以是单一溶剂或者两种或更多种溶剂的组合(或混合物)。在一个实施方案中，溶剂是非质子溶剂，并且可以是与水
混溶的、部分与水混溶的或难与水混溶的。在一个实施方案中，溶剂是非油质的。还希望溶剂无毒。非质子溶剂的非限制性实例列于表b中。
[0175]
表b：示例性非质子溶剂
[0176][0177]
[0178]
在一个实施方案中，非质子溶剂是偶极矩大于约2.5d、或大于约3.0d、或大于约3.5d的溶剂。在一个实施方案中，非质子溶剂是偶极矩大于约2.5d、或大于约3.0d、或大于约3.5d的溶剂，并且可与水混溶。在另一个实施方案中，非质子溶剂是偶极矩大于约2.5d、或大于约3.0d、或大于约3.5d的溶剂，并且在水中难以混溶。在一个实施方案中，如果溶剂在室温(20-25℃)下以所有比例与水形成均一的溶液，则溶剂是可与水混溶的。如果溶剂在室温(20-25℃)下以某些比例与水形成均一的溶液，则其是部分可混溶的。如果溶剂不与水(20-25℃)形成均一的溶液，则其难以混溶。在一个实施方案中，溶剂是偶极非质子溶剂。
[0179]
非质子溶剂可以是来自选自酰胺、酸的酯、醇的酯、醚、酮、内酯和亚砜的一类溶剂中的溶剂。参考表b，酰胺类溶剂中的溶剂包括2-吡咯烷酮、二甲基甲酰胺、n-甲基-2-吡咯烷酮、n-乙基-2-吡咯烷酮、二甲基乙酰胺、n-环己基-2-吡咯烷酮和己内酰胺。酸的酯类溶剂包括例如羧酸酯和脂肪酸酯，诸如乙酸乙酯、苯甲酸苄酯、乙酸甲酯、肉豆蔻酸异丙酯、油酸乙酯、乳酸甲酯和乳酸乙酯。作为醇的酯的非质子溶剂包括碳酸丙烯酯(4-methyl-1,3-diololan-2-one)。亚砜类的非质子溶剂包括二甲基亚砜和癸基甲基亚砜。
[0180]
在另一个实施方案中，溶剂的分子量小于约150g/mol、小于约125g/mol、小于约110g/mol、小于约100g/mol、小于约90g/mol。例如，二甲基亚砜的分子量约为78g/mol，nmp的分子量为99g/mol。
[0181]
在一个实施方案中，溶剂是选自二甲基亚砜、n-甲基-2-吡咯烷酮、二甘醇单乙醚和肉豆蔻酸异丙酯的非质子溶剂。在另一个实施方案中，溶剂选自甘油和丙二醇。
[0182]
在一些实施方案中，溶剂不是辛酸/癸酸甘油三酯、甘油二山嵛酸酯、三山嵛精或甘油山嵛酸酯、甘油硬脂酸酯、ppg-15甾基醚、水、甘油、乙醇、丙二醇、丁二醇、二丙二醇、乙氧基化或丙氧基化二甘醇或环状多元醇。
[0183]
如上所述，ahr激动剂，诸如靛玉红(合成的或天然的)，可以悬浮或溶解在溶剂系统和/或组合物中。在一个实施方案中，ahr激动剂溶解在溶剂系统和组合物中，使得在组合物中没有观察到(视觉上或通过xrpd)ahr激动剂的结晶或颗粒形式。在另一个实施方案中，ahr激动剂溶解在溶剂系统中，使得在溶剂系统中没有观察到(视觉上)ahr激动剂的结晶或颗粒形式，并且ahr激动剂可以溶解或不溶解或以溶液形式存在于在组合物中。
[0184]
该组合物任选包含表面活性剂或增稠剂。表面活性剂可以是离子或非离子表面活性剂，并且在一个实施方案中是非离子三嵌段共聚物表面活性剂，诸如泊洛沙姆。在另一个实施方案中，组合物中包含增稠剂，示例性剂包括但不限于聚合物，诸如聚纤维素、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸、聚乙烯吡咯烷酮，以及其它已知的药剂，诸如瓜尔胶。多纤维素包括羟烷基纤维素，诸如羟丙基纤维素、羟甲基纤维素、羟乙基纤维素。丙烯酸和甲基丙烯酸聚合物和共聚物包括聚丙烯酸和聚甲基丙烯酸。聚丙烯酰胺包括聚丙烯酰胺(聚(2-丙烯酰胺)和与聚丙烯酰胺的共聚物，包括共聚物分散体丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲酯牛磺酸钠共聚物(sepineo
tm
p600)。
[0185]
在一个实施方案中，组合物基本上不含水。在另一个实施方案中，组合物包含少于约2重量％、1重量％、0.5重量％或0.025重量％的水。在另一个实施方案中，组合物基本上不含水，并且包含约0.01-0.5重量％、0.01-0.4重量％、0.01-0.3重量％、0.01-0.25重量％、0.05-0.5重量％、0.05-0.4重量％、0.05-0.3重量％、0.05-0.25重量％、0.075-0.5重量％、0.075-0.4重量％、0.075-0.3重量％,0.075-0.25重量％靛玉红(合成的或天然的)。
[0186]
在另一个实施方案中，本文所述的组合物在约25℃下储存至少约两个月、四个月、六个月或十二个月是物理和/或化学稳定的。在一个实施方案中，化学稳定的是指靛玉红的量在25℃下储存两个月、四个月、六个月或十二个月之后，例如由于降解而变化不超过1％、2％、3％、4％或5％。在实施方案中，物理稳定的是指制剂的物理状态不会例如由于在25℃下储存两个月、四个月、六个月或十二个月后分离成不同的相或者出现凝聚或沉淀而改变。
[0187]
