一种含乳酸菌的组合物、制备方法及其用途与流程

1.本发明涉及食品领域，主要涉及一种含乳酸菌的组合物、制备方法及其用途。


背景技术：

2.内脏过度敏感定义为患者对内脏疼痛的感觉强度增加和阈值降低。持续性vh是与神经元敏化相关，该神经元敏化表现为神经元激化的增加。神经传递物质(诸如，血清素(5
‑ꢀ
羟基色胺，5-ht))在神经元敏化中扮演重要角色。血清素为单胺神经元传递物质。先前研究已显示对清醒大鼠皮下注射5-羟基色氨酸(5-htp，其为一种血清素的前驱体)会引发 vh。血清素合成和储存主要的位置是肠粘膜的肠嗜铬细胞。从肠嗜铬细胞释放的血清素活化与肠道分泌、流动性以及感觉相关的神经反射。根据临床研究，ibs的患者通常伴随不正常的血清素代谢。另外，血清素受体拮抗剂已广泛用作治疗药物，表示ibs的病理是与血清素相关。
3.功能性胃肠失调(fgid)为胃肠病医疗中最常见的问题。此等是由于胃肠道不正常作用的结果而发生，而且被界定为慢性腹部复合综合症，诸如，腹痛、腹泻、便秘以及腹胀。根据罗马准则iii，已有超过20种功能性胃肠失调被认定。常见的fgid包含，但不限于，功能性腹痛、肠躁症(ibs)、便秘、功能性腹泻以及功能性消化不良。
4.肠躁症为慢性功能性胃肠失调。全世界约4％至30％的人饱受ibs所苦。ibs的特点包含两种主要症状，即腹痛(慢性痛)和排便习惯改变。根据这些主要的病征，ibs可分类成四个子群：腹泻型ibs(ibs-d)、便秘型ibs(ibs-c)、混合型ibs(ibs-m)以及未分型ibs (ibsu)。在ibs患者中，约30％的患者在胃肠发炎后饱受ibs所苦，而且彼等患者是属于感染/发炎后ibs。再者，激励患者寻求健康照护和造成生活品质显著下降的主要因素是与内脏过度敏感(vh)相关的腹痛。内脏过度敏感被认为是造成功能性胃肠失调的主要机转之一。此外，最近研究显示内脏过度敏感对ibs高度特异。
5.乳酸菌为用作益生菌的最重要菌种，由于其能够调节宿主肠道菌群，已被认为能做为预防或治疗肠胃道健康的另外选择。此外，近年来越来越多的证据也显示乳酸菌能改变宿主对于心理压力的心理和生理反应(zareie等,2006)。
6.作为一种存在于人类体内的益生菌
‑‑
乳酸菌是一类能利用可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的通称，能够帮助消化，有助人体肠脏的健康。大量研究表明，益生乳酸菌能够调节机体胃肠道正常菌群、保持微生态平衡，提高食物消化率和生物价，降低血清胆固醇，控制内毒素，抑制肠道内腐败菌生长繁殖和腐败产物的产生，制造营养物质，刺激组织发育，从而对机体的营养状态、生理功能、细胞感染、药物效应、毒性反应、免疫反应、肿瘤发生、衰老过程和突然的应急反应等产生作用。益生乳酸菌不仅可以提高食品的营养价值，改善食品风味，提高食品保藏性和附加值，而且其特殊的生理活性和营养功能正日益引起人们的重视。


技术实现要素：

7.鉴于此，本发明提供了一种含有乳酸菌的组合物，将该组合物可以制备成即食型乳酸菌，单独服用可用来修复紊乱的肠道，让身体代谢趋向，还可以与其他药物一起服用，例如首荟通便胶囊、复方芦荟胶囊改善肠道微生态，以及其他药物诸如奥利司他、新利司他等，提高药物的生物利用度，协同改善机制更加明显。
8.具体而言，本发明是这样实现的：
9.一种含乳酸菌的菌株，其特征在于，所述的组合物含有：
10.(1)植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、两歧双歧杆菌、乳双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌中的至少一种；
11.(2)菊粉、低聚糖以及包含或不包含食品级或药学上可用的辅料。
12.所述的乳酸菌选自植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、两歧双歧杆菌、乳双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌中的至少二种。
13.进一步地，所述的乳酸菌选自植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、两歧双歧杆菌、乳双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌中的至少三种。
