一种从紫荆叶提取物中制备山奈酚及阿福豆苷的方法与流程

1.本发明属于医药技术领域，具体涉及一种从紫荆叶提取物中制备山奈酚及阿福豆苷的方法。


背景技术：

2.紫荆(cercis chinensis)为豆科(leguminosae)紫荆属(cercis)植物。紫荆树皮可入药，有清热解毒，活血行气，消肿止痛之功效，可治产后血气痛、疗疮肿毒、喉痹；紫荆花具有清热凉血，通淋解毒的功效，主治热淋、血淋、疮疡和风湿筋骨痛。紫荆果具有止咳平喘，行气止痛之功效，常用于咳嗽多痰、哮喘和心口痛。紫荆根具有破瘀活血，消痈解毒之功效，常用于妇女月经不调、瘀滞腹痛、痈肿疮毒、痄腮和狂犬咬伤。
3.本发明所涉及的天然化合物山奈酚和阿福豆苷为黄酮醇类化合物，存在于多种植物中，但是含量不一。现代药理学研究表明，山奈酚具有抗氧化、抗炎、抗癌，防治糖尿病、动脉粥样硬化和骨质疏松，保护神经、肝脏和心肌以及抑制蛋白激酶活性的药理作用。阿福豆苷具有较好的抗血栓活性和抗肿瘤活性，可作为抗血栓药和抗癌药的先导化合物。由此可见，山奈酚和阿福豆苷均具有广阔的应用前景。山奈酚和阿福豆苷在紫荆叶中的含量较高，但目前尚未见从紫荆属植物大量提取山奈酚的报道，已有的从紫荆叶中提取阿福豆苷的方法中(cn 201710206992.7)，需要用到硅胶柱层析，会产生硅胶废弃物，并且提取率低。