在体外测试表a中的组合物以测量表皮、真皮和透皮皮肤渗透。如实施例2所述，将人的尸体皮肤放置在体外扩散装置上，角质层面朝上。将已知量的约10mg的每种制剂施用于限定的皮肤表面积，以提供约10mg/cm2的剂量。在24小时的测试期间，取皮肤样品下面的受体液体样品，测量活性剂的皮肤流量。24小时后，从皮肤上除去残留的制剂，从皮肤上除去角质层，以及分离表皮和真皮。测定表皮、真皮和受体溶液中ahr激动剂靛玉红的量。结果如表1a至表1c和图1a至图1b所示。
[0188]
图1a显示了每种制剂在表皮(开口条)和真皮(具有交叉平行线画出的阴影填充的条)中回收的平均药物量，单位为ng。制标编号oo09、oo14、oo17和po01在24小时测试期内向表皮内递送了超过50ng的合成靛玉红(作为模型ahr激动剂)。制剂编号oo14在24小时内将超过50ng的合成靛玉红递送到表皮和真皮中，真皮中存在的药物多于表皮。因此，在一个实施方案中，考虑了一种组合物，该组合物提供了用于将ahr激动剂，诸如合成靛玉红递送到真皮和表皮的局部施用，其中局部施用该组合物后24小时真皮中激动剂的量在表皮中的量的25％、20％、15％或10％之内。在优选实施方案中，局部施用组合物后24小时真皮中激动剂的量等于表皮中的量或比表皮中的量多至少约5％、10％或15％。
[0189]
图1b显示了对于每种制剂而言，受体溶液中药物的平均累积量(单位为ng/cm2)作为时间(单位为小时)的函数。制剂编号oo14在局部施用到皮肤上后10小时产生大于约5ng/cm2的通量，在局部施用到皮肤上后20小时产生大于约12ng/cm2的通量，在局部施用到皮肤上后24小时产生大于约15ng/cm2的通量。因此，在一个实施方案中，考虑了在局部施用到皮肤上后10小时提供至少约5ng/cm2的体外皮肤通量(使用人尸体皮肤)的组合物。在其它实施方案中，考虑了在局部施用于皮肤后10小时提供至少约5ng/cm2的体外皮肤(人尸体皮肤)通量和在局部施用于皮肤后25小时提供至少约15ng/cm2的体外皮肤(人尸体皮肤)通量的组合物。
[0190]
表1a：将鉴定的制剂体外应用于人皮肤24小时后，从表皮和真皮中回收的靛玉红的平均量(ng)。
[0191][0192]
表1b：将经鉴定的制剂在体外应用于人皮肤后24小时，真皮和表皮中的靛玉红克分子浓度
[0193]
制剂真皮(μm)表皮(μm)oo021.214.3oo09(0.08％)1.227.5oo09(0.2％)1.439.3oo143.326.9oo171.036.7oo190.916.8po010.433.8po030.518.4438n0.76.5438s0.22.7
[0194]
表1c：将鉴定的制剂体外应用于人体皮肤24小时后，24小时时的靛玉红平均累积量(ng/cm2)和通量(ng/cm2/hr)。
[0195][0196]
在其它实施方案中，考虑了一种组合物，其在24小时时将至少约0.7μm的靛玉红体外皮肤(人尸体皮肤)递送到真皮中。在另一个实施方案中，考虑了一种组合物，其在24小时时将至少约6.5μm或大于约6.5μm的靛玉红体外皮肤(人尸体皮肤)递送到表皮中。在另一个实施方案中，考虑了一种组合物，其提供大于约0.1ng/cm2/hr、0.3ng/cm2/hr或0.5ng/cm2/hr的平均通量的靛玉红体外皮肤(人尸体皮肤)递送。在一个实施方案中，大于约0.1、0.3或0.5ng/cm2/hr的靛玉红的平均靛玉红体外通量是通过人皮肤的顶部500微米。
[0197]
图1a至图1b和表1a至表1c中的数据显示，与包含合成靛玉红的制剂编号483s相比，包含天然形式的靛玉红的制剂编号483n在体外渗透测定中具有优异的性能，尽管它们都包含相同的赋形剂和相同总量的靛玉红。这可归因于在制剂编号483n中存在于溶液中的靛玉红比制剂编号483s中的靛玉红多大约四倍的事实。另外，这两种制剂的制造方法也不同。制剂编号483n由青黛制成，其中含有靛玉红作为复杂固体混合物的一部分，而制剂编号483s由高纯度结晶合成靛玉红制成。
[0198]
制剂编号oo09(0.08％)和oo09(0.2％)在真皮和受体溶液中具有大致相似的靛玉红浓度(图1b和表1c)，尽管组合物中靛玉红的量相差约2.5倍。该数据支持组合物中溶液中靛玉红的量是与靛玉红皮肤通量相关的因素，并且其中靛玉红基本上完全溶解或完全溶解的组合物实现了足以治疗本文所述疾患的皮肤通量，并且提供了治疗有效量的靛玉红到表皮和真皮中的递送。
[0199]
实施例3描述了使用另一种ahr激动剂本维莫德的示例性制剂。
[0200]
本维莫德组合物适用于治疗本文所述的任何疾患，包括银屑病(ps)、特应性皮炎(ad)、接触性皮炎、化脓性汗腺炎(hs)、坏疽性脓皮病(pg)、sweet综合征、pstpip-1基因中的突变(papa综合征、papsh综合征和pash综合征)、白塞氏病、大疱性类天疱疮、粘膜类天疱疮、寻常型天疱疮、皮肤克罗恩病、综合征、系统性红斑狼疮、结节性痒疹(pn)、慢
性苔藓样糠疹、掌跖脓疱病(ppp)、坏疽性脓皮病(pg)和红皮病。
[0201]