14.进一步地，所述的乳酸菌选自植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、两歧双歧杆菌、乳双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌中的至少四种。
15.进一步地，所述的乳酸菌为植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、两歧双歧杆菌、乳双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌的混合菌。
16.所述的食品级或药学上可用的辅料为粘合剂，填充剂；进一步地，所述的食品级或药学上可用的辅料包括但不限于多元醇、淀粉。
17.所述的组合物包含以下重量份的组分：
[0018][0019][0020]
所述的低聚糖选自低聚果糖、低聚异麦芽糖、低聚木糖、水苏糖中的至少一种；所述的多元醇为乳糖醇、肌醇、半乳糖醇、山梨醇、木糖醇、麦芽糖醇、甘露醇中的至少一种；所述的淀粉选自玉米淀粉、小麦淀粉中的至少一种。
[0021]
以重量比计算，所述的低聚糖选自低聚果糖50-200份、低聚异麦芽糖150-400份、低聚木糖1-15份、水苏糖5-15份；所述的多元醇选自乳糖醇250-500份；所述的淀粉选自玉米淀粉5-20份。
[0022]
以重量比计算，所述的乳酸菌选自植物乳杆菌lp45 15-45份、乳双歧杆菌bal531 1-10 份、两歧双歧杆菌tmc3115 1-10份、嗜酸乳杆菌la28 1-10份、鼠李糖乳杆菌lr519 1-10份。
[0023]
其中，植物乳杆菌lp45(即植物乳杆菌lactobacillus plantarum，ymc1005)，该菌株 在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心进行了保藏，地址为北京市朝阳 区北辰西路1号院，保藏日期2013年8月26日保藏号为：cgmcc no.8072。
[0024]
嗜酸乳杆菌la28(嗜酸乳杆菌lactobacillus acidophilus)，该菌株在中国普通微生物菌种 保藏管理中心进行了保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物 研究所，保藏日期2015年10月15日，保藏号为cgmcc no.11506。
[0025]
两歧双歧杆菌tmc3115(即两歧双歧杆菌bifidobacterium bifidum)，该菌株在中国微 生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心进行了保藏，地址为北京市朝阳区北辰 西路1号院，中科院微生物研究所，保藏日期2013年11月11日，保藏号为cgmcc no.8462。
[0026]
乳双歧杆菌bal531(即乳双歧杆菌bifidobacterium lactis)，该菌株在中国微生物菌 种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心进行了保藏，地址为北京市朝阳区北辰西路1 号院，中科院微生物研究所，保藏日期2019年03月13日，保藏编号为cgmccno.17329
[0027]
鼠李糖乳杆菌lr-g14(即鼠李糖乳杆菌lactobacillus rhamnosus)，该菌株在中国微生 物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心进行了保藏，地址为北京市朝阳区北辰西路 1号院，中科院微生物研究所，保藏日期2018年06月20日，保藏编号为gmccno.15969
[0028]
以重量比计算，所述的组合物含有植物乳杆菌lp45 20-40份、两歧双歧杆菌tmc3115 4-8份、乳双歧杆菌bal531 4-8份、嗜酸乳杆菌la28 1-10份、鼠李糖乳杆菌lr519 1-10份、菊粉100-300份、低聚果糖50-150份、低聚异麦芽糖150-400份、低聚木糖1-15份、水苏糖5-15 份、乳糖醇250-500份、玉米淀粉5-15份；进一步优选为，植物乳杆菌lp45 30份、乳双歧杆菌bal531 5份、两歧双歧杆菌tmc3115 5份、嗜酸乳杆菌la28 5份、鼠李糖乳杆菌lr519 4 份、菊粉200份、低聚果糖100份、低聚异麦芽糖270份、低聚木糖10份、水苏糖10份、乳糖醇320份、玉米淀粉10份。所述组合物包括如下步骤：
