一种用于雄激素受体蛋白靶向降解的嵌合体化合物、其制备方法及其在医药上的应用与流程

1.本公开属于医药领域，是关于一种新型蛋白降解靶向嵌合体(protac)化合物，其制备方法，及其在医药上的应用。具体而言，本公开涉及一种通式(im)所示的含有新型vhl(von hippel-lindau)e3泛素连接酶配体的蛋白降解靶向嵌合体(protac)化合物、其制备方法，及其在医药上的应用。本发明在医药上的应用展示了(但是不限制)其作为雄激素受体降解剂治疗雄激素受体介导的或依赖性的疾病或病症的用途。


背景技术：

2.protac(proteolysis targeting chimera)是一种杂合双功能小分子化合物。其结构中含有两种不同配体:一个是泛素连接酶e3配体,另一个是与靶蛋白结合配体,两个配体之间由连接臂相连。protac通过将靶蛋白和细胞内的泛素连接酶e3拉近,形成靶蛋白-protac-e3三元复合物,接着e3泛素连接酶给靶蛋白标记泛素化蛋白标签,随后启动细胞内强大的泛素化—蛋白酶体系统，特异性地降解靶蛋白，进而达到抑制相应蛋白信号通路的作用(cell biochem funct.2019,37,21-30)。与传统的小分子抑制剂相比,protac展现出了独特的优势:1、protac不需要与目标靶蛋白长时间和高强度的结合,并且降解靶蛋白过程类似于催化反应,可循环结合、降解靶蛋白。从而降低药物的系统暴露量，减少毒副作用的发生。2、靶蛋白被降解后需要重新合成才能恢复功能,因此降解靶蛋白比抑制其活性显示出更加高效、持久的抗肿瘤作用，且不会发生因靶蛋白突变而产生的耐药性。3、对于目前认为不可成药的靶点，例如转录因子，支架蛋白和调控蛋白等，protac也具有治疗潜力。
3.vhl是一种重要的e3连接酶。缺氧诱导因子1α(hif-1α)是vhl的主要底物。2012年，crews等发现基于羟基脯氨酸的小分子化合物可以干扰vhl与hif-1α的相互作用(j.am.chem.soc.2012,134,4465-4468)。在此之后，基于羟基脯氨酸的vhl配体得到了迅速的发展，并广泛应用于protac的合成中。
4.雄激素受体(androgen receptor,ar)是一种配体依赖性的反式转录调节蛋白，属于核受体超家族成员，主要存在于细胞核内。未与配体结合的ar与热休克蛋白(heat shock protein,hsp)结合；而ar与配体结合后，发生构象变化，与hsp解离，与dna亲和力增高(ar的活化)。活化的ar以二聚体形式与细胞核中特定的dna序列—雄激素反应原件(androgen response element,are)结合，并与其它转录因子相互作用，从而调节相关基因的表达，产生生物效应。研究表明，ar信号通路的异常与前列腺癌、良性前列腺增生、肯尼迪病(kennedy’s disease)、男性不育、雄激素不敏感征以及男性乳癌等疾病的发生、发展有密切的关系。
5.前列腺癌是最为常见的恶性肿瘤之一。据统计2018年全球有近130万新发病例和35.9万死亡病例，占男性恶性肿瘤发病率的13.5％，高居第二位；占男性恶性肿瘤死亡率的6.7％，高居第五位。多个ar拮抗剂已经被批准上市，成功应用于去势抵抗性前列腺癌治疗，已经成为前列腺癌的主要治疗手段。但是大多数病人在经过0.5-2年治疗之后，都会产生耐
药，从而导致病情的进展。一部分耐药的病人，癌细胞的生长仍然依赖于ar信号通路。
6.有必要开发更加有效的前列腺癌治疗手段。不同于ar拮抗剂，protac可以降解ar，能够更加有效地抑制ar信号通路，有可能成为有潜力的前列腺癌治疗方法。已公开的ar蛋白靶向降解protac化合物的专利申请包括wo2015160845a2、wo2016197032a1、us2015291562a1、wo2018071606a1、wo2019023553a1、wo2016118666a1和wo2018144649a1。


技术实现要素：

7.本公开的目的在于提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其为通式(im)所示的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐：
[0008][0009]
其中：
[0010]
环a和环b相同或不同，且各自独立地为芳基或杂芳基；
[0011]
r1选自氢原子、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；
[0012]
r2选自氢原子、卤素、烷基、烯基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；其中所述的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0013]
r3选自氢原子、氘原子、卤素、烷基、氘代烷基、烯基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；
[0014]r4a
和r
4b
相同或不同，且各自独立地选自氢原子、氘原子、卤素、烷基、氘代烷基、杂烷基、烯基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、-oc(o)r
10
、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；
[0015]
r5选自氢原子、氘原子、卤素、烷基、氘代烷基、杂烷基、烯基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；
[0016]
各个r6相同或不同，各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、烯基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；其中所述的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0017]
各个r7相同或不同，各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、烯基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；其中所述的烷
基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0018]
l为连接单元；
[0019]
ptm为选自通式(in-1)、通式(in-2)和通式(in-3)的雄激素受体拮抗剂片段；
[0020][0021]
y1、y2、y3和y4相同或不同，且各自独立地为c原子或n原子；
[0022]
r8相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、烯基、炔基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、羧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；
[0023]
r9相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、烯基、炔基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、羧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0024]r10
选自氢原子、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；
[0025]
n为0、1、2、3或4；
[0026]
m为0、1、2、3或4；
[0027]
p为0、1、2、3或4；且
[0028]
q为0、1、2、3、4和5。
[0029]
在本公开的一些实施方案中，提供clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其为通式(i)所示的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，
[0030][0031]
其中：
[0032]
环a、环b、l、y1、y2、y3、y4、r1～r3、r
4a
、r
4b
、r5～r9、n、m、p和q如通式(im)中所定义。
[0033]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中l选自l1、l2、l3和l
1-l
2-l3；
[0034]
l1和l3相同或不同，且各自独立地选自共价键、o原子、s原子、nr
1l
、cr
2lr3l
、c(o)、cr
2lr3l
c(o)、s(o)、s(o)2、c(s)、c(o)o、c(o)nr
4l
和nr
4l
c(o)；
[0035]
l2选自共价键、亚烷基、亚杂烷基、亚烯基、亚炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基和l
2a-l
2b-l
2c
，其中所述的亚烷基、亚杂烷基、亚烯基、亚炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、氧代、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0036]
l
2a
、l
2b
和l
2c
相同或不同，且各自独立地选自共价键、亚烷基、亚杂烷基、亚烯基、亚炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的亚烷基、亚杂烷基、亚烯基、亚炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、氧代、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0037]r1l
选自氢原子、烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；
[0038]r2l
和r
3l
相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、氧代、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；
[0039]r4l
选自氢原子、烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基。
[0040]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中l为l
1-l
2-l3；
[0041]
l1选自共价键、o原子和nr
1l
；r
1l
选自氢原子、c
1-6
烷基、卤代c
1-6
烷基、c
3-8
环烷基、3至8元杂环基、c
6-10
芳基和5至10元杂芳基；
[0042]
l2选自共价键、c
1-12
亚烷基、1至12元亚杂烷基、c
2-12
亚烯基、c
2-12
亚炔基、c
3-8
环烷基、3至8元杂环基、c
6-10
芳基、5至10元杂芳基和l
2a-l
2b-l
2c
，其中所述的c
1-12
亚烷基、1至12元亚杂烷基、c
2-12
亚烯基、c
2-12
亚炔基、c
3-8
环烷基、3至8元杂环基、c
6-10
芳基和5至10元杂芳基各自独立地任选被选自卤素、c
1-12
烷基、c
1-12
烷氧基、卤代c
1-12
烷基、羟基、羟c
1-12
烷基、氰基、氨基、氧代、c
3-8
环烷基、3至8元杂环基、c
6-10
芳基和5至10元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0043]
l
2a
、l
2b
和l
2c
相同或不同，且各自独立地选自共价键、c
1-12
亚烷基、1至12元亚杂烷基、c
2-12
亚烯基、c
2-12
亚炔基、c
3-8
环烷基、3至8元杂环基、c
6-10
芳基和5至10元杂芳基，其中所
述的c
1-12
亚烷基、1至12元亚杂烷基、c
2-12
亚烯基、c
2-12
亚炔基、c
3-8
环烷基、3至8元杂环基、c
6-10
芳基和5至10元杂芳基各自独立地任选被选自卤素、c
1-12
烷基、c
1-12
烷氧基、卤代c
1-12
烷基、羟基、羟c
1-12
烷基、氰基、氨基、氧代、c
3-8
环烷基、3至8元杂环基、c
6-10
芳基和5至10元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0044]
l3为c(o)或ch2c(o)。
[0045]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其为通式(i-1)所示的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，
[0046][0047]
其中：
[0048]
l1选自共价键、o原子、s原子、nr
1l
、cr
2lr3l
、c(o)、cr
2lr3l
c(o)、s(o)、s(o)2、c(s)、c(o)o、c(o)nr
4l
和nr
4l
c(o)；优选地，l1选自共价键、o原子和nh；
[0049]
l2选自共价键、亚烷基、亚杂烷基、亚烯基、亚炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基和l
2a-l
2b-l
2c
，其中所述的亚烷基、亚杂烷基、亚烯基、亚炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、氧代、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0050]
l
2a
、l
2b
和l
2c