实施例5描述了关于鉴定为制剂编号oo14的组合物的药效学研究结果。在这项研究中，将人的皮肤置于静态体外扩散池中，并将固定量的制剂施用于皮肤。该制剂在th17刺激前16小时或在th17刺激前40小时和16小时施用于皮肤。将受体溶液用th17刺激培养基替代，在收获前孵育24小时。th17刺激培养基包含诱导th17极化的细胞因子和抗体的混合物(smith s.h.等人，plos one 11(2):0147979)。与gapdh的内部标准相比，qpcr用于测量皮肤中的细胞因子水平，cyp1a1被选为ahr激活的指示剂，因为其在正常条件下很少表达，并被激活的ahr上调。il-17α、il-1β、s100a7和il-8是与th17型炎症相关的促炎细胞因子或抗微生物分子，并在hs病变中被上调(frew等，f1000 research2018,7:1930)。作为对照，在th17刺激前40小时和16小时将0.01％倍他米松(bmv)加入受体溶液。结果如表2和图2a至图2e所示。
[0202]
表2:分析物水平的变化
[0203][0204]
*n/i＝与th17相比不受抑制
[0205]
图2a至图2e是显示了cypia1(图2a)、il17-α(图2b)、il1-β(图2c)、il8(图2d)和s100a7(图2e)(每一种都是ahr调节的生物标志物)在人尸体皮肤中的活性百分比的条形图，其中对于本文中被鉴定为“oo14”的包含合成靛玉红，并在刺激前被施用于皮肤16小时或40小时的局部制剂，活性百分比计算为指定的生物标志物与th17刺激相比的百分比减少；制剂“bmv”是倍他米松类固醇的对照制剂，所述倍他米松类固醇被施用于受体溶液并抑制除抗微生物肽s100a7之外的生物标志物的表达。
[0206]
图2a示出了从本文预期和描述的组合物中局部施用ahr激动剂上调cyp1a1。图2b示出了从本文预期和描述的组合物中局部施用ahr激动剂可下调促炎细胞因子il17-α。图2c至图2e示出了从本文预期和描述的组合物中局部施用ahr激动剂分别下调促炎细胞因子或抗微生物肽、il-1β和il-8和s100a7。因此，在一些实施方案中，考虑了一种组合物，其在局部施用于皮肤后8、12、16、24或40小时下调一种或多种促炎细胞因子。
[0207]
因此，在一个实施方案中，含有ahr激动剂的组合物在局部施用于皮肤时，相对于不含ahr激动剂的相同组合物，实现了皮肤中cyp1a1的上调超过100倍。在另一个实施方案中，含有ahr激动剂的组合物在被局部施用于皮肤时，实现了ahr在距角质层大于500μm、750μm或1000μm的距离处迁移到细胞核中，例如如通过免疫组织化学所测量的。在另一个实施方案中，含有ahr激动剂的组合物在局部施用于皮肤时在距离角质层大于500μm、750μm或1000μm处的皮肤中实现了cyp1a1的上调，例如如通过免疫组织化学或通过qpcr所测量的。
在另一个实施方案中，cyp1a1的上调和/或ahr向细胞核中的转位发生在皮脂腺和/或毛囊皮脂腺单位内。
[0208]
因此，鉴于本文的数据，当以10mg/cm2局部施用于人体皮肤时，包含合成靛玉红的组合物提供了一个或多个以下特征：(i)靛玉红的非治疗性全身性血液水平；(ii)当施用于皮肤24小时时，超过约10ng/cm2、12ng/cm2、14ng/cm2、14.5ng/cm2或14.7ng/cm2的靛玉红进入表皮；(iii)当施用于皮肤24小时时，超过约10ng/cm2、12ng/cm2、14ng/cm2、16.0ng/cm2、16.5ng/cm2或16.9ng/cm2的靛玉红进入真皮；以及(iv)相对于缺少合成靛玉红的相同组合物，皮肤中cyp1a1的上调超过50倍、75倍、100倍或125倍。所实现的一个或多个特征可发生在体外的人体皮肤上，或者可以发生在体内的人皮肤。皮肤可以是完好无损的，也可以是被破坏的。
[0209]
该组合物可被包装用于医疗环境或直接零售给消费者(即，制造品或试剂盒)。这些物品将被贴上标签，并以建议患者如何使用产品进行治疗的方式进行包装。这些说明将包括治疗持续时间、给药方案、注意事项等。这些说明可呈图片、书面说明或其组合的形式。它们可被印刷在包装的侧面，可以是插页，或者任何其它适合零售市场的通讯联系形式。
[0210]
该组合物可以方便地以剂量单位形式提供，并且可以通过药学领域公知的任何方法制备。例如，可将组合物放置在合适的容器中，诸如带有用于分配软膏和霜剂的盖子的挤压管，或者用于分配单位剂量制剂的装置，诸如将受控的预定剂量的组合物分配到目标区域的瓶子或滴管。在一个优选实施方案中，目标区域在人的皮肤上。
[0211]
该组合物可以是试剂盒的一部分，该试剂盒允许使用者向制剂中加入色素，使其更接近人的肤色。该试剂盒可包括化妆品或化妆用品，用于在施用组合物之前或之后使用，以使组合物不太显眼。
[0212]
在所述的组合物中，ahr激动剂以用于皮肤状况、小病和/或疾病诸如hs的量存在。在一个实施方案中，组合物包含治疗有效量的ahr激动剂。所施用的化合物的量将取决于多种因素，包括例如正在治疗的患者的hs的严重程度、施用方式、患者的年龄和体重、特定活性化合物的生物利用度等。有效剂量的确定完全在本领域技术人员的能力范围内。熟练的从业者将能够确定用于特定个体的最佳剂量。有效剂量最初可从体外测定中估算。
[0213]
