用于改善瘀伤并使皮肤焕发活力的组合物和方法与流程

用于改善瘀伤并使皮肤焕发活力的组合物和方法
交叉引用
1.本技术要求2020年1月29日提交的第62/967,383号美国临时专利申请、2019年8月1日提交的第62/881,783号美国临时专利申请和2019年5月8日提交的第62/845,063号美国临时专利申请的权益，所述临时申请中的每一个均通过引用整体并入本文。


背景技术：

2.瘀斑可在皮肤表面下组织损伤后数小时出现，或者在某些情况下，当血管破裂时(例如在注射过程中)立即出现瘀斑。红细胞外渗到周围组织中，而巨噬细胞对这些细胞的破坏导致氧损失，从而使红细胞呈蓝色。血红蛋白分解的副产物(血红素、胆绿素、胆红素和含铁血黄素)将不同的颜色传送到皮肤，一旦这些色素被巨噬细胞吸收并消化，这些颜色就会缓慢消退。由于皮肤变色在美感上的负面影响可能会持续多天，因此需要更快地解决瘀伤过程。


技术实现要素：

3.本文描述了用于改善瘀伤的组合物和方法。在一些情况下，瘀伤是由注射引起的。如本文所述的组合物和方法可通过改善巨噬细胞功能来改善瘀伤。如本文所述的组合物和方法可进一步刺激弹性蛋白和/或胶原蛋白的产生、内在透明质酸的产生、脂肪生成或减轻炎症。
4.活性成分的功效取决于几个因素，包括其生物利用度。对于局部用组合物，皮肤渗透能力对于活性成分的生物利用度至关重要。一些改善皮肤渗透和生物利用度的方法可能过于激进，例如使用酒精等皮肤屏障破坏剂的方法。采用脂质体的递送系统可以以安全有效的方式改善局部组合物的递送和皮肤渗透。本文描述了用于改善分布、功效、生物利用度和/或活性的脂质体组合物。脂质体组合物可以通过改善递送和皮肤渗透来改善分布、功效、生物利用度和/或活性。
5.本文描述的一个方面是用于改善注射填充物后的瘀伤的局部组合物，其包含：包封在脂质体中的一种或多种成分；三肽-1；和六肽-12，其中所述局部组合物改善注射填充物后的瘀斑的愈合或外观。在一个特征中，所述三肽-1以1-10ppm存在。在一个特征中，所述三肽-1包括棕榈酰基三肽-1、肉豆蔻酰基三肽-1或其组合。在一个特征中，所述六肽-12包括棕榈酰基六肽-12、肉豆蔻酰基六肽-12或其组合。在一个特征中，所述六肽-12以1-10ppm存在。在一个特征中，包封在脂质体中的所述一种或多种成分中的第一成分是六肽-11。在一个特征中，所述六肽-11以50-150ppm存在。在一个特征中，包封在脂质体中的所述一种或多种成分中的第二成分是六肽-38。在一个特征中，所述六肽-38是乙酰基六肽-38。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含四肽。在一个特征中，所述四肽是四肽-2。在一个特征中，所述四肽-2是乙酰基四肽-2。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含磷脂酰丝氨酸。在一个特征中，所述磷脂酰丝氨酸以不超过0.050重量％(wt.％)存在。在一个特征中，所述磷脂酰丝氨酸以约0.005wt.％至约0.1wt.％存在。在一个特征中，所述磷脂酰丝氨酸
以不超过5.0wt％存在。在一个特征中，所述磷脂酰丝氨酸以0.1wt％存在。在一个特征中，包封在脂质体中的所述一种或多种成分中的第三成分是乳铁蛋白。在一个特征中，所述乳铁蛋白以不超过0.050wt.％存在。在一个特征中，所述乳铁蛋白以约0.005wt.％至约0.1wt.％存在。在一个特征中，所述乳铁蛋白以不超过5.0wt％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含杜香(ledum palustre)提取物。在一个特征中，所述杜香提取物以约0.1wt.％至约2.5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含莳萝提取物。在一个特征中，所述莳萝提取物以约0.01wt.％至约2.5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含羟基甲氧基苯基癸酮。在一个特征中，所述羟基甲氧基苯基癸酮以约0.001wt.％至约2.5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含银耳(tremella fuciformis)提取物。在一个特征中，所述银耳提取物以约0.001wt.％至约2.5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含透明质酸钠交联聚合物。在一个特征中，所述透明质酸钠交联聚合物以约0.0001wt.％至约2.5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合。在一个特征中，所述木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合以约0.25wt.％至约5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含丁二醇、甘油、角鲨烷、盐生杜氏藻(dunaliella salina)提取物、磷脂、生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯、黄原胶、甜菜碱、丙二醇、卵磷脂、辛酸/癸酸甘油三酯、辛二醇、辛酰甲基硅氧烷、苯氧乙醇、乙基己基甘油、聚丙烯酸酯-13、聚异丁烯、聚山梨醇酯20、辛酰氧肟酸、乙二胺四乙酸二钠、山金车(arnica montana)提取物、失水山梨醇异硬脂酸酯、戊二醇、葡萄糖、葵花籽油、萝卜根发酵滤液、山梨酸钾或其组合。在一个特征中，所述局部组合物是水性的。在一个特征中，所述局部组合物的粘度在约8,000厘泊(cps)至约30,000cps的范围内。在一个特征中，所述填充物是软组织填充物。在一个特征中，所述填充物是皮肤填充物。
6.本文描述的一个方面是用于改善瘀伤的局部组合物，其包含：包封在脂质体中的一种或多种成分，其中包封在脂质体中的所述一种或多种成分中的第一成分是六肽-11；三肽-1；和六肽-12，其中所述局部组合物改善瘀斑的愈合或外观。在一个特征中，所述三肽-1以1-10ppm存在。在一个特征中，三肽-1包括棕榈酰基三肽-1、肉豆蔻酰基三肽-1或其组合。在一个特征中，六肽-12包括棕榈酰基六肽-12、肉豆蔻酰基六肽-12或其组合。在一个特征中，所述六肽-12以1-10ppm存在。在一个特征中，所述六肽-11以50-150ppm存在。在一个特征中，包封在脂质体中的所述一种或多种成分中的第二成分是六肽-38。在一个特征中，所述六肽-38是乙酰基六肽-38。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含四肽。在一个特征中，所述四肽是四肽-2。在一个特征中，所述四肽-2是乙酰基四肽-2。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含磷脂酰丝氨酸。在一个特征中，所述磷脂酰丝氨酸以不超过0.050重量％(wt.％)存在。在一个特征中，所述磷脂酰丝氨酸以约0.005wt.％至约0.1wt.％存在。在一个特征中，所述磷脂酰丝氨酸以不超过5.0wt％存在。在一个特征中，所述磷脂酰丝氨酸以0.1wt％存在。在一个特征中，包封在脂质体中的所述一种或多种成分中的第三成分是乳铁蛋白。在一个特征中，所述乳铁蛋白以不超过0.050wt.％存在。在一个特征中，所述乳铁蛋白以约0.005wt.％至约0.1wt.％存在。在一个特征中，所述乳铁蛋白以不超过5.0wt％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含杜香(ledum palustre)提取物。在一个特征中，所述杜香提取物以约0.1wt.％至约2.5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进
一步包含莳萝提取物。在一个特征中，所述莳萝提取物以约0.01wt.％至约2.5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含羟基甲氧基苯基癸酮。在一个特征中，所述羟基甲氧基苯基癸酮以约0.001wt.％至约2.5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含银耳(tremella fuciformis)提取物。在一个特征中，所述银耳提取物以约0.001wt.％至约2.5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含透明质酸钠交联聚合物。在一个特征中，所述透明质酸钠交联聚合物以约0.0001wt.％至约2.5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合。在一个特征中，所述木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合以约0.25wt.％至约5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含丁二醇、甘油、角鲨烷、盐生杜氏藻提取物、磷脂、生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯、黄原胶、甜菜碱、丙二醇、卵磷脂、辛酸/癸酸甘油三酯、辛二醇、辛酰甲基硅氧烷、苯氧乙醇、乙基己基甘油、聚丙烯酸酯-13、聚异丁烯、聚山梨醇酯20、辛酰氧肟酸、乙二胺四乙酸二钠、山金车提取物、失水山梨醇异硬脂酸酯、戊二醇、葡萄糖、葵花籽油、萝卜根发酵滤液、山梨酸钾或其组合。在一个特征中，所述局部组合物是水性的。在一个特征中，所述局部组合物的粘度在约8,000厘泊(cps)至约30,000cps的范围内。在一个特征中，所述瘀斑在美容程序后出现。在一个特征中，所述美容程序是注射填充物。在一个特征中，所述美容程序是注射神经毒素。在一个特征中，所述美容程序是侵入性手术。在一个特征中，所述瘀斑在医疗程序后出现。在一个特征中，所述医疗程序是治疗性注射。在一个特征中，所述医疗程序是静脉内注射。在一个特征中，所述医疗程序是侵入性手术。在一个特征中，所述瘀斑在创伤后出现。
7.本文描述的一个方面是用于使皮肤焕发活力的局部组合物，其包含包封以下成分的脂质体：一种或多种肽；和乳铁蛋白，其中所述局部组合物使皮肤焕发活力。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含三肽-1。在一个特征中，所述三肽是三肽-1。在一个特征中，所述三肽-1以1-10ppm存在。在一个特征中，三肽-1包括棕榈酰基三肽-1、肉豆蔻酰基三肽-1或其组合。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含六肽-12。在一个特征中，六肽-12包括棕榈酰基六肽-12、肉豆蔻酰基六肽-12或其组合。在一个特征中，所述六肽-12以1-10ppm存在。在一个特征中，所述一种或多种肽中的第一肽包括六肽-11。在一个特征中，所述六肽-11以50-150ppm存在。在一个特征中，所述一种或多种肽中的第二肽包括六肽-38。在一个特征中，所述六肽-38是乙酰基六肽-38。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含四肽。在一个特征中，所述四肽是四肽-2。在一个特征中，所述四肽-2是乙酰基四肽-2。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含磷脂酰丝氨酸。在一个特征中，所述磷脂酰丝氨酸以不超过0.050重量％(wt.％)存在。在一个特征中，所述磷脂酰丝氨酸以约0.005wt.％至约0.1wt.％存在。在一个特征中，所述磷脂酰丝氨酸以不超过5.0wt％存在。在一个特征中，所述磷脂酰丝氨酸以0.1wt％存在。在一个特征中，所述乳铁蛋白以不超过0.050wt.％存在。在一个特征中，所述乳铁蛋白以约0.005wt.％至约0.1wt.％存在。在一个特征中，所述乳铁蛋白以不超过5.0wt％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含杜香(ledum palustre)提取物。在一个特征中，所述杜香提取物以约0.1wt.％至约2.5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含莳萝提取物。在一个特征中，所述莳萝提取物以约0.01wt.％至约2.5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含羟基甲氧基苯基癸酮。在一个特征中，所述羟基甲氧基苯基癸酮以约0.001wt.％至约2.5wt.％存在。在一个
特征中，所述局部组合物进一步包含银耳(tremella fuciformis)提取物。在一个特征中，所述银耳提取物以约0.001wt.％至约2.5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含透明质酸钠交联聚合物。在一个特征中，所述透明质酸钠交联聚合物以约0.0001wt.％至约2.5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合。在一个特征中，所述木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合以约0.25wt.％至约5wt.％存在。在一个特征中，所述局部组合物进一步包含丁二醇、甘油、角鲨烷、盐生杜氏藻提取物、磷脂、生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯、黄原胶、甜菜碱、丙二醇、卵磷脂、辛酸/癸酸甘油三酯、辛二醇、辛酰甲基硅氧烷、苯氧乙醇、乙基己基甘油、聚丙烯酸酯-13、聚异丁烯、聚山梨醇酯20、辛酰氧肟酸、乙二胺四乙酸二钠、山金车提取物、失水山梨醇异硬脂酸酯、戊二醇、葡萄糖、葵花籽油、萝卜根发酵滤液、山梨酸钾或其组合。在一个特征中，所述局部组合物是水性的。在一个特征中，所述局部组合物的粘度在约8,000厘泊(cps)至约30,000cps的范围内。
8.本文描述的一个方面是在个体中改善瘀伤的方法，其包括施用如本文所述的局部组合物。在一个特征中，所述瘀伤改善至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％。在一个特征中，所述瘀伤改善至少0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。在一个特征中，在施用所述局部组合物后至少1天，所述瘀伤得到改善。在一个特征中，在施用所述局部组合物后至少2天，所述瘀伤得到改善。在一个特征中，瘀伤的改善包括瘀斑的加速消退、瘀斑大小的减小、皮肤变色减少、肿胀减轻或其组合。
9.本文描述的一个方面是在个体中改善巨噬细胞功能的方法，其包括施用如本文所述的局部组合物。在一个特征中，改善的巨噬细胞功能包括改善的吞噬作用。在一个特征中，改善的巨噬细胞功能包括改善的含铁血黄素清除。在一个特征中，所述巨噬细胞功能改善至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％。在一个特征中，所述巨噬细胞功能改善改善至少0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。
10.本文描述的一个方面是在个体中刺激弹性蛋白、胶原蛋白或其组合的产生的方法，其包括施用如本文所述的局部组合物。在一个特征中，所述弹性蛋白、胶原蛋白或其组合的产生被刺激至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％。在一个特征中，所述弹性蛋白、胶原蛋白或其组合的产生被刺激至少0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。
11.本文描述的一个方面是在个体中刺激内在透明质酸产生的方法，其包括施用如本文所述的局部组合物。在一个特征中，所述内在透明质酸产生被刺激至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％。在一个特征中，所述内在透明质酸产生被刺激至少0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。
12.本文描述的一个方面是在个体中增加脂肪生成的方法，其包括施用如本文所述的局部组合物。在一个特征中，脂肪生成增加至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％。在一个特征中，脂肪生成增加至少0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。
13.本文描述的一个方面是在个体中减轻炎症的方法，其包括施用如本文所述的局部组合物。在一个特征中，炎症减轻至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％。在一个特征中，炎症减轻至少0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。
14.本文描述的一个方面是施用局部组合物的方法。在一个特征中，所述局部组合物在美容程序后施用。在一个特征中，所述局部组合物在美容程序前施用。在一个特征中，所述美容程序包括注射填充物。在一个特征中，所述填充物是软组织填充物。在一个特征中，所述填充物是皮肤填充物。在一个特征中，所述美容程序是微针程序。在一个特征中，所述微针程序是射频微针程序。在一个特征中，所述局部组合物在微针程序前至少1天施用。在一个特征中，所述局部组合物在微针程序前至少1周施用。在一个特征中，所述局部组合物在微针程序前至少2周施用。在一个特征中，所述局部组合物在微针程序后至少1天施用。在一个特征中，所述局部组合物在微针程序后至少1周施用。在一个特征中，所述局部组合物在微针程序后至少2周施用。在一个特征中，所述局部组合物紧接注射填充物前施用。在一个特征中，所述局部组合物在注射填充物前至少1天施用。在一个特征中，所述局部组合物在注射填充物前至少1周施用。在一个特征中，所述局部组合物在注射填充物前至少2周施用。在一个特征中，所述局部组合物在注射填充物后立即施用。在一个特征中，所述局部组合物在注射填充物后至少1天施用。在一个特征中，所述局部组合物在注射填充物后至少1周施用。在一个特征中，所述局部组合物在注射填充物后至少2周施用。在一个特征中，所述美容程序是注射神经毒素。在一个特征中，所述美容程序是侵入性手术。在一个特征中，所述局部组合物在医疗程序后施用。在一个特征中，所述局部组合物在医疗程序前施用。在一个特征中，所述医疗程序是治疗性注射。在一个特征中，所述医疗程序是静脉内注射。在一个特征中，所述医疗程序是侵入性手术。在一个特征中，所述局部组合物在创伤后施用。在一个特征中，所述局部组合物在创伤前施用。在一个特征中，所述局部组合物每天施用1、2、3、4、5、6、7或8次。在一个特征中，所述局部组合物每天施用4次。在一个特征中，所述个体是人。援引并入
15.本说明书中所提及的所有出版物、专利和专利申请均通过引用并入本文，其程度犹如具体地且单独地指出每个单独的出版物、专利或专利申请均通过引用而并入。
附图说明
16.本专利或申请文件包含至少一张以彩色绘制的附图。在请求并支付必要的费用后，专利局将会提供具有彩图的该专利或专利申请公布文本的副本。
17.图1a示出了巨噬细胞吞噬测定的示意图。
18.图1b示出了红细胞冲洗前的巨噬细胞吞噬作用。
19.图1c示出了红细胞冲洗后的巨噬细胞吞噬作用。
20.图2示出了以下组的人红细胞(rbc)的吞噬作用图：无处理阳性对照、无处理阴性对照、六肽-11(hex11-肽)、六肽-12(hex12-肽)、三肽-1(三肽)、八肽(oct-peptide)和仅血液。
21.图3a示出了红细胞(rbc)标准曲线图，y轴为吸光度，x轴为rbc数目。
22.图3b示出了红细胞(rbc)标准曲线(log2)的图，y轴为吸光度(log2)，x轴为rbc数目(log2)。
23.图4示出了无处理对照样品的吸光度图，y轴为吸光度，x轴为时间(24小时、48小时和72小时)。
24.图5示出了各种处理后吞噬作用的时程图。处理包括以下：无处理(nt)，三肽-1(tri)，六肽-11(hex11)，六肽-12(hex12)，三肽-1和六肽-11(tri hex11)，以及三肽-1、六肽-11和六肽-12(tri hex11 hex12)。
25.图6示出了各种处理后的吞噬作用图，这些处理包括：无处理(nt)，三肽-1(tri)，六肽-11(hex11)，六肽-12(hex12)，三肽-1和六肽-11(tri hex11)，以及三肽-1、六肽-11和六肽-12(tri hex11 hex12)。
26.图7示出了各种处理后的吞噬作用图，这些处理包括：无处理(nt)，三肽-1(tri)，六肽-11(hex11)，六肽-12(hex12)，三肽-1和六肽-11(tri hex11)，三肽-1、六肽-11和六肽-12(tri hex11 hex12)，10ug/ml磷脂酰丝氨酸(ps_10ug/ml)，50ug/ml磷脂酰丝氨酸(ps_50ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和10ug/ml磷脂酰丝氨酸(pep_ps_10ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和50ug/ml磷脂酰丝氨酸(pep_ps_50ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和100ug/ml磷脂酰丝氨酸(pep_ps_100ug/ml)，以及三肽-1、六肽-11、六肽-12和500ug/ml磷脂酰丝氨酸(pep_ps_500ug/ml)。
27.图8示出了各种处理后的吞噬作用图，这些处理包括：无处理(nt)，三肽-1(tri)，六肽-11(hex11)，六肽-12(hex12)，三肽-1和六肽-11(tri hex11)，三肽-1、六肽-11和六肽-12(tri hex11 hex12)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和10ug/ml乳铁蛋白(pep_lac_10ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和50ug/ml乳铁蛋白(pep_lac_50ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和100ug/ml乳铁蛋白(pep lac 100ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和500ug/ml乳铁蛋白(pep_lac_500ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12、磷脂酰丝氨酸和50ug/ml乳铁蛋白(pep ps lac50ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12、磷脂酰丝氨酸和100ug/ml乳铁蛋白(pep ps lac100ug/ml)，以及三肽-1、六肽-11、六肽-12、磷脂酰丝氨酸和500ug/ml乳铁蛋白(pep ps lac500ug/ml)。