[0029]
(1)将菊粉、低聚糖混合后，加入食品级或药学上可用的辅料，湿法制粒，灭菌，过筛，得颗粒备用；
[0030]
(2)取乳酸菌与步骤(1)的颗粒混合，按照常规工艺制备，即得。
[0031]
本发明所述的组合物，其每g组合物中含有至少108至10
12
cfu乳酸菌。
[0032]
本发明所述的组合物，其每g组合物中含有至少109至10
11
cfu乳酸菌。
[0033]
上述组合物可制备成丸剂、片剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂或口服液的任意一种。
[0034]
本发明还提供了一种含有上述组合物的药品、食品或保健品；优选的，所述食品或保健品包括但不限于益生菌、益生元、饼干、零食。
[0035]
本发明还提供了一种上述中药组合物在制备调节肠道功能的药品、食品或保健品中的应用；以及在制备辅助首荟通便胶囊排毒养颜、通便润肠功效作用的药品或食品中的应用。
[0036]
本发明还提供了一种即食型乳酸菌，所述即食型乳酸菌有上述组合物。
[0037]
本发明还提供了一种药物组合物，所述的药物组合物含有上述即食型乳酸菌以及奥利司他、首荟通便胶囊、复方芦荟胶囊、苁蓉通便口服液、麻仁丸、清宁丸、通便灵胶囊、苁蓉通便胶囊、麻仁润肠丸、麻仁滋脾丸、便秘通、通乐颗粒、新利司他、阿莫西林、伊立替康、异烟肼、利福平、利福喷汀、氟尿嘧啶类抗肿瘤药物中的任意一种。
[0038]
上述药物组合物可以是由即食型乳酸菌与首荟通便胶囊(国药准字z20150041)内容物通过常规工艺制备成颗粒剂，以重量用量比计算，即食型乳酸菌与首荟通便胶囊内容
物的比例为1-10:1；优选为，即食型乳酸菌与首荟通便胶囊内容物的比例为4.26:1；
[0039]
上述药物组合物可以是由即食型乳酸菌与奥利司他组成，以重量用量比计算，即食型乳酸菌与奥利司他的比例为1-50:1；优选为，以重量用量比计算，即食型乳酸菌与奥利司他的比例为10-30:1；进一步优选为，以重量用量比计算，即食型乳酸菌与奥利司他的比例为27:1。
[0040]
上述药物组合物还可以是由即食型乳酸菌与复方芦荟胶囊(国药准字z13020306)内容物通过常规工艺制备成颗粒剂，以重量用量比计算，即食型乳酸菌与复方芦荟胶囊内容物的比例为1-20:1；优选为，以重量用量比计算，即食型乳酸菌与复方芦荟胶囊内容物的比例为1-10:1；进一步优选的，以重量用量比计算，即食型乳酸菌与复方芦荟胶囊内容物的比例为5.4:1。
[0041]
本发明另一目的在于提供一种即食型乳酸菌的制备方法，该方法工艺流程参见说明书附图中图1所示。
[0042][0043]
与现有技术相比，本发明的优点在于：
[0044]
1)在动物模型实验中，本发明的药物组合物能有效的针对性地改变肠道菌群，调节肠道菌群结构，改善微环境，进一步提高肠道健康，对多种原因导致的肠道菌群紊乱均显示出了很好的调节作用，取得了非常好的技术效果。
[0045]
2)对比实验结果表明，本发明组合物提供的组合物与奥利司他、首荟通便胶囊、复方芦荟胶囊等的特定比例，比单一的组合物或奥利司他、首荟通便胶囊、复方芦荟胶囊具有更优越的调节减肥、便秘以及肠道菌群结构的作用，表明组合物与奥利司他、首荟通便胶囊、复方芦荟胶囊等特定重量比组合后，具有较好的协同增效作用。
附图说明
图1本发明所述即食型乳酸菌制备工艺流程图。
具体实施例
[0046]
下面结合具体实施例进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本技术所附权利要求所限定的范围。
[0047]
实施例1：一种即食型乳酸菌，所用的原料与制备工艺如下：
[0048][0049]
制备工艺为：
[0050]
(1)将菊粉、低聚果糖混合后，加入乳糖醇、玉米淀粉，湿法制粒，灭菌，过筛，得颗粒备用；
[0051]
(2)将植物乳杆菌lp45、两歧双歧杆菌tmc3115与步骤(1)的颗粒混合，按照常规工艺制备，即得。
[0052]
实施例2：一种即食型乳酸菌，所用的原料与制备工艺如下：
[0053][0054]
制备工艺同实施例1。
[0055]
实施例3：一种即食型乳酸菌，所用的原料与制备工艺如下：
[0056][0057]
菊粉100克、低聚果糖50克、低聚异麦芽糖150克、低聚木糖5克、水苏糖5克、乳糖醇250克、玉米淀粉5克。
