抗整联蛋白抗体及其用途的制作方法

技术特征：
1.一种抗体，其与αvβ1整联蛋白特异性结合但不与其他整联蛋白结合，并且任选地其中所述抗体具有以下特性中的一种或多种：(i)与人αvβ1以kd≤20nm的高亲和力(二价亲和力)结合；(ii)阻断αvβ1与其配体的相互作用；(iii)对于与人αvβ1的结合是阳离子依赖性的；(iv)对于与人αvβ1的结合是阳离子非依赖性的；(v)与成纤维细胞上的αvβ1结合；和(vi)抑制成纤维细胞tgfβ响应。2.如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体与包含重链可变区(vh)和轻链可变区(vl)的参考抗αvβ1整联蛋白抗体竞争和/或结合相同的表位，其中所述参考抗体的vh和vl包含：(i)分别地在seq id no:35中示出的氨基酸序列和在seq id no:22中示出的氨基酸序列；(ii)分别地在seq id no:61中示出的氨基酸序列和在seq id no:58中示出的氨基酸序列；(iii)分别地在seq id no:11中示出的氨基酸序列和在seq id no:12中示出的氨基酸序列；(iv)分别地在seq id no:21中示出的氨基酸序列和在seq id no:22中示出的氨基酸序列；(v)分别地在seq id no:27中示出的氨基酸序列和在seq id no:28中示出的氨基酸序列；(vi)分别地在seq id no:30中示出的氨基酸序列和在seq id no:12中示出的氨基酸序列；(vii)分别地在seq id no:44中示出的氨基酸序列和在seq id no:45中示出的氨基酸序列；(viii)分别地在seq id no:49中示出的氨基酸序列和在seq id no:50中示出的氨基酸序列；(ix)分别地在seq id no:57中示出的氨基酸序列和在seq id no:58中示出的氨基酸序列；或(x)分别地在seq id no:64中示出的氨基酸序列和在seq id no:58中示出的氨基酸序列。3.一种抗体，其与αvβ1整联蛋白和αvβ6整联蛋白两者特异性结合但不与其他整联蛋白结合，并且任选地其中所述抗体具有以下特性中的一种或多种：(i)与人αvβ1以kd≤20nm的高亲和力(二价亲和力)结合且与人αvβ6以100nm的亲和力(二价亲和力)结合；(ii)阻断αvβ1和/或αvβ6与其配体的相互作用；(iii)对于与人αvβ1和/或αvβ6的结合是阳离子依赖性的；(iv)与成纤维细胞上的αvβ1结合；和(v)抑制成纤维细胞tgfβ响应。4.如权利要求3所述的抗体，其中所述抗体与结合αvβ1整联蛋白和αvβ6整联蛋白两者且包含重链可变区(vh)和轻链可变区(vl)的参考抗体竞争和/或结合相同的表位，其中所述参考抗体的vh和vl包含：(i)分别地在seq id no:44中示出的氨基酸序列和在seq id no:68中示出的氨基酸序列；(ii)分别地在seq id no:44中示出的氨基酸序列和在seq id no:70中示出的氨基酸序列；
(iii)分别地在seq id no:49中示出的氨基酸序列和在seq id no:72中示出的氨基酸序列；或(iv)分别地在seq id no:76中示出的氨基酸序列和在seq id no:77中示出的氨基酸序列。5.一种抗体，其与αvβ1以及一种或多种选自由αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α5β1、α8β1和αiibβ3组成的组的整联蛋白特异性结合，并且任选地其中所述抗体具有以下特性中的一种或多种：(i)其与人αvβ1以kd≤20nm的高亲和力(二价亲和力)结合且与其他rgd结合整联蛋白以100nm的亲和力(二价亲和力)结合；(ii)阻断αvβ1和/或rgd家族整联蛋白与其配体的相互作用；(iii)对于与人αvβ1和/或rgd结合整联蛋白的结合是阳离子依赖性的；(iv)对于与人αvβ1和/或rgd结合整联蛋白的结合是阳离子非依赖性的；(v)与成纤维细胞上的αvβ1和/或rgd结合整联蛋白结合；和(v)抑制成纤维细胞tgfβ响应。6.如权利要求5所述的抗体，其中所述抗体与包含重链可变区(vh)和轻链可变区(vl)的参考抗体竞争和/或结合相同的表位，其中所述参考抗体的vh和vl包含：(i)分别地在seq id no:82中示出的氨基酸序列和在seq id no:83中示出的氨基酸序列；(ii)分别地在seq id no:92中示出的氨基酸序列和在seq id no:93中示出的氨基酸序列；(iii)分别地在seq id no:92中示出的氨基酸序列和在seq id no:95中示出的氨基酸序列；(iv)分别地在seq id no:100中示出的氨基酸序列和在seq id no:28中示出的氨基酸序列；(v)分别地在seq id no:21中示出的氨基酸序列和在seq id no:104中示出的氨基酸序列；或(vi)分别地在seq id no:49中示出的氨基酸序列和在seq id no:107中示出的氨基酸序列。7.