28.图9示出了各种处理后的吞噬作用图，这些处理包括：无处理(nt)，三肽-1(tri)，六肽-11(hex11)，六肽-12(hex12)，三肽-1和六肽-11(tri hex11)，三肽-1、六肽-11和六肽-12(tri hex11 hex12)，1mg/ml的羟基琥珀酰亚胺(hs_1mg/ml)，2mg/ml的羟基琥珀酰亚胺(hs_2mg/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和1mg/ml的羟基琥珀酰亚胺(pep_hs_1mg/ml)，以及三肽-1、六肽-11、六肽-12和2mg/ml的羟基琥珀酰亚胺(pep_hs_2mg/ml)。
29.图10示出了各种处理后的吞噬作用图，这些处理包括：无处理(nt)，三肽-1(tri)，六肽-11(hex11)，六肽-12(hex12)，三肽-1和六肽-11(tri hex11)，三肽-1、六肽-11和六肽-12(tri hex11 hex12)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和500ug/ml磷脂酰丝氨酸(pep_ps_500ug/ml)，以及三肽-1、六肽-11、六肽-12、500ug/ml磷脂酰丝氨酸和500ug/ml乳铁蛋白(pep ps lac500ug/ml)。
30.图11a-1b显示了制备脂质体的示意图。
31.图12显示了脂质体的图像。
32.图13a显示了分子a通过人皮肤的扩散图。
33.图13b显示了分子a的皮肤分布图。
34.图13c显示了24小时后分子b的皮肤分布图。
35.图14a-14b显示了第一个实验中乙酰基六肽-38的大小分布图。
36.图14c-14d显示了第二个实验中乙酰基六肽-38的大小分布图。
37.图15a显示了在施用局部产品和温和的润肤膏后随时间推移的瘀斑颜色强度图。
38.图15b显示了在右臂上施用局部产品而在左臂上施用温和润肤膏的第一名受试者的瘀伤消退图像。
39.图15c显示了在左臂上施用局部产品而在右臂上施用温和润肤膏的第二名受试者的瘀伤消退图像。
40.图15d显示了在左臂上施用局部产品而在右臂上施用温和润肤膏的第三名受试者的瘀伤消退图像。
41.图15e显示了在右臂上施用局部产品而在左臂上施用温和润肤膏的第四名受试者的瘀伤消退图像。
42.图15f显示了在左臂上施用局部产品而在右臂上施用温和润肤膏的第五名受试者的瘀伤消退图像。
43.图15g显示了在施用局部产品或温和的润肤膏后的瘀伤消退图像。
44.图16a显示了在第1天、第2天、第3天和第4天，与温和的润肤膏相比，施用局部产品的第一名受试者的肿胀图像。
45.图16b显示了在第1天、第2天、第3天和第4天，与温和的润肤膏相比，施用局部产品的第二名受试者的肿胀图像。
46.图16c显示了用射频(rf)针刺处理并施用局部产品的受试者的瘀伤消退图像。
47.图16d显示了施用局部产品后的瘀伤消退图像。
48.图16e显示了herovici染色的图像(放大40倍)，表明新的粘多糖形成(由乳突状真皮层中的蓝色区域表示)。左图是处理前，右图是使用局部产品后2周。
49.图16f显示了棕色的原纤蛋白染色的图像(放大10倍)，表明弹性蛋白纤维的再生。左图是处理前，右图是使用局部产品后2周。
50.图17显示了局部产品的抗微生物有效性测试的结果。
具体实施方式
定义
51.贯穿本公开内容，多个实施方案以范围格式给出。应当理解，范围格式的描述只是为了方便和简明，而不应被解释为对任何实施方案的范围的硬性限制。因此，除非上下文另有明确规定，否则对范围的描述应被认为明确公开了所有可能的子范围以及该范围内精确到下限单位十分之一的各个数值。例如，对诸如从1至6的范围的描述应被认为已经明确公开了诸如从1至3、从1至4、从1至5、从2至4、从2至6、从3至6等子范围，以及该范围内的各个值，例如，1.1、2、2.3、5和5.9。无论范围的宽度如何，这都是适用的。这些中间范围的上限和下限可独立地包括在更小的范围内，并且也被涵盖于本公开内容中，受所述范围中任何具体排除的限值所约束。除非上下文另有明确规定，否则在所述范围包括限值之一或两者的情况下，排除了这些所包含的限值中的任一个或两者的范围也被包括在本公开内容中。
52.本文使用的术语仅用于描述特定实施方案的目的，而非旨在限制任何实施方案。除非上下文另有明确规定，否则如本文所用的单数形式“一个”、“一种”和“该”也意欲包括复数形式。进一步应当理解，术语“包括”和/或“包含”在本说明书中使用时指代所述特征、整数、步骤、操作、元件和/或组分的存在，但不排除存在或添加一个或多个其他特征、整数、步骤、操作、元件、组分和/或其群体。如本文所用的，术语“和/或”包括一个或多个相关所列项目的任何及所有组合。
53.除非具体说明或从上下文中可以明显看出，否则如本文所用的，关于数字或数字范围的术语“约”应被理解为表示所述数字及其 /-10％的数字，或者对于范围列出的值，表示低于所列下限的10％至高于所列上限的10％。组合物
54.瘀斑是由于皮下毛细血管创伤导致的皮下出血引起的。由于创伤，血液可能会外渗到周围组织。通常，瘀伤导致皮肤上明显的变色。瘀伤引起的变色可能需要数天才消失，并通过巨噬细胞的功能而消退。因此，需要用于改善瘀伤过程的组合物。
55.本文描述了用于改善瘀伤的组合物和方法。如本文所述的组合物和方法可通过改善巨噬细胞功能来改善瘀伤。如本文所述的组合物和方法可进一步刺激弹性蛋白和/或胶原蛋白的产生、内在透明质酸的产生、脂肪生成或减轻炎症。
56.脂质体
57.本文描述了用于改善分布、功效、生物利用度和/或活性的脂质体组合物。脂质体组合物可以通过改善递送和组织(例如皮肤)渗透来改善活性成分的分布、功效、生物利用度和/或活性。在一些情况下，改善的递送和皮肤渗透是由于活性成分掺入(例如包封)在脂质体中。在一些情况下，活性成分是包封在脂质体中的肽。
58.如本文所述的脂质体组合物可包含包封在脂质体中的肽。在一些实施方案中，该肽是三肽-1。在一些实施方案中，该肽是六肽-12。在一些实施方案中，该肽是六肽-11。在一些实施方案中，该肽是六肽-38。在一些实施方案中，该肽是四肽-2。在一些实施方案中，该肽用棕榈酰基进行官能化。在一些实施方案中，该肽用乙酰基进行官能化。例如，该肽是乙酰基六肽-38。
59.如本文所述的脂质体组合物可包含包封在脂质体中的各种成分。在一些实施方案中，该成分是乳铁蛋白。在一些实施方案中，该成分是磷脂酰丝氨酸。在一些实施方案中，该成分是杜香提取物。在一些实施方案中，该成分是山金车提取物。在一些实施方案中，该成分是透明质酸钠。在一些实施方案中，该成分大于50kda。
60.卵磷脂和其他磷脂可用来制备含有本文所述的肽组合物的脂质体。在一些实施方案中，使用脂质体制备一种或多种肽。在一些实施方案中，该肽用乙酰基进行官能化。当将磷脂如卵磷脂置于水中并因此形成一个双层或一系列双层(每个双层由水分子隔开)时，一旦提供足够的能量就会发生脂质囊泡的形成。脂质体可以通过在水中对磷脂进行声处理来产生。低剪切率产生多层脂质体。持续的高剪切声处理倾向于形成较小的单层脂质体。疏水性化学物质可以溶解在磷脂双层膜中。脂质体的脂双层递送本文所述的肽组合物。
61.用于制备本文所述的脂质体组合物的磷脂可具有约10℃至约25℃的相变温度。在一些情况下，磷脂的相变温度为约10℃、12℃、14℃、16℃、18℃、20℃、22℃、24℃、26℃、28℃、30℃、32℃、34℃、36℃、38℃、40℃或高于40℃。在一些情况下，磷脂的相变温度在约10
℃至约40℃、约12℃至约36℃、约14℃至约32℃、约16℃至约20℃或约21℃至约25℃的范围内。
62.所述局部组合物可含有胶束，或分散在水溶液中的表面活性剂分子的聚集体。胶束可以通过将油溶剂分散在包含表面活性剂的水溶液中来制备，其中该表面活性剂浓度超过临界胶束浓度。所得组合物含有胶束，即球形小油滴。
63.所述脂质体组合物可含有胶束，或分散在水溶液中的表面活性剂分子的聚集体。胶束可以通过将油溶剂分散在包含表面活性剂的水溶液中来制备，其中该表面活性剂浓度超过临界胶束浓度。所得制剂含有分散在水性溶剂中的胶束，即由极性表面活性剂分子膜包围的球形小油滴。
64.在一些实施方案中，本文描述了制备包含包封在脂质体中的肽的组合物的方法，其包括：将所述肽与溶剂混合以形成混合物；以及使该混合物与包含脂质体的水溶液接触。在一些情况下，该接触在约10℃至约25℃的温度下发生。在一些情况下，该接触在约10℃、12℃、14℃、16℃、18℃、20℃、22℃、24℃、26℃、28℃、30℃、32℃、34℃、36℃、38℃、40℃或高于40℃的温度下发生。在一些情况下，该接触在约10℃至约40℃、约12℃至约36℃、约14℃至约32℃、约16℃至约20℃或约21℃至约25℃范围内的温度下发生。
65.制备包含包封在脂质体中的肽的组合物的方法可包括使用溶剂。在一些情况下，该溶剂是水。在一些情况下，该溶剂是有机溶剂。示例性有机溶剂包括但不限于石油醚、环己烷、甲苯、四氯化碳、二氯甲烷、氯仿、乙醚、二异丙醚、乙酸乙酯、丁醇、正丙醇、乙醇、甲醇、聚乙二醇、丙二醇和吡啶。在一些情况下，该溶剂是二醇。在一些情况下，该溶剂是丁二醇。在一些情况下，该溶剂是辛二醇。在一些情况下，该溶剂是丙二醇(丙烯乙二醇)。
66.溶剂可以以各种百分比使用。在一些情况下，溶剂以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％提供。该溶剂可以是丙二醇、丁二醇或辛二醇。
67.在一些实施方案中，如本文所述的方法包括将肽与溶剂混合以形成混合物；以及使该混合物与包含脂质体的水溶液接触，其中该水溶液包含一定百分比的水和一定百分比的脂质体。在一些情况下，该水溶液包含至少或大约20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％的水。在一些情况下，该水溶液包含约10％至约95％、约20％至约90％、约30％至约85％、约40％至约80％或约50％至约60％范围内的水。在一些情况下，该水溶液包含至少或大约20％、30％、40％、50％、60％或超过60％的脂质体。在一些情况下，该水溶液包含约10％至约80％、约20％至约70％或约30％至约60％范围内的脂质体。脂质体与水的比例可以在约1:9至约3:7的范围内。在一些情况下，脂质体与水的比例可以是至少或大约1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3或1:2。
68.用于产生如本文所述的脂质体组合物的方法可导致不超过100％的包载效力。在一些情况下，包载效力不超过50％、60％、70％、80％、90％、95％、99％或99.5％。
69.本文描述了脂质体组合物，其中肽占该组合物的一定百分比。在一些实施方案中，肽以组合物的至少或大约0.0001％、0.0005％、0.00055％、0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％
提供。在一些实施方案中，肽以组合物的至少或大约10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、22％、24％、26％、28％、30％或超过30％提供。在一些实施方案中，肽以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约5％或约0.02％至约2％(重量)提供。在一些实施方案中，肽以组合物的约0.03％提供。
70.本文描述了脂质体组合物，其中脂质体占该组合物的一定百分比。在一些实施方案中，脂质体以组合物的至少或大约10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、22％、24％、26％、28％、30％或超过30％提供。在一些实施方案中，脂质体以约5％至约90％、约10％至约80％、约20％至约70％、约30％至约60％、约10％至约30％或约20％至约40％提供。在一些实施方案中，脂质体以约30％提供。在一些实施方案中，脂质体以27％提供。
71.在一些实施方案中，如本文所述的脂质体组合物包含至多220纳米(nm)的平均颗粒大小。在一些情况下，平均颗粒大小为至多100nm、105nm、110nm、115nm、120nm、125nm、130nm、135nm、140nm、145nm、150nm、155nm、160nm、165nm、170nm、175nm、180nm、185nm、190nm、195nm、200nm、205nm、210nm、215nm、220nm、230nm、240nm、250nm、260nm、270nm、280nm、290nm、300nm、320nm、340nm、360nm、380nm或400nm。在一些情况下，平均颗粒大小为约100nm、105nm、110nm、115nm、120nm、125nm、130nm、135nm、140nm、145nm、150nm、155nm、160nm、165nm、170nm、175nm、180nm、185nm、190nm、195nm、200nm、205nm、210nm、215nm、220nm、230nm、240nm、250nm、260nm、270nm、280nm、290nm、300nm、320nm、340nm、360nm、380nm或400nm。在一些情况下，平均颗粒大小在约50nm至约500nm、约100nm至约400nm、约150nm至约220nm、约180nm至约220nm或约190nm至约210nm的范围内。
72.在一些情况下，脂质体组合物包含分子量不超过约600道尔顿(da)的活性剂。在一些情况下，活性剂的分子量为至少或大约50、75、100、125、150、175、200、225、250、275、300、325、350、375、400、425、450、475、500、525、550、575、600、625、650、675、700、725、750、775、800、825、850、875、900、925、950、975、1000或超过1000道尔顿(da)。在一些情况下，活性剂的分子量为至少或大约1000、1100、1200、1300、1400、1500、1600、1700、1800、1900、2000、2100、2200、2300、2400、2500、2600、2700、2800、2900、3000、4000、5000、6000或超过6000道尔顿(da)。在一些情况下，活性剂的分子量在约50至约1000、约100至约900、约200至约800、约300至约700或约400至约600道尔顿(da)的范围内。在一些情况下，该活性剂为肽。在一些情况下，该活性剂是包封在脂质体中的肽。
73.在一些实施方案中，如本文所述的脂质体组合物的多分散指数(pdi)在0至约0.2的范围内。在一些情况下，多分散指数约为0.01、0.025、0.05、0.1、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5、0.55、0.6、0.65、0.7、0.75或0.8。在一些情况下，多分散指数在约0.01至约0.8、约0.025至约0.75、约0.05至约0.6或约0.1至约0.3的范围内。
74.在一些情况下，如本文所述的脂质体组合物的截距在约0.85至约0.95的范围内。在一些情况下，该截距为幅度。在一些情况下，该截距为至少或大约0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90或0.95。
75.在一些实施方案中，所述脂质体包含丙二醇、卵磷脂或其组合。在一些实施方案中，丙二醇以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、
5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，丙二醇以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。在一些实施方案中，卵磷脂以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，卵磷脂以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。在一些实施方案中，该脂质体包含丙二醇和卵磷脂。在一些实施方案中，丙二醇和卵磷脂以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，丙二醇和卵磷脂以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。在一些实施方案中，丙二醇和卵磷脂以约0.90重量％提供。
76.本文描述了具有改善的分布、功效、生物利用度和/或活性的脂质体组合物。与不包含脂质体的组合物相比，所述脂质体组合物可具有改善的分布、功效、生物利用度和/或活性。在一些情况下，与不包含脂质体的组合物相比，分布改善至少或大约0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、4.0x、4.5x、5x或超过5x。在一些情况下，与不包含脂质体的组合物相比，功效改善至少或大约0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、4.0x、4.5x、5x或超过5x。在一些情况下，与不包含脂质体的组合物相比，生物利用度改善至少或大约0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、4.0x、4.5x、5x或超过5x。在一些情况下，与不包含脂质体的组合物相比，活性改善至少或大约0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、4.0x、4.5x、5x或超过5x。与不包含脂质体的组合物相比，分布、功效、生物利用度和/或活性可以改善至少或大约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或超过90％。
77.在一些实施方案中，如本文所述的脂质体组合物和方法是局部组合物。在一些情况下，脂质体组合物不含油。在一些情况下，脂质体组合物不含防腐剂。在一些实施方案中，所述脂质体制剂是水性制剂。在一些实施方案中，所述脂质体制剂是无水制剂。在一些情况下，脂质体组合物的ph在约5至约8的范围内。在一些情况下，脂质体组合物的ph为至少或大约2、3、4、5、6、7、8、9或10。
78.如本文所述的方法和组合物可导致改善的毛囊渗透。在一些情况下，毛囊渗透改善至少或大约0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、4.0x、4.5x、5x或超过5x。毛囊渗透可改善至少或大约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或超过90％。在一些情况下，组合物导致至少或大约0.5、0.75、1、1.25、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、7、8、9、10或超过10毫米深度的毛囊渗透。
79.肽
80.在一些实施方案中，如本文所述的肽改善瘀伤、弹性蛋白和/或胶原刺激、透明质酸刺激、脂肪细胞刺激、减轻炎症或其组合。在一些实施方案中，如本文所述的肽改善巨噬细胞功能。在一些实施方案中，三肽-1导致弹性蛋白和/或胶原蛋白刺激、胞外基质(ecm)再循环、抗炎作用或其组合。在一些实施方案中，六肽-12吸引新产生的弹性蛋白。在一些实施
方案中，乙酰基四肽-2刺激成纤维细胞产生弹性蛋白。
81.在一些实施方案中，如本文所述的肽组合改善瘀伤、弹性蛋白和/或胶原刺激、透明质酸刺激、脂肪细胞刺激、减轻炎症或其组合。例如，三肽-1和六肽-12改善巨噬细胞功能。在一些实施方案中，三肽-1和六肽-11改善巨噬细胞功能。在一些实施方案中，三肽-1、六肽-11和六肽-12改善巨噬细胞功能。例如，六肽-11与一种或多种不同的肽如三肽-1、六肽-12或其组合的组合是自噬和巨噬细胞聚集的有效刺激剂，并且可以改善与瘀伤和出血相关的含铁血黄素色素的去除。
82.如本文所述的组合物包含不同浓度的肽。在一些情况下，肽以约50ppm或更少至1000、5000、10000、50000、100000、500000ppm或更多，例如，100ppm的肽存在。在一些情况下，肽以约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、50、75、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000或超过1000ppm存在。在一些情况下，肽以约1至约100、约1至约50、约1至约40、约1至约30、约1至约20、约1至约10、约5至约90、约10至约80、约20至约60或约30至约50ppm存在。在一些情况下，肽以约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、50、75、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000或超过1000微克/毫升(ug/ml)存在。在一些情况下，肽以约1至约100、约1至约50、约1至约40、约1至约30、约1至约20、约1至约10、约5至约90、约10至约80、约20至约60或约30至约50微克/毫升存在。在一些情况下，肽以约0.01％至约10％、约0.01％至约0.02％、约0.01％至约0.03％、约0.01％至约0.04％、约0.01％至约0.05％、约0.01％至约0.1％、约1％至约5％或约1％至约10％(重量)(wt.％)存在。