[0058]
制备工艺同实施例1。
[0059]
实施例4：一种即食型乳酸菌，所用的原料与制备工艺如下：
[0060][0061]
菊粉300克、低聚果糖150克、低聚异麦芽糖400克、低聚木糖15克、水苏糖15克、乳糖醇500克、玉米淀粉15克。
[0062]
制备工艺同实施例1。
[0063]
实施例5：一种即食型乳酸菌，所用的原料与制备工艺如下：
[0064][0065]
菊粉200克、低聚果糖100克、低聚异麦芽糖270克、低聚木糖10克、水苏糖10克、乳糖醇320克、玉米淀粉10克。
[0066]
制备工艺同实施例1。
[0067]
实施例6：一种即食型乳酸菌，所用的原料与制备工艺如下：
[0068]
植物乳杆菌lp45
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
30克
[0069]
乳双歧杆菌bal531
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
5克
[0070]
两歧双歧杆菌tmc3115
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
5克
[0071]
菊粉200克、低聚果糖100克、低聚异麦芽糖270克、低聚木糖10克、水苏糖10克、乳糖醇320克、玉米淀粉10克。
[0072]
制备工艺同实施例1。
[0073]
实施例7：一种即食型乳酸菌，所用的原料与制备工艺如下：
[0074][0075]
菊粉200克、低聚果糖100克、低聚异麦芽糖270克、低聚木糖10克、水苏糖10克、乳糖醇320克、玉米淀粉10克。
[0076]
制备工艺同实施例1。
[0077]
实施例8：一种含即食型乳酸菌的药物，所用的原料与制备工艺如下：
[0078][0079]
菊粉200克、低聚果糖100克、低聚异麦芽糖270克、低聚木糖10克、水苏糖10克、乳糖醇320克、玉米淀粉10克。
[0080]
将上述原料按照实施例1所述的制备工艺制备成药物组合物，然后按照4.26:1的重量比加入首荟通便胶囊内容物，按照常规工艺制备成颗粒剂，装袋，每袋3g。
[0081]
实施例9：一种含即食型乳酸菌的药物，所用的原料与制备工艺如下：
[0082][0083][0084]
菊粉200克、低聚果糖100克、低聚异麦芽糖270克、低聚木糖10克、水苏糖10克、乳糖醇320克、玉米淀粉10克。
[0085]
将上述原料按照实施例1所述的制备工艺制备成药物组合物，然后按照27:1的重量比加入奥利司他，按照常规工艺制备成颗粒剂，装袋，每袋3g。
[0086]
实施例10：一种含即食型乳酸菌的药物，所用的原料与制备工艺如下：
[0087][0088]
菊粉200克、低聚果糖100克、低聚异麦芽糖270克、低聚木糖10克、水苏糖10克、乳糖醇320克、玉米淀粉10克。
[0089]
将上述原料按照实施例1所述的制备工艺制备成药物组合物，然后按照5.4:1的重量比加入复方芦荟胶囊内容物，按照常规工艺制备成颗粒剂，装袋，每袋3g。
[0090]
对比实施例1：一种含即食型乳酸菌，所用的原料与制备工艺如下：
[0091]
微晶纤维素49克菊粉200克、低聚果糖10克、低聚异麦芽糖27克、低聚木糖10克、水苏糖10克、乳糖醇320克、玉米淀粉10克。
[0092]
制备工艺同实施例1。
[0093]
对比实施例2：一种含即食型乳酸菌的组合物，所用的原料与制备工艺如下：
[0094][0095]
菊粉80克、低聚果糖300克、低聚异麦芽糖270克、低聚木糖60克、水苏糖60克、乳糖醇320克、玉米淀粉10克。
[0096]
制备工艺同实施例1。
[0097]
对比实施例3：一种含即食型乳酸菌的组合物，所用的原料与制备工艺如下：
[0098][0099]
菊粉50克、低聚果糖100克、低聚异麦芽糖277克、低聚木糖110克、水苏糖15克、乳糖醇120克、玉米淀粉5克。
[0100]
制备工艺同实施例1。
[0101]
对比实施例4：一种含即食型乳酸菌的组合物，所用的原料与制备工艺如下：
[0102][0103]
制备工艺为：
[0104]
取处方量的植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、副干酪乳杆菌混合均匀成菌粉，灭菌，过筛，再与菌粉混合，装袋，每袋3g，即得。
[0105]
对比实施例5：一种含即食型乳酸菌的组合物，所用的原料与制备工艺如下：