在一个实施方案中，局部施用该组合物不会例如在局部施用后24小时或48小时产生可测量的ahr激动剂化合物全身性血液水平。在一个实施方案中，没有可测量的全身性血液水平意味着所述ahr激动剂化合物的浓度基本上不大于来自未用该组合物治疗的受试者的对照血液样品，和/或不是在治疗上不显著的血液水平。
[0214]
在一个实施方案中，载体适于局部给药。在一个实施方案中，载体是软膏。在一个实施方案中，载体是油质化合物和溶剂，任选含有蜡。
[0215]
一个方面，本文描述的组合物用于治疗hs。该组合物被局部施用于皮肤的局部区域，在该区域中hs(或待治疗的另一种炎性疾病)的体征和症状是明显的。在一个实施方案中，将该制剂以局部制剂的形式直接施用至受影响的皮肤区域，而不将其以任何显著的量施用到未受影响的皮肤上。
[0216]
在各种实施方案中，该组合物被施用到皮肤上，每天至少一次，或每天至少两次、三次或四次。在一个实施方案中，局部制剂每天至少施用一次，持续约4-12周的一段时间。在其它实施方案中，局部制剂每天施用1-3次，持续约4-12周的一段时间。在其它实施方案
中，组合物每天局部施用1-2次、1-3次、1-4次或1-5次，持续约1-2周、1-3周、1-4周、1-6周、1-8周、1-10周、1-12周、1-16周、1-20周、1-24周、1-2个月、1-3个月、1-4个月、1-6个月、1-8个月、1-10个月、1-12个月。如可以理解的，给药方案将取决于医学领域众所周知的因素，包括制剂中药物化合物的剂量、疾病的严重程度和患者的健康状况。
[0217]
b.治疗的示例性状况
[0218]
如可基于前述内容所理解的，考虑了包含ahr激动剂的组合物。该组合物适用于治疗对ahr的激活有反应的疾患。该组合物优选为用于受皮肤病症影响的皮肤的局部用组合物，用于治疗皮肤病症。在一个实施方案中，局部组合物下调一种或多种促炎细胞因子，以治疗、缓解症状或预防症状或病症的复发。在某些实施方案中，考虑用该组合物治疗的病症或疾患包括化脓性汗腺炎(hidradenitis suppurativa，hs)、坏疽性脓皮病(pyoderma gangrenosum，pg)、银屑病(psoriasis，ps)、特应性皮炎(atopic dermatitis，ad)、掌跖脓疱病(palmoplantar pustulosis，ppp)和/或结节性痒疹(prurigo nodularis，pn)。
[0219]
在第一方面，考虑了治疗hs、pg、ps、ad、ppp和pn的方法。该方法包括向受试者施用治疗有效量的包含芳香烃受体激动剂或调节剂的组合物，从而治疗或预防受试者的hs、pg、银屑病和/或特应性皮炎。另一方面，用于缓解与hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn相关的症状的方法包括向受试者施用治疗有效量的包含芳香烃受体激动剂或调节剂的组合物，从而缓解受试者中与hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn相关的症状。
[0220]
在又一方面，提供了一种通过施用除芳香烃受体激动剂外的活性剂，例如抗生素、类视黄醇、janus激酶抑制剂、pde-4抑制剂、补体抑制剂、抗tnf-α抗体、抗il-17抗体、抗il-23抗体、抗雄激素和/或类固醇，来治疗先前接受过hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn治疗的受试者的hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn的方法。该方法包括向受试者施用治疗有效量的包含芳香烃受体激动剂或调节剂的组合物，从而治疗难治性受试者中的hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn。
[0221]
在另一方面，提供了用于在被诊断为hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn的受试者中预防与hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn相关的症状复发或降低hs、pg、ps、ppp和/或pn的频率的方法。该方法包括向受试者施用治疗有效量的包含芳香烃受体激动剂或调节剂的组合物，从而防止所述受试者中hs、pg、ps、ad、ppp和/或pn的症状复发或降低其频率。
[0222]
本文中提及的坏疽性脓皮病或pg是一种典型的溃疡性形式(其通常发生在腿部)，和/或更为浅表且通常发生在身体的其它部位的非典型形式。除非另有说明，否则该术语还包括创口周围脓皮坏疽、脓疱性脓皮坏疽或植物性脓皮坏疽。包括特发性的或已知原因的pg的形式，以及出现在创伤部位(包括手术伤口)的pg的形式。
[0223]
过敏性皮炎或ad也被称为湿疹。其可以扩散或局限于身体的特定部位。其可以发生在婴儿、儿童和成人身上。湿疹有几种不同的类型，包括接触性皮炎、干燥性湿疹、钱币状湿疹、脂溢性皮炎和淤滞性皮炎。在一个实施方案中，通过局部施用本文所述的组合物来治疗的疾患是ad。特应性皮炎是常见皮肤病，其通常首先发生在儿童身上，特征在于皮肤发红发痒，有时呈片状皮肤，并被认为是过敏或th2型免疫反应的一种形式。某些疾病在病理生理学上可能是不同的，但被认为是特应性皮炎的形式。这些包括脂溢性皮炎和手部湿疹。