83.在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含多种肽。在一些情况下，所述多种肽中的肽以约50ppm或更少至1000、5000、10000、50000、100000、500000ppm或更多，例如，100ppm的肽，或其他任何合适的量存在。在一些情况下，所述多种肽中的肽以约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、50、75、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000或超过1000ppm存在。在一些情况下，所述多种肽中的肽以约1至约100、约1至约50、约1至约40、约1至约30、约1至约20、约1至约10、约5至约90、约10至约80、约20至约60或约30至约50ppm存在。在一些情况下，所述多种肽中的肽以约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、50、75、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000或超过1000微克/毫升(ug/ml)存在。在一些情况下，所述多种肽中的肽以约1至约100、约1至约50、约1至约40、约1至约30、约1至约20、约1至约10、约5至约90、约10至约80、约20至约60或约30至约50微克/毫升存在。在一些情况下，所述多种肽中的肽以约0.01％至约10％、约0.01％至约0.02％、约0.01％至约0.03％、约0.01％至约0.04％、约0.01％至约0.05％、约0.01％至约0.1％、约1％至约5％或约1％至约10％(重量)(wt.％)存在。在一些实施方案中，所述多种肽中的肽以至少或大约0.00001％、0.0003％、0.0005％、0.001％、0.001％、0.005％、0.0055％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，所述多种肽中的肽以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，所述多种肽中的每种肽以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。
84.在一些实施方案中，所述肽是三肽-1、六肽-12、六肽-11、六肽-38、四肽-2或其组合。
85.在一些实施方案中，三肽-1以至少或大约0.00001％、0.0003％、0.0005％、0.001％、0.001％、0.005％、0.0055％、0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，三肽-1以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，三肽-1以至少或大约0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25或超过25ppm提供。在一些实施方案中，三肽-1以约0.25至约10、约0.5至约8、约1至约6或约2至约4ppm提供。在一些实施方案中，三肽-1以约1至约10ppm提供。在一些实施方案中，三肽-1以至少或大约0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25或超过25微克/毫升(ug/ml)提供。在一些实施方案中，三肽-1以约0.25至约10、约0.5至约8、约1至约6或约2至约4微克/毫升提供。
86.在一些实施方案中，六肽-12以至少或大约0.00001％、0.0003％、0.0005％、0.001％、0.001％、0.005％、0.0055％、0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，六肽-12以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，六肽-12以至少或大约0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25或超过25ppm提供。在一些实施方案中，六肽-12以约1至约10ppm提供。在一些实施方案中，六肽-12以约0.25至约10、约0.5至约8、约1至约6或约2至约4ppm提供。在一些实施方案中，六肽-12以至少或大约0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25或超过25微克/毫升(ug/ml)提供。在一些实施方案中，六肽-12以约0.25至约10、约0.5至约8、约1至约6或约2至约4微克/毫升提供。
87.在一些实施方案中，六肽-11以至少或大约0.00001％、0.0003％、0.0005％、0.001％、0.001％、0.005％、0.0055％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％(重量)(wt)提供。在一些实施方案中，六肽-11以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，六肽-11以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％提供。在一些实施方案中，六肽-11以约0.005％至约0.02％(重量)提供。在一些实施方案中，六肽-11以至少或大约5、10、20、25、50、75、100、150、200、250或超过250ppm提供。在一些实施方案中，六肽-11以约25至约250、约50至约200或约75至约150ppm提供。在一些实施方案中，六肽-11以约10至约100ppm提供。在一些实施方案中，六肽-11以至少或大约5、10、20、25、50、75、100、150、200、250或超过250微克/毫升(ug/ml)提供。在一些实施方案中，六肽-11以约25至约250、约50至约200或约75至约150微克/毫升提供。
88.在一些实施方案中，六肽-38以至少或大约0.00001％、0.0003％、0.0005％、0.001％、0.001％、0.005％、0.0055％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％(重
量)(wt)提供。在一些实施方案中，六肽-38以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，六肽-38以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％提供。在一些实施方案中，六肽-38以约0.005％至约0.02％(重量)提供。在一些实施方案中，六肽-38以至少或大约0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、5、10、20、25、50、75、100、150、200、250或超过250ppm提供。在一些实施方案中，六肽-38以约25至约250、约50至约200或约75至约150ppm提供。在一些实施方案中，六肽-38以至少或大约5、10、20、25、50、75、100、150、200、250或超过250微克/毫升(ug/ml)提供。在一些实施方案中，六肽-38以约25至约250、约50至约200或约75至约150微克/毫升提供。在一些实施方案中，所述六肽-38是乙酰基六肽-38。
89.在一些实施方案中，四肽-2以至少或大约0.00001％、0.0003％、0.0005％、0.001％、0.001％、0.005％、0.0055％、0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，四肽-2以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，四肽-2以至少或大约0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25或超过25ppm提供。在一些实施方案中，四肽-2以约0.25至约10、约0.5至约8、约1至约6或约2至约4ppm提供。在一些实施方案中，四肽-2以至少或大约0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25或超过25微克/毫升(ug/ml)提供。在一些实施方案中，四肽-2以约0.25至约10、约0.5至约8、约1至约6或约2至约4微克/毫升提供。
90.在示例性实施方案中，局部组合物中第一肽与第二肽的重量比为1份第一肽比0.2至10份第二肽、1至10份第二肽、1至8份第二肽或1至5.5份第二肽。本文使用以下命名法来指代各种氨基酸：丙氨酸(本文中也称为“ala”或“a”)、精氨酸(本文中也称为“arg”或“r”)、天冬酰胺(本文中也称为“asn”或“n”)、天冬氨酸(本文中也称为“asp”或“d”)、半胱氨酸(本文中也称为“cys”或“c”)、谷氨酸(本文中也称为“glu”或“e”)、谷氨酰胺(本文中也称为“gln”或“q”)、甘氨酸(本文中也称为“gly”或“g”)、组氨酸(本文中也称为“his”或“h”)、异亮氨酸(本文中也称为“ile”或“i”)、亮氨酸(本文中也称为“leu”或“l”)、赖氨酸(本文中也称为“lys”或“k”)、甲硫氨酸(本文中也称为“met”或“m”)、苯丙氨酸(本文中也称为“phe”或“f”)、脯氨酸(本文中也称为“pro”或“p”)、丝氨酸(本文中也称为“ser”或“s”)、苏氨酸(本文中也称为“thr”或“t”)、色氨酸(本文中也称为“trp”或“w”)、酪氨酸(本文中也称为“tyr”或“y”)、缬氨酸(本文中也称为“val”或“v”)。
91.在一些实施方案中，第一肽是二肽。合适的二肽包括但不限于具有以下氨基酸序列的二肽：kk、kp、ck、kc、kt、df、nf、vw、yr或tt。在一些实施方案中，该二肽具有以下氨基酸序列：kv。在其他实施方案中，第一肽是三肽。合适的三肽包括但不限于具有以下氨基酸序列的三肽：hgg、rkr、ghk、gkh、ggh、ghg、kfk或kpk。在一些实施方案中，该三肽具有以下氨基酸序列：kvk。在一些实施方案中，第一肽是四肽。合适的四肽包括但不限于具有以下氨基酸序列的四肽：gqpr、ktfk、aqtr或rsrk。在一些实施方案中，该四肽具有以下氨基酸序列：kdvy。在一些实施方案中，第二肽是五肽。合适的五肽包括但不限于具有以下氨基酸序列的五肽：kttks、yggfx或klaak。在一些实施方案中，第二肽是六肽。合适的六肽包括但不限于具有以下氨基酸序列的六肽：vgvapg或gkttks。在一些实施方案中，该六肽具有以下氨基酸
序列：fvapfp。在一些实施方案中，第二肽是七肽。合适的七肽包括但不限于具有氨基酸序列rgyylle的七肽或七肽-6(前sirtuin肽)。所述组合物可包含两种或更多种肽，例如，两种二肽和一种五肽；一种三肽和一种六肽；一种二肽、一种三肽和一种七肽等，条件是该组合物含有至少一种二肽、三肽或四肽和至少一种五肽、六肽或七肽。在一些实施方案中，所述组合物包含三肽和一种或多种六肽。在一些实施方案中，所述组合物包含三肽、一种或多种六肽和四肽。在一些实施方案中，该三肽是三肽-1。在一些实施方案中，所述一种或多种六肽是六肽-12。在一些实施方案中，所述一种或多种六肽是六肽-11。在一些实施方案中，所述一种或多种六肽是六肽-38。在一些实施方案中，所述组合物包含三肽-1、六肽-12、六肽-11和六肽-38。在一些实施方案中，该四肽是四肽-2。
92.可以对所述肽进行官能化。例如，所述肽可以用脂肪酸进行官能化，该脂肪酸例如是肉豆蔻烯酸、棕榈油酸、顺-6-十六碳烯酸(sapienic acid)、油酸、反油酸、异油酸、亚油酸、反式亚油酸、α-亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、芥酸、二十二碳六烯酸、辛酸、癸酸、月桂酸、棕榈酸、硬脂酸、花生酸、山萮酸、木蜡酸、蜡酸等。实例包括棕榈酰基六肽-12(pal-vgvapg)、棕榈酰基三肽-1(pal-ghk)、肉豆蔻酰基六肽-12(myr-vgvapg)和肉豆蔻酰基三肽-1(myr-ghk)。在某些实施方案中，棕榈酰基或肉豆蔻酰基官能化可以是期望的，因为其在与其他脂肪酸相比时展现出增强的渗透。在一些实施方案中，所述肽用化学基团进行官能化。例如，所述肽用乙酰基进行官能化。实例包括乙酰基六肽-38和乙酰基四肽-2。在一些情况下，所述肽用包含不超过14个碳的官能团进行官能化。在一些情况下，所述肽用包含不超过3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或超过20个碳的官能团进行官能化。在一些情况下，该肽是非棕榈酰化的。不希望局限于特定理论，在一些实施方案中，将肽掺入脂质体中增加了官能化或未官能化的肽的亲脂性。
93.本文提供的方法和组合物的一些实施方案包括作为第一肽的甘氨酸-组氨酸-赖氨酸(ghk)。ghk是一种肽序列，其在蛋白质类别中通常很少发现，但常见于细胞外基质蛋白质中。ghk的小尺寸允许其比更大的肽更容易接近膜受体。此外，其独特的铜结合结构增强了铜进出细胞的转运，并通过几种不同但相关的途径促进伤口愈合。由于ghk的强铜结合结构，其可以以ghk-cu的形式(铜结合的ghk形式)提供。
94.在局部组合物中，所述三肽一般以约50ppm或更低至约100、200、300、400或500ppm或更高，例如50ppm至150ppm的量存在。
95.在组合物中，所述六肽一般以约50ppm或更低至约100、200、300、400或500ppm或更高，例如50ppm至150ppm的量存在。
96.在组合物中，所述四肽一般以约50ppm或更低至约100、200、300、400或500ppm或更高，例如50ppm至150ppm的量存在。
97.所述肽可以有利地在适合与脂质体组合物的其他组分组合的基质中提供。该基质可以包括一种或多种组分，如增稠剂/粘合剂(例如，季戊四醇四异硬脂酸酯)、润肤剂/分散剂(例如，辛酸/癸酸甘油三酯)、溶剂(例如，碳酸丙烯酯)和/或流变改性剂/抗沉降剂(例如，二硬脂二甲铵锂蒙脱石)。
98.磷脂酰丝氨酸
99.在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含磷脂酰丝氨酸。从红细胞内细胞膜的磷脂酰丝氨酸的暴露可诱导红细胞的吞噬作用。参见chang cf,goods ba,askenase mh
edema after oculofacial surgery:preliminary results.ophthalmic plast reconstr surg.2017；33(1):47-52。
106.在一些实施方案中，杜香提取物以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，杜香提取物以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，杜香提取物以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％、约0.02％至约2％或约0.1％至约2.5％(重量)提供。在一些实施方案中，杜香提取物以约0.25％提供。在一些实施方案中，杜香提取物以约0.5％提供。在一些实施方案中，杜香提取物以约1.0％提供。
107.明串珠菌/萝卜根发酵滤液
108.在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含明串珠菌/萝卜根发酵滤液。在一些实施方案中，明串珠菌/萝卜根发酵滤液以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)(wt)提供。在一些实施方案中，明串珠菌/萝卜根发酵滤液以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，明串珠菌/萝卜根发酵滤液以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％、约0.02％至约2％或约0.1％至约2.5％(重量)提供。在一些实施方案中，明串珠菌/萝卜根发酵滤液以约0.25％提供。在一些实施方案中，明串珠菌/萝卜根发酵滤液以约0.5％提供。在一些实施方案中，明串珠菌/萝卜根发酵滤液以约1.0％提供。
109.乳铁蛋白
110.在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含转铁蛋白。在一些实施方案中，该转铁蛋白是乳铁蛋白。在一些实施方案中，乳铁蛋白被包封在脂质体中。乳铁蛋白具有伤口愈合特性，促进成纤维细胞增殖，并增加ha分泌。参见saito s,takayama y,mizumachi k,suzuki c.lactoferrin promotes hyaluronan synthesis in human dermal fibroblasts.biotechnology letters.2011；33(1):33-39；takayama y.effects of lactoferrin on skin wound healing.in:lactoferrin and its role in wound healing.2012:87-100。
111.在一些情况下，乳铁蛋白具有抗微生物活性。在一些情况下，乳铁蛋白对细菌、真菌、酵母、病毒、寄生虫或其组合具有抗微生物活性。在一些情况下，乳铁蛋白具有抗生物膜活性。在一些情况下，乳铁蛋白与细菌表面相互作用，并使微生物膜去稳定。在一些情况下，乳铁蛋白螯合铁，以破坏微生物膜。
112.在一些实施方案中，乳铁蛋白以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，乳铁蛋白以约0.005％至约0.1％、约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，乳铁蛋白以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约2.5％或约0.02％至约2％(重量)提供。在一些实施方案中，乳铁蛋白以约0.025％提供。在一些实施方案中，乳铁蛋白以约0.05％提供。在一些实施方案中，乳铁蛋白以约0.10％提
供。在一些实施方案中，乳铁蛋白以至少或大约5、10、20、25、50、75、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000或超过1000微克/毫升(ug/ml)提供。在一些实施方案中，乳铁蛋白以约5至约1000、约10至约900、约30至约800、约50至约700、约60至约600或约100至约500微克/毫升(ug/ml)提供。
113.莳萝提取物
114.在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含莳萝提取物。在一些实施方案中，莳萝提取物刺激loxl再诱导和弹性蛋白形成。在一些实施方案中，莳萝提取物是草茴香(anethum graveolens)提取物。在一些实施方案中，莳萝提取物是黄花前胡(peucedanum graveolens)提取物。
115.在一些实施方案中，莳萝提取物以至少或大约0.01％、0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，莳萝提取物以约0.25％至约10％、约0.025％至约4％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，莳萝提取物以约1.0重量％提供。
116.羟基甲氧基苯基癸酮
117.在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含羟基甲氧基苯基癸酮。在一些实施方案中，羟基甲氧基苯基癸酮是有效的内在透明质酸促进剂、抗氧化剂、抗刺激剂或其组合。
118.在一些实施方案中，羟基甲氧基苯基癸酮以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，羟基甲氧基苯基癸酮以约0.25％至约10％、约0.1％至约2.5％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，羟基甲氧基苯基癸酮以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。
119.银耳
120.在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含银耳提取物。在一些实施方案中，银耳提取物来源于食用蘑菇。在一些实施方案中，银耳提取物提供水分和抗氧化性质。
121.在一些实施方案中，银耳提取物以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，银耳提取物以约0.25％至约10％、约0.1％至约2.5％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，银耳提取物以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。
122.透明质酸钠交联聚合物
123.在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含透明质酸钠交联聚合物。透明质酸钠交联聚合物是具有高水结合能力和保湿能力的高分子量合成透明质酸。
124.在一些实施方案中，透明质酸钠交联聚合物以至少或大约0.0001％、0.0005％、0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4.0％(重量)(wt.％)提供。在一些
实施方案中，透明质酸钠交联聚合物以约0.5重量％提供。在一些实施方案中，透明质酸钠交联聚合物以约0.0001％至约4.0％、约0.001％至约4.0％、约0.01％至约3.0％、约0.1％至约2.5％或约0.50％至约1.5％(重量)提供。
125.八氢番茄红素和六氢番茄红素
126.在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含八氢番茄红素、六氢番茄红素或其组合。八氢番茄红素和六氢番茄红素是源自咸水微藻的无色类胡萝卜素，其调节前列腺素e-2(pge-2)。
127.在一些实施方案中，八氢番茄红素、六氢番茄红素或其组合以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，八氢番茄红素、六氢番茄红素或其组合以约0.25％至约10％、约0.1％至约2.5％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，八氢番茄红素、六氢番茄红素或其组合以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。
128.木糖醇
129.在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合。木糖醇是一种糖醇，并且具有抗生物膜和抗炎作用。在一些实施方案中，木糖醇和乳铁蛋白的组合具有抗生物膜作用。在一些实施方案中，木糖醇和乳铁蛋白协同作用。例如，乳铁蛋白使细菌膜去稳定，并允许木糖醇穿过细菌膜以抑制生物膜的发育和生长。