[0106][0107]
制备工艺为：
[0108]
取处方量的植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、副干酪乳杆菌混合均匀成菌粉加入阿斯巴甜与水果粉，灭菌，过筛，再与菌粉混合，装袋，每袋3g，即得。
[0109]
验证实施例
[0110]
一、本发明组合物对肠道菌群的影响
[0111]
实验材料以及实验地点
[0112]
实验单位：鲁南制药集团山东新时代药业有限公司药理中心
[0113]
动物：sd大鼠由鲁南制药集团股份有限公司提供，实验动物合格证批号为：syxk(鲁)
[0114]
2018 0008，雌雄各半，体重在180-220g。
[0115]
1.1造模及分组
[0116]
造模大鼠给予高脂饲料(配方为78.8％基础饲料、1％胆固醇、10％蛋黄粉、10％猪油、 0.2％胆盐)连续喂养7天。
[0117]
取造模成功的大鼠110只，随机分为11组，每组10只，分别为模型对照组、实施例5 组、实施例8组、实施例9组、实施例10组、复方芦荟胶囊组、首荟通便胶囊组、奥利司他组、对比实施例3组、对比实施例4组、对比实施例5组；另取正常饲料喂养的大鼠10 只，为空白对照组。
[0118]
1.2给药方式以及剂量如下：
[0119]
实施例5组：灌胃给予实施例5的即食型乳酸菌(0.81g/kg/d)；
[0120]
实施例8组：灌胃给予实施例8的药物(相当于0.81g/kg/d乳酸菌组合物 0.19g/kg/d 首荟通便胶囊)；
[0121]
实施例9组：灌胃给予实施例9的药物(相当于0.81g/kg/d乳酸菌组合物 0.03g/kg/d 奥利司他)；
[0122]
实施例10组：灌胃给予实施例10的药物(相当于0.81g/kg/d乳酸菌组合物 0.15g/kg/d 复方芦荟胶囊)；
[0123]
复方芦荟胶囊组：灌胃给予复方芦荟胶囊(0.15g/kg/d)；
[0124]
首荟通便胶囊组：灌胃给予首荟通便胶囊(0.19g/kg/d)；
[0125]
对比实施例3组：灌胃给予对比实施例3的组合物(0.81g/kg/d)；
[0126]
对比实施例4组：灌胃给予对比实施例4的组合物(0.062g/kg/d)；
[0127]
对比实施例5组：灌胃给予对比实施例5的组合物(0.069g/kg/d)；
[0128]
正常对照组、模型对照组灌胃给予等体积纯化水。
[0129]
大鼠灌胃给予组合物的体积为10ml/kg，每天灌胃1次，连续4d。通过计算每一组中摄取的活菌数量相同。
[0130]
试验期间，空白对照组继续给予正常饲料，模型对照组和各给药组继续给予高脂饲料。
[0131]
1.3大鼠肠道菌群的检测
[0132]
末次给药前，无菌采取粪便适量(0.1
±
0.01g)，置干燥灭菌试管中，再次称重，计算大鼠粪便重量，加入0.9％氯化钠溶液，震荡溶解，配制成10mg/ml的混悬液，再依次进行 10倍稀释，选择合适的稀释度，采用螺旋接种仪，分别接种于以下各选择培养基，按以下要求进行培养。
[0133]
乳杆菌：lbs琼脂培养基，37℃，48h，需氧培养；
[0134]
双歧杆菌：bbl琼脂培养基，37℃，48h，厌氧培养。
[0135]
培养结束后，以菌落形成单位(cfu
·
g-1
)进行计数，结果以每克粪便中的细菌菌落数的对数值表示。比较组间乳酸杆菌、双歧杆菌的变化情况。
[0136]
1.4数据处理
[0137]
统计学处理采用spss19.0软件进行统计分析，实验数据用均数
±
标准差表示，双侧t检验进行组间显著性分析，p＜0.05为差异具有统计学意义。
[0138]
2.结果
[0139]
2.1本发明组合物对大鼠肠道菌群的影响
[0140]
试验结果见表1，与正常对照组比较，模型对照组大鼠粪样中乳酸杄菌、双歧杆菌数量显著降低(p＜0.01)。
[0141]
使用本发明组合物后，实施例2组、实施例5组、实施例8组、实施例9组、实施例 10组大鼠粪样中乳杆菌、双歧杆菌数量均明显增加，与模型对照组相比，差异均有显著性意义(p＜0.01)。
[0142]
与对比实施例3-5组相比，实施例1-3组乳酸杄菌、双歧杆菌数量增加显著，差异均有显著性意义(p＜0.05或p＜0.01)。
[0143]
表1本发明组合物对大鼠乳酸杆菌、双歧杆菌数量的影响
[0144][0145][0146]
与正常对照组相比，
*
p《0.05，
**
p《0.01；