技术实现要素：

4.本发明的目的是针对现有的问题，提供了一种从紫荆叶提取物中制备山奈酚及阿福豆苷的方法。
5.本发明是通过以下技术方案实现的：
6.一种从紫荆叶提取物中制备山奈酚及阿福豆苷的方法，包括如下步骤：
7.(1)以干燥的紫荆叶为原料，粉碎后用60～95％乙醇40～65℃提取，提取2～3次，每次1～3h；
8.(2)将提取液减压浓缩、回收溶剂得到提取物总浸膏；
9.(3)将提取物总浸膏加水溶解后，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯萃取，得到不同的有机层；
10.(4)将乙酸乙酯层减压浓缩，所得浸膏加水溶解，上nka-9大孔吸附树脂，并用不同浓度乙醇梯度洗脱，得到相应洗脱部分；
11.(5)将30％乙醇洗脱部分减压浓缩，甲醇溶解，过sephadex lh-20凝胶色谱柱，甲醇洗脱，得山奈酚和阿福豆苷纯品。
12.进一步地，步骤(4)中所述的nka-9大孔吸附树脂洗脱梯度为10％乙醇、30％乙醇、50％乙醇、90％乙醇梯度洗脱。
13.本发明相比现有技术具有以下优点：
14.1、本技术提取分离所用的填料、溶剂均可回收利用，绿色环保。
15.2、本技术能同时得到山奈酚和阿福豆苷两种纯品。
16.3、本技术提取率高，高达0.342％，而对比文件cn 201710206992.7中仅为0.021％。
17.4、本发明提供了一种从紫荆叶提取物中制备山奈酚及阿福豆苷的方法，有利于更好地开发利用紫荆这一药用植物，为山奈酚及阿福豆苷的药用价值开发提供物质基础；本发明提取工艺简单，可高效得到山奈酚和阿福豆苷纯品，所用分离材料及溶剂均可回收循环利用，绿色环保，提取量大，适合工业化生产。
附图说明
18.图1为本技术中的山奈酚和阿福豆苷的结构式。
具体实施方式
19.一种从紫荆叶提取物中制备山奈酚及阿福豆苷的方法，包括如下步骤：
20.(1)以干燥的紫荆叶为原料，粉碎后用60～95％乙醇40～65℃提取，提取2～3次，每次1～3h；
21.(2)将提取液减压浓缩、回收溶剂得到提取物总浸膏；
22.(3)将提取物总浸膏加水溶解后，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯萃取，得到不同的有机层；
23.(4)将乙酸乙酯层减压浓缩，所得浸膏加水溶解，上nka-9大孔吸附树脂，并用不同浓度乙醇梯度洗脱，得到相应洗脱部分；
24.(5)将30％乙醇洗脱部分减压浓缩，甲醇溶解，过sephadex lh-20凝胶色谱柱，甲醇洗脱，得山奈酚和阿福豆苷纯品。
25.步骤(4)中的nka-9大孔吸附树脂洗脱梯度为10％乙醇、30％乙醇、50％乙醇、90％乙醇梯度洗脱。
26.为了对本发明做更进一步的解释，下面结合下述具体实施例进行阐述。
27.实施例1
28.一种从紫荆叶提取物中制备山奈酚及阿福豆苷的方法，包括如下步骤：
29.(1)以干燥的紫荆叶为原料，粉碎后用60％乙醇40℃提取，提取2次，每次1h；
30.(2)将提取液减压浓缩、回收溶剂得到提取物总浸膏；
31.(3)将提取物总浸膏加水溶解后，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯萃取，得到不同的有机层；
32.(4)将乙酸乙酯层减压浓缩，所得浸膏加水溶解，上nka-9大孔吸附树脂，并用不同浓度乙醇梯度洗脱，得到相应洗脱部分；
33.(5)将30％乙醇洗脱部分减压浓缩，甲醇溶解，过sephadex lh-20凝胶色谱柱，甲醇洗脱，得山奈酚和阿福豆苷纯品。
34.步骤(4)中的nka-9大孔吸附树脂洗脱梯度为10％乙醇、30％乙醇、50％乙醇、90％乙醇梯度洗脱。
35.实施例2
36.一种从紫荆叶提取物中制备山奈酚及阿福豆苷的方法，包括如下步骤：
37.(1)以1kg干燥的紫荆叶为原料，粉碎后用85％乙醇50℃提取，提取3次，每次1.5h；
38.(2)将提取液减压浓缩、回收溶剂得到提取物总浸膏；
39.(3)将提取物总浸膏加水溶解后，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯萃取，得到不同的有机层；
40.(4)将乙酸乙酯层减压浓缩，所得浸膏加水溶解，上nka-9大孔吸附树脂，并用不同浓度乙醇梯度洗脱，得到相应洗脱部分；
41.(5)将30％乙醇洗脱部分减压浓缩，甲醇溶解，过sephadex lh-20凝胶色谱柱，甲醇洗脱，得山奈酚和阿福豆苷纯品。
42.步骤(4)中的nka-9大孔吸附树脂洗脱梯度为10％乙醇、30％乙醇、50％乙醇、90％乙醇梯度洗脱。
43.山奈酚1.12g(提取率0.112％)，得阿福豆苷3.42g(提取率0.342％)。
44.仪器材料：熔点由显微熔点仪sgwx-4a仪器测定。1h-nmr和
13
c-nmr图谱由bruker avance iii hd 400核磁共振仪测定。
45.实验结果：
46.山奈酚(a)：黄色粉末状固体。熔点276-277℃。在uv 254nm灯下呈强荧光，10％硫酸乙醇显色剂显色为黄色。1h-nmr(dmso-d6，400mhz)δ8.15(d,8.8,h-2'/6')，7.02(d,8.8,h-3'/5'),6.53(d,2.0,h-8),6.27(d,2.0,h-6)；
13
c-nmr(dmso-d6，100mhz)δ176.4(c-4),164.4(c-7),161.2(c-5),159.7(c-4'),156.7(c-9),147.3(c-2),136.1(c-3),130.0(c-2'/6'),122.1(c-1'),115.9(c-3'/5'),103.5(c-10),98.7(c-6),94.0(c-8)。
47.阿福豆苷(b)：黄色粉末状固体。熔点170-172℃。在uv 254nm灯下呈强荧光，10％硫酸乙醇显色剂显色为黄色。1h-nmr(dmso-d6，400mhz)δ7.66(2h,d,8.4,h-2
′
/6
′
),6.83(2h,d,8.4,h-3
′
/5
′
),6.27(1h,d,j＝2.0hz,h-8),6.09(1h,d,2.0,h-6),5.27(1h,d,j＝2.0hz,h-1
″
),4.13-3.00(4h,m,h-2
″
,h-3
″
,h-4
″
,h-5
″
),0.83(3h,d,j＝7.2hz,ch3-6
″
)；
13
c-nmr(dmso-d6,100mhz)δ178.2(c-4),164.5(c-7),161.8(c-4
′
),160.2(c-5),157.9(c-9),157.1(c-2),134.8(c-3),130.5(c-2
′
,c-6
′
),121.3(c-1
′
),115.1(c-3
′
,c-5
′
),104.5(c-10),102.1(c-1
″
),98.4,(c-6),93.4(c-8),71.8(c-4
″
),70.7(c-3
″
),70.6(c-2
″
),70.5(c-5
″
),16.3(c-6
″
).
48.实施例3
49.一种从紫荆叶提取物中制备山奈酚及阿福豆苷的方法，包括如下步骤：
50.(1)以干燥的紫荆叶为原料，粉碎后用95％乙醇65℃提取，提取3次，每次3h；
51.(2)将提取液减压浓缩、回收溶剂得到提取物总浸膏；
52.(3)将提取物总浸膏加水溶解后，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯萃取，得到不同的有机层；
53.(4)将乙酸乙酯层减压浓缩，所得浸膏加水溶解，上nka-9大孔吸附树脂，并用不同浓度乙醇梯度洗脱，得到相应洗脱部分；
54.(5)将30％乙醇洗脱部分减压浓缩，甲醇溶解，过sephadex lh-20凝胶色谱柱，甲醇洗脱，得山奈酚和阿福豆苷纯品。
55.步骤(4)中的nka-9大孔吸附树脂洗脱梯度为10％乙醇、30％乙醇、50％乙醇、90％乙醇梯度洗脱。
56.以上所述仅为本发明的较佳实施例，但本发明不以所示限定实施范围，凡是依照本发明的构想所作的改变，或修改为等同变化的等效实施例，仍未超出说明书所涵盖的精神时，均应在本发明的保护范围内。