一种包含阴离子多糖的百草枯组合物及其应用的制作方法

1.本发明属于农药领域，特别是涉及一种包含阴离子多糖的百草枯组合物及其应用。


背景技术：

2.百草枯为快速非选择性的季铵盐除草剂，因其除草效果强且价格低廉而被广泛应用于农业耕作中，为世界各地的粮食增产、生产成本降低以及免耕技术的发展做出了巨大贡献，其带来的经济效益是不可估量的。但是百草枯作为高毒性化合物也会导致哺乳动物，尤其是人的不可逆肺损伤和纤维化，并且在摄取后数天至3周之间发生恶化，其中每年会有人因摄入百草枯而死亡。
3.百草枯中毒严重威胁着患者生命安全及身体的健康状态。百草枯中毒的常规治疗方法是催吐和洗胃，百草枯中毒的新型治疗方法目前主要有肺移植、骨髓间充质干细胞移植和甲基强的松龙联合技术等。
4.然而，上述常规治疗方法只能在一定程度上缓解病情，并不能完全控制病情进展并最终治愈，而且均为事后治愈，对于哺乳动物和人的损伤已经造成。尤其是肺移植、干细胞移植等高尖端技术尚不够成熟。如，肺移植治疗方法，部分病例会再次出现纤维化；骨髓间充质干细胞移植联合甲基强的松龙治疗百草枯中毒，会造成严重的并发症如肺部感染、药物性肝肾损害等。
5.目前所采取的措施主要是希望尽早降低血中百草枯浓度，将治疗“时间窗口”前移，如何彻底清除肠道内残存的百草枯，减少后续对肺组织的持续损害。
6.现有针对百草枯中毒的解救方法以预防及对症救治为主，一般是通过直接解毒，间接解毒或促进百草枯代谢的方法进行救治，包括血液透析等体外治疗方法因较少涉及到中毒后的治疗环节，虽能在一定程度上减缓病情，但是对于疗效不能有确切的把控。现有的治疗药物中，以化学螯合剂或大分子吸附剂居多，但因为安全性差以及可能产生更大的毒副作用，所以难以用于人体。对于中药方剂的组合疗法，其物质基础及解毒机理不明，生药原料、炮制方法、个别药材的强肝毒性、配伍剂量以及个体差异等影响因素均会干扰药效，使得防治效果不确定。但是目前并没有有效的提前预防百草枯中毒，尤其是误服的情况下避免百草枯中毒的方法。因此，对于百草枯的中毒机制以及解毒剂的探究是十分重要的。
7.本发明发现了对于百草枯更加有效的毒性阻止途径，就是阻断人体肠胃对百草枯的吸收，阻断百草枯进入哺乳动物的血液，这样使得百草枯即使进入哺乳动物肠道也不会马上造成哺乳动物中毒或者是能够完全避免哺乳动物中毒。