[0147]
与模型对照组相比，
&
p《0.05，
&&
p《0.01。
[0148]
从表1可以看出：本发明的实施例组合物能够显著增加肠道中乳酸杆菌和双歧杆菌的数量，并调节肠道菌群。
[0149]
2.本发明组合物对小鼠肠炎实验的治疗评价
[0150]
实验单位：鲁南制药集团山东新时代药业有限公司药理中心
[0151]
动物：balb/c小鼠由鲁南制药集团股份有限公司提供，实验动物合格证批号为：
[0152]
syxk(鲁)2018 0008，雌雄各半，3-4周龄，体重在18-22g。
[0153]
2.1造模及分组
[0154]
小鼠按照齐宇等产肠毒素大肠杆菌k88诱发balb/c小鼠肠炎模型的建立及评价方式建立小鼠肠炎模型。取造模成功的小鼠140只，随机分为模型对照组、阳性对照组、实施例2、 3、4、5、6组及对比实施例1、2、3、4、5组，每组10只；另取正常小鼠10只，为空白对照组。
[0155]
各给药组按照以下方式给予相应的药物：
[0156]
实施例2组：灌胃给予实施例2的组合物(1.00g/kg/d)；
[0157]
实施例3组：灌胃给予实施例3的组合物(1.00g/kg/d)；
[0158]
实施例4组：灌胃给予实施例4的组合物(1.00g/kg/d)；
[0159]
实施例5组：灌胃给予实施例5的组合物(1.00g/kg/d)；
[0160]
实施例6组：灌胃给予实施例6的组合物(1.00g/kg/d)；
[0161]
实施例7组：灌胃给予实施例7的组合物(1.00g/kg/d)；
[0162]
对比实施例1组：灌胃给予对比实施例1的组合物(1.00g/kg/d)；
[0163]
对比实施例2组：灌胃给予对比实施例2的组合物(1.00g/kg/d)；
[0164]
对比实施例3组：灌胃给予对比实施例3的组合物(1.00g/kg/d)；
[0165]
对比实施例4组：灌胃给予对比实施例4的组合物(1.00g/kg/d)；
[0166]
对比实施例5组：灌胃给予对比实施例5的组合物(1.00/kg/d)；
[0167]
阳性对照组：服用肠炎宁片(给药剂量：0.8736g/kg/d)。
[0168]
空白组、模型组小鼠灌胃给予淀粉(剂量为1.0mg/日/灌胃)，连续给药4天。试验期间，各组小鼠均正常喂养。
[0169]
2.2检测指标
[0170]
腹泻和疼痛。肠炎的最明显的表现在于腹泻，即大便的次数，是最能直观反映结肠炎的结果，本发明试验统计了小鼠24小时内的大便次数；结肠炎的另一个表征就是疼痛，发明人通过在8h内观察小鼠身体扭转次数，各组检测指标测量结果见表2。
[0171]
2.3统计学处理
[0172]
所有实验数据均以均数
±
标准差表示，采用spss19.0软件进行组间显著性t检验。
[0173]
表2各实施例各项指标的测定结果
[0174]
组别大便次数身体扭转次数(次数/8h)空白对照组2.1
±
0.563.52
±
0.88模型对照组7.2
±
1.71
**
19.72
±
4.01
**
肠炎宁片组2.8
±
0.32
&&##
5.25
±
1.73
&&##@
实施例2组3.0
±
0.40
&&##
5.19
±
1.14
&&##@
实施例3组2.3
±
0.96
&&##
4.25
±
1.27
&&##@
实施例4组2.5
±
0.29
&&##
3.99
±
0.73
&&##@
实施例5组2.1
±
0.55
&&##@
3.25
±
1.09
&&##@
实施例6组2.8
±
0.44
&&##
4.15
±
1.13
&&##@
实施例7组2.7
±
0.63
&&##
4.09
±
0.87
&&##@
对比实施例1组7.0
±
1.2218.65
±
3.22对比实施例2组5.8
±
1.3010.25
±
2.77
&&
对比实施例3组4.4
±
1.91
&
9.69
±
3.12
&&
对比实施例4组2.4
±
1.5
&&##
4.56
±
1.27
&&##
对比实施例5组2.3
±
0.85
&&##
4.44
±
0.92
&&##
[0175]
注：与空白对照组相比，
*
p《0.05，
**
p《0.01；
[0176]
与模型对照组相比，
&
p《0.05，
&&
p《0.01；
[0177]
与对比实施例1组相比，
#
p《0.05，
##
p《0.01；
[0178]
与对比实施例2组相比，
@
p《0.05，
@@
p《0.01。