130.在一些实施方案中，木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合以约0.25％至约10％、约0.1％至约2.5％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。
131.失水山梨醇异硬脂酸酯
132.在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含失水山梨醇异硬脂酸酯。在一些实施方案中，失水山梨醇异硬脂酸酯以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，失水山梨醇异硬脂酸酯以约0.25％至约10％、约0.1％至约2.5％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，失水山梨醇异硬脂酸酯以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。在一些实施方案中，失水山梨醇异硬脂酸酯以约0.10重量％提供。
133.葡萄糖
134.在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含葡萄糖。在一些实施方案中，葡萄糖以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)(wt.％)提供。在
一些实施方案中，葡萄糖以约0.25％至约10％、约0.1％至约2.5％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，葡萄糖以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。在一些实施方案中，葡萄糖以约0.01重量％提供。
135.在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含种子油。在一些实施方案中，该种子油是向日葵(葵花)籽油。在一些实施方案中，种子油以至少或大约0.001％、0.003％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，种子油以约0.25％至约10％、约0.1％至约2.5％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，种子油以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。在一些实施方案中，种子油以约0.003重量％提供。
136.其他组分
137.其他组分可包括抗炎剂、抗氧化剂和溶解度增强剂。示例性抗刺激剂包括但不限于泛醇三乙酸酯和柚皮素。泛醇三乙酸酯和柚皮素是天然植物提取物，其可减少皮肤发红和水分流失。当在组合物中使用时，抗刺激剂的典型的量为1重量％至4重量％(wt.％)。
138.示例性抗氧化剂包括但不限于盐生杜氏藻提取物和角鲨烷。盐生杜氏藻提取物包括诸如β-胡萝卜素等组分。它可以表现出抗氧化作用。当在组合物中使用时，抗炎剂的典型的量为0.1重量％至2.5重量％(wt.％)。在一些实施方案中，盐生杜氏藻提取物以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)提供。在一些实施方案中，盐生杜氏藻提取物以约0.001％至约4.0％、约0.01％至约3.0％、约0.1％至约2.5％或约0.50％至约1.5％提供。在一些实施方案中，角鲨烷以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)提供。在一些实施方案中，角鲨烷以约0.001％至约4.0％、约0.01％至约3.0％、约0.1％至约2.5％或约0.50％至约1.5％提供。在一些实施方案中，盐生杜氏藻提取物和角鲨烷以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)提供。在一些实施方案中，盐生杜氏藻提取物和角鲨烷以约0.001％至约4.0％、约0.01％至约3.0％、约0.1％至约2.5％或约0.50％至约1.5％提供。
139.在一些实施方案中，所述组合物包含硅氧烷聚合物。在一些实施方案中，该硅氧烷聚合物为辛酰甲基硅氧烷。在一些实施方案中，辛酰甲基硅氧烷以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4.0％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，辛酰甲基硅氧烷以约0.5重量％提供。在一些实施方案中，辛酰甲基硅氧烷以约0.001％至约4.0％、约0.01％至约3.0％、约0.1％至约2.5％或约0.50％至约1.5％(重量)提供。在一些实施方案中，辛酰甲基硅氧烷以约0.25重量％提供。在一些实施方案中，辛酰甲基硅氧烷以约1重量％提供。
140.膨润土粘土可以与肽一起使用，以赋予组合物渗透和吸附性质，并且可以帮助稳
定乳剂。也可以使用其他粘土，如锂蒙脱石和硅酸铝镁。可以对膨润土或其他粘土进行改性，以产生有机改性粘土化合物。脂肪酸(例如，氢化脂肪酸)的盐(例如，季铵盐)可与锂蒙脱石或其他粘土反应。如本文所提供的，使用本领域技术人员采用的常规命名法来指代和描述脂肪酸。饱和脂肪酸不包含碳-碳双键。不饱和脂肪酸包含至少一个碳-碳双键。单不饱和脂肪酸仅包含一个碳-碳双键。多不饱和脂肪酸包含两个或更多个碳-碳双键。脂肪酸中的双键通常是顺式的；然而，反式双键也是可能的。双键的位置可以用δn表示，其中n表示每对双键碳原子中较低编号的碳。可以采用指定总碳数:双键数δ
双键位置
的简化符号。例如，20:4δ
5,8,11,14
是指具有20个碳原子和四个双键的脂肪酸，其中双键位于5与6碳原子、8与9碳原子、11与12碳原子和14与15碳原子之间，其中碳原子1是羧酸基团的碳。硬脂酸(十八烷酸)是饱和脂肪酸。油酸(顺式-δ9-十八碳烯酸)是单不饱和脂肪酸，亚麻酸(全顺式-δ9,12,15-十八碳三烯酸)是多不饱和脂肪酸。适合使用的脂肪酸可包含5至30个碳原子，例如，5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碳原子。脂肪酸可以是完全饱和的，或者可以包含链长所允许的尽可能多的双键。适用于锂蒙脱石或其他粘土官能化的脂肪酸包括棕榈酸和硬脂酸。二烷基季铵阳离子改性剂包括二棕榈酰基二甲基氯化铵和二硬脂基二甲基氯化铵。酰胺季铵阳离子改性剂包括棕榈酰胺丙基三甲基氯化鲸蜡硬脂醇和棕榈酰胺丙基三甲基氯化铵。
141.在一些实施方案中，所述肽可以与合适的载体、稀释剂或赋形剂混合，并且可以含有辅助物质，如湿润剂或乳化剂、ph缓冲剂、胶凝或粘度增强添加剂、防腐剂、香味剂、着色剂等，这取决于施用途径和所需的制品。参见，例如，“remington:the science and practice of pharmacy”,lippincott williams&wilkins；第20版(2003年6月1日)和“remington’s pharmaceutical sciences,”mack pub.co.；第18版和第19版(分别于1985年12月和1990年6月)。这些制品可包含络合剂、金属离子、聚合化合物(如聚乙酸、聚乙醇酸、水凝胶、葡聚糖等)、脂质体、微乳液、胶束、单层或多层囊泡、红细胞血影或球芽。用于组合物的合适的脂质包括但不限于甘油单酯、甘油二酯、硫苷脂、溶血卵磷脂、磷脂、皂苷、胆汁酸等。在一些实施方案中，本文所述的组合物包含磷脂酰丝氨酸、磷脂、生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯或其组合。在一些实施方案中，磷脂酰丝氨酸、磷脂、生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯或其组合以0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，磷脂酰丝氨酸、磷脂、生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯或其组合以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，磷脂酰丝氨酸、磷脂、生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯或其组合以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约5％(重量)提供。在一些实施方案中，添加剂是甜菜碱。在一些实施方案中，甜菜碱以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约5％(重量)提供。在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含辛二醇。在一些实施方案中，辛二醇以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约5％(重量)提供。在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含辛酰氧肟酸。在一些实施方案中，辛酰氧肟酸以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约5％(重量)提供。这类附加组分的存在可以影响物理状态、溶解度、稳定性、释放速率、清除速率和活性成分的渗透。
142.用于局部施用的组合物包含本文所述的肽组合物和皮肤病学上可接受的媒介物。该媒介物可以是水性或非水性的。在局部组合物中使用的皮肤病学上可接受的媒介物可以是洗剂、凝胶、软膏、液体、乳膏或乳剂的形式。如果该媒介物是乳剂，则该乳剂可具有连续水相和不连续的非水相或油相(水包油乳剂)，或连续的非水相或油相和不连续的水相(油包水乳剂)。当以液体或凝胶形式局部施用时，可以向活性成分添加液体载体，如水，石油，动物或植物来源的油如花生油、矿物油、大豆油或芝麻油，或合成油。生理盐水溶液、右旋糖或其他糖溶液，或二醇如乙二醇、丙二醇或聚乙二醇，也是合适的液体载体。药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油如橄榄油或花生油，矿物油如液体石蜡，或其混合物。合适的乳化剂包括天然存在的树胶，如阿拉伯胶和黄蓍胶，天然存在的磷脂，如大豆卵磷脂，衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯，如失水山梨醇单油酸酯，以及这些偏酯与环氧乙烷的缩合产物，如聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯。乳剂还可含有着色剂和香味剂。
143.在某些实施方案中，采用硅氧烷弹性体(例如，聚二甲基硅氧烷交联聚合物)来增加肽向皮肤的递送和渗透。增加分子量(如用硅胶)或添加填充剂(如用硅氧烷化合物)的替代手段是部分交联硅氧烷聚合物并将该材料分散在合适的硅氧烷载体流体中。由于线性聚合物之间的交联，所得到的聚二甲基硅氧烷交联聚合物(在个人护理行业中也称为硅氧烷弹性体)与碱性聚二甲基硅氧烷(pdms)不同。这些材料可以在肽组合物中使用，并且还在瘢痕治疗、创周保护和酶递送中提供益处。在护肤应用中，硅氧烷弹性体(包括具有官能团的那些)的美容及其吸收各种油的能力(例如，用聚二甲基硅氧烷/乙烯基聚二甲基硅氧烷交联聚合物，如dow9506弹性体粉末)是弹性体的两种理想性质。硅氧烷弹性体具有与任何硅氧烷流体不同的皮肤感觉，被描述为“光滑的”、“天鹅绒般柔软的”和“粉末状的”。它可以通过控制配方中液相的量来改变，因此可以通过控制溶胀度来改变。由于聚二甲基硅氧烷交联聚合物的成膜性质，其可用作活性成分如本文所述的肽或其他组合物组分如油溶性维生素和遮光剂的递送系统。可以从含有硅氧烷弹性体的组合物中更有效地递送遮光剂，如甲氧基肉桂酸辛酯，从而产生更高的防晒系数(spf)。硅氧烷弹性体掺合物可用来增强含有机遮光剂的水包油组合物的spf。例如，在针对spf进行的测试中，将4％硅氧烷弹性体掺合物添加至含有有机遮光剂的防晒组合物中使spf从5.7增加到18。硅氧烷弹性体的这种性质使得组合物中遮光剂的有效性最大化，同时减少达到期望的spf所需的量。结果，可以降低组合物成本以及由遮光剂活性物引起的潜在刺激。因此，可以用相同量的uv吸收剂实现更高的spf，从而在不增加组合物成本的情况下提高性能。硅氧烷弹性体可以通过多种交联反应，例如，通过乙烯基与硅氢化合物反应的氢化硅烷化反应，由线性硅氧烷聚合物制备。一般方法涉及线性硅氧烷聚合物，其中沿聚合物链的反应性位点与交联剂反应。聚二甲基硅氧烷交联聚合物可以被制备为由在载体流体中溶胀的弹性体颗粒的悬浮液制成的凝胶(例如，环戊硅氧烷中高分子量硅氧烷弹性体的混合物，如dow9040 silicone elastomer blend)，或喷雾干燥的粉末(聚二甲基硅氧烷/乙烯基聚二甲基硅氧烷交联聚合物，如dow9506 elastomer powder)。具有所需属性的凝胶形式是环聚二甲基硅氧烷，但也可使用低粘度聚二甲基硅氧烷和有机流体。悬浮液或凝胶形式的聚二甲基硅氧烷交联聚合物的实例是在十甲基环戊硅氧烷中的高分子量硅氧烷弹性体(12％)(例如，dowst-弹性体10)和在环戊硅氧烷中的高分子量硅氧烷弹性体
混合物(例如，dow9040 silicone elastomer blend)，其弹性体含量一般在10-20重量％的范围内。
144.在肽组合物的局部制品中使用的药用赋形剂可选自溶剂、润肤剂和/或乳化剂、油基质、防腐剂、抗氧化剂、张力调节剂、渗透促进剂和增溶剂、螯合剂、缓冲剂、表面活性剂、一种或多种聚合物及其组合。
145.用于水性或亲水性脂质体组合物的合适的溶剂包括水；乙醇；异丙醇；水和乙醇和/或异丙醇的混合物；甘油；乙二醇、丙二醇或丁二醇；dmso；戊二醇；及其混合物。在一些实施方案中，甘油以至少或大约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％或超过12％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，甘油以至少或大约7％提供。在一些实施方案中，甘油以约1％至约12％、约2％至约11％或约3％至约10％(重量)提供。在一些实施方案中，丁二醇以至少或大约0.0025％、0.005％、0.075％、0.01％、0.025％、0.05％、0.75％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％或超过12％(重量)提供。在一些实施方案中，丁二醇以约0.01％至约10％、约0.025％至约5％或约0.05％至约1.25％(重量)提供。在一些实施方案中，戊二醇以至少或大约0.0025％、0.005％、0.075％、0.01％、0.025％、0.05％、0.75％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％或超过12％(重量)提供。在一些实施方案中，戊二醇以约0.01％至约10％、约0.025％至约5％或约0.05％至约1.25％(重量)提供。用于疏水性组合物的合适的溶剂包括矿物油、植物油和硅油。如果需要，可将本文所述的肽组合物溶解或分散在疏水性油相中，随后可将该油相在单独地或与低级醇、甘油和/或二醇组合地包含水的水相中乳化。在一些实施方案中，应用无水组合物，因为水的存在可在向经受激光治疗、化学剥脱术、皮肤磨削术等的皮肤组织施用时导致刺痛感。无水组合物还可以起到防止在受损或敏感皮肤中产生水基刺激物接触性皮炎的作用，该皮炎可能产生可延缓伤口愈合和皮肤质量改善的皮疹和皮肤刺激。tsai,t.f.,maibach,h.i.how irritant is water？an overview.contact dermatitis 41(6)(1999):311-314(描述了由水作为刺激物引起的接触性皮炎)。然而，在某些实施方案中，提供水基组合物或允许存在有限量的水可以是可接受的。例如，可以存在水，但其量低于在施加至受损皮肤时可能产生刺痛感的阈值。渗透休克或渗透胁迫是细胞周围溶质浓度的突然变化，导致水穿过其细胞膜的运动的快速变化。在上清液中存在高浓度的盐、基质或任何溶质的条件下，通过渗透将水从细胞中抽出。这也抑制基质和辅因子向细胞中的转运，从而导致细胞“休克”。或者，在低浓度的溶质下，水大量进入细胞，导致其膨胀并破裂或经历凋亡。如果希望使渗透休克最小化，可以有利地采用如本文所述的某些组合物。
146.如本文所述的组合物可包含不同量的溶剂。在一些实施方案中，该溶剂是水。在一些实施方案中，该溶剂为至少或大约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或超过95％(重量)(wt.％)。在一些实施方案中，溶剂在约10％至约95％、约20％至约90％、约30％至约85％、约40％至约80％或约50％至约75％(重量)的范围内。
147.可以使用药学上可接受的增稠剂将组合物的粘度维持在所选的水平。可用来制备具有水基质的粘性凝胶或乳膏的合适的粘度增强剂或增稠剂包括聚丙烯酸钠、黄原胶、聚乙烯吡咯烷酮、丙烯酸聚合物、角叉菜胶、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙氧基化聚丙烯酰胺、聚乙氧基化丙烯酸酯和
聚乙氧基化烷烃硫醇。甲基纤维素是优选的，因为它获取容易、经济，并且易于使用。其他合适的增稠剂包括，例如，黄原胶、羧甲基纤维素、羟丙基纤维素、卡波姆等。增稠剂的优选浓度将取决于所选的增稠剂。优选使用将达到所选粘度的量。粘性组合物通常通过添加这类增稠剂或通过采用具有可接受粘度水平的基质由溶液制备。
148.在一些实施方案中，如本文所述的组合物的粘度在约8,000厘泊(cps)至约30,000cps的范围内。在一些实施方案中，该粘度为至少或大约4,000；5,000；6,000；7,000；8,000；9,000；10,000；11,000；12,000；13,000；14,000；15,000；16,000；17,000；18,000；19,000；20,000；21,000；22,000；23,000；24,000；25,000；26,000；27,000；28,000；29,000；30,000；31,000；32,000；33,000；34,000、35,000；36,000；37,000；38,000；39,000；40,000；或超过40,000cps。在一些实施方案中，该组合物的粘度在约4,000至约40,000、约6,000至约38,000、约8,000至约36,000、约10,000至约34,000cps、约12,000至约32,000cps或约14,000至约30,000cps的范围内。
149.合适的润肤剂包括烃油和蜡，如矿物油、矿脂、石蜡、矿蜡、地蜡、微晶蜡、聚乙烯、角鲨烯、鲨烷、硅油、甘油三酯、乙酰甘油酯如乙酰化甘油单酯；乙氧基化甘油酯，如乙氧基化单硬脂酸甘油酯；脂肪酸或二羧酸的烷基酯。在一些实施方案中，该润肤剂为辛酸/癸酸甘油三酯。
150.在一些实施方案中，润肤剂以至少或大约0.0025％、0.005％、0.075％、0.01％、0.025％、0.05％、0.75％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％或超过12％(重量)提供。在一些实施方案中，润肤剂以约0.01％至约10％、约0.01％至约2.5％、约0.025％至约5％或约0.05％至约1.25％(重量)提供。在一些实施方案中，辛酸/癸酸甘油三酯以至少或大约0.0025％、0.005％、0.075％、0.01％、0.025％、0.05％、0.75％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％或超过12％(重量)提供。在一些实施方案中，辛酸/癸酸甘油三酯以约0.01％至约10％、约0.01％至约2.5％、约0.025％至约5％或约0.05％至约1.25％(重量)提供。
151.用作润肤剂的合适的硅油包括二甲基聚硅氧烷、甲基(苯基)聚硅氧烷以及水溶性和醇溶性硅氧烷乙二醇共聚物。用作润肤剂的合适的甘油三酯包括植物和动物的脂肪和油，包括蓖麻油、红花油、棉籽油、玉米油、橄榄油、鱼肝油、杏仁油、鳄梨油、棕榈油、芝麻油和大豆油。
152.用作润肤剂的合适的羧酸或二酸的酯类包括脂肪酸的甲酯、异丙酯和丁酯。烷基酯的具体实例包括月桂酸己酯、月桂酸异己酯、棕榈酸异己酯、棕榈酸异丙酯、油酸癸酯、油酸异癸酯、硬脂酸十六烷基酯、硬脂酸癸酯、异硬脂酸异丙酯、乳酸二月桂酯、乳酸肉豆蔻酯和乳酸十六烷基酯；以及脂肪酸的烯基酯，如肉豆蔻酸油醇酯、硬脂酸油醇酯和油酸油醇酯。二酸的烷基酯的具体实例包括己二酸二异丙酯、己二酸二异己酯、己二酸双(己基癸基)酯和癸二酸二异丙酯。
153.可在组合物中使用的其他合适的润肤剂或乳化剂类别包括脂肪酸、脂肪醇、脂肪醇醚、乙氧基化脂肪醇、乙氧基化脂肪醇的脂肪酸酯和蜡。
154.用作润肤剂的脂肪酸的具体实例包括壬酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、异硬脂酸、羟基硬脂酸、油酸、亚油酸、蓖麻油酸、花生酸、山萮酸和芥酸。用作润肤剂的脂肪醇的具体实例包括月桂醇、肉豆蔻醇、鲸蜡醇、十六烷基醇、硬脂醇、异硬脂醇、羟基硬脂醇、油
醇、蓖麻油醇、山萮醇和芥酸醇以及2-辛基十二烷醇。
155.适合于用作润肤剂的蜡的具体实例包括羊毛脂及其衍生物，包括羊毛脂油、羊毛脂蜡、羊毛脂醇、羊毛脂脂肪酸、羊毛脂酸异丙酯、乙氧基化羊毛脂、乙氧基化羊毛脂醇，乙氧基化胆固醇、丙氧基化羊毛脂醇、乙酰化羊毛脂、乙酰化羊毛脂醇、羊毛脂醇亚油酸酯、羊毛脂醇蓖麻油酸酯、羊毛脂醇蓖麻油酸酯的乙酸酯、羊毛脂醇蓖麻油酸酯的乙酸酯、乙氧基化醇酯的乙酸酯、羊毛脂的氢化物、氢化羊毛脂、乙氧基化氢化羊毛脂、乙氧基化山梨醇羊毛脂以及液体和半固体羊毛脂。也可用作蜡，包括烃蜡、酯蜡和酰胺蜡。有用的蜡包括蜡酯如蜂蜡、鲸蜡、肉豆蔻酸肉豆蔻酯和硬脂酸硬脂醇酯；蜂蜡衍生物，例如聚氧乙烯山梨醇蜂蜡；以及植物蜡，包括巴西棕榈蜡和小烛树蜡。
156.多元醇和聚醚衍生物可用作组合物中的溶剂和/或表面活性剂。合适的多元醇和聚醚包括丙二醇、二丙二醇、聚丙二醇2000和4000、聚(氧化乙烯-共-氧化丙烯)二醇、甘油、山梨醇、乙氧基化山梨醇、羟丙基山梨醇、聚乙二醇200-6000、甲氧基聚乙二醇350、550、750、2000和5000、聚[环氧乙烷]均聚物(100,000-5,000,000)、聚亚烷基二醇及衍生物、己二醇、2-甲基-2,4-戊二醇、1,3-丁二醇、1,2,6-己三醇、2-乙基-1,3-己二醇、具有15至18个碳原子的邻位二醇和三羟甲基丙烷的聚氧丙烯衍生物。
[0157]