[0224]
结节性痒疹或pn是一种皮肤病，其会导致在皮肤上形成坚硬、发痒的肿块(结节)。瘙痒(搔痒症)会很强烈，导致患者抓痒到出血或疼痛的程度。皮肤发痒可能会影响睡眠或日常活动。结节的大小可以从很小到约半英寸直径不等。结节通常顶部粗糙干燥，数量可从
几个到几百个不等。结节最常见于在外臂、肩部和腿部上形成，但也可能发生在颈部和躯干，它们很少形成于面部和手掌。它们可能比周围的皮肤颜色更浅或更深。瘢痕形成可能发生在结节开始愈合后。pn的症状可以在任何年龄开始，但最常见于20-60岁的成年人。在一个实施方案中，通过局部施用本文所述的组合物来治疗的疾患是pn。
[0225]
掌跖脓疱病或ppp是主要出现在手掌和脚底的皮肤疾患。ppp有时也被称为手掌和脚底的脓疱型银屑病，因为一些受影响的人也患有银屑病。其有时发生在家族中，很少在成年前发生。皮肤出现微小的充满液体的水泡，里面充满少量脓液，变成棕色，然后有鳞屑。鳞屑可以非常突出，使得只能看到发红和鳞屑。它们以波浪或庄稼的形式出现在一只或两只手和/或脚上，导致增厚、有鳞、红色的皮肤，容易产生疼痛的裂缝(裂隙)。疾患严重程度不一，并且可能会持续多年。在一个实施方案中，待治疗的疾患是pnn。
[0226]
在一个实施方案中，待治疗的疾患是hs。hs是一种慢性、炎症性、复发性、衰弱性皮肤病，其通常在青春期后表现为身体顶泌腺承载区的疼痛、发炎的病变。hs的严重程度通过各种测量，诸如hurley分类、改良sartorius评分和国际脓性汗腺炎严重程度评分系统(international hidradenitis suppurativa severity score system)(zouboulis，c.c.等人，british journal of dermatology,177(5)l1401(2017))进行分类。常用hurley分期系统，其将hs分为三期-i期，特征在于单发或多发脓肿，无窦道形成或瘢痕形成；ii期，特征在于为复发性脓肿，有一个或多个窦道，瘢痕被正常皮肤广泛分隔；和iii期，特征在于弥漫性累及多个窦道，没有干预正常皮肤(hurley h.j.,in:roenigk rk,roenigk hh jr，编辑roenigk and roenigk’s dermatologic surgery:principles and practice.第2版new york,ny:marcel dekker；1996:623-645)。本文描述的方法涵盖对患有hurley i期hs、hurley ii期hs和/或hurley iii期hs的受试者的治疗。
[0227]
实施例7-9描述了患有hs的受试者的治疗。在一个实施方案中，将含有ahr受体激动剂的组合物每天两次施用于患处。在7天内观察到明显的改善，在长达一个月的研究期间症状持续减轻。在另一个实施方案中，将含有ahr受体激动剂的组合物每天施用一次，持续8周。观察到新的炎性结节数量减少。与安慰制剂相比，观察到炎性结节、脓肿和瘘管的消退。这一降低导致hs的hiscore等级降低50％或更多。在另一个实施方案中，将含有ahr受体激动剂的组合物每天施用一次，持续8周。观察到新的炎性结节数量减少。与安慰制剂相比，观察到炎性结节、脓肿和瘘管的消退。这一降低导致hs的hiscore等级降低50％或更多。
[0228]
在一个实施方案中，待治疗的疾患是坏疽性脓皮病(pg)。pg是一种罕见的慢性炎性皮肤病，定义为变成溃疡并逐渐生长的疼痛性结节或脓疱。原因不明，但以广泛免疫浸润的病变为特征。pg常被误诊，并且不恰当地用抗生素治疗。pg病变可能会出现和消失，或持续较长时间。所述病变通常会导致长时间无法愈合的开放性伤口。创伤通常会导致新的病变产生。在一个实施方案中，通过局部施用本文所述的组合物来治疗的疾患是pn。
[0229]
在另一个实施方案中，待治疗的疾患是可能表现为皮肤溃疡的嗜中性皮肤病。这些疾病可包括hs和pg和痤疮，但也包括罕见疾病，诸如与pstpip-1基因中的突变相关的papa、pash和papash综合征。所有这些疾病都由无菌或非无菌中性粒细胞丰富的炎症的皮肤区域来定义。
[0230]
银屑病或ps，是由皮肤上的红色、有时发痒的鳞状斑块定义的常见的慢性炎性皮肤病。该疾患包括斑块状银屑病、滴状银屑病、反转型银屑病、脓疱型银屑病(无论是手掌还
是其它部位)或红皮性银屑病。其还包括局限于特定解剖区域诸如头皮、手、脚、手臂下或腹股沟中、肘部、膝盖、下背部、指甲下或甲床的银屑病，以及银屑病关节炎。因此，在另一个实施方案中，待治疗的疾患是ps。严重性可通过覆盖有病变的体表面积(bsa)百分比或通过银屑病面积和严重性指数(pasi)或医生总体评估(pga)来确定，尽管也使用了许多其它评估工具。有许多fda批准用于银屑病的疗法，但它们通常不方便、无效、昂贵，或者导致不良事件的发展。某些银屑病疾病在病理生理学上可能是不同的，但被认为是银屑病的形式。这些疾病包括掌跖脓疱病、头皮银屑病和指甲银屑病。在一个实施方案中，通过局部施用本文所述的组合物来治疗的疾患是ps。
[0231]