[0179]
由表2结果显示小鼠大便次数和身体扭转次数，空白对照组与模型对照组相比看出，本发明的造模是成功的，实施例各组对于小鼠大便次数和身体扭转次数均具有改善作用，但是对比实施例的治疗效果显著低于本发明实施例组(p《0.05，p《0.01)。
[0180]
3.对出口梗阻型大鼠便秘模型作用的研究
[0181]
3.1材料与方法
[0182]
实验动物：sd大鼠，雌雄各半，体重180～220g，由鲁南制药集团股份有限公司提供，实验动物合格证批号为：syxk(鲁)2018 0008；实验前适应性饲养一周。
[0183]
3.2药物及试剂
[0184]
实施例5组：灌胃给予实施例5的组合物(0.81g/kg/d)；
[0185]
实施例8组：灌胃给予实施例8的药物(相当于0.81g/kg/d乳酸菌组合物 0.19g/kg/d 首荟通便胶囊)；
[0186]
实施例10组：灌胃给予实施例10的药物(相当于0.81g/kg/d乳酸菌组合物 0.15g/kg/d 复方芦荟胶囊)；
[0187]
复方芦荟胶囊组：灌胃给予复方芦荟胶囊(0.15g/kg/d)；
[0188]
首荟通便胶囊组：灌胃给予首荟通便胶囊(0.19g/kg/d)；
[0189]
对比实施例1：灌胃给予对比实施例1的组合物(0.81g/kg/d)；
[0190]
对比实施例3：灌胃给予对比实施例3的组合物(0.81g/kg/d)；
[0191]
对比实施例5：灌胃给予对比实施例5的组合物(0.81g/kg/d)。
[0192]
3.3造模方法
[0193]
采用直肠不全结扎法造模。将大鼠随机分为空白组、实施例5、实施例8、实施例10、复方芦荟胶囊组、首荟通便胶囊组、对比实施例1、对比实施例3、对比实施例5的组，共 10个组，每组10只，雌雄各半。空白组不做任何处理。其他各组大鼠以30mg/kg剂量的戊巴比妥钠麻醉，开腹，暴露直肠，以10号丝线经腹壁从距肛门1-1.5cm处“8”字形从直肠下方绕过再经腹壁引出，丝线引入点和引出点在腹壁相距约0.5cm。在丝线内套入直径为0.5cm的铁丝，打结，保持直肠被部分缩窄并悬吊于腹壁、肠壁血运正常状态。闭合腹腔，大鼠苏醒后给与正常饮食。
[0194]
术后给药，连续3天，每天一次，末次给药1h后，各药给予按照体重给与墨汁灌胃，灌胃结束30min后，立即脱颈椎处死大鼠，打开腹腔，分离肠系膜，以大肠上端至幽门为“小肠长度”，从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。
[0195]
计算墨汁推进率：墨汁推进率(％)＝墨汁推进长度/小肠长度
×
100％
[0196]
称量小肠湿重，80℃烘干至恒重，称重。
[0197]
计算肠腔含水率：小肠含水率(％)＝(小肠湿重-小肠干重)/小肠湿重。
[0198]
数据结果采用spss19.0软件进行分析。
[0199]
3.4实验结果：
[0200]
结果见表3。
[0201]
表3碳末推进率和小肠含水率的比较
[0202]
分组碳末推进率(％)小肠含水率(％)
正常组42.7
±
5.758.1
±
10.5模型组30.3
±
6.1
**
67.2
±
11.3
**
实施例5组36.9
±
7.7
&&#@
60.9
±
9.6
&&#
实施例8组44.6
±
8.5
&&##@@
55.3
±
8.1
&&##
实施例10组41.5
±
9.4
&&##@@
58.6
±
11.9
&&
复方芦荟胶囊组38.6
±
7.5
&&##@@
50.3
±
6.9
&&##
首荟通便胶囊组40.36
±
9.4
&&##@@
53.2
±
11.9
&&
对比实施例1组31.0
±
5.365.7
±
12.2对比实施例3组34.9
±
4.8
&
64.1
±
9.3对比实施例5组33.8
±
6.665.3
±
10.8
[0203]
注：与空白对照组相比，
*
p《0.05，
**
p《0.01；
[0204]
与模型对照组相比，
&
p《0.05，
&&
p《0.01；
[0205]
与对比实施例1组相比，
#
p《0.05，
##
p《0.01；
[0206]
与对比实施例2组相比，
@
p《0.05，
@@
p《0.01。
[0207]
由表3可以看出，相对于正常组，模型组自主排便功能最差，且有显著性差异(p《0.01)。实施例各组以及对比实施例组的碳末推进率及小肠含水量有不同程度的改善。但通过统计数据可以看出，实施例各组以及对比实施例组相比，在促进大鼠的肠道蠕动，减少肠腔含水量具有显著性差异(p《0.05，p《0.01)。