多元醇酯可用作乳化剂或润肤剂。合适的多元醇酯包括乙二醇单脂肪酸酯和二脂肪酸酯、二乙二醇单脂肪酸酯和二脂肪酸酯、聚乙二醇(200-6000)单脂肪酸酯和二脂肪酸酯、丙二醇单脂肪酸酯和二脂肪酸酯、聚丙二醇2000单油酸酯、聚丙二醇2000单硬脂酸酯、乙氧基化丙二醇单硬脂酸酯、甘油单脂肪酸酯和二脂肪酸酯、聚甘油聚脂肪酸酯、乙氧基化单硬脂酸甘油酯、1,3-丁二醇单硬脂酸酯、1,3-丁二醇二硬脂酸酯、聚氧乙烯多元醇脂肪酸酯、失水山梨醇脂肪酸酯和聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯。
[0158]
用于组合物的合适的乳化剂包括阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂和两性离子表面活性剂。优选的离子乳化剂包括磷脂，如卵磷脂及衍生物。
[0159]
甾醇，包括，例如，胆固醇和胆固醇脂肪酸酯；酰胺如脂肪酸酰胺、乙氧基化脂肪酸酰胺和脂肪酸链烷醇酰胺，也可用作润肤剂和/或渗透促进剂。
[0160]
可以采用药学上可接受的防腐剂来增加组合物的保质期。可以采用用于组合物的其他合适的防腐剂和/或抗氧化剂，包括苯扎氯铵、苯甲醇、苯酚、尿素、对羟基苯甲酸酯、丁羟甲苯(bht)、丁羟茴醚(bha)、生育酚、硫柳汞、氯丁醇等及其混合物。如果采用防腐剂，如抗氧化剂，则基于组合物的总重量，浓度一般为约0.02％至约2％，但是取决于所选择的试剂，可能需要更大或更小的量。如本文所述，还原剂可有利地用来维持组合物的良好保质期。通常观察到实施方案的无水组合物表现出令人满意的稳定性，使得可以从组合物中省略防腐剂。
[0161]
用于组合物的合适的螯合剂包括乙二胺四乙酸、其碱金属盐、其碱土金属盐、其铵盐以及其四烷基铵盐。在一些实施方案中，该螯合剂为乙二胺四乙酸(edta)二钠。在一些实施方案中，乙二胺四乙酸二钠以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％或超过4％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，乙二胺四乙酸二钠以约0.25％至约10％、约0.1％至约2.5％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，乙二胺四乙酸二钠以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％
至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。
[0162]
载体的ph优选为约4.0至10.0，更优选约4.8至约7.8，更优选约5.0至约6.5。可以使用缓冲溶液或其他ph调节剂来控制ph。合适的ph调节剂包括磷酸和/或磷酸盐、柠檬酸和/或柠檬酸盐、氢氧化物盐(即，氢氧化钙、氢氧化钠、氢氧化钾)和胺如三乙醇胺。合适的缓冲溶液包括含有磷酸二氢钾和磷酸氢二钾溶液的缓冲液，将ph维持在5.8至8之间；以及含有磷酸二氢钠和磷酸氢二钠溶液的缓冲液，将ph维持在6至7.5之间。其他缓冲剂包括柠檬酸/柠檬酸钠和磷酸氢二钠/柠檬酸。所述实施方案的肽组合物优选与接受者的血液或其他体液等渗。可以使用酒石酸钠、丙二醇或其他无机或有机溶质来获得组合物的等渗性。氯化钠是特别优选的。可以使用缓冲剂，如乙酸和乙酸盐、柠檬酸和柠檬酸盐、硼酸和硼酸盐以及磷酸和磷酸盐。可能需要在组合物中包含还原剂，如维生素c、维生素e或制药领域中已知的其他还原剂。
[0163]
表面活性剂也可用作赋形剂，例如，阴离子去污剂如十二烷基硫酸钠、二辛基磺基琥珀酸钠和二辛基磺酸钠，阳离子去污剂如苯扎氯铵或苄索氯铵，或非离子去污剂如聚氧乙烯氢化蓖麻油、单硬脂酸甘油酯、聚山梨醇酯、蔗糖脂肪酸酯、甲基纤维素或羧甲基纤维素。
[0164]
在某些实施方案中，包含具有药理活性的其他药剂可能是有利的。抗感染剂包括但不限于驱虫剂(甲苯咪唑)，抗生素，包括氨基糖苷类(庆大霉素、新霉素、妥布霉素)、抗真菌抗生素(两性霉素b、氟康唑、灰黄霉素、伊曲康唑、酮康唑、制霉菌素、咪康唑、托萘酯)、头孢菌素类(头孢克洛、头孢唑啉、头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢呋辛、头孢氨苄)、β-内酰胺类抗生素(头孢替坦、美罗培南)、氯霉素、大环内酯类(阿奇霉素、克拉霉素、红霉素)、青霉素类(青霉素g钠盐、阿莫西林、氨苄青霉素、双氯西林、萘夫西林、哌拉西林、替卡西林)、四环素类(多西环素、米诺环素、四环素)、杆菌肽、克林霉素、多粘菌素e甲磺酸钠、硫酸多粘菌素b、万古霉素，抗病毒剂，包括阿昔洛韦、金刚烷胺、去羟肌苷、依非韦伦、膦甲酸、更昔洛韦、茚地那韦、拉米夫定、奈非那韦、利托那韦、沙奎那韦、司他夫定、伐昔洛韦、缬更昔洛韦、齐多夫定，喹诺酮类(环丙沙星、左氧氟沙星)，磺胺类(磺胺嘧啶、磺胺异噁唑)，砜类(氨苯砜)、呋喃唑酮、甲硝唑、喷他脒、结晶磺胺、加替沙星和磺胺甲噁唑/甲氧苄啶。麻醉剂可包括但不限于乙醇、布比卡因、氯普鲁卡因、左布比卡因、利多卡因、甲哌卡因、普鲁卡因、罗哌卡因、丁卡因、地氟醚、异氟醚、氯胺酮、异丙酚、七氟醚、可待因、芬太尼、氢吗啡酮、马卡因、哌替啶、美沙酮、吗啡、羟考酮、瑞芬太尼、舒芬太尼、布托啡诺、纳布啡、曲马多、苯佐卡因、地布卡因、氯乙烷、利多卡因和非那吡啶。抗炎剂包括但不限于非甾体抗炎药(nsaid)，如阿司匹林、塞来昔布、三水杨酸胆碱镁、双氯芬酸钾、双氯芬酸钠、二氟尼柳、依托度酸、非诺洛芬、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、酮咯酸、甲芬那酸(melenamic acid)、萘丁美酮、萘普生、萘普生钠、奥沙普秦、吡罗昔康、罗非昔布、双水杨酸酯、舒林酸和托美汀；以及皮质类固醇，如可的松、氢化可的松、甲泼尼龙、泼尼松、泼尼松龙、倍他米松、二丙酸倍氯米松、布地奈德、地塞米松磷酸钠、氟尼缩松、丙酸氟替卡松、曲安奈德、倍他米松、醋酸氟轻松、二丙酸倍他米松、戊酸倍他米松、地奈德、去羟米松、氟轻松、曲安奈德、丙酸氯倍他索和地塞米松。
[0165]
在某些实施方案中，可以改进润肤剂、乳剂稳定剂、保湿剂、赋形剂和其他化合物的添加来增强局部组合物的感官性质，包括但不限于：皮肤感觉(丝滑、轻盈、乳脂状等)、吸
收性(产品失去湿润感并且不再在皮肤上感知到的所需时间)、稠度、紧实度、铺展性(例如粘度、流动开始、剪切速率)、粘性、形状完整性、光泽度、亲水性或疏水性等。优选地，组合物将具有高铺展性和低粘度性质。已经证明，具有这类性质的组合物具有增强的“丝滑”或“轻盈”的皮肤感觉等级(参见，例如，bekker,m.webber,g.,louw,n.relating rheological measurements to primary and secondary skin feeling when mineral-based and fischer-tropsch wax-based cosmetic emulsions and jellies are applied to the skin,international journal of cosmetic science 2013,35(4)、pp.354-61)。
[0166]
在一些实施方案中，组合物包含苯氧乙醇、乙基己基甘油或其组合。在一些实施方案中，苯氧乙醇以至少或大约0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，苯氧乙醇以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，乙基己基甘油以至少或大约0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，乙基己基甘油以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，苯氧乙醇和乙基己基甘油以至少或大约0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，苯氧乙醇和乙基己基甘油以约0.25％至约10％、约0.1％至约4％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。
[0167]
在一些实施方案中，组合物包含聚丙烯酸酯-13、聚异丁烯、聚山梨醇酯20或其组合。在一些实施方案中，聚丙烯酸酯-13以至少或大约0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，聚丙烯酸酯-13以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，聚异丁烯以至少或大约0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，聚异丁烯以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，聚丙烯酸酯-13以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，聚山梨醇酯20以至少或大约0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，聚山梨醇酯20以约0.25％至约10％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)提供。在一些实施方案中，聚丙烯酸酯-13、聚异丁烯和聚山梨醇酯20以至少或大约0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，聚丙烯酸酯-13、聚异丁烯和聚山梨醇酯20以约0.25％至约10％、
约0.1％至约4％、约0.5％至约8％、约0.75％至约6％或约1％至约4％(重量)(wt.％)提供。
[0168]
在一些实施方案中，如本文所述的组合物包含山梨酸钾。在一些实施方案中，山梨酸钾以至少或大约0.001％、0.00175％、0.0025％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，山梨酸钾以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。
[0169]
在一些实施方案中，所述脂质体包含丙二醇、卵磷脂或其组合。在一些实施方案中，丙二醇以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，丙二醇以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。在一些实施方案中，卵磷脂以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，卵磷脂以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。在一些实施方案中，该脂质体包含丙二醇和卵磷脂。在一些实施方案中，丙二醇和卵磷脂以至少或大约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.05％、0.10％、0.20％、0.25％、0.50％、0.75％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％、6.5％、7.0％、8％、9％、10％或超过10％(重量)(wt.％)提供。在一些实施方案中，丙二醇和卵磷脂以约0.001％至约6％、约0.002％至约4％、约0.01％至约3％或约0.02％至约2％(重量)提供。在一些实施方案中，丙二醇和卵磷脂以约0.90重量％提供。
[0170]
所述局部组合物可含有胶束，或分散在水溶液中的表面活性剂分子的聚集体。胶束可以通过将油溶剂分散在包含表面活性剂的水溶液中来制备，其中该表面活性剂浓度超过临界胶束浓度。所得组合物含有胶束，即球形小油滴。
[0171]
渗透促进剂
[0172]
可以使用脂肪酸和醇来增强肽的渗透，并向组合物提供丝滑感，例如，甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、己酸、庚酸、辛酸(octanoic acid)、壬酸、癸酸(decanoic acid)、肉豆蔻烯酸、异戊酸、棕榈油酸、顺-6-十六碳烯酸、油酸、反油酸、异油酸、亚油酸、反式亚油酸、α-亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、芥酸、二十二碳六烯酸、辛酸(caprylic acid)、癸酸(capric acid)、月桂酸、棕榈酸、硬脂酸、花生酸、山萮酸、木蜡酸、蜡酸、中链脂肪酸(例如，c
6-12
脂肪酸)等。当在组合物中使用时，典型的量为1重量％至4重量％。
[0173]
抗微生物功效
[0174]
在一些实施方案中，本文描述了在生理ph下化学和物理稳定的组合物。在一些实施方案中，所述组合物是无菌的并且对于人类施用是安全的。在一些实施方案中，所述组合物符合或通过所需的抗微生物功效测试，如抗微生物有效性测试。在一些实施方案中，所述组合物导致细菌、酵母、霉菌或其组合的完全或基本上完全根除。治疗用途
[0175]
本文描述了用于改善瘀伤的组合物和方法。瘀伤可由多种原因引起。在一些实施方案中，瘀伤是手术、激光治疗或创伤的结果。在一些实施方案中，瘀伤是美容程序的结果。在一些实施方案中，瘀伤是医疗程序的结果。在一些实施方案中，本文所述的组合物和方法改善美容程序、医疗程序或创伤之前或之后的瘀伤。
[0176]
本文还描述了用于刺激增加的胶原蛋白、弹性蛋白、脂肪或透明质酸的组合物和方法。在一些实施方案中，该刺激是注射软组织填充物的辅助。
[0177]
在一些实施方案中，该美容程序包括美容手术。示例性美容手术包括但不限于前额提升、脸颊增强、耳成形术、除皱术、下除皱术、脸颊缩小术、颏成形术、眼睑成形术、面部植入、鼻部手术、皮肤切除术、皮肤活检、侵入性脂肪团治疗、注射填充物以及注射可注射物，如或
[0178]
在一些实施方案中，该美容程序包括注射填充物。在一些实施方案中，该填充物是软组织填充物产品。例如，该软组织填充物是可注射的皮肤或皮下填充物。在一些实施方案中，该填充物是隆乳术或乳房再造术填充物、唇部填充物或适用于其他软组织修复或增强的填充物。在一些实施方案中，该填充剂是皮肤填充物。在一些情况下，该皮肤填充物通过注射到受试者的皮肤中或皮肤下来施用。
[0179]
在一些实施方案中，美容程序包括注射注射可注射物，如在一些实施方案中，美容程序包括注射注射可注射物，如或
[0180]
在一些实施方案中，该美容程序是微针程序。在一些情况下，该美容程序是射频微针程序。在一些情况下，该美容程序是化学剥脱术。在一些情况下，该美容程序是微晶换肤术(microdermabrasion)。
[0181]
在一些实施方案中，美容程序包括减少脂肪团或酶促(胶原酶)或机械破坏筋膜带。
[0182]
在一些情况下，瘀伤是由侵入性程序引起的。在一些情况下，侵入性程序包括使用侵入性激光或手术。在一些情况下，瘀伤是由非侵入性程序引起的。在一些情况下，非侵入性程序包括非手术皮肤紧致、非手术减脂或使用非侵入性激光。在一些情况下，该程序是塑体或塑形程序。示例性的塑体或塑形程序包括但不限于高频聚焦超声、脉冲聚焦超声、冷冻溶脂、射频诱导的电穿孔、可注射的脂解剂和脂肪抽吸。在一些实施方案中，该程序是减脂程序。该减脂程序可以是低水平激光疗法、红外线、超声、射频或冷冻溶脂。在一些情况下，该程序包括能源。在一些情况下，该能源是电磁能。在某些情况下，该程序是高强度聚焦电磁技术(hifem)。
[0183]
在一些实施方案中，医疗程序包括治疗性注射、静脉内(iv)管线的放置或侵入性手术。
[0184]
在一些实施方案中，医疗程序包括降低静脉可见度的程序。在一些实施方案中，可见的静脉是静脉曲张。降低静脉可见度的示例性程序包括但不限于静脉后硬化治疗、激光治疗、静脉内激光疗法(evlt)、射频消融(rfa)、使用射频或激光能量的导管辅助程序、高位结扎和静脉剥脱、非卧床静脉切除术和内窥镜静脉手术。
[0185]
瘀伤可由多种因素引起。在一些实施方案中，瘀伤是由创伤引起的。在一些情况下，瘀伤是由导致瘀伤的损伤、挫伤、拉伤、扭伤、脱位、骨折、肌腱撕裂或肌肉肿胀引起的。
在一些情况下，瘀伤是由药物、草药或补充剂引起的。在一些情况下，瘀伤是由维生素缺乏引起的。在一些情况下，瘀伤是由营养不良引起的。在一些实施方案中，瘀伤是潜在疾病或病症的结果。可导致瘀伤的示例性疾病或病症包括但不限于库欣综合征、血小板减少症、白血病、von willebrand病、血友病a、血友病b、因子vii缺乏、因子x缺乏、因子v缺乏、因子ii缺乏、静脉曲张和深静脉血栓形成。
[0186]
在一些实施方案中，由创伤引起的瘀伤在更易于发生瘀伤的受试者中发生。在一些实施方案中，更易于发生瘀伤的受试者是毛细血管脆弱的老年人。在一些实施方案中，更易于发生瘀伤的受试者正在服用具有增加瘀伤倾向的副作用的药物。
[0187]
本文描述了用于改善各种类型的瘀斑的方法和组合物。在一些实施方案中，瘀斑是不可触及的(斑状)紫癜。在一些实施方案中，瘀斑是可触及的(丘疹状)紫癜。在一些实施方案中，瘀斑是非血小板减少性紫癜。在一些实施方案中，瘀斑是血小板减少性紫癜。在一些实施方案中，瘀斑是老年性紫癜。
[0188]
本文描述了用于改善老年个体的各种类型的瘀斑的方法和组合物。在一些实施方案中，该老年个体具有慢性皮肤脆弱性。在一些实施方案中，该老年个体患有皮肤疏松症(dermatoporosis)。在一些实施方案中，该老年个体具有不可触及的(斑状)紫癜、可触及的(丘疹状)紫癜、非血小板减少性紫癜、血小板减少性紫癜或老年性紫癜。在一些实施方案中，该老年个体具有老年性紫癜。
[0189]
如本文所述的方法和组合物可改善美容程序后的瘀伤。在一些实施方案中，方法和组合物改善美容程序前的瘀伤。在一些情况下，瘀伤是由红细胞引起的。通常，红细胞有效地结合大气中的氧，将其输送到组织中，并帮助清除二氧化碳。在一些情况下，红细胞与出血和这些细胞向组织中外渗的病理生理学问题有关。一旦处于血管系统之外，红细胞就会迅速破裂，释放出游离血红蛋白(hb)。该hb可能易于自发氧化，并可能转化为更高的氧化态，如具有有效促炎和促氧化作用的ferrylhb。参见jeney v,eaton jw,balla g,balla j.natural history of the bruise:formation,elimination,and biological effects of oxidized hemoglobin.oxidative medicine and cellular longevity.2013；2013:703571。释放的血红素可能被巨噬细胞吞噬。在被巨噬细胞内化后，血红素裂解为胆绿素、一氧化碳和铁。这种机制可以有效消除hb，但它也保证了在正常情况下用于新红细胞生成(新红细胞形成)的铁循环。参见jeney v,eaton jw,balla g,balla j.natural history of the bruise:formation,elimination,and biological effects of oxidized hemoglobin.oxidative medicine and cellular longevity.2013；2013:703571。在一些情况下，出血的副产物留在周围太长时间会产生促炎作用的风险。在一些情况下，这些作用会干扰伤口愈合、促进色素沉着，或不美观。在一些情况下，导致延迟的瘀伤。参见sadeghpour m,dover js.understanding delayed bruising after hyaluronic acid injections:why the molecule and not just the injection matters-letters and communications.dermatol surg.2019；45(3):471-473。在一些实施方案中，如本文所述的组合物和方法通过更有效地去除红细胞外渗的副产物来改善瘀伤。在一些实施方案中，本文所述的组合物导致巨噬细胞功能的改善。
[0190]
在一些实施方案中，包含乳铁蛋白、磷脂酰丝氨酸、三肽-1、六肽-12、六肽-11、山金车提取物、杜香或其组合的如本文所述的组合物改善瘀伤。乳铁蛋白是具有高铁结合能
s71；widgerow a.topical skin restoration technology
–
advances in age management strategies.modern aesthetics.2016(5月/6月):1-8。在一些实施方案中，乙酰基四肽-2提高fbln5和loxl1蛋白质水平，从而导致弹性蛋白合成增加。在一些情况下，乙酰基四肽-2上调与胶原蛋白1合成有关的基因。乙酰基四肽-2可在体内降低与皮肤松弛和真皮组织破坏相关的参数。参见产品专题材料：uplevitytm.lipotec.2013年6月。
[0195]
在一些实施方案中，草茴香(莳萝提取物)通过产生loxl合成的再诱导来改善弹性蛋白和/或胶原蛋白的刺激。参见cenizo v,andre
′
v,reymermier c,sommer p,damour o,e.p.loxl as a target to increase the elastin content in adult skin:a dill extract induces the loxl gene expression.experimental dermatology.2006；15:574-581。微纤维和可溶性弹性蛋白在一生中不断合成，而loxl从18岁起就急剧减少。皮肤中loxl水平的升高导致微纤维和原弹性蛋白的装配，从而导致皮肤的机械性能改善。同上。弹性发生主要持续到生命的第二个十年末，尽管此后皮肤弹性蛋白的整体含量可能会增加，但是这种弹性蛋白的性质通常不是最佳的并且功能失调。参见ashcroft,g.等人.age-related changes in the temporal and spatial distributions of fibrillin and elastin mrnas and protein in acute cutaneous wounds of healthy humans,journal of pathology.1997；183:80-89。在这个阶段之后，弹性蛋白基因和原纤蛋白-1基因在整个生命中仍然是活跃的，尽管弹性发生变低或效率低下。参见cenizo v,andre
′