相同或不同，且各自独立地选自共价键、亚烷基、亚杂烷基、亚烯基、亚炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的亚烷基、亚杂烷基、亚烯基、亚炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、氧代、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0051]r1l
选自氢原子、烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；
[0052]r2l
和r
3l
相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、氧代、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；
[0053]r4l
选自氢原子、烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基。
[0054]
环a、环b、y1、y2、y3、y4、r1～r3、r
4a
、r
4b
、r5～r9、n、m、p和q如通式(im)中所定义。
[0055]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中环a和环b相同或不同，且各自独立地为c
6-10
芳基或5至10元杂芳基；优选地，环a为苯基；环b为噻唑基。
[0056]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中r3和r5相同或不同，且各自独立地为氢原子或卤素。
[0057]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中r
4b
为氢原子；r
4a
选自氢原子、羟基和-oc(o)r
10
；r
10
为c
1-6
烷基。
[0058]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其为通式(ii)所示的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，
[0059][0060]
其中：
[0061]
l、y1、y2、y3、y4、r1、r2、r
4a
、r6～r9、n、m、p和q如通式(im)中所定义。
[0062]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其为通式(ii-1)所示的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，
[0063][0064]
其中：
[0065]
l1、l2、y1、y2、y3、y4、r1、r2、r
4a
、r6～r9、n、m、p和q如通式(i-1)中所定义。
[0066]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中y1、y2、y3和y4相同或不同，且各自独立地为c原子或n原子；条件是y1、y2、y3和y4中最多两个为n原子。
[0067]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中选自
r8和p如通式(im)所定义。
[0068]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中r1选自氢原子、c
1-6
烷基、卤代c
1-6
烷基、羟c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基。
[0069]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中r2选自氢原子、卤素、c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷基。
[0070]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中r6相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷基。
[0071]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中r7相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷基。
[0072]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中r8相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素和c
1-6
烷基。
[0073]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中r9相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、氰基、c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷基。
[0074]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中n为0、1或2。
[0075]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中m为0、1或2，优选为1。
[0076]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中p为0、1或2。
[0077]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中q为0、1、2或3，优选为2。
[0078]
在本公开的一些实施方案中，提供一种具有clm-l-ptm结构的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中选自：
ch2c(o)、nh-(ch2)
k-o-ch2c(o)和o-(ch2ch2o)
j-ch2c(o)；k为1、2、3、4、5或6；且j为1或2；y1、y2、y3和y4相同或不同，且各自独立地为c原子或n原子；条件是y1、y2、y3和y4中最多两个为n原子；r1选自氢原子、c
1-6
烷基、卤代c
1-6
烷基、羟c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基；r2选自氢原子、卤素、c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷基；r
4a
选自氢原子、羟基和-oc(o)r
10
；r
10
为c
1-6
烷基；r6相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷基；r7相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷基；r8相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素和c
1-6
烷基；r9相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、氰基、c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷基；n为0、1或2；m为0、1或2；p为0、1或2；且q为0、1、2或3。
[0087]
在本公开一些优选的实施方案中，通式(ii-1)所示的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中选自o-(ch2)
k-o-ch2、nh-(ch2)
k-o-ch2和o-(ch2ch2o)
j-ch2；k为1、2、3、4、5或6；且j为1或2；y1、y2、y3和y4相同或不同，且各自独立地为c原子或n原子；条件是y1、y2、y3和y4中最多两个为n原子；r1选自氢原子、c
1-6
烷基、卤代c
1-6
烷基、羟c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基；r2选自氢原子、卤素、c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷基；r
4a
选自氢原子、羟基和-oc(o)r
10
；r
10
为c
1-6
烷基；r6相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷基；r7相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷基；r8相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素和c
1-6
烷基；r9相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、氰基、c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷基；n为0、1或2；m为0、1或2；p为0、1或2；且q为0、1、2或3。
[0088]
在本公开一些优选的实施方案中，通式(ii-1)所示的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中选自o-(ch2)
4-o-ch2、o-(ch2)
3-o-ch2、o-(ch2ch2o)
2-ch2和nh-(ch2)
5-o-ch2；y1、y2、y3和y4相同或不同，且各自独立地为c原子或n原子；条件是y1、y2、y3和y4中最多两个为n原子；r1为c
1-6
烷基；r2为c
1-6
烷基；r
4a
选自氢原子、羟基和-oc(o)r
10
；r
10
为c
1-6
烷基；r6均为氢原子；r7相同或不同，且各自独立地为氢原子或c
1-6
烷基；r8相同或不同，且各自独立地为氢原子或卤素；r9相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、氰基、c
1-6
烷基和卤代c
1-6
烷基；m为0、1或2；p为0、1或2；且q为0、1、2或3。
[0089]
表a本公开的典型化合物包括但不限于：
[0090]
[0091]
[0092]
[0093][0094]
本公开另一方面提供一种通式(ima)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，
[0095][0096]
其中：
[0097]
环a、环b、r1～r3、r
4a
、r
4b
、r5～r7、n和m如通式(im)中所定义。
[0098]
本公开另一方面提供一种通式(iic-1)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，
[0099][0100]
其中：
[0101]
r1、r2、r
4a
、r6、r7、n和m如通式(ii-1)中所定义。
[0102]
本公开另一方面提供一种通式(ima)或通式(iic-1)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中所述的可药用的盐优选为盐酸盐或三氟乙酸盐。
[0103]
表b本公开的典型化合物包括但不限于：
[0104][0105]
[0106]
本公开另一方面提供一种通式(ia)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，
[0107][0108]
其中：
[0109]
环a、环b、l、y1、y2、y3、y4、r1～r3、r
4a
、r
4b
、r5～r8、n、m和p如通式(i)中所定义。
[0110]
本公开另一方面提供一种通式(iia)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，
[0111][0112]
其中：
[0113]
l、y1、y2、y3、y4、r1、r2、r
4a
、r6～r8、n、m和p如通式(ii)中所定义。
[0114]
表c本公开的典型化合物包括但不限于：
[0115]
[0116][0117]
本公开的另一方面涉及一种制备通式(i)所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐的方法，其包括：
[0118][0119]
通式(ia)的化合物和通式(ib)的化合物或其可药用的盐发生缩合反应，得到通式(i)所示的化合物；
[0120]
环a、环b、l、y1、y2、y3、y4、r1～r3、r
4a
、r
4b
、r5～r9、n、m、p和q如通式(i)中所定义。
[0121]
本公开的另一方面涉及一种制备通式(i-1)所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐的方法，其包括：
[0122][0123]
通式(ima)的化合物或其可药用的盐和通式(id-1)的化合物发生缩合反应，得到通式(i-1)所示的化合物；
[0124]
环a、环b、l1、l2、y1、y2、y3、y4、r1～r3、r
4a
、r
4b
、r5～r9、n、m、p和q如通式(i-1)中所定义。
[0125]
本公开的另一方面涉及一种制备通式(ii)所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐的方法，其包括：
[0126][0127]
通式(ib)的化合物或其可药用的盐和通式(iia)的化合物发生缩合反应，得到通式(ii)所示的化合物；
[0128]
l、y1、y2、y3、y4、r1、r2、r