在另一个实施方案中，待治疗的疾患是瘙痒或发痒的皮肤。许多疾病都会引起瘙痒，包括全身瘙痒、结节性痒疹、银屑病和湿疹。许多治疗方法要么只治疗瘙痒，要么只治疗潜在的疾患。结节性痒疹是特征在于皮肤上有坚硬发痒的肿块的皮肤病。疾病的原因尚不清楚，抓挠会加重病情。
[0232]
该组合物也被考虑用于减轻受试者中与hs相关的症状和/或预防hs的复发。所述组合物也被考虑用于治疗先前用除ahr激动剂外的活性剂治疗过hs的受试者的hs。在一个实施方案中，患有hs的受试者对于利用非ahr激动剂的剂的治疗是难治性的。在其它实施方案中，患有hs的受试者对于用例如抗生素、抗雄激素(例如，螺内酯)、类视黄醇、janus-激酶(jak)抑制剂、补体抑制剂(例如，补体组分5a)、抗tnf-α抗体(例如，英夫利昔单抗、阿达木单抗)、th17型细胞因子或趋化因子阻断抗体(诸如il-17、il-8或il-23(例如，苏金单抗、bimikizumab、古塞库单抗、优特克单抗)、il-1(例如，贝迈奇单抗)、磷酸二酯酶-4抑制剂(例如，crisaborole、apremilast、roflumilast)和/或类固醇。
[0233]
该方法和组合物可以任选地与一种或多种其它疗法诸如一种或多种治疗剂、手术和/或辐照组合使用。治疗剂包括抗生素(口服或局部)、防腐剂等。在其它实施方案中，将本文提供的方法和组合物与一种或多种治疗剂组合使用。
[0234]
包含ahr激动剂(诸如本文所述的那些)的组合物也被考虑用于治疗其它皮肤病，诸如痤疮、反常性痤疮、肢端纤维角化瘤、肠病性肢端皮炎(acrodermatitus enterpathica)、肢端角化类弹力纤维病(acrokeratoelastoidosis)、光化性角化病(日光性角化病)、皮脂腺腺瘤、血管角化瘤、特应性皮炎、基底细胞癌、白塞氏病、良性纤维组织细胞瘤、膀胱癌、鲍文氏病、乳腺癌、buschke-ollendorff综合征、大疱性类天疱疮(bullous pemphigold)、宫颈癌、宫颈发育不良、樱桃血管瘤、慢性耳轮结节性软骨皮炎(chondrodermatitis nodularis chronica helicis)、接触性皮炎、皮肤克罗恩病、皮肤子宫内膜异位症、皮肤白血病、皮肤淋巴瘤、皮肤脑膜瘤、皮肤粘液瘤、darier病、真皮树突细胞错构瘤、皮肤纤维瘤、隆凸性皮肤纤维肉瘤、小汗腺血管瘤样错构瘤、外胚层发育不良、表皮包涵体囊肿、表皮痣(包括但不限于nacvus scbaccous、黑头粉刺痣(comedone nacvus)、proteus syndromebccker nacvus)、上皮样细胞组织细胞瘤、红皮病、家族性粘液血管纤维瘤、真菌性皮肤病(包括瘢痕疙瘩性芽生菌病(lobomycosis))、颗粒细胞瘤、胰高血糖素瘤综合征、生殖器疣、hailey-hailey病、鱼鳞癣(包括但不限于寻常型鱼鳞癣、板层状鱼鳞病(ichthyosis lamellaria)、x连锁鱼鳞癣、表皮松解性角化过度症、获得性鱼鳞癣和掌跖角化病)、特发性点状色素减少症(idiopathic guttate hypomelanosis)、脓疱病、婴儿肢端脓疱病、婴儿纤维瘤病、卡波西肉瘤、瘢痕疙瘩、角化棘皮瘤、角化囊肿、指节垫、虱子、雀斑
样痣、黑色素瘤、微血管血管瘤、莫顿神经瘤、粘液膜类天疱疮、多灶性淋巴管内皮瘤病、多核细胞血管组织细胞瘤、多发性皮肤平滑肌瘤、腮腺炎、蕈样真菌病、指甲银屑病、内瑟顿氏综合征、皮肤神经瘤、神经鞘粘液瘤(neurothekeoma)、鲜红斑痣、浅表脂肪瘤样痣、厚皮指症、栅栏状包膜神经瘤、寄生虫性皮肤病(包括但不限于疥疮、虱病、潜蚤病、钩虫相关的皮肤幼虫移行症)、毛发红糠疹、毛平滑肌瘤、丛状纤维组织细胞瘤、汗孔角化小汗腺口和真皮导管痣、进行性结节性组织细胞瘤型银屑病(包括但不限于银屑病皮疹、掌跖银屑病、掌跖脓疱病、zumbusch的泛发性脓疱性银屑病、地理舌(lingua geographical))、papa综合征、papsh综合征、pash综合征、寻常型天疱疮、慢性苔藓样糠疹、汗孔角化病、直肠炎、结节性痒疹、坏疽性脓皮病、脂溢性皮炎、脂溢性角化病、鼻赘瘤、酒渣鼻、孤立性皮肤平滑肌瘤、综合征、蜘蛛痣、靶样含铁血黄素沉积性血管瘤、鳞状细胞癌、sweet综合征、系统性红斑狼疮、丛状血管瘤、静脉湖(venous lake)、白癜风、色素性荨麻疹、类黄瘤肥大细胞增生症(xanthelasmoidal mastocytosis)或带状疱疹样转移(zosteriform metastasis)。
[0235]