v,reymermier c,sommer p,damour o,e.p.loxl as a target to increase the elastin content in adult skin:a dill extract induces the loxl gene expression.experimental dermatology.2006；15:574-581。loxl在生命的最初几十年后下降，已被证明可以刺激弹性发生并维持弹性纤维的稳态。同上；noblesse e,cenizo v,bouez c等人,lysyl oxidase-like and lysyl oxidase are present in the dermis and epidermis of a skin equivalent and in human skin and are associated to elastic fibers.the journal of investigative dermatology.2004；122(3):621-630；liu x,zhao y,gao j等人,elastic fiber homeostasis requires lysyl oxidase-like 1protein.nat genet.2004；36(2):178-182。在一些情况下，莳萝提取物在成纤维细胞和皮肤工程化模型中增加loxl的表达，并在体内导致重新弹性发生。参见cenizo v,andre
′
v,reymermier c,sommer p,damour o,e.p.loxl as a target to increase the elastin content in adult skin:a dill extract induces the loxl gene expression.experimental dermatology.2006；15:574-581。
[0196]
在一些实施方案中，如本文所述的组合物将弹性蛋白的产生刺激至少或大约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或超过95％。在一些实施方案中，如本文所述的组合物将弹性蛋白的产生刺激至少或大约0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。在一些实施方案中，如本文所述的组合物将胶原蛋白的产生刺激至少或大约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或超过95％。在一些实施方案中，如本文所述的组合物将胶原蛋白的产生刺激至少或大约0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。
[0197]
在一些实施方案中，如本文所述的组合物和方法刺激内在透明质酸(ha)的产生。如本文所述的组合物和方法可改善高分子量ha从皮肤至真皮的渗透。在一些实施方案中，包含羟基甲氧基苯基癸酮、银耳提取物、乳铁蛋白、透明质酸钠交联聚合物、磷脂酰丝氨酸或其组合的组合物刺激内在透明质酸的产生。
[0198]
在一些实施方案中，羟基甲氧基苯基癸酮刺激内在透明质酸的产生。羟基甲氧基苯基癸酮是有效的透明质酸促进剂、抗氧化剂和抗刺激剂，并且已经证明在离体人皮肤模型中，与安慰剂相比，将真皮和表皮透明质酸水平分别刺激了259％和198％。参见产品专题材料：symdecanox，symrise，2015年6月。
[0199]
在一些实施方案中，银耳提取物刺激内在透明质酸的产生。在一些实施方案中，银耳提供高水平的水分和抗氧化性质。参见li h,lee hs,kim sh,moon b,lee c.antioxidant and anti-inflammatory activities of methanol extracts of tremella fuciformis and its major phenolic acids.jfood sci.2014；79(4):c460-468；liao wc,hsueh cy,chan cf.antioxidative activity,moisture retention,film formation,and viscosity stability of auricularia fuscosuccinea,white strain water extract.biosci biotechnol biochem.2014；78(6):1029-1036。
[0200]
在一些实施方案中，透明质酸钠交联聚合物刺激内在透明质酸的产生。透明质酸钠交联聚合物是来自非动物来源的化学交联的透明质酸，具有高水结合能力。透明质酸钠交联聚合物可以充当破坏性自由基的清除剂。透明质酸钠交联聚合物包含具有凝胶域的凝胶结构，该凝胶域保持紧密结合的水，其可在皮肤上形成薄膜并随着时间的推移输送水。在一些实施方案中，透明质酸钠交联聚合物包含五十(50)倍于透明质酸的水结合能力。
[0201]
在一些实施方案中，如本文所述的组合物将内在透明质酸的产生刺激至少或大约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或超过95％。在一些实施方案中，如本文所述的组合物将内在透明质酸的产生刺激至少或大约0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。
[0202]
本文描述了用于刺激脂肪生成的组合物和方法。在一些实施方案中，填充物通过机械刺激真皮白色脂肪组织层中的脂肪干细胞来刺激新脂肪形成。参见kruglikov il,wollina u.soft tissue fillers as non-specific modulators of adipogenesis:change of the paradigm？experimental dermatology.2015；24(12):912-915。在一些实施方案中，包含乙酰基六肽-38的组合物刺激脂肪生成。六肽-38是一种pgc1a刺激剂(过氧化物增殖物激活受体-γ-pparγ-共激活物1α)。pgc1a在脂肪生成活性中起核心作用。参见liang h,ward wf.pgc-1alpha:a key regulator of energy metabolism.adv physiol educ.2006；30(4):145-151。如本文所述的组合物和方法可包含磷脂递送系统，以促进材料通过角质层的渗透和吸收。pgc1a在pparγ的影响下强烈诱导前体脂肪细胞分化为白色脂肪细胞。在这些条件下形成的年轻脂肪细胞看起来小而活跃，并且发现这种大小和活性是协同性的，并且与良好的弹性蛋白形成一致。参见ezure t,amano s.increment of subcutaneous adipose tissue is associated with decrease of elastic fibres in the dermal layer.exp dermatol.2015；24(12):924-929。因此，大的、成熟的脂肪细胞与弹性蛋白减少相关——表现为老化的下垂皮肤——而较年轻、较小、新合成的脂肪细胞伴
随着弹性蛋白水平的增加。
[0203]
在一些实施方案中，如本文所述的组合物将脂肪生成刺激至少或大约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或超过95％。在一些实施方案中，如本文所述的组合物将脂肪生成刺激至少或大约0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。
[0204]
本文描述了导致炎症减轻的组合物和方法。在一些实施方案中，包含八氢番茄红素、六氢番茄红素、木糖醇或其组合的组合物和方法具有抗炎作用。
[0205]
在一些实施方案中，如本文所述的组合物将炎症减轻至少或大约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或超过95％。在一些实施方案中，如本文所述的组合物将炎症减轻至少或大约0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。
[0206]
瘀伤、弹性蛋白和/或胶原刺激、透明质酸刺激、脂肪细胞刺激、抗炎作用或其组合的改善可以通过与对照进行比较来确定。在一些实施方案中，该对照是无处理。在一些实施方案中，该对照是媒介物处理。在一些实施方案中，在身体的第一部分接受本文所述组合物的处理而在身体的第二部分接受媒介物处理或无处理的受试者中测量改善。例如，在用本文所述组合物处理的右臂和接受媒介物处理的左臂之间比较改善。
[0207]
治疗
[0208]
如本文所述的组合物可以用于各种治疗方案。在一些情况下，本文所述的局部组合物每天施用一次、每天施用两次、每天施用三次或更频繁地施用。在一些情况下，本文所述的局部组合物每天施用两次。在一些实施方案中，本文所述的局部组合物每天、每隔一天、隔日、每周五天、每周一次、每隔一周、每月两周、每月三周、每月一次、每月两次、每月三次或更频繁地施用。在一些实施方案中，本文所述的局部组合物每天施用两次，例如，在早晨和晚上施用。在一些实施方案中，本文所述的局部组合物被施用至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、1周、2周、3周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月、18个月、2年、3年、4年、5年、10年或更长时间。在一些实施方案中，本文所述的局部组合物每天施用两次，持续至少或大约1周、2周、3周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月或更长时间。在一些实施方案中，本文所述的局部组合物每天施用一次、每天两次、每天三次、每天四次或每天超过四次，持续至少或大约1周、2周、3周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月或更长时间。
[0209]
在一些实施方案中，本文所述的组合物与美容程序结合使用。在一些实施方案中，该美容程序包括注射填充物。
[0210]
当在填充物注射之前、期间或之后施用时，如本文所述的组合物可改善瘀伤、弹性蛋白和/或胶原蛋白刺激、透明质酸刺激、脂肪细胞刺激、抗炎作用或其组合。在一些情况下，与对照相比，如本文所述的组合物将瘀伤、弹性蛋白和/或胶原蛋白刺激、透明质酸刺激、脂肪细胞刺激、抗炎作用或其组合改善10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或超过95％。在一些实施方案中，如本文所述的组合物将瘀伤、弹性蛋白和/或胶原蛋白刺激、透明质酸刺激、脂肪细胞刺激、抗炎作用或其组合改善至少或大约0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、
6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。在一些实施方案中，如本文所述的组合物在使用组合物后1天、2天、3天、4天、5天、6天、1周、2周、3周、1个月、2个月或超过2个月改善瘀伤、弹性蛋白和/或胶原蛋白刺激、透明质酸刺激、脂肪细胞刺激、抗炎作用或其组合。
[0211]
在一些实施方案中，与填充物注射结合使用的如本文所述的组合物在填充物注射后改善瘀伤、弹性蛋白和/或胶原蛋白刺激、透明质酸刺激、脂肪细胞刺激、抗炎作用或其组合。在一些实施方案中，如本文所述的组合物将瘀伤、弹性蛋白和/或胶原蛋白刺激、透明质酸刺激、脂肪细胞刺激、抗炎作用或其组合改善至少或大约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或超过95％。在一些实施方案中，如本文所述的组合物将瘀伤、弹性蛋白和/或胶原蛋白刺激、透明质酸刺激、脂肪细胞刺激、抗炎作用或其组合改善至少或大约0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。
[0212]
在一些情况下，本文所述的组合物在注射填充物前最多1天、最多2天、最多3天、最多5天、最多6天、最多1周、最多2周、最多3周或超过3周施用。在一些情况下，本文所述的组合物在紧接注射填充物前、注射填充物前最多1小时、最多2小时、最多3小时、最多5小时、最多6小时、最多7小时、最多8小时、最多12小时、最多16小时、最多20小时或最多24小时施用。有时，本文所述的组合物在注射填充物前单次施用，或者在一段时间内，如每天、每周多次、每周、每两周、每月或更不频繁地施用。在一些情况下，本文所述的组合物在注射填充物前单次施用，或者在一段时间内，如每天、每周多次、每周、每两周、每月或更频繁地施用。在一些实施方案中，所述组合物是局部组合物。在一些情况下，所述局部组合物在注射填充物前每天施用两次，持续至少或大约1周、2周、3周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月或更长时间。在一些实施方案中，本文所述的局部组合物在注射填充物前每天施用一次、每天两次、每天三次、每天四次或每天超过四次，持续至少或大约1周、2周、3周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月或更长时间。
[0213]
在一些情况下，本文所述的组合物在本文所述的医疗或美容程序或创伤前最多1天、最多2天、最多3天、最多5天、最多6天、最多1周、最多2周、最多3周或超过3周施用。在一些情况下，本文所述的组合物在紧接程序或创伤前、程序或创伤前最多1小时、最多2小时、最多3小时、最多5小时、最多6小时、最多7小时、最多8小时、最多12小时、最多16小时、最多20小时或最多24小时施用。有时，本文所述的组合物在程序或创伤前单次施用，或者在一段时间内，如每天、每周多次、每周、每两周、每月或更不频繁地施用。在一些情况下，本文所述的组合物在程序或创伤前单次施用，或者在一段时间内，如每天、每周多次、每周、每两周、每月或更频繁地施用。在一些实施方案中，所述组合物是局部组合物。在一些情况下，所述局部组合物在程序或创伤前每天施用两次，持续至少或大约1周、2周、3周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月或更长时间。在一些实施方案中，本文所述的局部组合物在程序或创伤前每天施用一次、每天两次、每天三次、每天四次或每天超过四次，持续至少或大约1周、2周、3周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月或更长时间。
[0214]
在一些情况下，本文所述的组合物在注射填充物后最多1天、最多2天、最多3天、最多5天、最多6天、最多1周、最多2周、最多3周或超过3周施用。在一些情况下，本文所述的组合物在注射填充物后立即、在注射填充物后最多1小时、最多2小时、最多3小时、最多5小时、最多6小时、最多7小时、最多8小时、最多12小时、最多16小时、最多20小时或最多24小时施
用。有时，本文所述的组合物在注射填充物后单次施用，或者在一段时间内，如每天、每周多次、每周、每两周、每月或更不频繁地施用。在一些情况下，本文所述的组合物在注射填充物后单次施用，或者在一段时间内，如每天、每周多次、每周、每两周、每月或更频繁地施用。在一些实施方案中，所述组合物是局部组合物。在一些情况下，所述局部组合物在注射填充物后每天施用两次，持续至少或大约1周、2周、3周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月或更长时间。在一些实施方案中，本文所述的局部组合物在注射填充物后每天施用一次、每天两次、每天三次、每天四次或每天超过四次，持续至少或大约1周、2周、3周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月或更长时间。
[0215]
在一些情况下，本文所述的组合物在本文所述的医疗或美容程序或创伤后最多1天、最多2天、最多3天、最多5天、最多6天、最多1周、最多2周、最多3周或超过3周施用。在一些情况下，本文所述的组合物在程序或创伤后立即、在程序或创伤后最多1小时、最多2小时、最多3小时、最多5小时、最多6小时、最多7小时、最多8小时、最多12小时、最多16小时、最多20小时或最多24小时施用。有时，本文所述的组合物在程序或创伤后单次施用，或者在一段时间内，如每天、每周多次、每周、每两周、每月或更不频繁地施用。在一些情况下，本文所述的组合物在程序或创伤后单次施用，或者在一段时间内，如每天、每周多次、每周、每两周、每月或更频繁地施用。在一些实施方案中，所述组合物是局部组合物。在一些情况下，所述局部组合物在程序或创伤前每天施用两次，持续至少或大约1周、2周、3周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月或更长时间。在一些实施方案中，本文所述的局部组合物在程序或创伤后每天施用一次、每天两次、每天三次、每天四次或每天超过四次，持续至少或大约1周、2周、3周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月或更长时间。稳定性测试
[0216]
组合物的稳定性测试可以如下进行。
[0217]
高温测试现在通常用作长期稳定性的预测指标。高温测试可以在37℃(98
°
f)和45℃(113
°
f)下进行。如果产品在45℃下储存三个月(并且表现出可接受的稳定性)，那么它应该会在室温下稳定两年。良好的控制温度为4℃(39
°
f)，其中大多数产品将表现出良好的稳定性。有时，该产品也经受-10℃(14
°
f)三个月。
[0218]
在一些情况下，产品的稳定性通过从-10℃(14
°
f)到25℃(77
°
f)的三个温度测试循环来评估。在这样的情况下，将产品在-10℃下放置24小时，并将其在室温(25℃)下放置24小时。这完成了一个循环。更严格的测试是-10℃至45℃的五循环测试。这使乳液处于巨大压力(stress)下。
[0219]
(水包油乳剂的)分散相具有分离并上升至乳剂顶部从而形成油滴层的趋势。这种现象被称为乳状液分层(creaming)。乳状液分层是即将发生乳剂不稳定的最初迹象之一。预测乳状液分层的测试方法是离心。将乳剂加热至50℃(122
°
f)并以3000rpm将其离心30分钟。然后检查所得产品是否有乳状液分层的迹象。
[0220]
制剂和包装均可对uv辐射敏感。将产品放置于玻璃器皿中，并且将实际包装放置于具有广谱输出的灯箱中。完全用铝箔覆盖的另一个玻璃罐用作对照。可以观察到产品变色。
[0221]
对于所有上述测试，可以观察到颜色、气味/香味、粘度、ph值以及(如果有的话)在显微镜下的粒度均匀性和/或颗粒团聚。
供非侵入性使用和与侵入性程序一起使用的试剂盒
[0222]
本文提供的方法和组合物的一些实施方案包括包含本文提供的肽的试剂盒。在一些实施方案中，可以向施用医师、其他卫生保健专业人员、患者或照护人员提供试剂盒。在一些实施方案中，试剂盒包含在合适的局部组合物中含有所述肽组合物的容器以及关于将所述肽组合物施用于受试者的说明书。该试剂盒还可任选地含有一种或多种额外的治疗剂或其他药剂。例如，含有局部形式的肽组合物的试剂盒可以与其他护肤剂如清洁剂、闭塞性保湿剂、渗透性保湿剂、遮光剂、防晒剂等一起提供。该试剂盒可含有散装形式的肽组合物，或者可含有单独剂量的肽组合物以供连续或顺序施用。该试剂盒可任选地含有一种或多种诊断工具、施用工具和/或使用说明书。该试剂盒可含有合适的递送装置，如注射器、泵分配器、单剂量包装等，以及关于施用所述肽组合物和其他任何治疗剂或有益药剂的说明书。该试剂盒可任选地含有关于储存、重建(如果适用)和施用所包括的任何或所有治疗剂或有益药剂的说明书。该试剂盒可包括多个容器，其反映出将要给予受试者的施用次数，或者将要施用于受试者的不同产品。
[0223]
在一些实施方案中，所述组合物被配置为在美容手术之前、期间和之后支持皮肤，并且还与皮肤自身的自然再生过程一起作用，并帮助改善皮肤的外观和皮肤紧实度。所述局部组合物可以在术后立即施加，以便于更快地恢复，或通常使皮肤看起来更健康。所述组合物可以提高皮肤中弹性蛋白的天然水平、改善现有弹性蛋白的质量、刺激胶原蛋白产生的增加，并且表现出高抗氧化活性，以减少炎症、发红和刺激。该局部组合物适用于所有皮肤类型和术后皮肤。该局部组合物可以以散装形式提供给患者，以允许患者自行施用适量的肽。例如，患者可以施加足以在患区上提供均匀涂层的量的组合物，或者遵照医生另外的指示。在某些实施方案中，可能需要将额外的治疗剂或活性剂掺入局部组合物中。或者，可以单独施用辅助疗法或药剂。例如，可以提供清洁剂、防晒霜、遮光剂、渗透性保湿剂和/或闭塞性保湿剂，以供在所述实施方案的局部组合物之前或之后施用。
[0224]
在一个实施方案中，提供了用于与本文所述的美容皮肤程序结合使用的试剂盒。该试剂盒可包括局部肽组合物、闭塞性保湿剂、温和清洁剂、渗透性保湿剂和广谱spf 30 遮光剂。
[0225]
乳膏、软膏、洗剂、溶液、凝胶、喷雾剂和贴剂的各种实例中可以掺入作为活性成分的本文所述的肽组合物，与渗透增强剂和协同作用于皮肤的其他活性剂相组合，以用于促进伤口愈合或伤口闭合或治疗慢性皮肤伤口。编号的实施方案
[0226]
编号实施方案1包括一种用于改善注射填充物后的瘀伤的局部组合物，其包含：包封在脂质体中的一种或多种成分；三肽-1；和六肽-12，其中所述局部组合物改善注射填充物后的瘀斑的愈合或外观。编号实施方案2包括编号实施方案1的局部组合物，其中所述三肽-1以1-10ppm存在。编号实施方案3包括编号实施方案1-2的局部组合物，其中所述三肽-1包括棕榈酰基三肽-1、肉豆蔻酰基三肽-1或其组合。编号实施方案4包括编号实施方案1-3的局部组合物，其中所述六肽-12包括棕榈酰基六肽-12、肉豆蔻酰基六肽-12或其组合。编号实施方案5包括编号实施方案1-4的局部组合物，其中所述六肽-12以1-10ppm存在。编号实施方案6包括编号实施方案1-5的局部组合物，其中包封在脂质体中的所述一种或多种成分中的第一成分是六肽-11。编号实施方案7包括编号实施方案1-6的局部组合物，其中所述