一种抗体，其与αvβ1整联蛋白结合但不与其他整联蛋白结合，所述抗体含有包含vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3的vh以及包含vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3的vl，其中vhcdr1、vhcdr2、vhcdr3、vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3包含：(i)分别地seq id no:32、34、17、18、19和20；(ii)分别地seq id no:60、39、55、18、19和56；(iii)分别地seq id no:4、6、7、8、9和10；(iv)分别地seq id no:14、16、17、18、19和20；(v)分别地seq id no:4、6、23、24、25和26；(vi)分别地seq id no:29、6、7、8、9和10；(vii)分别地seq id no:37、39、40、41、42和43；(viii)分别地seq id no:37、39、46、18、47和48；(ix)分别地seq id no:52、54、55、18、19和56；或(x)分别地seq id no:63、54、55、18、19和56。8.如权利要求7所述的抗体，其中：
(i)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:35和22中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(ii)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:61和58中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(iii)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:11和12中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(iv)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:21和22中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(v)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:27和28中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(vi)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:30和12中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(vii)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:44和45中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(viii)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:49和50中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(ix)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:57和58中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；或(x)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:64和58中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列。9.一种抗体，其与αvβ1整联蛋白和αvβ6整联蛋白两者结合但不与其他整联蛋白结合，其中所述抗体含有包含vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3的vh以及包含vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3的vl，其中vhcdr1、vhcdr2、vhcdr3、vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3包含：(i)分别地seq id no:37、39、40、65、66和67；(ii)分别地seq id no:37、39、40、65、66和69；(iii)分别地seq id no:37、39、46、18、47和71；或(iv)分别地seq id no:37、39、73、74、42和75。10.如权利要求9所述的抗体，其中：(i)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:44和68中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(ii)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:44和70中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(iii)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:49和72中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；或(iv)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:76和77中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列。