4a
、r6～r9、n、m、p和q如通式(ii)中所定义。
[0129]
本公开的另一方面涉及一种制备通式(ii-1)所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐的方法，其包括：
[0130][0131]
通式(iic-1)的化合物或其可药用的盐和通式(id-1)的化合物发生缩合反应，得到通式(ii-1)所示的化合物；
[0132]
l1、l2、y1、y2、y3、y4、r1、r2、r
4a
、r6～r9、n、m、p和q如通式(ii-1)中所定义。
[0133]
在本公开的一些实施方案中，通式(id-1)所示的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中l1为o原子或nh。
[0134]
在本公开的一些实施方案中，通式(id-1)所示的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中l2为c
1-12
亚烷基-o-ch2或c
1-12
亚烷基-o-c
1-12
亚烷基-o-ch2；优选地，l2为(ch2)
k-o-ch2或(ch2ch2o)
j-ch2；k为1、2、3、4、5或6；且j为1或2；更优选地，l2选自(ch2)
4-o-ch2、(ch2)
3-o-ch2、(ch2ch2o)
2-ch2和(ch2)
5-o-ch2。
[0135]
在本公开的一些实施方案中，通式(id-1)所示的化合物，或其互变异构体、外消旋
体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，其中选自o-c
1-12
亚烷基-o-ch2、nh-c
1-12
亚烷基-o-ch2、o-c
1-12
亚烷基-o-c
1-12
亚烷基-o-ch2和nh-c
1-12
亚烷基-o-c
1-12
亚烷基-o-ch2；优选地，选自o-(ch2)
k-o-ch2、nh-(ch2)
k-o-ch2和o-(ch2ch2o)
j-ch2；k为1、2、3、4、5或6；且j为1或2；更优选地，选自o-(ch2)
4-o-ch2、o-(ch2)
3-o-ch2、o-(ch2ch2o)
2-ch2和nh-(ch2)
5-o-ch2。
[0136]
本公开的另一方面涉及一种药物组合物，所述药物组合物含有本公开上述通式(im)、通式(i)、通式(i-1)、通式(ii)、通式(ii-1)或表a所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
[0137]
本公开进一步涉及上述通式(im)、通式(i)、通式(i-1)、通式(ii)、通式(ii-1)或表a所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，或包含其的药物组合物在制备用于调节受试者体内的雄激素受体(ar)蛋白泛素化和降解的药物中的用途。
[0138]
本公开进一步涉及上述通式(im)、通式(i)、通式(i-1)、通式(ii)、通式(ii-1)或表a所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，或包含其的药物组合物在制备用于治疗和/或预防由雄激素受体介导的或依赖性的病症的药物中的用途，其中由雄激素受体介导的或依赖性的病症优选选自肿瘤、男性性功能障碍和肯尼迪氏病(kennedy’sdisease)；更优选选自前列腺癌、前列腺增生、多毛症、脱发、神经性厌食症、乳腺癌、痤疮、男性性功能障碍、肯尼迪氏病和艾滋病，最优选为前列腺癌，最最优选为激素敏感的前列腺癌或激素难治的前列腺癌。
[0139]
本公开还涉及一种调节受试者体内的雄激素受体(ar)蛋白泛素化和降解的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的上述通式(im)、通式(i)、通式(i-1)、通式(ii)、通式(ii-1)或表a所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐，或包含其的药物组合物。
[0140]
本公开还涉及一种治疗或预防通过受试者体内与小脑蛋白蛋白质结合而治疗的病症的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的上述通式(im)、通式(i)、通式(i-1)、通式(ii)、通式(ii-1)或表a所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，或包含其的药物组合物。
[0141]
本公开进一步涉及一种上述通式(im)、通式(i)、通式(i-1)、通式(ii)、通式(ii-1)或表a所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用作药物。
[0142]
本公开进一步涉及上述通式(im)、通式(i)、通式(i-1)、通式(ii)、通式(ii-1)或表a所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用于调节受试者体内的雄激素受体(ar)蛋白泛素化和降解。
[0143]
本公开进一步涉及上述通式(im)、通式(i)、通式(i-1)、通式(ii)、通式(ii-1)或表a所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式
或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用于治疗或预防通过受试者体内与小脑蛋白蛋白质结合而治疗的病症。
[0144]
在某些实施方式中，所述疾病或病症是哮喘、多发性硬化、癌症、肯尼迪氏病、纤毛疾病、腭裂、糖尿病、心脏病、高血压、炎症性肠病、智力迟钝、情绪病症、肥胖症、屈光不正、不育、angelman综合征、卡纳万病、腹腔病、夏-马-图三氏病、囊性纤维化、杜氏肌肉营养不良症、血色病、血友病、格来弗德氏综合征、神经纤维瘤、苯丙酮酸尿症、多囊性肾病、(pkd1)或4(pkd2)帕-魏二氏综合征、镰状细胞病、泰-萨克斯病、特纳综合征。其中所述癌症是鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、肝细胞癌、肾细胞癌、膀胱癌、肠癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、食管癌、头癌、肾癌、肝癌、肺癌、颈癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、胃癌、白血病、良性和恶性淋巴瘤(特别是伯基特氏淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤)、良性和恶性黑素瘤、骨髓增生性疾病、肉瘤(包括尤因肉瘤、血管肉瘤、卡波西氏肉瘤、脂肪肉瘤、肌肉瘤、周围神经上皮瘤、滑膜肉瘤、神经胶质瘤、星形细胞瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤、成胶质细胞瘤、神经母细胞瘤、神经节瘤、神经节神经胶质瘤、成神经管细胞瘤、松果体细胞肿瘤、脑膜瘤、脑膜肉瘤、神经纤维瘤和许旺氏细胞瘤)、子宫内膜癌、睾丸癌、甲状腺癌、癌肉瘤、霍奇金病、韦尔姆斯氏瘤或畸胎癌。在某些实施方式中，要治疗的疾病是癌症，例如，前列腺癌或肯尼迪氏病。
[0145]
在优选的实施方式中，以上所述受试者是人。可将活性化合物制成适合于通过任何适当途径给药的形式，活性化合物优选是以单位剂量的方式，或者是以患者可以以单剂自我给药的方式。本公开化合物或组合物的单位剂量的表达方式可以是片剂、胶囊、扁囊剂、瓶装药水、药粉、颗粒剂、锭剂、栓剂、再生药粉或液体制剂。
[0146]
本公开治疗方法中所用化合物或组合物的剂量通常将随疾病的严重性、患者的体重和化合物的相对功效而改变。不过，作为一般性指导，合适的单位剂量可以是0.1～1000mg。
[0147]
本公开的药物组合物除活性化合物外，可含有一种或多种辅料，所述辅料选自以下成分：填充剂(稀释剂)、粘合剂、润湿剂、崩解剂或赋形剂等。根据给药方法的不同，组合物可含有0.1至99重量％的活性化合物。
[0148]
含活性成分的药物组合物可以是适用于口服的形式，例如片剂、糖锭剂、锭剂、水或油混悬液、可分散粉末或颗粒、乳液、硬或软胶囊，或糖浆剂或酏剂。可按照本领域任何已知制备药用组合物的方法制备口服组合物，此类组合物可含有一种或多种选自以下的成分：甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂，以提供悦目和可口的药用制剂。片剂含有活性成分和用于混合的适宜制备片剂的无毒的可药用的赋形剂。这些赋形剂可以是惰性赋形剂、造粒剂、崩解剂、粘合剂和润滑剂。这些片剂可以不包衣或可通过掩盖药物的味道或在胃肠道中延迟崩解和吸收，因而在较长时间内提供缓释作用的已知技术将其包衣。
[0149]
也可用其中活性成分与惰性固体稀释剂或其中活性成分与水溶性载体或油溶媒混合的软明胶胶囊提供口服制剂。
[0150]
水悬浮液含有活性物质和用于混合的适宜制备水悬浮液的赋形剂。此类赋形剂是悬浮剂、分散剂或湿润剂。水混悬液也可以含有一种或多种防腐剂、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂。
[0151]
油混悬液可通过使活性成分悬浮于植物油，或矿物油配制而成。油悬浮液可含有增稠剂。可加入上述的甜味剂和矫味剂，以提供可口的制剂。可通过加入抗氧化剂保存这些
组合物。
[0152]
通过加入水可使适用于制备水混悬的可分散粉末和颗粒提供活性成分和用于混合的分散剂或湿润剂、悬浮剂或一种或多种防腐剂。适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂可说明上述的例子。也可加入其他赋形剂例如甜味剂、矫味剂和着色剂。通过加入抗氧化剂例如抗坏血酸保存这些组合物。
[0153]
本公开的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油，或矿物油或其混合物。适宜的乳化剂可以是天然产生的磷脂，乳剂也可以含有甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧剂。此类制剂也可含有缓和剂、防腐剂、着色剂和抗氧剂。
[0154]
本公开的药物组合物可以是无菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶剂有水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。无菌注射制剂可以是其中活性成分溶于油相的无菌注射水包油微乳可通过局部大量注射，将注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本公开化合物恒定循环浓度的方式给予溶液和微乳。为保持这种恒定浓度，可使用连续静脉内递药装置。这种装置的实例是deltec cadd-plus.tm.5400型静脉注射泵。
[0155]
本公开的药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用上述那些适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制该混悬液。无菌注射制剂也可以是在肠胃外可接受的无毒稀释剂或溶剂中制备的无菌注射溶液或混悬液。此外，可方便地用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用任何调和固定油。此外，脂肪酸也可以制备注射剂。
[0156]
可按用于直肠给药的栓剂形式给予本公开化合物。可通过将药物与在普通温度下为固体但在直肠中为液体，因而在直肠中会溶化而释放药物的适宜的无刺激性赋形剂混合来制备这些药物组合物。
[0157]
如本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定于以下因素：所用具体化合物的活性、患者的年龄、患者的体重、患者的健康状况、患者的行为、患者的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合等；另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、通式化合物(i)的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。
[0158]
术语说明
[0159]
除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
[0160]
术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12个)碳原子的烷基，更优选为含有1至6个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正
癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，取代基优选独立地任选选自d原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基。
[0161]
术语“杂烷基”指烷基中的一个或多个-ch
2-被选自n、o和s的杂原子所取代；其中所述的烷基如上所定义；杂烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，取代基优选独立地任选选自d原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基。
[0162]