[0208]
二、鲁南制药集团员工服用本发明药物组合物考察
[0209]
药品：首荟通便胶囊，生产商：鲁南厚普制药有限公司。
[0210]
实验人员：从有减轻功能性便秘的意愿人群中，随机挑选120志愿者
[0211]
分组以及服用方法：
[0212]
实验组
①
组：首荟通便胶囊2粒/次 实施例5的组合物5g/次，早、中、晚各一次，每天三次；
[0213]
实验组
②
组：首荟通便胶囊2粒/次，早、中、晚各一次，每天三次；
[0214]
实验组
③
组：实施例5的组合物5g/次，早、中、晚各一次，每天三次。
[0215]
实验组
④
组：首荟通便胶囊2粒/次 对比实施例5的组合物5g/次，早、中、晚各一次，每天三次；
[0216]
实验组
⑤
组：首荟通便胶囊2粒/次 对比实施例1的组合物5g/次，早、中、晚各一次，每天三次；
[0217]
观察组：复方芦荟胶囊2粒/次，早、晚各一次。
[0218]
不间断服用14天，统计实验组观察并记录各组的结果，14天之后再次统计便秘的情况以及胃肠道情况信息。
[0219]
主要指标：
[0220]
1)大便特征：排便次数以及满意度，服用相关实施例药物/组合物之后，24小时内排便的次数，连续14天统计。排便的难易程度：非常满意10分，满意7分，一般3分，差 1分。
[0221]
2)腹部特征：腹痛、腹鸣、腹泻、腹胀减轻程度分别为非常满意10分，满意7分，一般3分，差1分。
[0222]
3)14天之后，排便次数和腹痛、腹鸣、腹泻、腹胀情况统计。
[0223]
次要指标：
[0224]
1)口感程度：服用组合物的口感满意度：非常满意10分，满意7分，一般3分，差 1分。
[0225]
2)饮食：服用组合物之后食欲情况：非常满意10分，满意7分，一般3分，差1分。
[0226]
3)气味：服用组合物的清香程度：非常满意10分，满意7分，一般3分，差1分。
[0227]
4)口臭改善：服用组合物的口臭改变程度：非常满意10分，满意7分，一般3分，差1分。
[0228]
结果：对最终的分数进行汇总并采用spss19.0进行统计分析。
[0229]
表4腹部特征统计结果
[0230][0231]
注：与实验组
②
组相比，
#
p＜0.05，与实验组
④
组相比
@
p＜0.05；
[0232]
与实验组
⑤
组相比，
￥
p＜0.05；与观察组相比，
▲
p＜0.05，
▲▲
p＜0.01。
[0233]
表5大便特征统计结果
[0234][0235][0236]
注：与实验组
③
组相比，
▲
p＜0.05，
▲▲
p＜0.01。
[0237]
从表4和表5可以看出，腹腔特征和大便特征中，实验各组均有不同程度的改善，但是改善效果最为明显是实验组
①
组，优于其他实验组，仅使用首荟通便胶囊能够很好的改善患者的便秘问题，但是对腹部特征，例如腹泻和腹痛的改善不大，就改善腹痛、腹泻的指症上，本发明实施例5的组合物具有显著的疗效。
[0238]
表6各实施例各项指标的测定结果
[0239]
组别口感程度气味饮食口臭实验组
①
组95.8
±
11.3
@￥
96.5
±
8.6
@@￥
88.5
±
6.6
##@@
▲▲
87.9
±
6.6
##@@￥￥
▲▲
实验组
②
组
‑‑‑‑
57.5
±
7.365.5
±
7.3
▲
实验组
③
组96.3
±
9.6
@￥
96.8
±
6.5
@@￥
87.2
±
8.5
##@@￥￥
▲▲
84.8
±
8.2
##@@￥￥
▲▲
实验组
④
组86.2
±
8.560.2
±
5.954.3
±
5.270.1
±
7.5
▲
实验组
⑤
组82.9
±
9.487.2
±
7.254.2
±
7.766.2
±
5.6
▲
观察组
‑‑‑‑
53.8
±
9.960.8
±
9.9
[0240]
注：与实验组
②
组相比，
#
p＜0.05，
##
p＜0.01；与实验组
④
组相比
@
p＜0.05，
@@
p＜0.01；
[0241]
与实验组
⑤
组相比，
￥
p＜0.05，
￥￥
p＜0.01；与观察组相比，
▲
p＜0.05，
▲▲
p＜0.01。从表3可以看出，添加水果粉、阿斯巴甜的口感程度和气味，更容易被接受，但是同样不能够解决口臭和食欲的问题；实验组
④
组和实验组
⑤
组，在口感、饮食等方面有的与本发明的组合物相差较大。