技术实现要素：

8.为解决上述技术问题，本发明提供了一种对哺乳动物减毒的百草枯组合物，所述百草枯组合物包含百草枯和阴离子多糖，阴离子多糖具有如下化学式a的结构：
a其中rx为c
0-c
10
的烷基，ra
m-为阴离子取代基，m为1、2或3，ru为糖单元或被取代基取代的糖单元，n为糖单元的数量，n为大于6的整数；其特征在于，所述百草枯组合物的水溶液在百草枯质量浓度为2g/l的情况下的zeta电势小于零。
9.优选的，上述百草枯组合物中，所述百草枯组合物的水溶液在百草枯质量浓度为2g/l情况下的zeta电势为-80至0mv，优选的，所述百草枯组合物的水溶液在百草枯质量浓度为2g/l情况下的zeta电势为-40至-1mv。
10.zeta电势又称作zeta电位（zeta potential），又叫电动电位或电动电势（ζ-电位或ζ-电势），是指剪切面(shear plane)的电位，是表征胶体分散系稳定性的指标。
11.由于包含百草枯和阴离子多糖的组合物溶于水溶液后分散，阴离子多糖分散为粒状体，粒状体表面带有负电荷从而吸引百草枯阳离子，这样使得粒状体的zeta电势为负值，百草枯的分散被破坏而发生凝结或凝聚，使得百草枯分子难以逃离出阴离子多糖形成的粒状体。阴离子多糖除了具有负电荷能够吸附百草枯分子，阴离子多糖还能够形成网状或球状结构而缠绕或包裹百草枯分子，使得百草枯分子无法脱离阴离子多糖，这样就使得百草枯的组合物进入哺乳动物体内后无法被肠胃吸收，无法形成对哺乳动物的毒性。
12.优选的，上述百草枯组合物中，所述百草枯组合物溶于水中形成水溶液后，在水溶液中阴离子多糖和百草枯形成环状分子体系，环状分子体系的表现状态为溶液中形成粒状体。
13.优选的，上述百草枯组合物中，所述百草枯组合物稀释到2g/l的情况下，溶液中的粒状体的平均粒径为0.01-100um，优选的，粒状体的平均粒径为10-500nm，尤其优选的，粒状体的平均粒径为10-250nm；优选的，所述粒状体为球囊粒子。
14.优选的，上述百草枯组合物中，所述糖单元ru除了键合ra外，ru糖单元上不被阳离子基团取代，例如-nh
3
，糖单元ru为中性或阴性。
15.优选的，上述百草枯组合物中，所述糖单元ru为d-葡萄糖、果糖、甘露糖、半乳糖、木糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸，l-岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖中的一种或多种。
16.优选的，上述百草枯组合物中，所述阴离子取代基为-coo-、-so
42-、-no
3-、-po
33-或-so
32-。
17.优选的，上述百草枯组合物中，其中rx为c0烷基的时候，所述rx为化学键，也就是ra直接与糖单元连接。
18.优选的，上述百草枯组合物中，所述阴离子多糖为水溶性的，所述水溶性是指阴离子多糖在水溶液中的溶解度大于50g/100ml水，或者阴离子多糖中水不溶物重量占阴离子多糖的重量百分比小于等于1.0%，优选的，小于等于0.5%；在本发明中，减毒的含义是能够降低百草枯的毒性，减毒剂就是在百草枯被哺乳动物误服之前包含在百草枯组合物中，哺乳动物误服后不会中毒或者降低百草枯对哺乳动物的生理伤害的物质，减毒剂能够延迟百草枯对哺乳动物的伤害。本发明的降低百草枯对哺乳
动物毒性的减毒剂和本领域常说的解毒剂不同，本发明的减毒剂的使用方法是在百草枯被误服前就已经与百草枯混合，也就是在制备百草枯原药、母药或百草枯制剂的过程中就已经将减毒剂和百草枯混合，混合了减毒剂的百草枯即使被哺乳动物误服也不会导致中毒或者降低百草枯对哺乳动物的生理伤害，或者延迟对哺乳动物的伤害。本发明上下文的“减毒”的含义就是减少百草枯原药、母药、制剂等药剂对哺乳动物的毒性，通过在百草枯药剂中添加减毒剂，能够实现即使哺乳动物误服后也不会导致中毒或者降低百草枯对哺乳动物的毒害，延长哺乳动物中毒后治疗的窗口期。
19.优选的，上述百草枯组合物中，所述百草枯组合物中阴离子多糖和百草枯的重量比例范围使得百草枯组合物满足上述百草枯溶液的zeta电势和百草枯溶液中粒状体的平均粒径要求。
20.优选的，上述百草枯组合物中，百草枯与阴离子多糖的重量比为1：（0.01-50）；优选的，百草枯与阴离子多糖的重量比为1：（0.05-5.0）；尤其优选的，百草枯与阴离子多糖的重量比为1：（0.1-3.0）。