术语“亚烷基”指饱和的直链或支链脂肪族烃基，其为从母体烷的相同碳原子或两个不同的碳原子上除去两个氢原子所衍生的残基，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12个)碳原子，更优选含有1至6个碳原子的亚烷基。亚烷基的非限制性实例包括但不限于亚甲基(-ch
2-)、1,1-亚乙基(-ch(ch3)-)、1,2-亚乙基(-ch2ch2)-、1,1-亚丙基(-ch(ch2ch3)-)、1,2-亚丙基(-ch2ch(ch3)-)、1,3-亚丙基(-ch2ch2ch
2-)、1,4-亚丁基(-ch2ch2ch2ch
2-)等。亚烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，取代基优选独立地任选选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基和氧代基中的一个或多个取代基。
[0163]
术语“亚杂烷基”指亚烷基中的一个或多个(优选为1、2、3、4或5个)-ch
2-被选自n、o和s的杂原子所取代；其中所述的亚烷基如上所定义；亚杂烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，取代基优选独立地任选选自d原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基。
[0164]
术语“烯基”指分子中含有至少一个碳碳双键的烷基化合物，其中烷基的定义如上所述。烯基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基。
[0165]
术语“炔基”指分子中含有至少一个碳碳三键的烷基化合物，其中烷基的定义如上所述。炔基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基。
[0166]
术语“亚烯基”分子中含有至少一个碳碳双键的亚烷基化合物，其中亚烷基的定义如上所述。亚烯基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，取代基优选独立地任选选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂
环基氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基和氧代基中的一个或多个取代基。
[0167]
术语“亚炔基”分子中含有至少一个碳碳三键的亚烷基化合物，其中亚烷基的定义如上所述。亚炔基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，取代基优选独立地任选选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基和氧代基中的一个或多个取代基。
[0168]
术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，优选包含3至8个碳原子(例如3、4、5、6、7和8个)，更优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。
[0169]
术语“螺环烷基”指5至20元的单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为3元/5元、3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺环烷基。螺环烷基的非限制性实例包括：
[0170][0171]
术语“稠环烷基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环稠环烷基。稠环烷基的非限制性实例包括：
[0172][0173]
术语“桥环烷基”指5至20元，任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更优选为双环或三环。桥环烷基的非限制性实例包括：
[0174][0175]
所述环烷基环包括如上所述的环烷基(包括单环、螺环、稠环和桥环)稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实例包括等；优选为或
[0176]
环烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，取代基优选独立地任选选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基。
[0177]
术语“烷氧基”指-o-(烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基。烷氧基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自d原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基。
[0178]
术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧、硫、s(o)或s(o)2的杂原子，但不包括-o-o-、-o-s-或-s-s-的环部分，其余环原子为碳。优选包含3至12个(例如3、4、5、6、7、8、9、10、11和12个)环原子，其中1～4个(例如1、2、3和4个)是杂原子；更优选包含3至8个环原子(例如3、4、5、6、7和8个)，其中1-3是杂原子(例如1、2和3个)；更优选包含3至6个环原子，其中1-3个是杂原子；最优选包含5或6个环原子，其中1-3个是杂原子。单环杂环基的非限制性实例包括吡咯烷基、四氢吡喃基、1,2.3.6-四氢吡啶基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基等。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。
[0179]
术语“螺杂环基”指5至20元的单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子为选自氮、氧、硫、s(o)或s(o)2的杂原子，其余环原子为碳。其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺杂环基和双螺杂环基。更优选为3元/5元、3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺杂环基。螺杂环基的非限制性实例包括：
[0180]
[0181]
术语“稠杂环基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧、硫、s(o)或s(o)2的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环稠杂环基。稠杂环基的非限制性实例包括：
[0182][0183]
术语“桥杂环基”指5至14元，任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧、硫、s(o)或s(o)2的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元(例如7、8、9或10元)。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基，优选为双环、三环或四环，更优选为双环或三环。桥杂环基的非限制性实例包括：
[0184][0185]
所述杂环基环包括如上所述的杂环基(包括单环、螺杂环、稠杂环和桥杂环)稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，其非限制性实例包括：
[0186]
等。
[0187]
杂环基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，取代基优选独立地任选选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基。
[0188]
术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(稠合多环是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至10元，例如苯基和萘基。所述芳基环包括如上所述的芳基环稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，
其非限制性实例包括：
[0189][0190]
芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，取代基优选独立地任选选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基。
[0191]
术语“杂芳基”指包含1至4个(例如1、2、3和4个)杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至10元(例如5、6、7、8、9或10元)，更优选为5元或6元，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、n-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基等。所述杂芳基环包括如上述的杂芳基稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，其非限制性实例包括：
[0192][0193]
杂芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，其可以在任何可使用的连接点上被取代，取代基优选独立地任选选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、环烷基氧基、杂环基氧基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基。
[0194]
上述环烷基、杂环基、芳基和杂芳基包括从母体环原子上除去一个氢原子所衍生的残基，或从母体的相同或两个不同的环原子上除去两个氢原子所衍生的残基，即“二价环烷基”、“二价杂环基”、“亚芳基”和“亚杂芳基”。。
[0195]
术语“氨基保护基”是为了使分子其它部位进行反应时氨基保持不变，用易于脱去的基团对氨基进行保护。非限制性实施例包含(三甲基硅)乙氧基甲基、四氢吡喃基、叔丁氧羰基(boc)、苄氧羰基(cbz)、乙酰基、苄基、烯丙基和对甲氧苄基(pmb)等。这些基团可任选地被选自卤素、烷氧基或硝基中的1-3个取代基所取代。
[0196]
术语“环烷基氧基”指环烷基-o-，其中环烷基如上所定义。
[0197]
术语“杂环基氧基”指杂环基-o-，其中杂环基如上所定义。
[0198]
术语“烷硫基”指烷基-s-，其中烷基如上所定义。
[0199]
术语“卤代烷基”指烷基被一个或多个卤素取代，其中烷基如上所定义。
[0200]
术语“卤代烷氧基”指烷氧基被一个或多个卤素取代，其中烷氧基如上所定义。
[0201]
术语“氘代烷基”指烷基被一个或多个氘原子取代，其中烷基如上所定义。
[0202]
术语“羟烷基”指烷基被一个或多个羟基取代，其中烷基如上所定义。
[0203]
术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。
[0204]
术语“羟基”指-oh。
[0205]
术语“巯基”指-sh。
[0206]
术语“氨基”指-nh2。
[0207]
术语“氰基”指-cn。
[0208]
术语“硝基”指-no2。
[0209]
术语“氧代基”指“＝o”。
[0210]
术语“羰基”指c＝o。
[0211]
术语“羧基”指-c(o)oh。
[0212]
术语“羧酸酯基”指-c(o)o(烷基)、-c(o)o(环烷基)、(烷基)c(o)o-或(环烷基)c(o)o-，其中烷基、环烷基如上所定义。
[0213]
本公开所述化合物的化学结构中，键表示未指定构型，即如果化学结构中存在手性异构体，键可以为或或者同时包含和两种构型。本公开所述化合物的化学结构中，键并未指定构型，即可以为z构型或e构型，或者同时包含两种构型。
[0214]
本公开的化合物包含其同位素衍生物。术语“同位素衍生物”指结构不同仅在于存在一种或多种同位素富集原子的化合物。例如，具有本公开的结构，用“氘”或“氚”代替氢，或者用
18
f-氟标记(
18
f同位素)代替氟，或者用
11
c-，
13
c-，或者
14
c-富集的碳(
11
c-，
13
c-，或者
14
c-碳标记；
11
c-，
13
c-，或者
14
c-同位素)代替碳原子的化合物处于本公开的范围内。这样的化合物可用作例如生物学测定中的分析工具或探针，或者可以用作疾病的体内诊断成像示踪剂，或者作为药效学、药动学或受体研究的示踪剂。本公开的各种氘化形式的式(i)化合物是指与碳原子连接的各个可用的氢原子可独立地被氘原子替换。本领域技术人员能够参考相关文献合成氘化形式的式(i)化合物。在制备氘代形式的式(i)化合物时可使用市售的氘代起始物质，或它们可使用常规技术采用氘代试剂合成，氘代试剂包括但不限于氘代硼烷、三氘代硼烷四氢呋喃溶液、氘代氢化锂铝、氘代碘乙烷和氘代碘甲烷等。氘代物通常
可以保留与未氘代的化合物相当的活性，并且当氘代在某些特定位点时可以取得更好的代谢稳定性，从而获得某些治疗优势。
[0215]