11.一种抗体，其与αvβ1以及一种或多种选自由αvβ6、αvβ3、αvβ5、αvβ8、α5β1、α8β1和αiibβ3组成的组的整联蛋白结合，其中所述抗体含有包含vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3的vh以及包含vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3的vl，其中vhcdr1、vhcdr2、vhcdr3、vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3
包含：(i)分别地seq id no:4、6、78、79、80和81；(ii)分别地seq id no:85、87、88、89、90和91；(iii)分别地seq id no:85、87、88、89、90和94；(iv)分别地seq id no:97、99、23、24、25和26；(v)分别地seq id no:14、16、17、101、102和103；或(vi)分别地seq id no:37、39、46、105、80和106；12.如权利要求11所述的抗体，其中：(i)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:82和83中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(ii)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:92和93中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(iii)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:92和95中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(iv)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:100和28中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(v)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:21和104中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；或(vi)所述vh和所述vl分别地包含与在seq id no:49和107中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列。13.如权利要求1至12中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含人igg1、igg2、igg3或igg4重链恒定区。14.如权利要求1至12中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含非糖基化人恒定区。15.如权利要求1至12中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含higg1agly fc、higg2 saa fc、higg4(s228p)fc或higg4(s228p)/g1 agly fc。16.如权利要求1至15中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含人κ或人λ轻链恒定区。17.如权利要求1至12中任一项所述的抗体，其中所述抗体是完整抗体、单结构域抗体、人源化抗体、嵌合抗体、双特异性抗体、fv、scfv、sc(fv)2、双抗体、纳米抗体、fab和f(ab’)2。18.如权利要求1至17中任一项所述的抗体，其还包含半衰期延长部分。19.如权利要求1至18中任一项所述的抗体，其还包含可检测的标记。20.如权利要求1至19中任一项所述的抗体，其还包含治疗剂。21.如权利要求1至17中任一项所述的抗体，其还包含放射性同位素。22.如权利要求1至17中任一项所述的抗体，其还包含化疗或放疗剂。23.一种药物组合物，其包含如权利要求1至22中任一项所述的抗体。24.一种或多种多核苷酸，其编码如权利要求1至17中任一项所述的抗体。25.一种或多种载体，其包含如权利要求24所述的一种或多种多核苷酸。26.一种宿主细胞，其包含如权利要求24所述的一种或多种多核苷酸或如权利要求25所述的一种或多种载体。