六肽-11以50-150ppm存在。编号实施方案8包括编号实施方案1-7的局部组合物，其中包封在脂质体中的所述一种或多种成分中的第二成分是六肽-38。编号实施方案9包括编号实施方案1-8的局部组合物，其中所述六肽-38是乙酰基六肽-38。编号实施方案10包括编号实施方案1-9的局部组合物，其进一步包含四肽。编号实施方案11包括编号实施方案1-10的局部组合物，其中所述四肽是乙酰基四肽-2。编号实施方案12包括编号实施方案1-11的局部组合物，其中所述四肽-2是乙酰基四肽-2。编号实施方案13包括编号实施方案1-12的局部组合物，其进一步包含磷脂酰丝氨酸。编号实施方案14包括编号实施方案1-13的局部组合物，其中所述磷脂酰丝氨酸以不超过0.005重量％(wt.％)存在。编号实施方案15包括编号实施方案1-14的局部组合物，其中所述磷脂酰丝氨酸以约0.005wt.％至约0.1wt.％存在。编号实施方案16包括编号实施方案1-15的局部组合物，其中所述磷脂酰丝氨酸以不超过5.0wt％存在。编号实施方案17包括编号实施方案1-16的局部组合物，其中所述磷脂酰丝氨酸以0.1wt％存在。编号实施方案18包括编号实施方案1-17的局部组合物，其中包封在脂质体中的所述一种或多种成分中的第三成分是乳铁蛋白。编号实施方案19包括编号实施方案1-18的局部组合物，其中所述乳铁蛋白以不超过0.050wt.％存在。编号实施方案20包括编号实施方案1-19的局部组合物，其中所述乳铁蛋白以约0.005wt.％至约0.1wt.％存在。编号实施方案21包括编号实施方案1-20的局部组合物，其中所述乳铁蛋白以不超过5.0wt％存在。编号实施方案22包括编号实施方案1-21的局部组合物，其进一步包含杜香提取物。编号实施方案23包括编号实施方案1-22的局部组合物，其中所述杜香提取物以约0.1wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案24包括编号实施方案1-23的局部组合物，其进一步包含莳萝提取物。编号实施方案25包括编号实施方案1-24的局部组合物，其中所述莳萝提取物以约0.01wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案26包括编号实施方案1-25的局部组合物，其进一步包含羟基甲氧基苯基癸酮。编号实施方案27包括编号实施方案1-26的局部组合物，其中所述羟基甲氧基苯基癸酮以约0.001wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案28包括编号实施方案1-27的局部组合物，其进一步包含银耳提取物。编号实施方案29包括编号实施方案1-28的局部组合物，其中所述银耳提取物以约0.001wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案30包括编号实施方案1-29的局部组合物，其进一步包含透明质酸钠交联聚合物。编号实施方案31包括编号实施方案1-30的局部组合物，其中所述透明质酸钠交联聚合物以约0.0001wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案32包括编号实施方案1-31的局部组合物，其进一步包含木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合。编号实施方案33包括编号实施方案1-32的局部组合物，其中所述木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合以约0.25wt.％至约5wt.％存在。编号实施方案34包括编号实施方案1-33的局部组合物，其进一步包含丁二醇、甘油、角鲨烷、盐生杜氏藻提取物、磷脂、生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯、黄原胶、甜菜碱、丙二醇、卵磷脂、辛酸/癸酸甘油三酯、辛二醇、辛酰甲基硅氧烷、苯氧乙醇、乙基己基甘油、聚丙烯酸酯-13、聚异丁烯、聚山梨醇酯20、辛酰氧肟酸、乙二胺四乙酸二钠、山金车提取物、失水山梨醇异硬脂酸酯、戊二醇、葡萄糖、葵花籽油、萝卜根发酵滤液、山梨酸钾或其组合。编号实施方案35包括编号实施方案1-34的局部组合物，其中所述局部组合物是水性的。编号实施方案36包括编号实施方案1-35的局部组合物，其中所述局部组合物的粘度在约8,000厘泊(cps)至约30,000cps的范围内。编号实施方案37包括编号实施方案1-36的局部组合物，其中所述填充物是软组织填充物。编号实施方案38包括编号实施方案1-37
的局部组合物，其中所述填充物是皮肤填充物。编号实施方案39包括一种用于改善瘀伤的局部组合物，其包含：包封在脂质体中的一种或多种成分，其中包封在脂质体中的所述一种或多种成分中的第一成分是六肽-11；三肽-1；和六肽-12，其中所述局部组合物改善瘀斑的愈合或外观。编号实施方案40包括编号实施方案1-39的局部组合物，其中所述三肽-1以1-10ppm存在。编号实施方案41包括编号实施方案1-40的局部组合物，其中所述三肽-1包括棕榈酰基三肽-1、肉豆蔻酰基三肽-1或其组合。编号实施方案42包括编号实施方案1-41的局部组合物，其中所述六肽-12包括棕榈酰基六肽-12、肉豆蔻酰基六肽-12或其组合。编号实施方案43包括编号实施方案1-42的局部组合物，其中所述六肽-12以1-10ppm存在。编号实施方案44包括编号实施方案1-43的局部组合物，其中所述六肽-11以50-150ppm存在。编号实施方案45包括编号实施方案1-44的局部组合物，其中包封在脂质体中的所述一种或多种成分中的第二成分是六肽-38。编号实施方案46包括编号实施方案1-45的局部组合物，其中所述六肽-38是乙酰基六肽-38。编号实施方案47包括编号实施方案1-46的局部组合物，其进一步包含四肽。编号实施方案49包括编号实施方案1-48的局部组合物，其中所述四肽是乙酰基四肽-2。编号实施方案50包括编号实施方案1-49的局部组合物，其中所述四肽-2是乙酰基四肽-2。编号实施方案51包括编号实施方案1-50的局部组合物，其进一步包含磷脂酰丝氨酸。编号实施方案52包括编号实施方案1-51的局部组合物，其中所述磷脂酰丝氨酸以不超过0.005重量％(wt.％)存在。编号实施方案53包括编号实施方案1-52的局部组合物，其中所述磷脂酰丝氨酸以约0.005wt.％至约0.1wt.％存在。编号实施方案54包括编号实施方案1-53的局部组合物，其中所述磷脂酰丝氨酸以不超过5.0wt％存在。编号实施方案55包括编号实施方案1-54的局部组合物，其中所述磷脂酰丝氨酸以0.1wt％存在。编号实施方案56包括编号实施方案1-55的局部组合物，其中包封在脂质体中的所述一种或多种成分中的第三成分是乳铁蛋白。编号实施方案57包括编号实施方案1-56的局部组合物，其中所述乳铁蛋白以不超过0.050wt.％存在。编号实施方案58包括编号实施方案1-57的局部组合物，其中所述乳铁蛋白以约0.005wt.％至约0.1wt.％存在。编号实施方案59包括编号实施方案1-58的局部组合物，其中所述乳铁蛋白以不超过5.0wt％存在。编号实施方案60包括编号实施方案1-59的局部组合物，其进一步包含杜香提取物。编号实施方案61包括编号实施方案1-60的局部组合物，其中所述杜香提取物以约0.1wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案62包括编号实施方案1-61的局部组合物，其进一步包含莳萝提取物。编号实施方案63包括编号实施方案1-62的局部组合物，其中所述莳萝提取物以约0.01wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案64包括编号实施方案1-63的局部组合物，其进一步包含羟基甲氧基苯基癸酮。编号实施方案65包括编号实施方案1-64的局部组合物，其中所述羟基甲氧基苯基癸酮以约0.001wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案66包括编号实施方案1-65的局部组合物，其进一步包含银耳提取物。编号实施方案67包括编号实施方案1-66的局部组合物，其中所述银耳提取物以约0.001wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案68包括编号实施方案1-67的局部组合物，其进一步包含透明质酸钠交联聚合物。编号实施方案69包括编号实施方案1-68的局部组合物，其中所述透明质酸钠交联聚合物以约0.0001wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案70包括编号实施方案1-69的局部组合物，其进一步包含木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合。编号实施方案71包括编号实施方案1-70的局部组合物，其中所述木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合以约0.25wt.％至约5wt.％存在。编号实
施方案72包括编号实施方案1-71的局部组合物，其进一步包含丁二醇、甘油、角鲨烷、盐生杜氏藻提取物、磷脂、生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯、黄原胶、甜菜碱、丙二醇、卵磷脂、辛酸/癸酸甘油三酯、辛二醇、辛酰甲基硅氧烷、苯氧乙醇、乙基己基甘油、聚丙烯酸酯-13、聚异丁烯、聚山梨醇酯20、辛酰氧肟酸、乙二胺四乙酸二钠、山金车提取物、失水山梨醇异硬脂酸酯、戊二醇、葡萄糖、葵花籽油、萝卜根发酵滤液、山梨酸钾或其组合。编号实施方案73包括编号实施方案1-72的局部组合物，其中所述局部组合物是水性的。编号实施方案74包括编号实施方案1-73的局部组合物，其中所述局部组合物的粘度在约8,000厘泊(cps)至约30,000cps的范围内。编号实施方案75包括编号实施方案1-74的局部组合物，其中所述瘀斑在美容程序后出现。编号实施方案76包括编号实施方案1-75的局部组合物，其中所述美容程序是注射填充物。编号实施方案77包括编号实施方案1-76的局部组合物，其中所述美容程序是注射神经毒素。编号实施方案781包括编号实施方案1-77的局部组合物，其中所述美容程序是侵入性手术。编号实施方案79包括编号实施方案1-78的局部组合物，其中所述瘀斑在医疗程序后出现。编号实施方案80包括编号实施方案1-79的局部组合物，其中所述医疗程序是治疗性注射。编号实施方案81包括编号实施方案1-80的局部组合物，其中所述医疗程序是静脉内注射。编号实施方案82包括编号实施方案1-81的局部组合物，其中所述医疗程序是侵入性手术。编号实施方案83包括编号实施方案1-82的局部组合物，其中所述瘀斑在创伤后出现。编号实施方案84包括一种用于使皮肤焕发活力的局部组合物，其包含包封以下成分的脂质体：一种或多种肽；和乳铁蛋白，其中所述局部组合物使皮肤焕发活力。编号实施方案85包括编号实施方案1-84的局部组合物，其进一步包含三肽-1。编号实施方案86包括编号实施方案1-85的局部组合物，其中所述三肽是三肽-1。编号实施方案87包括编号实施方案1-86的局部组合物，其中所述三肽-1以1-10ppm存在。编号实施方案88包括编号实施方案1-87的局部组合物，其中所述三肽-1包括棕榈酰基三肽-1、肉豆蔻酰基三肽-1或其组合。编号实施方案89包括编号实施方案1-88的局部组合物，其进一步包含六肽-12。编号实施方案90包括编号实施方案1-89的局部组合物，其中所述六肽-12包括棕榈酰基六肽-12、肉豆蔻酰基六肽-12或其组合。编号实施方案91包括编号实施方案1-90的局部组合物，其中所述六肽-12以1-10ppm存在。编号实施方案92包括编号实施方案1-91的局部组合物，其中所述一种或多种肽中的第一肽包括六肽-11。编号实施方案93包括编号实施方案1-92的局部组合物，其中所述六肽-11以50-150ppm存在。编号实施方案94包括编号实施方案1-93的局部组合物，其中所述一种或多种肽中的第二肽包括六肽-38。编号实施方案95包括编号实施方案1-94的局部组合物，其中所述六肽-38是乙酰基六肽-38。编号实施方案96包括编号实施方案1-95的局部组合物，其进一步包含四肽。编号实施方案97包括编号实施方案1-96的局部组合物，其中所述四肽是乙酰基四肽-2。编号实施方案948包括编号实施方案1-97的局部组合物，其中所述四肽-2是乙酰基四肽-2。编号实施方案99包括编号实施方案1-98的局部组合物，其进一步包含磷脂酰丝氨酸。编号实施方案100包括编号实施方案1-99的局部组合物，其中所述磷脂酰丝氨酸以不超过0.005重量％(wt.％)存在。编号实施方案101包括编号实施方案1-100的局部组合物，其中所述磷脂酰丝氨酸以约0.005wt.％至约0.1wt.％存在。编号实施方案102包括编号实施方案1-101的局部组合物，其中所述磷脂酰丝氨酸以不超过5.0wt％存在。编号实施方案103包括编号实施方案1-102的局部组合物，其中所述磷脂酰丝氨酸以0.1wt％存在。编号实施方案104包括编号实施方案1-103的局部组
合物，其中所述乳铁蛋白以不超过0.050wt.％存在。编号实施方案105包括编号实施方案1-104的局部组合物，其中所述乳铁蛋白以约0.005wt.％至约0.1wt.％存在。编号实施方案106包括编号实施方案1-105的局部组合物，其中所述乳铁蛋白以不超过5.0wt％存在。编号实施方案107包括编号实施方案1-106的局部组合物，其进一步包含杜香提取物。编号实施方案108包括编号实施方案1-107的局部组合物，其中所述杜香提取物以约0.1wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案109包括编号实施方案1-108的局部组合物，其进一步包含莳萝提取物。编号实施方案110包括编号实施方案1-109的局部组合物，其中所述莳萝提取物以约0.01wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案111包括编号实施方案1-110的局部组合物，其进一步包含羟基甲氧基苯基癸酮。编号实施方案112包括编号实施方案1-111的局部组合物，其中所述羟基甲氧基苯基癸酮以约0.001wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案113包括编号实施方案1-112的局部组合物，其进一步包含银耳提取物。编号实施方案114包括编号实施方案1-113的局部组合物，其中所述银耳提取物以约0.001wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案115包括编号实施方案1-114的局部组合物，其进一步包含透明质酸钠交联聚合物。编号实施方案116包括编号实施方案1-114的局部组合物，其中所述透明质酸钠交联聚合物以约0.0001wt.％至约2.5wt.％存在。编号实施方案116包括编号实施方案1-115的局部组合物，其进一步包含木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合。编号实施方案117包括编号实施方案1-116的局部组合物，其中所述木糖基葡糖苷、脱水木糖醇、木糖醇或其组合以约0.25wt.％至约5wt.％存在。编号实施方案118包括编号实施方案1-117的局部组合物，其进一步包含丁二醇、甘油、角鲨烷、盐生杜氏藻提取物、磷脂、生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯、黄原胶、甜菜碱、丙二醇、卵磷脂、辛酸/癸酸甘油三酯、辛二醇、辛酰甲基硅氧烷、苯氧乙醇、乙基己基甘油、聚丙烯酸酯-13、聚异丁烯、聚山梨醇酯20、辛酰氧肟酸、乙二胺四乙酸二钠、山金车提取物、失水山梨醇异硬脂酸酯、戊二醇、葡萄糖、葵花籽油、萝卜根发酵滤液、山梨酸钾或其组合。编号实施方案119包括编号实施方案1-118的局部组合物，其中所述局部组合物是水性的。编号实施方案120包括编号实施方案1-119的局部组合物，其中所述局部组合物的粘度在约8,000厘泊(cps)至约30,000cps的范围内。编号实施方案121包括一种在个体中改善瘀伤的方法，其包括施用编号实施方案1-120的局部组合物。编号实施方案122包括编号实施方案1-121的方法，其中所述瘀伤改善至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％。编号实施方案123包括编号实施方案1-122的方法，其中所述瘀伤改善至少0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。编号实施方案124包括编号实施方案1-123的方法，其中在施用所述局部组合物后至少1天，所述瘀伤得到改善。编号实施方案125包括编号实施方案1-124的方法，其中在施用所述局部组合物后至少2天，所述瘀伤得到改善。编号实施方案126包括编号实施方案1-125的方法，其中瘀伤的改善包括瘀斑的加速消退、瘀斑大小的减小、皮肤变色减少、肿胀减轻或其组合。编号实施方案127包括一种在个体中改善巨噬细胞功能的方法，其包括施用编号实施方案1-126中任一项的局部组合物。编号实施方案128包括编号实施方案1-127的方法，其中改善的巨噬细胞功能包括改善的吞噬作用。编号实施方案129包括编号实施方案1-128的方法，其中改善的巨噬细胞功能包括改善的含铁血黄素清除。编号实施方案130包括编号实施方案1-129的方法，其中所述巨噬细胞功能改善至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％。编号
实施方案131包括编号实施方案1-130的方法，其中所述巨噬细胞功能改善至少0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。编号实施方案132包括一种在个体中刺激弹性蛋白、胶原蛋白或其组合的产生的方法，其包括施用编号实施方案1-131的局部组合物。编号实施方案133包括编号实施方案1-132的方法，其中弹性蛋白、胶原蛋白或其组合的产生被刺激至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％。编号实施方案134包括编号实施方案1-133的方法，其中弹性蛋白、胶原蛋白或其组合的产生被刺激至少0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。编号实施方案135包括一种在个体中刺激内在透明质酸产生的方法，其包括施用编号实施方案1-134的局部组合物。编号实施方案136包括编号实施方案1-135的方法，其中所述内在透明质酸产生被刺激至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％。编号实施方案137包括编号实施方案1-136的方法，其中所述内在透明质酸产生被刺激至少0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。编号实施方案138包括一种在个体中增加脂肪生成的方法，其包括施用编号实施方案1-137的局部组合物。编号实施方案139包括编号实施方案1-138的方法，其中脂肪生成增加至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％。编号实施方案140包括编号实施方案1-139的方法，其中脂肪生成增加至少0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。编号实施方案141包括一种在个体中减轻炎症的方法，其包括施用编号实施方案1-140的局部组合物。编号实施方案142包括编号实施方案1-141的方法，其中炎症减轻至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或超过90％。编号实施方案143包括编号实施方案1-142的方法，其中炎症减轻至少0.5x、1.0x、1.5x、2.0x、2.5x、3.0x、3.5x、4.0x、5.0x、6.0x、7.0x、8.0x、9.0x、10x或超过10x。编号实施方案144包括编号实施方案1-143的方法，其中所述局部组合物在美容程序后施用。编号实施方案145包括编号实施方案1-144的方法，其中所述局部组合物在美容程序前施用。编号实施方案146包括编号实施方案1-145的方法，其中所述美容程序包括注射填充物。编号实施方案147包括编号实施方案1-146的方法，其中所述填充物是软组织填充物。编号实施方案148包括编号实施方案1-147的方法，其中所述填充物是皮肤填充物。编号实施方案149包括编号实施方案1-148的方法，其中所述美容程序是微针程序。编号实施方案150包括编号实施方案1-149的方法，其中所述微针程序是射频微针程序。编号实施方案151包括编号实施方案1-150的方法，其中所述局部组合物在微针程序前至少1天施用。编号实施方案152包括编号实施方案1-151的方法，其中所述局部组合物在微针程序前至少1周施用。编号实施方案153包括编号实施方案1-152的方法，其中所述局部组合物在微针程序前至少2周施用。编号实施方案154包括编号实施方案1-153的方法，其中所述局部组合物在微针程序后至少1天施用。编号实施方案155包括编号实施方案1-154的方法，其中所述局部组合物在微针程序后至少1周施用。编号实施方案156包括编号实施方案1-155的方法，其中所述局部组合物在微针程序后至少2周施用。编号实施方案157包括编号实施方案1-156的方法，其中所述局部组合物紧接注射填充物前施用。编号实施方案158包括编号实施方案1-157的方法，其中所述局部组合物在注射填充物前至少1天施用。编号实施方案159包括编号实施方案1-158的方法，其中所述局部组合物在注射填充物前至
少1周施用。编号实施方案160包括编号实施方案1-159的方法，其中所述局部组合物在注射填充物前至少2周施用。编号实施方案161包括编号实施方案1-160的方法，其中所述局部组合物在注射填充物后立即施用。编号实施方案162包括编号实施方案1-161的方法，其中所述局部组合物在注射填充物后至少1天施用。编号实施方案163包括编号实施方案1-162的方法，其中所述局部组合物在注射填充物后至少1周施用。编号实施方案164包括编号实施方案1-163的方法，其中所述局部组合物在注射填充物后至少2周施用。编号实施方案165包括编号实施方案1-164的方法，其中所述美容程序是注射神经毒素。编号实施方案166包括编号实施方案1-165的方法，其中所述美容程序是侵入性手术。编号实施方案167包括编号实施方案1-166的方法，其中所述局部组合物在医疗程序后施用。编号实施方案168包括编号实施方案1-167的方法，其中所述局部组合物在医疗程序前施用。编号实施方案169包括编号实施方案1-168的方法，其中所述医疗程序是治疗性注射。编号实施方案170包括编号实施方案1-169的方法，其中所述医疗程序是静脉内注射。编号实施方案171包括编号实施方案1-170的方法，其中所述医疗程序是侵入性手术。编号实施方案172包括编号实施方案1-171的方法，其中所述局部组合物在创伤后施用。编号实施方案173包括编号实施方案1-172的方法，其中所述局部组合物在创伤前施用。编号实施方案174包括编号实施方案1-173的方法，其中所述局部组合物每天施用1、2、3、4、5、6、7或8次。编号实施方案175包括编号实施方案1-174的方法，其中所述局部组合物每天施用4次。编号实施方案176包括编号实施方案1-175的方法，其中所述个体是人。实施例
[0227]
给出以下实施例是为了说明本公开的多个实施方案的目的，而并非意图以任何方式限制本发明。这些实施例以及目前代表优选实施方案的本文所述方法是示例性的，而非旨在限制本公开的范围。本领域技术人员将会想到其变化以及包含在由权利要求的范围所限定的本公开的精神之内的其他用途。
[0228]
实施例1：示例性组合物
[0229]
示例性组合物可见表1。表1.