术语“泛素连接酶”是指促进泛素向特异性底物蛋白质转移、靶向底物蛋白质用于降解的蛋白质家族。例如，小脑蛋白是单独或与e2泛素结合酶组合导致泛素连接到标靶蛋白质上的赖氨酸并且随后靶向特异性蛋白质底物用于通过蛋白酶体降解的e3泛素连接酶蛋白质。因此，e3泛素连接酶单独或与e2泛素结合酶复合是泛素向标靶蛋白质转移的原因。一般来说，泛素连接酶参与聚泛素化，以便第二泛素连接到第一泛素，第三泛素连接到第二泛素，等等。聚泛素化标记蛋白质用于通过蛋白酶体降解。然而，存在一些限于单泛素化的泛素化事件，其中仅单一泛素通过泛素连接酶添加到底物分子。单泛素化蛋白质不被靶向到蛋白酶体用于降解，但可能反而在其细胞位置或功能方面改变，例如经由结合具有能够结合泛素的结构域的其它蛋白质。让事情更复杂的是，泛素上的不同赖氨酸可以由e3靶向以制备链。最常见赖氨酸是泛素链上的lys48。这是用以制备聚泛素的赖氨酸，其由蛋白酶体识别。
[0216]
术语“靶蛋白”是指具有任何生物功能或活性(包括结构、调节、激素、酶促、遗传、免疫、收缩、储存、运输和信号转导)的蛋白质和肽。在一些实施方案中，靶蛋白质包括结构蛋白质、受体、酶、细胞表面蛋白质、与细胞的集成功能相关的蛋白质，包括以下各者中涉及的蛋白质：催化活性、芳香酶活性、运动活性、螺旋酶活性、新陈代谢过程(合成代谢和分解代谢)、抗氧化活性、蛋白水解、生物合成、具有激酶活性的蛋白质、氧化还原酶活性、转移酶活性、水解酶活性、裂解酶活性、异构酶活性、连接酶活性、酶调节因子活性、信号转导因子活性、结构分子活性、结合活性(蛋白质、脂质碳水化合物)、受体活性、细胞运动性、膜融合、细胞通讯、生物过程调节、发育、细胞分化、剌激反应、行为蛋白质、细胞粘附蛋白、细胞死亡中涉及的白质、转运中涉及的蛋白质(包括蛋白质转运活性、核转运、离子转运活性、通道转运活性、载体活性)、通透酶活性、分泌活性、电子转运活性、发病原、伴随蛋白调节因子活性、核酸结合活性、转录调节因子活性、细胞外构造和生物起源活性、转译调节因子活性。所述蛋白质包括来自真核生物和原核生物的蛋白质，所述真核生物和原核生物包括微生物、病毒、真菌和寄生虫以及众多其它者，包括作为药物疗法标靶的人类、微生物、病毒、真菌和寄生虫，其它动物包括家养动物)、用于测定抗生素的标革巴的微生物和其它抗微生物药和植物和甚至病毒以及众多其它者。
[0217]“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。
[0218]“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为1～5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下(通过实验或理论)确定可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
[0219]“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
[0220]“可药用的盐”是指本公开化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和
有效性，且具有应有的生物活性。可以在化合物的最终分离和纯化过程中，或通过使合适的基团与合适的碱或酸反应来单独制备盐。通常用于形成药学上可接受的盐的碱包括无机碱，例如氢氧化钠和氢氧化钾，以及有机碱，例如氨。通常用于形成药学上可接受的盐的酸包括无机酸以及有机酸。
[0221]
针对药物或药理学活性剂而言，术语“治疗有效量”是指无毒的但能达到预期效果的药物或药剂的足够用量。有效量的确定因人而异，取决于受体的年龄和一般情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。
[0222]
本文所用的术语“溶剂化物”是指本公开的化合物与一种或多种，优选地为1-3种，无论是有机的还是无机的溶剂分子的物理结合。该物理结合包括氢键。在某些情况下，例如，当在结晶固体的晶格中掺入一种或多种，优选1-3种溶剂分子时，溶剂化物将被分离。示例性的溶剂化物包括但不限于水合物、乙醇化物、甲醇化物和异丙醇化物。溶剂化方法是本领域公知的。
[0223]“前药”是指可以在生理条件下，例如通过在血液中水解，在体内转化以产生活性原药化合物。
[0224]
本文所用的术语“药学上可接受的”是指这些化合物、材料、组合物和/或剂型，在合理的医学判断范围内，适用于与患者组织接触而没有过度毒性、刺激性、过敏反应或其他问题或并发症，具有合理的获益/风险比，并且对预期的用途是有效。
[0225]
当将术语“约”应用于诸如ph、浓度、温度等的参数时，表明该参数可以变化
±
10％，并且有时更优选地在
±
5％之内。如本领域技术人员将理解的，当参数不是关键的时，通常仅出于说明目的给出数字，而不是限制。
[0226]
本公开化合物的合成方法
[0227]
为了完成本公开的目的，本公开采用如下技术方案：
[0228]
方案一
[0229]
本公开通式(i)所示的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐的方法，该方法包括：
[0230][0231]
通式(ia)的化合物和通式(ib)的化合物或其可药用的盐在缩合剂存在下，碱性条件下，发生缩合反应，得到通式(i)所示的化合物；
[0232]
环a、环b、l、y1、y2、y3、y4、r1～r3、r
4a
、r
4b
、r5～r9、n、m、p和q如通式(i)中所定义。
[0233]
方案二
[0234]
本公开通式(i-1)所示的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐的方法，该方法包括：
[0235][0236]
通式(ima)的化合物或其可药用的盐和通式(id-1)的化合物在缩合剂存在下，碱性条件下，发生缩合反应，得到通式(i-1)所示的化合物；
[0237]
环a、环b、l1、l2、y1、y2、y3、y4、r1～r3、r
4a
、r
4b
、r5～r9、n、m、p和q如通式(i-1)中所定义。
[0238]
方案三
[0239]
本公开通式(ii)所示的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐的方法，该方法包括：
[0240][0241]
通式(ib)的化合物或其可药用的盐和通式(iia)的化合物在缩合剂存在下，碱性条件下，发生缩合反应，得到通式(ii)所示的化合物；
[0242]
l、y1、y2、y3、y4、r1、r2、r
4a
、r6～r9、n、m、p和q如通式(ii)中所定义。
[0243]
方案四
[0244]
本公开通式(ii-1)所示的化合物，或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐的方法，该方法包括：
[0245][0246]
通式(iic-1)的化合物或其可药用的盐和通式(id-1)的化合物在缩合剂存在下，碱性条件下，发生缩合反应，得到通式(ii-1)所示的化合物；
[0247]
l1、l2、y1、y2、y3、y4、r1、r2、r
4a
、r6～r9、n、m、p和q如通式(ii-1)中所定义。
[0248]
上述合成方案中，所述的缩合剂包括但不限于1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、n,n'-二环己基碳化二亚胺、n,n'-二异丙基碳二酰亚胺、o-苯并三氮唑-n,n,n',n'-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基苯并三唑和n-甲基吗啉、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、o-苯并三氮唑-n,n,n',n'-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸盐、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷，优选为2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸盐或1-羟基苯并三唑和n-甲基吗啉。
[0249]
上述合成方案中，提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱类，所述的有机碱类包括但不限于三乙胺、n,n-二异丙基乙基胺、正丁基锂、二异丙基氨基锂、乙酸钠、醋酸钾、乙酸钠、乙醇钠、叔丁醇钠或叔丁醇钾，所述的无机碱类包括但不限于氢化钠、磷酸钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化锂一水合物、氢氧化锂和氢氧化钾；优选n,n-二异丙基乙基胺。
[0250]
上述合成方案优选在溶剂中进行，所用溶剂包括但不限于：乙二醇二甲醚、醋酸、甲醇、乙醇、乙腈、正丁醇、甲苯、四氢呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、水、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺及其混合物。
具体实施方式
[0251]
以下结合实施例用于进一步描述本公开，但这些实施例并非限制着本公开的范围。
[0252]
实施例
[0253]
化合物的结构是通过核磁共振(nmr)或/和质谱(ms)来确定的。nmr位移(δ)以10-6
(ppm)的单位给出。nmr的测定是用bruker avance-400核磁仪或bruker avance neo 500m，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(dmso-d6)、氘代氯仿(cdcl3)、氘代甲醇(cd3od)，内标为四甲基硅烷(tms)。
[0254]
ms的测定用agilent 1200/1290dad-6110/6120quadrupole ms液质联用仪(生产商：agilent，ms型号：6110/6120quadrupole ms)。
[0255]
waters acquity uplc-qd/sqd(生产商：waters，ms型号：waters acquity qda detector/waters sq detector)
[0256]
thermo ultimate 3000-q exactive(生产商：thermo，ms型号：thermo q exactive)
[0257]
高效液相色谱法(hplc)分析使用agilent hplc 1200dad、agilent hplc 1200vwd和waters hplc e2695-2489高效液相色谱仪。
[0258]
手性hplc分析测定使用agilent 1260dad高效液相色谱仪。
[0259]
高效液相制备使用waters 2545-2767、waters 2767-sq detecor2、shimadzu lc-20ap和gilson gx-281制备型色谱仪。
[0260]
手性制备使用shimadzu lc-20ap制备型色谱仪。
[0261]
combiflash快速制备仪使用combiflash rf200(teledyne isco)。
[0262]
薄层层析硅胶板使用烟台黄海hsgf254或青岛gf254硅胶板，薄层色谱法(tlc)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化所得残余物产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。
[0263]
硅胶柱色谱法一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。
[0264]
激酶平均抑制率及ic
50
值的测定用novostar酶标仪(德国bmg公司)。
[0265]
本发明的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自abcr gmbh&co.kg，acros organics，aldrich chemical company，韶远化学科技(accela chembio inc)、达瑞化学品等公司。
[0266]
实施例中无特殊说明，反应均能够在氩气氛或氮气氛下进行。
[0267]
氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1l容积的氩气或氮气气球。
[0268]
氢气氛是指反应瓶连接一个约1l容积的氢气气球。
[0269]
加压氢化反应使用parr 3916ekx型氢化仪和清蓝ql-500型氢气发生器或hc2-ss型氢化仪。
[0270]
氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。
[0271]
微波反应使用cem discover-s 908860型微波反应器。
[0272]
实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。
[0273]
实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。
[0274]
实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(tlc)，反应所使用的展开剂，纯化所得残余物化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括：a：二氯甲烷/甲醇体系，b：正己烷/乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。
[0275]
实施例1
[0276]
n-((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-4-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2-氧代乙氧基)丁氧基)苯甲酰胺1
[0277]
[0278][0279]
第一步
[0280]
2-(4-溴苯基)-2-甲基肼基羧酸叔丁酯1b
羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯1g
[0300]
将化合物1f(2.5g,7.5mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(20ml)，加入n,n-二异丙基乙基胺(3.9g,30.2mmol)，n-(叔丁氧羰基)-l-叔亮氨酸(1.8g,7.8mmol,韶远科技(上海)有限公司)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸盐(4.2g,11mmol)，氩气置换三次，搅拌反应2小时。减压浓缩除去溶剂，加入水(50ml)，用乙酸乙酯萃取(50ml
×
3)，合并有机相，水洗(30ml)，无水硫酸钠干燥。过滤，减压浓缩除去溶剂。用硅胶柱色谱法以展开剂体系a纯化所得残余物，得到标题化合物1g(2.6g)，产率：63％。
[0301]
ms m/z(esi):546.0[m 1]。
[0302]
第七步
[0303]
(2s,4r)-1-((s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-n'-甲基-n'-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)吡咯烷-2-甲酰肼盐酸盐1h
[0304]
将化合物1g(2.6g,4.8mmol)溶于二氯甲烷(50ml)，加入4m氯化氢的1,4-二氧六环溶液(10ml,40mmol)，搅拌反应1小时。减压浓缩除去溶剂，经纯化，干燥，得到标题化合物1h粗品(2.2g)，直接用于下一步反应。
[0305]
ms m/z(esi):446.0[m 1]。
[0306]
第八步
[0307]
2-(4-羟基丁氧基)乙酸叔丁酯1j
[0308]
将1,4-丁二醇1i(15g,166mmol,韶远科技(上海)有限公司)溶于四氢呋喃(300ml)，氩气保护。冰浴下，加入钠氢(6.66g,166mmol,60％purity)，室温反应1小时；随后，反应降温至0℃，缓慢滴加2-溴乙酸叔丁酯(32.5g,166mmol,韶远科技(上海)有限公司)。滴毕，0℃反应1小时，自然升至室温反应16小时。加入水(30ml)淬灭反应，有机相用饱和氯化钠洗涤(100ml
×
3)，无水硫酸钠干燥。过滤，减压浓缩，得到标题化合物1j，直接用于下一步反应。
[0309]
第九步
[0310]
2-(4-(对甲苯磺酰基氧基)丁氧基)乙酸叔丁酯1k
[0311]
将化合物1j(24.2g,118mmol)溶于二氯甲烷(300ml)，加入三乙胺(24g,237mmol,33ml)和对甲苯磺酰氯(22.6g,118mmol)，反应16小时。反应液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以展开剂体系b纯化所得残余物，得到标题化合物1k(10.3g)，产率：25％。
[0312]
ms m/z(esi):381.0[m 23]
[0313]
第十步
[0314]
4-(4-(2-叔丁氧基)-2-氧代乙氧基)丁氧基)苯甲酸甲酯1l
[0315]
将化合物1k(4.95g,13.8mmol)和4-羟基苯甲酸甲酯(2g,13.1mmol,韶远科技(上海)有限公司)溶于n,n-二甲基甲酰胺(30ml)，加入碳酸铯(8.57g,26.3mmol)，反应加热至80℃搅拌2小时。反应液冷却至室温，加入乙酸乙酯和水，静置分层，水相用乙酸乙酯萃取(50ml
×
3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤(50ml
×
3)。无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，用硅胶柱色谱法以展开剂体系b纯化所得残余物，得到标题化合物1l(2.47g)，产率：96％。
[0316]
ms m/z(esi):361.2[m 23]。
[0317]
第十一步
[0318]
2-(4-(4-(甲氧基羰基)苯氧基)丁氧基)乙酸1m
[0319]
将化合物1l(4.27g,12.6mmol)溶于二氯甲烷(50ml)，加入三氟乙酸(15.35g,135mmol,10ml)。反应1小时，反应液减压浓缩，得到标题化合物1m粗品(3.79g)，直接用于下一步反应。
[0320]
ms m/z(esi):281.1[m-1]。
[0321]
第十二步
[0322]
4-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2氧代乙氧基)丁氧基)苯甲酸甲酯1n
[0323]
将化合物1h(2.8g,5.9mmol)和化合物1m(1.66g,5.9mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(30ml)。加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸盐(2.66g,7mmol)和n,n-二异丙基乙基胺(2.2g,17mmol)，反应1小时。加入乙酸乙酯和水。静置分层，水相用乙酸乙酯萃取(50ml
×
3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤(50ml
×
3)。无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，用硅胶柱色谱法以展开剂体系b纯化所得残余物，得到标题化合物1n(3.5g)，产率：84％。
[0324]
ms m/z(esi):710.1[m 1]。
[0325]
第十三步
[0326]
4-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2氧代乙氧基)丁氧基)苯甲酸1o
[0327]
将化合物1n(3.5g,4.9mmol)加入到40ml甲醇和水(v/v＝3/1)的混合液中，加入氢氧化钠(820mg,20mmol)，反应加热至50℃搅拌16小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，加入水(10ml)，用稀盐酸(1m)调节溶液至弱酸性(ph＝4)。用乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)，合并有机相，减压浓缩，得到标题化合物1o(3.1g)，产率：91％。
[0328]
ms m/z(esi):696.1[m 1]
[0329]
第十四步
[0330]
n-((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-4-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2氧代乙氧基)丁氧基)苯甲酰胺1
[0331]
将4-((1r,3r)-3-氨基-2,2,4,4-四甲基环丁氧基)-2-氯苯腈1p(1.52g,4.8mmol,采用j.med.chem.2011,54,7693
–
7704公开的方法制备而得)和化合物1o(3.1g,4.4mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(30ml)。加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸盐(2.2g,5.8mmol)和n,n-二异丙基乙基胺(1.86g,14mmol)，反应1小时。加入乙酸乙酯和水，静置分层，水相用乙酸乙酯萃取(50ml
×
3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤(50ml
×
3)。无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，用硅胶柱色谱法以展开剂体系b纯化所得残余物，得到标题化合物1(1.6g)，产率：38％。
[0332]
ms m/z(esi):956.3[m 1]。
[0333]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.35(s,1h),8.88(s,1h),7.92-7.90(m,1h),7.82-7.81(m,2h),7.66-7.64(m,1h),7.49-7.47(m,1h),7.27-7.25(m,2h),7.21-7.20(m,1h),
7.02-6.96(m,5h),4.58-4.56(m,1h),4.43-4.40(m,2h),4.32(s,1h),4.09-4.06(m,3h),3.97(s,2h),3.67-3.64(m,2h),3.58-3.55(m,2h),3.12(s,3h),2.41(s,3h),2.10-2.08(m,1h),2.02-1.96(m,1h),1.85-1.82(m,2h),1.74-1.71(m,2h),1.23(s,6h),1.13(s.6h),0.93(s,9h)。
[0334]
实施例2
[0335]
n-((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-4-(3-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2-氧代乙氧基)丙氧基)苯甲酰胺2
[0336][0337]
参考实施例1的合成方法，将第八步原料1i替换为化合物1,3-丙二醇(韶远科技(上海)有限公司)，得到标题化合物2(26mg)。
[0338]
ms m/z(esi):940.2[m-1]。
[0339]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.33(s,1h),8.84(s,1h),7.91-7.89(m,1h),7.83-7.82(m,2h),7.65-7.62(m,1h),7.55-7.52(m,1h),7.26-7.21(m,3h),7.18(s,1h),7.03-6.98(m,4h),4.57-4.55(m,1h),4.42-4.40(m,2h),4.31(s,1h),4.20-4.18(m,2h),4.07-4.05(m,1h),3.98(s,2h),3.70-3.65(m,4h),3.10(s,3h),2.42(s,3h),2.08-2.06(m,1h),2.05-2.01(m,2h),1.98-1.95(m,1h),1.24(s,6h),1.15(s.6h),0.92(s,9h)。
[0340]
实施例3
[0341]
n-((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-4-(2-(2-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2-氧代乙氧基)乙氧基)乙氧基)苯甲酰胺3
[0342][0343]
参考实施例1的合成方法，将第八步原料1i替换为化合物二乙二醇(韶远科技(上海)有限公司)，得到标题化合物3(47mg)。
[0344]
ms m/z(esi):970.3[m-1]。
[0345]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.35(s,1h),8.90(s,1h),7.92-7.90(m,1h),7.82-7.80(m,2h),7.69-7.67(m,1h),7.54-7.52(m,1h),7.27-7.25(m,2h),7.22-7.21(m,1h),7.02-6.95(m,4h),4.60-4.58(m,1h),4.41-4.39(m,2h),4.32(s,1h),4.19-4.18(m,2h),
4.07-4.06(m,1h),4.01-3.99(m,2h),3.84-3.80(m,3h),3.69-3.62(m,5h),3.11(s,3h),2.41(s,3h),2.18-2.15(m,1h),1.98-1.94(m,1h),1.22(s,6h),1.13(s.6h),0.93(s,9h)。
[0346]
实施例4
[0347]
n-((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-4-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2-氧代乙氧基)丁氧基)嘧啶-5-甲酰胺4
[0348][0349]
参考实施例1的合成方法，将第十步原料4-羟基苯甲酸甲酯替换为化合物2-羟基嘧啶-5-甲酸乙酯(上海毕得医药科技有限公司)，得到标题化合物4(15mg)。
[0350]
ms m/z(esi):958.2[m 1]。
[0351]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.34(s,1h),8.96(s,2h),8.88(s,1h),8.04-8.02(m,1h),7.91-7.89(m,1h),7.48-7.46(m,1h),7.26-7.22(m,2h),7.02-6.98(m,3h),4.56-4.55(m,1h),4.43-4.38(m,3h),4.30(s,1h),4.07-4.05(m,1h),3.99-3.96(m,2h),3.66-3.63(m,3h),3.57-3.55(m,2h),3.11(s,3h),2.42(s,3h),2.09-2.07(m,1h),1.97-1.95(m,1h),1.87-1.82(m,2h),1.72-1.69(m,2h),1.23(s,6h),1.12(s.6h),0.94(s,9h)。
[0352]
实施例5
[0353]
n-((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-6-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2-氧代乙氧基)丁氧基)烟酰胺5
