一类2，4-二取代噻唑结构的PPARα/δ双重激动剂及其应用的制作方法

一类2，4-二取代噻唑结构的ppar
α
/
δ
双重激动剂及其应用
技术领域
1.本发明属于医药技术领域，具体涉及一类2，4-二取代噻唑结构的pparα/δ双重激动剂及其应用。


背景技术：

2.非酒精性脂肪性肝炎(nash)，主要表现为不明原因的肝内脂肪蓄积，通常伴有炎症和细胞内损伤,好发于中老年特别是超重肥胖个体。nash是一种以炎症和瘢痕组织为特征的脂肪肝疾病，进一步发展可导致肝硬化，并且在某些严重情况下可导致肝癌。在过去20年里，其前驱疾病—非酒精性脂肪性肝病的发病率已翻倍，成为导致患慢性肝病及肝酶异常的首要原因。
3.nash的发病机制现在比较公认的是“二次打击”学说。“第一次打击”是肝脏脂肪堆积，即肝细胞内脂质内流增加、脂肪酸β氧化能力下降、甘油三酯外流减少、胰岛素抵抗等；“第二次打击”是肝脏炎症反应及纤维化，主要表现为氧化应激增强及各种炎症因子增多、肝细胞坏死等。
4.过氧化物酶体增殖物激活受体(ppar)家族包括三个亚型，分别是pparα、pparδ和pparγ，三者均在代谢调控方面发挥重要作用。pparα主要分别于肝细胞、心机细胞、棕色脂肪细胞上，调控脂质代谢和胆汁酸合成过程中所需基因蛋白的表达。激活pparα会增加胆汁酸合成及转运基因例如cyp7a1、cyp27a1、ugt1a1、mdr3和asbt等的转录翻译，结果是nf-κβ被抑制，进而导致白细胞因子il-1β和il-6的表达减少，炎症降低。pparδ主要表达在肝细胞、kupffer细胞、星形细胞上，激活pparδ能够促进脂肪酸氧化、减少胆固醇吸收和合成、抵御炎症纤维化等作用。