其它皮肤病也可以用ahr激动剂治疗，所述皮肤病包括但不限于过敏性紫癜、关节炎相关皮疹、良性表皮囊肿、胎痣、胼胝、鸡眼、湿疹、雀斑、遗传性对称性色素异常症、遗传性普遍性色素异常症、糖尿病足溃疡、家族性进行性色素沉着过度、galli galli病、含铁血黄素色素沉着过度、特发性点状色素减少症、铁金属性变色、白斑病、狼疮相关皮疹、黑斑病、色素痣(moles)、玛卡梅综合征、金星项链样皮肤病(necklace of venus)、贫血痣、脱色素痣、帕丽斯特-基利安综合征(pallister-killiansyndrome)、树叶状色素减退症、斑驳病、面颈网状色素沉着(pigmentatio reticularis facici et colli)、色素沉着病症(药物诱导的色素沉着过度)、皮拉尔囊肿(pilar cysts)、白色糠疹、玫瑰糠疹、西瓦特皮肤异色病(poikiloderma of civatte)、血管萎缩性西瓦特皮肤异色病、炎症后色素沉着过度、进进行性斑样色素减退症、瘙痒、屈侧网状色素异常、北村网状肢端色素沉着症(reticulate acropigmentation of kitamura)、里尔黑变病、沙赫瓦登伯革综合征(shah-waardenburg syndrome)、香菇皮炎(shiitak emushroom dermatitis)、焦油黑变病、钛金属性变色(titaniummetallic discoloration)、新生儿一过性脓疱性黑变病、寄生性白黑皮病(vagabond’s leukomelanoderma)、血管痉挛性斑点、文德-鲍克斯综合征(wende-bauckus syndrome)、x-连锁网状色素性疾病、也门聋哑色素减退综合征、疤痕、皮肤结节、去除文身或白癜风(包括但不限于非分段性白癜风)。
iii.实施例
[0236]
以下实施例本质上是说明性的，决不是限制性的。
[0237]
实施例1
[0238]
示例性组合物
[0239]
由靛青组成的组合物被制备成局部制剂，其成分和量(以制剂总重量计的重量百分比)如表1-1所示。
[0240]
表1-1
[0241]
[0242][0243][0244]
实施例2
[0245]
包含合成靛玉红的局部组合物在人体皮肤中的体外渗透和药代动力学
[0246]
由合成靛玉红组成的组合物被制备成局部制剂，其成分的量(以制剂总重量计的重量百分比表示)如表2-1、表2-2和表2-3所示。
[0247]
通过首先将合成靛玉红和任意抗氧化剂加入到非油质溶剂中以将合成靛玉红溶解或悬浮在所述溶剂中来制备制剂。然后，将油质组分(油性液体或聚乙二醇组分)和蜡组分加入溶解/悬浮的靛玉红-溶剂混合物中。添加之前，将油质组分加热至约75℃。使用silverson l4rt均化器以10,000rpm的速度将混合物均化2分钟，然后在ika热板上以550rpm的速度搅拌，直到冷却至环境温度。如本实施例所述制备鉴定为制剂编号438s的制剂；如us 9,833,438中所述制备鉴定为制剂编号438n的制剂，所述专利通过引入并入本文。
[0248]
表2-1
[0249][0250]
*dmso＝二甲基亚砜；nmp＝n-甲基-2-吡咯烷酮；peg＝聚乙二醇
[0251]
表2-2
[0252][0253]
*dmso＝二甲基亚砜；nmp＝n-甲基-2-吡咯烷酮
[0254]
表2-3
[0255]
[0256][0257]
*dmso＝二甲基亚砜；nmp＝n-甲基-2-吡咯烷酮；bht＝丁基化羟基甲苯
[0258]
使用人尸体皮肤测试每种制剂的体外皮肤渗透性。将皮肤切皮成500微米厚，角质层保持完整，放置在体外扩散装置上，角质层面向供体孔。将每种制剂10mg施用于1cm2皮肤表面区域，以提供10mg/cm2的剂量。用含有0.01％brij 98的柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液(ph 5.6)的受体溶液以8μl/分钟连续流过安装在装置中的皮肤下。24小时后，用从皮肤上去除残留制剂。通过使用胶带进行胶带剥离，从皮肤上去除角质层。在60℃加热2分钟后分离表皮和真皮，然后用90∶10乙腈/水进行匀浆并提取。通过lc-ms/ms测定表皮、真皮和受体溶液的每一种中的ahr激动剂靛玉红的量。每两小时自动收集受体溶液进行测试。作为比较对照，制备了青黛植物提取物的软膏(如专利us9,833,438中所述，该制备方法通过引入并入本文)，并且当由青黛制成时，其在本文中被
鉴定为制剂编号438n，当用合成靛玉红制成时，其被鉴定为制剂编号438s。
[0259]
结果如上面的表1a至表1c和图1a至图1b所示。
[0260]
实施例3
[0261]
包含合成靛玉红的局部组合物在人体皮肤中的体外渗透和药代动力学
[0262]
如实施例2中所述测试鉴定为制剂编号oo29、oo75、oo76、oo40、oo54、oo61、oo77、oo65、oo67和oo73的组合物，并将其与制剂编号438n进行比较。该制剂(438n除外)含有完全溶解的合成靛玉红，并且在25℃下在2、4、6或12个月内化学和物理稳定。测试制剂在24小时时在真皮、表皮和接收器溶液中释放的靛玉红明显多于对照制剂号438n，即使测试制剂含有的靛玉红水平低于或等于对照制剂。发现测试制剂在24小时后将超过约4.7ng/cm2的靛玉红(6.4μm)递送至表皮，并且将超过约16.9ng/cm2的靛玉红(0.7μm)递送至真皮。通过处理过的皮肤的所有制剂的通量都显著大于0.1ng/cm2/hr，导致24小时后受体溶液中靛玉红的累积量大于1.10ng/cm2。
[0263]
实施例4
[0264]
示例性组合物
[0265]
按照例如实施例2的程序，将包含本维莫德的组合物制备成局部制剂。该制剂具有表4-1和表4-2中指定的组分。