[0354][0355]
参考实施例1的合成方法，将第十步原料4-羟基苯甲酸甲酯替换为化合物6-羟基烟酸乙酯(上海毕得医药科技有限公司)，得到标题化合物5(14mg)。
[0356]
ms m/z(esi):957.3[m 1]。
[0357]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.35(s,1h),8.89(s,1h),8.64(s,1h),8.04-8.02(m,1h),8.10-8.08(m,1h),7.92-7.90(m,1h),7.48-7.46(m,1h),7.27-7.25(m,2h),7.21-7.20(m,1h),7.02-7.00(m,1h),6.98-6.96(m,2h),6.86-6.84(m,1h),4.59-4.55(m,1h),4.44-4.40(m,2h),4.38-4.35(m,2h),4.31(s,1h),4.08-4.06(m,1h),3.96(s,2h),3.66-3.61(m,2h),3.57-3.54(m,2h),3.12(s,3h),2.41(s,3h),2.09-2.07(m,1h),1.98-1.95(m,1h),1.85-1.81(m,2h),1.72-1.69(m,2h),1.23(s,6h),1.13(s.6h),0.92(s,9h)。
[0358]
实施例6
[0359]
n-((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-5-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2-氧代乙氧基)丁氧基)吡嗪-2-甲酰胺6
[0360][0361]
第一步
[0362]
5-(4-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙氧基)丁氧基)吡嗪-2-羧酸甲酯6a
[0363]
将化合物1j(104mg,0.5mmol)和5-氯-吡嗪-2-羧酸甲酯(102mg,0.5mmol,韶远科技(上海)有限公司)溶于1,4-二氧六环(5ml)，加入双(二亚芐基丙酮)钯(29mg,0.05mmol)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(58mg,0.1mmol)和碳酸铯(244mg,0.75mmol)。氩气气氛下，反应加热至110℃搅拌16小时。反应液冷却至室温，铺硅藻土过滤，滤液减压浓缩除去溶剂，用硅胶柱色谱法以展开剂体系b纯化所得残余物，得到标题化合物6a(60mg)，产率：35％。
[0364]
ms m/z(esi):363.0[m 23]。
[0365]
第二步
[0366]
2-(4-((5-(甲氧基羰基)吡嗪-2-基)氧基)丁氧基)乙酸6b
[0367]
参考实施例1的合成方法，将第十一步原料1l替换为化合物6a，得到标题化合物6b(50mg)。
[0368]
ms m/z(esi):285.0[m 1]。
[0369]
第三步
[0370]
5-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2-氧代乙氧基)丁氧基)吡嗪-2-羧酸甲酯6c
[0371]
参考实施例1的合成方法，将第十二步原料1m替换为化合物6b，得到标题化合物6c(120mg)。
[0372]
ms m/z(esi):712.1[m 1]。
[0373]
第四步
[0374]
5-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2氧代乙氧基)丁氧基)吡嗪-2-羧酸6d
[0375]
参考实施例1的合成方法，将第十三步原料1n替换为化合物6c，得到标题化合物6d(110mg)。
[0376]
ms m/z(esi):698.1[m 1]。
[0377]
第五步
[0378]
n-((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-5-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2-氧代乙氧基)丁氧基)吡嗪-2-甲酰胺6
[0379]
参考实施例1的合成方法，将第十四步原料1o替换为化合物6d，得到标题化合物6(9mg)。
[0380]
ms m/z(esi):958.2[m 1]。
[0381]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.35(s,1h),8.88(s,1h),8.74(s,1h),8.32(s,1h),8.00-7.99(m,1h),7.91-7.90(m,1h),7.47-7.45(m,1h),7.26-7.24(m,2h),7.04-7.02(m,1h),6.98-6.97(m,2h),4.57-4.55(m,1h),4.45-4.39(m,4h),4.00-3.96(m,3h),3.68-3.65(m,3h),3.58-3.55(m,2h),3.12(s,3h),2.41(s,3h),2.10-2.08(m,1h),2.03-1.95(m,1h),1.89-1.86(m,2h),1.74-1.61(m,2h),1.22(s,6h),1.13(s.6h),0.94(s,9h)。
[0382]
实施例7
[0383]
n-((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-3-氟-4-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2氧代乙氧基)丁氧基)苯甲酰胺7
[0384][0385]
参考实施例1的合成方法，将第十步原料4-羟基苯甲酸甲酯替换为化合物3-氟-4-羟基苯甲酸甲酯(韶远科技(上海)有限公司)，得到标题化合物7(20mg)。
[0386]
ms m/z(esi):974.5[m 1]。
[0387]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.36(s,1h),8.90(s,1h),7.92-7.90(m,1h),7.76-7.68(m,3h),7.51-7.49(m,1h),7.26-7.22(m,3h),7.02-6.95(m,3h),4.57-4.55(m,1h),4.44-4.39(m,2h),4.32(s,1h),4.18-4.15(m,2h),4.08-4.06(m,1h),3.97(s,2h),3.66-3.64(m,2h),3.58-3.55(m,2h),3.11(s,3h),2.41(s,3h),2.10-2.08(m,1h),1.99-1.95(m,1h),1.87-1.84(m,2h),1.74-1.71(m,2h),1.23(s,6h),1.13(s.6h),0.92(s,9h)。
[0388]
实施例8
[0389]
n-((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-2-氟-4-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2氧代乙氧基)丁氧基)苯甲酰胺8
[0390][0391]
参考实施例1的合成方法，将第十步原料4-羟基苯甲酸甲酯替换为化合物2-氟-4-羟基苯甲酸甲酯(韶远科技(上海)有限公司)，得到标题化合物8(27mg)。
[0392]
ms m/z(esi):974.2[m 1]。
[0393]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.35(s,1h),8.88(s,1h),7.91-7.89(m,1h),7.63-7.59(m,2h),7.49-7.47(m,1h),7.27-7.20(m,2h),7.02-6.96(m,3h),6.91-6.83(m,2h),4.57-4.56(m,1h),4.42-4.40(m,2h),4.32(s,1h),4.10-4.08(m,2h),3.99-3.94(m,2h),3.69-3.62(m,3h),3.57-3.54(m,2h),3.12(s,3h),2.42(s,3h),2.11-2.09(m,1h),2.01-1.96(m,1h),1.84-1.81(m,2h),1.73-1.70(m,2h),1.23(s,6h),1.13(s.6h),0.93(s,9h)。
[0394]
实施例9
[0395]
n-((1r,3r)-3-(3,4-二氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-4-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2-氧代乙氧基)丁氧基)苯甲酰胺9
[0396][0397]
参考实施例1的合成方法，将第十四步原料1p替换为化合物4-((1r,3r)-3-氨基-2,2,4,4-四甲基环丁氧基)-1,2-二氰基苯(采用j.med.chem.2011,54,7693
–
7704公开的方法制备而得)，得到标题化合物9(32mg)。
[0398]
ms m/z(esi):947.2[m 1]。
[0399]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.35(s,1h),8.89(s,1h),8.07-8.06(m,1h),7.82-7.81(m,2h),7.65-7.63(m,2h),7.49-7.47(m,1h),7.35-7.33(m,1h),7.27-7.25(m,2h),
7.00-6.96(m,3h),4.58-4.56(m,1h),4.44-4.40(m,2h),4.37(s,1h),4.11-4.07(m,3h),3.97(s,2h),3.68-3.62(m,2h),3.58-3.55(m,2h),3.12(s,3h),2.41(s,3h),2.10-2.08(m,1h),2.01-1.96(m,1h),1.85-1.81(m,2h),1.74-1.71(m,2h),1.24(s,6h),1.12(s.6h),0.93(s,9h)。
[0400]
实施例10
[0401]
n-((1r,3r)-3-(3,4-二氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-2-氟-4-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2-氧代乙氧基)丁氧基)苯甲酰胺10
[0402][0403]
参考实施例1的合成方法，将第十步原料4-羟基苯甲酸甲酯替换为化合物2-氟-4-羟基苯甲酸甲酯(韶远科技(上海)有限公司)，将第十四步原料1p替换为化合物4-((1r,3r)-3-氨基-2,2,4,4-四甲基环丁氧基)-1,2-二氰基苯(采用j.med.chem.2011,54,7693
–
7704公开的方法制备而得)，得到标题化合物10(12mg)。
[0404]
ms m/z(esi):965.1[m 1]。
[0405]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.35(s,1h),8.88(s,1h),8.06-8.05(m,1h),7.66(s,1h),7.63-7.57(m,2h),7.49-7.47(m,1h),7.36-7.34(m,1h),7.26-7.25(m,2h),6.99-6.96(m,2h),6.91-6.83(m,2h),4.58-4.56(m,1h),4.44-4.40(m,2h),4.37(s,1h),4.11-4.07(m,3h),3.97(s,2h),3.68-3.62(m,2h),3.58-3.55(m,2h),3.12(s,3h),2.41(s,3h),2.10-2.08(m,1h),2.01-1.96(m,1h),1.85-1.81(m,2h),1.74-1.71(m,2h),1.24(s,6h),1.12(s.6h),0.93(s,9h)。
[0406]
实施例11
[0407]
n-((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-4-((5-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2-氧代乙氧基)戊基)氨基)苯甲酰胺11
[0408][0409]
第一步
[0410]
4-((5-羟基戊基)氨基)苯甲酸叔丁酯11b
[0411]
将4-碘苯甲酸叔丁酯11a(6g,22.9mmol，上海毕得医药科技有限公司)，5-氨基戊-1-醇(2.4g,23.3mmol)，碳酸铯(11.2g,34.4mmol)，碘化亚铜(218mg,1.1mmol)，2-乙酰基环己酮(642mg,4.6mmol)，加入n,n-二甲基甲酰胺(30ml)中。氮气气氛下，反应加热至90℃搅拌16小时。反应液冷却至室温，加入乙酸乙酯和水，静置分层。水相用乙酸乙酯萃取(100ml
×
3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤(100ml
×
3)。无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩除去溶剂，用硅胶柱色谱法以展开剂体系a纯化所得残余物，得到标题化合物11b(2.6g)，产率：48％。
[0412]
ms m/z(esi):280.2[m 1]。
[0413]
第二步
[0414]
4-((5-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)戊基)氨基)苯甲酸叔丁酯11c
[0415]