技术实现要素：

5.本发明针对上述现有技术存在的不足，提供一类2，4-二取代噻唑结构的pparα/δ双重激动剂及其应用。
6.本发明的第一个目的在于，提供一类2，4-二取代噻唑结构的pparα/δ双重激动剂，含有有效量的式(i)所示化合物或/和其药学上可接受的衍生物：
[0007][0008]
其中，r1和r2分别独立地选自氢原子、卤素、c
1-c6烷基、c
2-c6烯基、c
2-c6炔基、卤化的c
1-c6烷基、羟基、-och2o-、-or5、-nh2、-nhr5、-nr5r6、ar环；
[0009]
其中，ar环是任选自被0～5个选自取代基组a的基团取代的c
6-c
10
芳基；
[0010]
取代基组a包括：c
1-c6烷基、c
2-c6烯基、c
2-c6炔基、卤化的c
1-c6烷基、卤素、氰基、氨基、羟基、-nhoh、-nh-o-(c
1-c6烷基)、-nh-(c
1-c6烷基)、-n(c
1-c6烷基)2、-c(o)nh2、-c(o)nh-(c
1-c6烷基)、-c(o)n(c
1-c6烷基)2、-nhc(o)-(c
1-c6烷基)、-nhc(o)-(c
3-c8环烷基)、-n(c
1-c6烷基)c(o)h、-n(c
1-c6烷基)c(o)-(c
1-c6烷基)、-nhc(o)nh2；
[0011]
r3和r4分别独立地选自氢原子、c
1-c6烷基、c
2-c6烯基、c
2-c6炔基、卤化的c
1-c6烷基、羟基、-or5、-nh2、-nhr5、-nr5r6、卤素，并且r3和r4分别独立地位于苯环的2、3、5或6位；
[0012]
其中r5和r6分别独立地选自氢原子、c
1-c6烷基、卤化的c
1-c6烷基。
[0013]
进一步，所述的衍生物包括盐、酯、溶剂化物、水合物、异构体、晶型或其前药。
[0014]
进一步，r1和r2分别独立地选自氢原子、c
1-c6烷基、卤化的c
1-c6烷基、卤素，并且r1和r2分别独立地位于苯环的2、3或4位；r3和r4分别独立地选自氢原子、c
1-c6烷基、卤化的c
1-c6烷基、卤素，并且r3和r4分别独立地位于苯环的2、3、5或6位。
[0015]
进一步，所述的pparα/δ双重激动剂结构式如下：
[0016][0017]
本发明的第二个目的在于，提供上述pparα/δ双重激动剂在治疗和/或预防与pparα/δ活性有关疾病的领域的应用，尤其是在糖尿病、动脉粥样硬化、非酒精性脂肪肝领域的应用。
[0018]
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
[0019]
本发明提供的化合物或/和其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物、水合物、异构体、晶型或其前药可用于治疗和/或预防与pparα/δ活性有关的疾病，例如糖尿病、动脉粥样硬化、非酒精性脂肪肝等，对pparα/δ具有良好的激动活性。
附图说明
[0020]
图1体现了实施例6中化合物6对mcd饮食造成的nash模型小鼠肝脏指标的影响。
具体实施方式
[0021]
以下结合实例对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
[0022]
实施例1
[0023]
化合物1—2-(2,6-二甲基-4-((4-苯基噻唑-2-基)甲氧基)苯氧基)-2-甲基丙酸的制备：
[0024][0025]
步骤1：
[0026][0027]
取100ml茄形瓶，将取代的溴代苯乙酮(5mmol)溶于乙醇(30ml)中，加入硫代草氨酸乙酯(5mmol)，80℃下回流6小时。tlc检测反应结束后，冷却至室温，旋干溶剂，用乙酸乙酯稀释后依次用1n碳酸氢钠水溶液、饱和nacl水溶液洗涤，最后有机相用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经硅胶柱层析纯化得到白色固体产物4-苯基噻唑-2-羧酸乙酯(产率73.8％)。
[0028]
步骤2：
[0029][0030]
取100ml茄形瓶，将化合物4-苯基噻唑-2-羧酸乙酯(3mmol)溶于冰水浴的无水四氢呋喃中，氢化铝锂(12mmol)分批次加入反应液中，维持0℃反应。tlc检测反应结束后，加水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取反应液，合并有机相用饱和nacl水溶液洗涤，最后用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得到无色油状产物(4-苯基噻唑-2-基)甲醇(产率82.1％)。
[0031]
步骤3：
[0032][0033]
取50ml茄形瓶，将化合物(4-苯基噻唑-2-基)甲醇(2mmol)溶于dcm(10ml)中，加入
三乙胺(3mmol)，滴加甲磺酰氯(3mmol)，室温反应。tlc检测反应结束后，加水淬灭反应，用dcm萃取反应液，合并有机相用饱和nacl水溶液洗涤，最后用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得到无色油状产物(4-苯基噻唑-2-基)甲基甲磺酸酯(产率85.3％)。
[0034]
步骤4：
[0035][0036]
取25ml茄形瓶，将化合物(4-苯基噻唑-2-基)甲基甲磺酸酯(238mg,1mmol)和化合物2-(4-羟基-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸甲酯(1mmol)溶于无水dmf(3ml)中，加入无水碳酸钾(276mg,2mmol)，氮气保护下80℃反应6小时。tlc检测反应结束后，加水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取反应液，合并有机相用饱和nacl水溶液洗涤，最后用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经硅胶柱层析纯化得到白色固体产物2-(2,6-二甲基-4-((4-苯基噻唑-2-基)甲氧基)苯氧基)-2-甲基丙酸甲酯(产率78.1％)。
[0037]
步骤5：
[0038][0039]
取25ml茄形瓶，将化合物2-(2,6-二甲基-4-((4-苯基噻唑-2-基)甲氧基)苯氧基)-2-甲基丙酸甲酯(0.5mmol)溶于四氢呋喃(2ml)中，加入2n naoh水溶液(2ml)，室温反应过夜。tlc检测反应结束后，加1n稀盐酸水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取反应液，合并有机相用饱和nacl水溶液洗涤，最后用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得到白色固体产物2-(2,6-二甲基-4-((4-苯基噻唑-2-基)甲氧基)苯氧基)-2-甲基丙酸(产率96.2％)。
[0040]
实施例2
[0041]
化合物2—2-(4-((4-(2-氯苯基)噻唑-2-基)甲氧基)-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸的制备：
[0042][0043]
该化合物的合成方法参考实施例1，将实施例1中步骤(1)中的起始原料溴代苯乙酮换成化合物2-氯-溴代苯乙酮，最终得到化合物2-(4-((4-(2-氯苯基)噻唑-2-基)甲氧基)-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸。
[0044]
实施例3
[0045]