[0266]
表4-1
[0267][0268]
表4-2
[0269][0270][0271]
*dmso＝二甲基亚砜；nmp＝n-甲基-2-吡咯烷酮；bht＝丁基羟基甲苯
[0272]
上表中的组合物用于治疗本文所述的任何病症，包括银屑病(ps)、特应性皮炎(ad)、接触性皮炎、化脓性汗腺炎(hs)、坏疽性脓皮病(pg)、sweet综合征、pstpip-1基因中的突变(papa综合征、papsh综合征和pash综合征)、白塞氏病、大疱性类天疱疮、粘膜类天疱
疮、寻常型天疱疮、皮肤克罗恩病、综合征、系统性红斑狼疮、结节性痒疹(pn)、慢性苔藓样糠疹、掌跖脓疱病(ppp)和红皮病。如实施例2所述，使用人尸体皮肤在体外皮肤渗透测定中测试组合物。使用稳定性测定来测试组合物的稳定性。如实施例4所述，将该组合物用于体外药效学测定皮肤。
[0273]
实施例5
[0274]
药效学
[0275]
将新鲜切下的人皮肤切皮至750微米，角质层完好无损，并放置在使用约0.6cm2的皮肤的静态franz细胞上。在刺激前16小时或者在th17刺激前40小时和16小时，将10μl含有0.079％合成靛玉红的局部制剂oo14施用于皮肤。作为对照，在th17刺激前40小时和16小时将0.01％倍他米松(bmv)加入受体溶液。th17刺激培养基含有经显示诱导th17极化的细胞因子和抗体的混合物，并按照smith s.h.等人，plos one11(2):e0147979中的皮肤驻留免疫细胞活化测定中所述进行制备和添加。在采集用于qpcr和针对ahr激活的染色之前，将皮肤再培养24小时。选择cyp1a1，因为其是ahr激活的读出，因为其在正常条件下表达不足，并被激活的ahr上调。选择il-17a、il-1b、s100a7和il-8，因为它们是与th-17型炎症相关的介质，并且已被证明在hs病变中被显著上调(frew等人，ff1000 research 2018,7:1930)。结果如表2和图2a至图2e所示。
[0276]
实施例6
[0277]
药效学
[0278]
在如实施例5中所述的药效学(pd)研究中测试鉴定为制剂编号oo29、oo75、oo76、oo40、oo54、oo61、oo77、oo65、oo67、oo73的组合物及其匹配的安慰剂，其中增加了皮肤供体的数量并添加了额外的qpcr分析物。在th17极化前16小时，在将制剂单次10μl施用于皮肤后，测定表皮和真皮pd。额外的qpcr分析物包括il-22、ccl20、tnfα和s100a9。与匹配的安慰剂对照相比，在治疗样品中记录的cyp1a1和il-22显著增加。il-17α、il-1β、s100a1、s100a9、il-8、ccl20和tnfα显著减少。
[0279]
在来自hs患者的病变活皮肤活检中测试制剂号oo29、oo75、oo76、oo40、oo54、oo61、oo77、oo65、oo67、oo73及其匹配的安慰剂。将该皮肤分成两等份，置于实施例2中如上所述的franz细胞上，并用10μl的每种制剂或匹配的安慰剂进行处理。24小时后，收获皮肤用于qpcr分析。与匹配的安慰剂对照相比，在治疗样品中记录的cyp1a1和il-22显著增加。il-17α、il-1β、s100a1、s100a9、il-8、ccl20和tnfα显著减少。
[0280]
在不同的活动性hs病变上测试制剂号oo29、oo75、oo76、oo40、oo54、oo61、oo77、oo65、oo67、oo73及其匹配的安慰剂。将0.5g每种形成物或安慰剂施用到包含活跃病变的10cm直径区域，每天两次，持续7天。7天后，采集皮肤活检物用于qpcr分析。与匹配的安慰剂对照相比，在治疗样品中记录的cyp1a1和il-22显著增加。il-17α、il-1β、s100a1、s100a9、il-8、ccl20和tnfα显著降低。
[0281]
实施例7
[0282]
hs的治疗
[0283]
如实施例2所述制备包含合成靛玉红的组合物，并将其局部应用于患有hs的受试者的皮肤。将该组合物每天两次施用于患处。在7天内观察到明显的改善，在长达一个月的研究期间症状持续减轻。
[0284]
实施例8
[0285]
hs的治疗
[0286]
制备鉴定为oo14的实施例2的组合物，并将其局部施用于患有hs的受试者的皮肤。该组合物每天施用一次，持续8周。观察到新的炎性结节数量减少。与安慰制剂相比，观察到炎性结节、脓肿和瘘管的消退。这一降低导致hs的hiscore等级降低50％或更多。
[0287]
实施例9
[0288]
hs的治疗
[0289]
如实施例4所述制备包含本维莫德的组合物，并将其局部施用于患有hs的受试者的皮肤。该组合物每天施用一次，持续8周。观察到新的炎性结节数量减少。与安慰制剂相比，观察到炎性结节、脓肿和瘘管的消退。这一降低导致hs的hiscore等级降低50％或更多。
[0290]
虽然上面已经讨论了许多示例性方面和实施例，但本领域技术人员将认识到其某些修改、置换、添加和子组合。因此，以下所附权利要求和此后引入的权利要求旨在被解释为包括在其真实精神和范围内的所有此类修改、置换、添加和子组合。