27.一种制备抗整联蛋白抗体的方法，所述方法包括：(a)在允许所述抗体表达的条件下培养如权利要求26所述的宿主细胞；和(b)分离所述抗体。28.如权利要求27所述的方法，其还包括将所述抗体配制为适合施用于人的无菌制剂。29.一种治疗或预防有需要的人受试者的纤维化的方法，所述方法包括向所述人受试者施用治疗有效量的如权利要求1至20中任一项所述的抗体。30.如权利要求29所述的方法，其中所述纤维化选自由肝纤维化、肺纤维化、肾纤维化、心肌纤维化、关节纤维化、纵隔纤维化、骨髓纤维化、肾原性系统性纤维化、佩罗尼氏病、进行性块状纤维化、小气道纤维化、与慢性阻塞性肺病相关联的纤维化和腹膜后纤维化组成的组。31.如权利要求30所述的方法，其中所述纤维化是肝纤维化。32.如权利要求29所述的方法，其中所述纤维化是特发性肺纤维化。33.如权利要求29所述的方法，其中所述纤维化是硬皮病/系统性硬化症。34.一种治疗或预防有需要的人受试者的慢性肾病的方法，所述方法包括向所述人受试者施用治疗有效量的如权利要求1至20中任一项所述的抗体。35.一种治疗或预防有需要的人受试者的癌症的方法，所述方法包括向所述人受试者施用治疗有效量的如权利要求1至22中任一项所述的抗体。36.如权利要求35所述的方法，其中所述癌症是上皮来源的，并且任选地其中所述上皮来源的癌症是鳞状细胞癌、腺癌、移行细胞癌或基底细胞癌。37.如权利要求35所述的方法，其中所述癌症选自由胰腺癌、乳腺癌、黑素瘤、前列腺癌、卵巢癌、宫颈癌、脑和中枢神经系统肿瘤以及成胶质细胞瘤组成的组。38.一种抑制有需要的人受试者的血小板聚集的方法，所述方法包括向所述人受试者施用治疗有效量的如权利要求1至20中任一项所述的抗体。39.如权利要求38所述的方法，其中所述抑制用于治疗急性冠状动脉综合征。40.一种治疗或预防有需要的人受试者的眼科疾病或病症的方法，所述方法包括向所述人受试者施用治疗有效量的如权利要求1至20中任一项所述的抗体。41.如权利要求40所述的方法，其中所述眼科疾病或病症选自由年龄相关性黄斑变性(amd)、湿性amd、黄斑水肿和糖尿病性视网膜病组成的组。42.一种治疗或预防有需要的人受试者的急性肾损伤、急性肺损伤或急性肝损伤的方法，所述方法包括向所述人受试者施用治疗有效量的如权利要求1至20中任一项所述的抗体。43.一种治疗或预防有需要的人受试者的非酒精性脂肪肝病(nafld)的方法，所述方法包括向所述人受试者施用治疗有效量的如权利要求1至20中任一项所述的抗体。44.如权利要求43所述的方法，其中所述nafld是非酒精性脂肪性肝炎(nash)。45.一种鉴定与αvβ1整联蛋白特异性结合但不与来自抗体群的其他整联蛋白结合的抗体的方法，所述方法包括使用指导抗体进行的指导选择来选择所述抗体，所述指导抗体是如权利要求1、2、4或6-12所述的抗体中的任一种。46.如权利要求45所述的方法，其中所述抗体群包含在原核细胞的表面上表达的抗体文库。
47.如权利要求45所述的方法，其中所述抗体群包含在真核细胞的表面上表达的抗体文库48.如权利要求45所述的方法，其中所述抗体群包含在酵母细胞的表面上表达的抗体文库。49.如权利要求45至48中任一项所述的方法，其包括选择与一种或多种包含αv和β1的胞外结构域的多肽结合的抗体的步骤，任选地其中所述步骤在不存在阳离子、存在钙和镁或存在锰的情况下进行，并且还任选地，其中所述选择通过macs和/或facs进行。50.如权利要求45至49中任一项所述的方法，其还包括消耗与一种或多种选自由αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α5β1、α8β1和α4β1组成的组的整联蛋白结合的抗体。51.如权利要求45至50中任一项所述的方法，其还包括通过选择与αvβ1整联蛋白结合的抗体来富集与αvβ1整联蛋白特异性结合的抗体。52.如权利要求45至51中任一项所述的方法，其还包括使所述所选的抗体亲和力成熟。53.一种从抗体群中鉴定抗体的方法，其中所述抗体与αvβ1整联蛋白和αvβ6整联蛋白两者特异性结合，所述方法包括使用指导抗体进行的指导选择来选择所述抗体，所述指导抗体是如权利要求1、2、4或6-12所述的抗体中的任一种。54.如权利要求53所述的方法，其中所述抗体群包含在原核细胞的表面上表达的抗体文库。55.如权利要求53所述的方法，其中所述抗体群包含在真核细胞的表面上表达的抗体文库56.如权利要求53所述的方法，其中所述抗体群包含在酵母细胞的表面上表达的抗体文库。57.如权利要求53至56中任一项所述的方法，其包括选择与一种或多种包含αv和β1的胞外结构域和/或αv和β6的胞外结构域的多肽结合的抗体的步骤，任选地其中所述步骤在不存在阳离子、存在钙和镁或存在锰的情况下进行，并且还任选地，其中所述选择通过macs和/或facs进行。58.如权利要求53至57中任一项所述的方法，其还包括消耗与一种或多种选自由αvβ3、αvβ5、αvβ8、α5β1、α8β1和α4β1组成的组的整联蛋白结合的抗体。59.如权利要求53至58中任一项所述的方法，其还包括通过选择与αvβ1整联蛋白和αvβ6整联蛋白结合的抗体富集与αvβ1整联蛋白和αvβ6整联蛋白特异性结合的抗体。60.如权利要求53至59中任一项所述的方法，其还包括使所述所选的抗体亲和力成熟。

技术总结
公开了抗整联蛋白抗体。还公开了使用所述抗体治疗或预防诸如纤维化疾病、癌症、眼科病症和NAFLD的病症的方法。还公开了选择与αvβ1特异性结合的抗体或与αvβ1和αvβ6结合的抗体或与整联蛋白的RGD亚家族的一个或多个成员结合的抗体的方法。员结合的抗体的方法。员结合的抗体的方法。


技术研发人员：C.格拉夫 C.帕尔默 B.布莱克利 T.马伦 A.加德特
受保护的技术使用者：比奥根MA公司
技术研发日：2020.04.08
技术公布日：2022/1/28