化合物3—2-(4-((4-(3-氯苯基)噻唑-2-基)甲氧基)-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲
基丙酸的制备：
[0046][0047]
该化合物的合成方法参考实施例1，将实施例1中步骤(1)中的起始原料溴代苯乙酮换成化合物3-氯-溴代苯乙酮，最终得到化合物2-(4-((4-(3-氯苯基)噻唑-2-基)甲氧基)-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸。
[0048]
实施例4
[0049]
化合物4—2-(4-((4-(2,4-二氯苯基)噻唑-2-基)甲氧基)-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸的制备：
[0050][0051]
该化合物的合成方法参考实施例1，将实施例1中步骤(1)中的起始原料溴代苯乙酮换成化合物2，4-二氯-溴代苯乙酮，最终得到化合物2-(4-((4-(2,4-二氯苯基)噻唑-2-基)甲氧基)-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸。
[0052]
实施例5
[0053]
化合物5—2-(2,6-二甲基-4-((4-(4-(三氟甲基)苯基)噻唑-2-基)甲氧基)苯氧基)-2-甲基丙酸的制备：
[0054][0055]
该化合物的合成方法参考实施例1，将实施例1中步骤(1)中的起始原料溴代苯乙酮换成化合物4-三氟甲基溴代苯乙酮，最终得到化合物2-(2,6-二甲基-4-((4-(4-(三氟甲基)苯基)噻唑-2-基)甲氧基)苯氧基)-2-甲基丙酸。
[0056]
实施例6
[0057]
化合物6—2-(4-((4-(2-甲氧基苯基)噻唑-2-基)甲氧基)-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸的制备：
[0058][0059]
该化合物的合成方法参考实施例1，将实施例1中步骤(1)中的起始原料溴代苯乙酮换成化合物2-甲氧基溴代苯乙酮，最终得到化合物2-(4-((4-(2-甲氧基苯基)噻唑-2-基)甲氧基)-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸。
[0060]
实施例7
[0061]
化合物7—2-(4-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)甲氧基)-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸的制备：
[0062][0063]
该化合物的合成方法参考实施例1，最终得到化合物2-(4-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)甲氧基)-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸。
[0064]
实施例8
[0065]
化合物8—2-(4-((4-(3，4-二氧杂环戊烷苯基)噻唑-2-基)甲氧基)-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸的制备：
[0066]
[0067]
该化合物的合成方法参考实施例1，最终得到化合物2-(4-((4-(3，4-二氧杂环戊烷苯基)噻唑-2-基)甲氧基)-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸。
[0068]
实施例9
[0069]
化合物9—2-(4-((4-([1,1'-联苯基]-4-基)噻唑-2-基)甲氧基)-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸的制备：
[0070][0071]
该化合物的合成方法参考实施例1，最终得到2-(4-((4-([1,1'-联苯基]-4-基)噻唑-2-基)甲氧基)-2,6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸。
[0072]
实施例10
[0073]
化合物2—2-(2,6-二氟-4-((4-苯基噻唑-2-基)甲氧基)苯氧基)-2-甲基丙酸的制备：
[0074][0075]
该化合物的合成方法参考实施例1，最终得到2-(2,6-二氟-4-((4-苯基噻唑-2-基)甲氧基)苯氧基)-2-甲基丙酸。
[0076]
实施例11
[0077]
化合物12—2-(3,5-二甲基-4-((4-苯基噻唑-2-基)甲氧基)苯氧基)-2-甲基丙酸的制备：
[0078][0079]
该化合物的合成方法参考实施例1，最终得到2-(3,5-二甲基-4-((4-苯基噻唑-2-基)甲氧基)苯氧基)-2-甲基丙酸。
[0080]
测试结果
[0081]
本发明实施例1-11所得化合物的1h-nmr、hrms的测试结果见表1。
[0082]
表1化合物的1h-nmr、hrms的测试结果
[0083][0084]
[0085][0086][0087]
生物学评价
[0088]
试验1：双荧光素酶报告基因实验
[0089]
试剂：
[0090]
名称供货商货号mem培养基gibco31985070lipofectamine 2000invitrogen11668-019胎牛血清gibco10091148dmem培养基gibcoc11995500bt双荧光素酶报告基因检测试剂盒promegae2p20
[0091]
试验方法：
[0092]
取对数生长期293t细胞以1.6
×
105个/ml接种细胞于24孔培养板中，每孔500μl，24h待细胞贴壁后，参照转染试剂说明书操作，分别转染pparα ppre 海肾对照质粒，pparδ ppre 海肾对照质粒分别构建pparα和pparδ报告基因评价体系。12小时之后，将阳性对照化合物gft-505和测试化合物用培养基分别稀释至测试浓度1μm，加入24孔培养板中。12小时之后，按照双荧光素酶报告基因检测试剂盒的说明书操作，检测luciferase值。计算结果萤火虫荧光素酶表达强度＝萤火虫荧光强度/海肾荧光强度。
[0093]
化合物筛选结果见表2。
[0094]
表2
[0095][0096][0097]
由表2中的试验数据可知，上述化合物对pparα/δ具有良好的激动活性。
[0098]
试验2：化合物6的体内抗nash实验
[0099]
实验方法：
[0100]
用mcd饮食喂养db/db小鼠7周造nash模型，造模的同时伴随给予化合物6和gft-505，7周后处死小鼠取样检测。
[0101]
结果如图1所示，与对照饮食组(ctrl diet)相比，mcd饮食组(vehicle)肝脏内总胆固醇(tc)和甘油三酯(tg)水平、血清中谷丙转氨酶(alt)水平都显著上升，说明肝脏内脂质堆积伴随炎症纤维化反应。给药组化合物6和gft-505均能明显下调血清alt、肝脏内tc和tg水平。这表明化合物6具有明显的降脂和抗炎作用，能够发挥抗nash作用。
[0102]
药用片剂的制备：
[0103]
将实施例6制备的化合物6(1g)与乳糖(23g)和微晶纤维素(5.7g)用混合机混合。用滚轴压紧机将所得混合物压制成型，值得薄片状压制物料。用锤式粉碎机将所述薄片状压制物料研磨成粉，使所得粉状物料通过20目筛过筛。将轻质二氧化硅(0.3g)和硬脂酸镁(0.3g)加入到已过筛的物料中，并混合。所得混合产物用制片机压片，制备片剂。
[0104]
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。