将化合物11b(1g,3.6mmol)，溶于二氯甲烷(100ml)中，加入乙酸铑二聚体(20mg,0.045mmol)，滴加重氮乙酸乙酯(818mg,7.2mmol)，反应0.5小时。补加重氮乙酸乙酯(818mg,7.2mmol)，反应16小时。反应液减压浓缩除去溶剂，用硅胶柱色谱法以展开剂体系a纯化所得残余物，得到标题化合物11c(380mg)，产率：29％。ms m/z(esi):366.5[m 1]。
[0416]
第三步
[0417]
4-((5-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)戊基)氨基)苯甲酸11d
[0418]
将化合物11c(380mg，1mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，加入三氟乙酸(2ml)，反应2小时。反应液减压浓缩除去溶剂，得到标题化合物11d粗品(410mg)，直接用于下一步反应。
[0419]
ms m/z(esi):310.1[m 1]。
[0420]
第四步
[0421]
2-((5-((4-(((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)甲酰氨基)苯基)氨基)戊基)氧基)乙酸乙酯11e
[0422]
将化合物1p(400mg,1.3mmol)，化合物11d(393mg,1.3mmol)，2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸盐(593g,1.6mmol)和n,n-二异丙基乙基胺(504mg,3.9mmol)加入n,n-二甲基甲酰胺(20ml)中，反应16小时。反应液冷却至室温，加入乙酸乙酯和水，静置分层。水相用乙酸乙酯萃取(20ml
×
3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤(20ml
×
3)。无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩除去溶剂，用硅胶柱色谱法以展开剂体系a纯化所得残余物，得到标题化合物11e(210mg)，产率：29％。
[0423]
ms m/z(esi):570.2[m 1]。
[0424]
第五步
[0425]
2-((5-((4-(((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)甲酰氨基)苯基)氨基)戊基)氧基)乙酸11f
[0426]
将化合物11e(254mg,0.45mmol)溶于15ml四氢呋喃和水(v/v＝1/2)的混合溶液中，加入氢氧化锂一水合物(75mg,1.8mmol)，反应1小时。用稀盐酸(1m)调节溶液至弱酸性(ph＝5)。用乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)萃取，合并有机相，减压浓缩除去溶剂，用硅胶柱色谱法以展开剂体系a纯化所得残余物，得到标题化合物11f(110mg)，产率：46％。
[0427]
ms m/z(esi):542.2[m 1]。
[0428]
第六步
[0429]
n-((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-4-((5-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2-氧代乙氧基)戊基)氨基)苯甲酰胺11
[0430]
将化合物11f(200mg,0.36mmol)和化合物1h(165mg,0.37mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(5ml)。加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸盐(168mg,0.44mmol)和n,n-二异丙基乙基胺(142mg,1.1mmol)，反应16小时。加入乙酸乙酯和水，静置分层。水相用乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤(10ml
×
3)。无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩除去溶剂，用硅胶柱色谱法以展开剂体系b纯化所得残余物，得到标题化合物11(70mg)，产率：20％。
[0431]
ms m/z(esi):969.3[m 1]。
[0432]1h nmr(500mhz,methanol-d4)δ8.99(s,1h),7.74-7.73(m,2h),7.66-7.64(m,2h),7.60-7.58(m,1h),7.36-7.34(m,2h),7.00-7.00(m,1h),6.99-6.98(m,1h),6.68-6.66(m,2h),4.74-4.73(m,1h),4.61-4.57(m,2h),4.29(s,1h),4.13(s,1h),4.05-4.00(m,3h),3.93-3.91(m,1h),3.86-3.85(m,1h),3.63-3.61(m,3h),3.20(s,3h),2.47(s,3h),2.31-2.28(m,1h),2.20-2.17(m,1h),1.76-1.70(m,4h),1.62-1.58(m,2h),1.28-1.28(s,6h),
1.23-1.21(s,6h),1.06(s,9h)。
[0433]
实施例12
[0434]
n-((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)-5-(4-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2-氧代乙氧基)丁氧基)-2-吡啶甲酰胺12
[0435][0436]
参考实施例1的合成方法，将第十步原料4-羟基苯甲酸甲酯替换为化合物5-羟基-2-吡啶甲酸甲酯(韶远科技(上海)有限公司)，得到标题化合物12(10mg)。
[0437]
ms m/z(esi):957.3[m 1]。
[0438]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.36(s,1h),8.88(s,1h),8.32(s,1h),8.15-8.13(m,1h),7.99-7.97(m,1h),7.92-7.90(m,1h),7.53-7.52(m,1h),7.49-7.48(m,1h),7.27-7.24(m,2h),7.04-7.02(m,1h),6.99-6.96(m,2h),6.86-6.84(m,1h),4.57-4.55(m,1h),4.40-4.36(m,3h),4.20-4.18(m,2h),4.02-3.99(m,3h),3.61-3.58(m,2h),3.55-3.52(m,2h),3.13(s,3h),2.42(s,3h),2.10-2.08(m,1h),1.98-1.95(m,1h),1.88-1.84(m,2h),1.76-1.73(m,2h),1.23(s,6h),1.14(s.6h),0.93(s,9h)。
[0439]
实施例13
[0440]
(3r,5s)-1-((s)-2-(2-(4-(4-(((1r,3r)-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基)甲酰氨基)苯氧基)丁氧基)乙酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-5-(2-甲基-2-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)肼基羰基)吡咯烷-3-基乙酸酯13
[0441][0442]
将化合物1(37mg,0.039mmol)溶于二氯甲烷(3ml)中，加入乙酸酐(9mg,0.088mmol)和4-二甲氨基吡啶(12mg,0.098mmol)，反应16小时。减压浓缩除去溶剂，用硅胶柱色谱法以展开剂体系a纯化所得残余物，得到标题化合物13(30mg)，产率：78％。
[0443]
ms m/z(esi):996.5[m-1]。
[0444]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.37(s,1h),8.89(s,1h),7.92-7.90(m,1h),7.83-7.81(m,2h),7.67-7.66(m,1h),7.52-7.51(m,1h),7.27-7.25(m,2h),7.22-7.21(m,1h),7.02-6.98(m,5h),4.44-4.43(m,1h),4.41(s,1h),4.09-4.06(m,3h),3.97-3.94(m,3h),3.85-3.84(m,1h),3.56-3.53(m,3h),3.12(s,3h),2.41(s,3h),2.19-2.17(m,1h),2.03(s,3h),1.93-1.91(m,1h),1.84-1.81(m,2h),1.73-1.70(m,2h),1.24(s,6h),1.13(s.6h),0.94(s,9h)。
[0445]
对照例1
[0446]
(2s,4r)-1-[(2s)-3,3-二甲基-2-[2-({5-[(4-{[反式-3-(3-氯-4-氰基苯氧基)-2,2,4,4-四甲基环丁基]氨基甲酰基}苯基)氨基]戊基}氧基)乙酰氨基]丁酰基]-4-羟基-n-[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲酰胺
010-cv)的rpmi1640培养基(hyclone,sh30809.01)进行培养。实验第一天，使用胰酶(gibco,25200-072)消化细胞，用含有5％活性炭处理的胎牛血清(biosun,bs-0004-500)的无酚红rpmi1640培养基(gibco,11835-030)将细胞洗一遍除去残留的胰酶后重悬细胞并计数，将细胞密度调整为4
×
105个/ml。在96孔板(corning，3599)中每孔加入100μl细胞悬液，将细胞放置于37℃，5％co2培养箱中培养过夜。实验第二天，使用bravo自动分液仪将化合物用dmso进行梯度稀释，将化合物配制成1000，100，10，1，0.1，0.01，0.001μm。然后将5μl的化合物加入到95μl的含有5％活性炭处理胎牛血清的无酚红rpmi1640培养基中，并用微孔板振荡器混匀。再将10μl用培养基稀释过的化合物加入到96孔板的细胞中。化合物终浓度是5000，500，50，5，0.5，0.05和0.005nm。将细胞与化合物在培养箱中孵育20至24个小时。实验第三天，将人ar总蛋白检测试剂盒(cell signaling technology,12850c)平衡至室温，弃去细胞培养基上清，用150μl每孔预冷的pbs将细胞洗一遍，每孔中加入120μl细胞裂解液。细胞裂解液为试剂盒中10
×
细胞裂解液用蒸馏水稀释至1
×
并加入终浓度为1mm的pmsf(生工,a100754-0005)。将细胞放置在冰上裂解15分钟。然后将100μl每孔的细胞裂解液加入到试剂盒中预包被的elisa板中，放置于37℃培养箱中孵育2小时。将试剂盒中20
×
洗液用蒸馏水稀释至1
×
，将孔板用每孔200μl的洗液洗5遍。将试剂盒中的ar检测抗体冻干粉用1ml的检测抗体稀释液溶解完全并加入到剩余的检测抗体稀释液中充分混匀，然后在每孔中加入100μl检测抗体，置于37℃培养箱中孵育1小时。将孔板洗5遍，将试剂盒中的hrp偶联抗体冻干粉用1ml的hrp稀释液溶解完全并加入到剩余的hrp稀释液中充分混匀，然后在每孔中加入100μl的hrp偶联抗体，置于37℃孵育30分钟。再将孔板洗五遍，每孔加入100μl的tmb底物，室温孵育至出现蓝色，每孔加入100μl终止液。使用pherastar fs多功能酶标仪读取od450信号值。用graphpad prism软件计算化合物降解活性的dc
50
值dmax％。化合物对lncap细胞内ar的降解活性如表2所示。
[0460]
表2本公开化合物对lncap细胞中ar的降解活性的dc
50
值和dmax％。
[0461][0462][0463]
结论：本公开化合物对lncap细胞中雄激素受体(androgen receptor，ar)具有很好的降解活性。
[0464]
测试例3本公开化合物的溶解度
[0465]
1.实验材料
[0466]
试剂：二甲亚砜(分析纯)、乙醇(分析纯)、乙腈(色谱纯)、nah2po4·
2h2o(分析纯)、乙酸铵(分析纯)、牛胆磺酸钠、卵磷脂、氢氧化钠、氯化钠(分析纯)
[0467]
仪器：液相色谱仪
[0468]
2、实验步骤
[0469]
在fassif溶液和fessif溶液中的溶解测试
[0470]
2.1称取适量待测化合物用dmso作为溶剂，配制10mm储备液。精密量取10μl储备液(浓度10mm，溶解在dmso中)与990μl有机混合溶剂(通常为dmso：乙腈：乙醇＝1:1:1)于2ml样品瓶中，混匀，得到澄清的100μm样品溶液，作为参比溶液。
[0471]
2.2溶解1mg待测样品至900μl fassif溶液(或fessif溶液)，强力混合，平行配制溶液两份；在37℃水浴中振摇24小时后，在4000rpm离心30min，上清液作为样品溶液，转移至液相色谱分析。
[0472]
3、实验结果
[0473]
溶解度(μm)＝样品的峰面积/参比的峰面积*参比溶液浓度(μm)*样品溶液稀释倍数。
[0474]
取两次测量值得平均值作为最终在fassif溶液、fessif溶液中的溶解度。
[0475]
表3、本公开化合物的溶解度。
[0476]
实施例编号fassif(μm)fessif(μm)116.5344.171111.7229.44对照例10.643.97
[0477]
结论：本公开化合物在fassif和fessif溶液中均具有很好的溶解度，与对照例1相比，溶解度有显著提升。