biolabs,inc.)进行。使用的巨噬细胞是raw-difluo mlc3自噬报告细胞。人红细胞(rbc)获自zenbio(目录号ser-10mlrbc)。简而言之，在测定前24小时，将巨噬细胞接种在96孔板上。一个平板接种12,500个巨噬细胞，第二个平板接种了25,000个巨噬细胞。测定当天，用人红细胞抗体对人红细胞(rbc)进行调理。作为阴性对照，用人rbc抗体对绵羊rbc进行调理。然后用肽或无肽替换培养基。将血液以200:1的rbc与巨噬细胞之比添加到平板中。在加入血液后2小时开始测量吞噬作用。从板的孔中除去培养基和血液。将板用rbc裂解缓冲液洗涤一次以去除未吞噬的rbc，然后用pbs洗涤两次。然后将巨噬细胞裂解缓冲液加入到板中，并将裂解的溶液转移到96孔板中。将检测血红素的底物溶液加入到96孔板中，并在1分钟、5分钟、10分钟和20分钟时记录吸光度。图1b-1c显示了红细胞(rbc)冲洗前(图1b)和rbc冲洗后(图1c)巨噬细胞吞噬作用的图像。箭头表示具有rbc的巨噬细胞(空心圆圈)。没有红细胞的巨噬细胞被观察为暗中央细胞核。
[0233]
该测定得到验证，数据见图2。图2显示了以下组：无处理阳性对照、无处理阴性对照、六肽-11(hex11-肽)、六肽-12(hex12-肽)、三肽-1(三肽)、八肽和仅血液。无处理阳性对照包含巨噬细胞和人血(人抗体)。无处理阴性对照包含巨噬细胞和人血(绵羊抗体)。肽处理(六肽-11、六肽-12、三肽-1和八肽)用巨噬细胞和人血(人抗体)完成。在没有巨噬细胞的情况下进行仅血液处理并评估洗出rbc的效率。在加入rbc后2小时记录吸光度。如图2所示，无处理阴性对照是无处理阳性对照的一半。进一步如图2所示，rbc洗涤步骤几乎去除了所有未吞噬的血液。
[0234]
制作红细胞(rbc)曲线以量化测定中被吞噬的rbc的数目，该曲线用于从吸光度值推断rbc的数目(图3a-3b)。图3a显示了rbc标准曲线图，y轴为吸光度，x轴为rbc数目。图3b显示了rbc标准曲线(log2)图，y轴为吸光度(log2)，x轴为rbc数目(log2)。
[0235]
进行时程以确定在何时研究吞噬作用。图4显示了无处理对照样品的吸光度图，y轴为吸光度，x轴为时间(24小时、48小时和72小时)。在24小时时，大多数红细胞(rbc)被吞噬。在48小时时，几乎所有的rbc都被吞噬并开始降解。在72小时时，所有rbc都被吞噬并降解。因此，选择24小时进行后续实验。
[0236]
各种处理后的吞噬
[0237]
在各种处理后进行红细胞(rbc)的吞噬。简而言之，在吞噬测定前24小时，将25,000个巨噬细胞接种到96孔板上。在测定当天，用各种肽或化合物处理替换培养基。然后以100:1的rbc与巨噬细胞之比将rbc添加到巨噬细胞中。然后将细胞在37℃和5％co2下孵育。24小时后，将未吞噬的rbc洗掉，巨噬细胞裂解，15分钟后加入血红素测定底物以检测吸收的rbc/血红素。肽的浓度包括以下：2.9ug/ml三肽-1、100ug/ml六肽-11和2.9ug/ml六肽-12。相对于无处理(nt)pbs对照比较乳铁蛋白和磷脂酰丝氨酸。y轴上的每0.1增量表明巨噬细胞功能的功效增加10％，代表rbc吞噬作用的显著增加。
[0238]
图5显示了各种处理后吞噬作用的时程。处理包括以下：无处理(nt)，三肽-1(tri)，六肽-11(hex11)，六肽-12(hex12)，三肽-1和六肽-11(tri hex11)，以及三肽-1、六肽-11和六肽-12(tri hex11 hex12)。时程经24小时(1d，黑条)、48小时(2d，白条)和72小时(3d，水平条)进行。在24小时时，肽组合处理显示吞噬作用的最大增加。24小时时间点用于以下描述的实验。
[0239]
然后确定各种肽处理对吞噬作用的影响。图6显示了各种肽处理对吞噬作用的影
响，包括：无处理(nt，白条)，三肽-1(tri，黑条)，六肽-11(hex11，黑条)，六肽-12(hex12，黑条)，三肽-1和六肽-11(tri hex11，水平条)，以及三肽-1、六肽-11和六肽-12(tri hex11 hex12，水平条)。如图6所示，与nt对照相比，单独的肽处理(三肽-1、六肽-11和六肽-12)显示吞噬作用降低或没有变化。与单独的肽处理相比，三肽1和六肽11处理以及三肽1、六肽11和六肽12处理导致功效增加约15％(3x-4x变化)，表明组合肽在巨噬细胞吞噬红细胞和溶解瘀伤中的协同作用。
[0240]
还测定了磷脂酰丝氨酸的作用。图7显示了以下处理的作用：无处理(nt)，三肽-1(tri)，六肽-11(hex11)，六肽-12(hex12)，三肽-1和六肽-11(tri hex11)，三肽-1、六肽-11和六肽-12(tri hex11 hex12)，10ug/ml磷脂酰丝氨酸(ps_10ug/ml)，50ug/ml磷脂酰丝氨酸(ps_50ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和10ug/ml磷脂酰丝氨酸(pep_ps_10ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和50ug/ml磷脂酰丝氨酸(pep_ps_50ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和100ug/ml磷脂酰丝氨酸(pep_ps_100ug/ml)，以及三肽-1、六肽-11、六肽-12和500ug/ml磷脂酰丝氨酸(pep_ps_500ug/ml)。如图7所示，三肽-1、六肽-11、六肽-12和50ug/ml磷脂酰丝氨酸处理以及三肽-1、六肽-11、六肽-12和500ug/ml磷脂酰丝氨酸处理显示出比单独的肽处理显著增加。三肽-1、六肽-11和六肽-12处理的增加为1.15。三肽-1、六肽-11、六肽-12和50ug/ml磷脂酰丝氨酸处理的增加为1.30。三肽-1、六肽-11、六肽-12和500ug/ml磷脂酰丝氨酸处理的增加为1.40。三肽-1、六肽-11、六肽-12和50ug/ml磷脂酰丝氨酸处理以及三肽-1、六肽-11、六肽-12和500ug/ml磷脂酰丝氨酸处理导致功效为单独的肽处理的2x-3x且功效为nt对照的4x。
[0241]
测定了乳铁蛋白的作用。图8显示了以下处理的作用：无处理(nt)，三肽-1(tri)，六肽-11(hex11)，六肽-12(hex12)，三肽-1和六肽-11(tri hex11)，三肽-1、六肽-11和六肽-12(tri hex11 hex12)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和10ug/ml乳铁蛋白(pep_lac_10ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和50ug/ml乳铁蛋白(pep_lac_50ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和100ug/ml乳铁蛋白(pep lac 100ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和500ug/ml乳铁蛋白(pep_lac_500ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12、500ug/ml磷脂酰丝氨酸和50ug/ml乳铁蛋白(pep ps lac50ug/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12、500ug/ml磷脂酰丝氨酸和100ug/ml乳铁蛋白(pep ps lac100ug/ml)，以及三肽-1、六肽-11、六肽-12、500ug/ml磷脂酰丝氨酸和500ug/ml乳铁蛋白(pep ps lac500ug/ml)。如图8所示，三肽-1、六肽-11、六肽-12和50ug/ml乳铁蛋白导致吞噬作用相对于三肽-1、六肽-11和六肽-12处理增加约30％且相对于nt对照增加45-50％(4.5-5x功效)。三肽-1、六肽-11、六肽-12和500ug/ml乳铁蛋白处理导致功效与nt对照相比增加约20％。三肽-1、六肽-11、六肽-12、500ug/ml磷脂酰丝氨酸和500ug/ml乳铁蛋白也导致功效与nt对照相比增加约45％。
[0242]
测定了羟基琥珀酰亚胺的作用。图9显示了以下处理的作用：无处理(nt)，三肽-1(tri)，六肽-11(hex11)，六肽-12(hex12)，三肽-1和六肽-11(tri hex11)，三肽-1、六肽-11和六肽-12(tri hex11 hex12)，1mg/ml羟基琥珀酰亚胺(hs_1mg/ml)，2mg/ml羟基琥珀酰亚胺(hs_2mg/ml)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和1mg/ml羟基琥珀酰亚胺(pep_hs_1mg/ml)，以及三肽-1、六肽-11、六肽-12和2mg/ml羟基琥珀酰亚胺(pep_hs_2mg/ml)。如图9所示，羟基琥珀酰亚胺处理显示吞噬作用没有或几乎没有改变。
[0243]
测定了三肽-1、六肽-11、六肽-12、磷脂酰丝氨酸和乳铁蛋白对吞噬作用的影响。
图10显示了以下处理的影响：无处理(nt)，三肽-1(tri)，六肽-11(hex11)，六肽-12(hex12)，三肽-1和六肽-11(tri hex11)，三肽-1、六肽-11和六肽-12(tri hex11 hex12)，三肽-1、六肽-11、六肽-12和500ug/ml磷脂酰丝氨酸(pep_ps_500ug/ml)，以及三肽-1、六肽-11、六肽-12、500ug/ml磷脂酰丝氨酸和500ug/ml乳铁蛋白(pep ps lac500ug/ml)。如图10所示，肽组合(tri hex11 hex12)导致功效增加(比对照增加15％)。添加磷脂酰丝氨酸(pep_ps_500ug/ml)显示出比对照增加30％。三肽-1、六肽-11、六肽-12、500ug/ml磷脂酰丝氨酸和500ug/ml乳铁蛋白处理导致巨噬细胞吞噬功效功效提高约47％并且功效比单独的肽组合提高约300％。
[0244]
实施例3：评价瘀伤改善的临床试验
[0245]
在注射皮肤填充物后在受试者中评价表1的组合物的效果。选择二十名受试者参与试验。排除和纳入标准在表2中列出。表2.
[0246]
每名受试者接受两次美容注射：一次在受影响面部区域的第一侧，第二次在受影响面部区域的第二侧。两周后，受试者每天两次应用表1的组合物。在第3、4、6、8和12周进行评估。使用医师全球美学改善量表(physician global aesthetic improvement scale，pgais)确定受试者的改善。
[0247]
实施例4.评价局部产品治疗瘀斑的有效性和安全性的多中心、双盲研究
[0248]
本研究的目的是评价包含表1所述配方的局部产品与温和的润肤膏相比在消散瘀斑方面的有效性和安全性。
[0249]
研究持续时间为3个月。每个站点将招募大约10名受试者，其中最多有3个站点参与。受试者包括18岁或以上的健康男性和女性受试者。纳入标准和排除标准在表3中列出。表3.纳入和排除标准
[0250]
该研究包括筛查访视、一次激光诱导程序访视和瘀伤后第2、4、6、8、10和14天的随访。选择活检的受试者在初始活检后的指定时间点返回进行第二组活检。受试者可以在访视1前最多30天同意研究。
[0251]
访视1程序包括以下内容：完成icf、人口统计、医疗/皮肤病史和研究标准确认。如果受试者有资格参加本研究，则受试者在左右臂内侧上进行激光程序以诱发瘀伤。在每只手臂上形成瘀斑前后进行标准摄影术。受试者随机在右臂或左臂接受局部瘀伤产品或温和的润肤膏。受试者每天两次在指定的手臂上使用局部产品。接受前臂活检的受试者每天两次将随机指定的产品应用于前臂上。
[0252]
在随访第2、4、6、8、10和14天，受试者将返回诊所并询问自上次访视以来健康状况的任何变化。完成受试者和研究者评估。完成标准化摄影术。
[0253]
在第2周，选择前臂活检的两名受试者返回诊所进行第二次活检，然后根据第一次活检返回进行拆线。
[0254]
功效的研究测量包括标准化摄影术、活检和受试者满意度问卷。在每次访视时和程序前后都拍摄标准化照片。使用这些照片对瘀斑进行可比评估。在访视1时和在使用局部产品后两周对同意前臂活检的两名任意患者进行活检。标本由皮肤病理学家盲测。受试者使用受试者满意度问卷对产品和递送的满意度进行评分。进一步的安全性通过按照事件时间表记录不良事件(ae)次数来确定。
[0255]
功效测量包括共同主要功效终点，其包括手臂之间瘀斑的整体改善。还测量次要功效终点。次要功效终点包括研究结束时皮肤病理学与基线相比的变化、皮肤活检的皮肤变化以及受试者满意度问卷。还测量安全终点，包括任何局部和全身不良事件(ae)的发生
率(严重程度和因果关系)。
[0256]
实施例5.局部产品治疗美容注射后瘀伤的功效的临床评价
[0257]
本研究的目的是评价包含表1所述配方的局部产品在消散美容注射后的瘀斑方面的功效。
[0258]
研究持续时间为3个月。招募大约50名受试者。受试者包括18岁或以上的健康男性和女性受试者。纳入标准和排除标准在表4中列出。表4.纳入和排除标准
[0259]
该研究包括第1天治疗访视和第2、4、6、8、10和14天的随访。受试者可以在第1天前最多30天同意研究。
[0260]
第1天的程序包括以下内容：完成icf、人口统计、医疗/皮肤病史。受试者接受由研究者和受试者决定的选择的美容注射物。在瘀斑形成后进行标准摄影术。受试者随机在面部左侧或右侧应用局部瘀伤产品。受试者每天两次在指定的瘀斑上使用局部产品。
[0261]
第2、4、6、8、10和14天随访：受试者返回诊所并询问自上次访视以来健康状况的任何变化。完成瘀斑的标准化摄影术。
[0262]
研究测量包括功效和安全性测量。使用标准化摄影术和受试者满意度问卷来确定功效。在每次访视时和程序后拍摄标准化照片。使用这些照片对瘀斑进行可比评估。使用受试者满意度问卷，受试者对产品和递送的满意度进行评分。安全性测量包括按照事件时间表记录不良事件(ae)。
[0263]
使用主要功效终点和次要功效终点确定研究功效。主要功效终点包括与未治疗的瘀斑相比，经治疗的瘀斑的总体改善。次要功效终点包括研究结束时的受试者满意度问卷。安全性终点还被测量为任何局部和全身不良事件(ae)的发生率(严重程度和因果关系)。
[0264]
实施例6.脂质体组合物的制备
[0265]
根据图11a所示的示意图制备脂质体制品。图11a显示了制备脂质体的各种方法，包括水溶性成分包载、脂溶性成分包载以及脂溶性和水溶性成分包载。图11b显示了脂质体形成的示意图。如图12所示，在脂质体悬浮工艺制造后观察到脂质体。
[0266]
实施例7.脂质体组合物的功效
[0267]
测试脂质体组合物在生物利用度和皮肤渗透方面的功效。
[0268]
脂质体的水悬浮液用1.5％的亲水分子a或300ppm(0.03％)的亲水分子b和27％
pro-lipo
tm
neo制备。分子a是咖啡因，分子量为194.2g/mol且渗透能力log kow为-0.07。分子b是一种六肽(六肽-38)，分子量为(870g/mol)且渗透能力log kow为-1.13。使用含有1.5％a或300ppm b的水溶液作为对照(非包载的分子)。
[0269]
使用franz池法将10mg/cm2的剂量应用于皮肤外植体上。在24小时期间测量分子穿过皮肤外植体的动力学。24小时后，测量每个皮肤隔室中的分子内容物，包括角质层、表皮、真皮和接收流体(receptor fluid)。
[0270]
图13a-13b显示了分子a穿过人皮肤的扩散图(图13a)和分子a的皮肤分布(图13b)。如图13a所示，在脂质体中配制的分子a比未包载的分子有效2.5倍，快1.6倍。如图13b所示，在24小时后，在脂质体中配制的分子a在总生物利用度上有效2.4倍。在脂质体中配制的分子b也表现出增加的生物利用度，如24小时后分子b的皮肤分布增加了2.5倍所示(图13c)。
[0271]
实施例8.脂质体乙酰基六肽38的颗粒大小
[0272]
确定了脂质体乙酰基六肽38的颗粒大小。
[0273]
将100ul脂质体乙酰基六肽38溶解在15ml水中。两个实验的测定信息可见表5。表5. 实验1实验2材料ri1.591.59材料吸收0.0100.010分散剂名称水水分散剂ri1.3301.330粘度(cp)0.88720.8872温度(℃)2525计数率(kcps)149.1149.1样品池描述一次性大小分级池一次性大小分级池采用的持续时间(s)8080测量位置(mm)4.654.65衰减器77
[0274]
实验结果可见表6-8和图14a-14d。表6.pdl是指多分散指数，截距是指幅度。表7.
表8.
[0275]
如表6-8和图14a-14d所示，产生了颗粒大小为184.7纳米(nm)的脂质体乙酰基六肽-38组合物。
[0276]
实施例9.示例性制剂
[0277]
示例性的脂质体制剂见表9。表9.
[0278]
实施例10.瘀伤消退的体内测试
[0279]
研究设计
[0280]
进行了一项2中心、随机化、双盲研究，以评估局部产品的有效性和安全性，该产品被配制用于增加表现为瘀斑的血液产物的消除。该研究调查了包含表9所述配方的局部产品与温和的润肤膏相比改善瘀斑外观的能力。该研究招募了18名受试者，16名受试者(32处瘀伤)完成了研究。
[0281]
符合条件的受试者通过血管的机械破坏、静脉穿刺(如抽血中)(1组)或通过在肘窝远侧的前臂内侧近端抽取血液并重新皮下注射0.1ml，在双臂上诱发瘀伤。
[0282]
受试者随机接受局部产品和温和的润肤膏，每天至少四次在指定的手臂上使用。一只手臂每天四次在瘀斑上接受局部产品，另一只手臂每天四次接受温和的润肤膏(cetaphil洗剂)。对受试者进行筛选，并接受程序性(第0天)访视和第1、2、3、6和7天的随访。两名受试者同意在第0天、处理前和程序后第12/20天进行前臂活检。每次访视时一式三份进行皮肤比色分析(skin colorcatch)，并通过摄影术记录瘀斑的临床变化。
[0283]
评估的终点包括与skin color catch测量相比，手臂之间瘀斑外观的整体改善。
[0284]
结果
[0285]
该研究招募了18名受试者，16名受试者(32处瘀伤)完成了研究，两名受试者由于
没有完成研究并提供足够的数据点而退出分析。使用比色法(skincolorcatch，delfin technologies，kuopio，finland)进行了客观评估。在所有时间点进行蓝色/黄色通道的强度测量。然后将该评分与瘀伤产生之前的基线评分进行比较，比较两组之间蓝色强度与原始清晰皮肤之间的差异，并提供瘀斑消退的信息。为了确保两组的等价性，确定紧接瘀伤后的评分具有可比性，如图15a所证明的。
[0286]
2个模型表现出轻微的变化。皮下注射稍晚出现淤伤；因此，该组的第3天和第7天相当于抽血组的第2天和第6天。数据表明，“临界点”发生在第2/3天，此时实验研究产品的颜色强度相比于比较物显著改善。与温和的润肤膏相比，使用局部产品的受试者有81％在第2/3天有较少的瘀伤，紫色强度评分改善了72％，表明局部产品加速了瘀伤的消退，如图15a-15g所示。
[0287]
如图15a-15g所示，在许多情况下，在消退之前接受局部产品的实验组中观察到从蓝色到红色的转变(例如，图15g的局部产品组的第3天)。局部产品提高巨噬细胞功效(经体外验证)，然后吸收色素，留下残留的红色色素，其很快消退。
[0288]
还测量了肿胀。受试者接受深度射频(rf)微针程序，并施用包含表9所述配方的局部产品或温和的润肤膏。使用面部分区案例研究比较了局部产品与温和的润肤膏。使用quantificare 3-d体积相机进行测量。红色表示与基线相比更大的体积/肿胀。数据见图16a-16b。
[0289]
如图16c所示，在8天时间内应用局部产品(每幅图像的右侧)减轻了用射频(rf)微针处理的受试者的瘀伤和肿胀。如图16d所示，局部产品的应用也减少了老年性紫癜。
[0290]
还观察到分子变化。如图16e所示，herovici染色(放大40倍)表明新的粘多糖形成(由乳突状真皮层中的蓝色区域表示)。左图是处理前，右图是使用局部产品后2周。如图16f所示，棕色的原纤蛋白染色(放大10倍)显示弹性蛋白纤维的再生。左图是处理前，右图是使用局部产品后2周。
[0291]
结论
[0292]
数据表明，使用局部产品改善了瘀伤消退。
[0293]
实施例11.局部产品的体外抗微生物有效性
[0294]
使用具有表9配方的局部产品进行抗微生物有效性测试。如图17中的数据所示，使用该局部产品完全根除了细菌、酵母和霉菌。该局部产品经确定满足类别2的抗微生物有效性测试的usp接受标准。
[0295]
虽然本文已经示出并描述了本公开的优选实施方案，但对于本领域技术人员明显的是，这些实施方案仅以示例的方式提供。在不脱离本公开内容的情况下，本领域技术人员将会想到许多变化、改变和替换。应当理解，在实施本公开时可以采用本文所述本公开的实施方案的各种替代方案。旨在以所附权利要求书限定本公开的范围，并且由此涵盖这些权利要求范围内的方法和结构及其等同物。