21.优选的，上述百草枯组合物中，百草枯组合物是由阴离子多糖和百草枯组成，其中百草枯与阴离子多糖的重量比为1：（0.05-5.0）；优选的，百草枯与阴离子多糖的重量比为1：（0.1-3.0），尤其优选的，百草枯与阴离子多糖的重量比为1：（0.1-2.0），特别优选的，百草枯与阴离子多糖的重量比为1：（0.1-1.0）。其中所述百草枯为百草枯原药或母药，也就是当百草枯组合物由阴离子多糖和百草枯组成的情况下，其中所述百草枯为制备百草枯制剂的原料，所述制备百草枯制剂的原料为百草枯原药、百草枯母药或含有合成杂质或合成溶剂的百草枯工业合成品。
22.优选的，上述百草枯组合物中，百草枯组合物由阴离子多糖、百草枯和农药用载体组成，其中所述农药载体为固体农药载体、液体农药载体或固体农药载体和液体农药载体的混合物，所述固体农药为矿物类填料、植物类填料、合成类填料中的一种或多种。优选的，所述矿物类填料选自硫磺、硅酸盐类填料、碳酸盐类填料、硫酸盐类填料、氧化物类填料、磷酸盐类填料中的一种或多种，优选的，所述液体农药载体为水、水溶性液体有机物或水和水溶性液体有机物的溶液。
23.当百草枯组合物由阴离子多糖、百草枯和农药用载体组成的情况下，所述百草枯组合物不需要添加例如乳化剂、润湿剂、分散剂等农药助剂就能够实现直接田间除草应用并且能够实现百草枯组合物对哺乳动物的减毒作用和效果。
24.其中，阴离子多糖对百草枯的减毒作用是本发明通过应用百草枯在哺乳动物的减毒试验中发现的，通过将水溶性的阴离子多糖与百草枯形成混合物进行毒性试验，也就是将由百草枯和阴离子多糖组成的组合物进行哺乳动物的毒性试验，验证了阴离子多糖能够降低百草枯在哺乳动物体内的毒性。
25.对于水溶性阴离子多糖来说，主要是用于上述百草枯组合物更加有益，水溶性阴离子多糖中更有利于减毒的是ph值为中性的水溶性阴离子多糖。
26.优选的，上述百草枯组合物中，所述阴离子多糖能够对1,1-二甲基-4,4-联吡啶二氯化物（cas号：1910-42-5）实现减毒作用，也能够对1,1-二甲基-4,4-联吡啶双硫酸单甲酯盐（cas号：2074-50-2）实现减毒作用，甚至是对于1,1-二甲基-4,4-联吡啶阳离子（cas号：4685-14-7）与氯离子和硫酸根离子外的阴离子形成的可溶性盐同样具有减毒作用。
27.所以，上述百草枯组合物中，所述百草枯为1,1-二甲基-4,4-联吡啶二氯化物、1,1-二甲基-4,4-联吡啶双硫酸单甲酯盐或1,1-二甲基-4,4-联吡啶阳离子的其他可溶性盐，优选的，百草枯为1,1-二甲基-4,4-联吡啶二氯化物或1,1-二甲基-4,4-联吡啶双硫酸单甲酯盐。
28.优选的，本发明还提供了包含上述百草枯组合物的百草枯药剂，百草枯药剂中，百草枯组合物占百草枯药剂的重量百分比为5-99%，所述百草枯药剂为百草枯原药、百草枯母药或百草枯制剂，或百草枯药剂中，百草枯组合物占百草枯药剂的重量百分比为10-10000ppm，所述百草枯药剂为百草枯药液。
29.当百草枯药剂为百草枯原药的情况下，所述百草枯原药中除了包含阴离子多糖和百草枯外，还包含合成百草枯的过程中残留于其中的杂质；当百草枯组合物为母药的情况下，百草枯母药中除了包含阴离子多糖和百草枯外，还包含合成百草枯的过程中残留于其中的副产物、溶剂、催化剂中的一种或多种，还包含为稳定百草枯母药所添加的农药助剂或载体。当百草枯药剂为百草枯制剂的情况下，百草枯制剂中除了包含阴离子多糖和百草枯外，还包含制备百草枯制剂所需要的农用助剂或载体；当百草枯药剂为百草枯药液的情况下，百草枯药液中除了包含阴离子多糖和百草枯外，还包含制备百草枯制剂所需要的农用助剂或载体，以及稀释百草枯制剂的水溶液。
30.也就是说，百草枯组合物可以制备为百草枯原药、百草枯母药、百草枯制剂，甚至可以是百草枯制剂稀释后用于田间施药的百草枯药液。如果是高纯度百草枯，百草枯的纯度大于90%的情况下，可以直接将百草枯原药和阴离子多糖进行充分混合，充分混合后形成的百草枯药剂为百草枯原药，然后将原药制备成百草枯母药，也可以将该原药或母药制备成百草枯制剂，也可以将百草枯制剂用水稀释成能够在田间除草的药液。
31.无论上述百草枯药剂为原药、母药、制剂，或者为稀释成田间用药的药液，其中的阴离子多糖都能够实现对百草枯的减毒作用，也就是只要百草枯药剂中包含上述百草枯组合物后，其都能够使得哺乳动物误服后不会马上发生中毒，降低百草枯对哺乳动物的毒性。
32.优选的，上述百草枯药剂中，所述百草枯药剂为原药的情况下，该原药由百草枯原药与阴离子多糖混合形成，虽然阴离子多糖的加入使得百草枯原药的纯度降低，但是百草枯原药反而因为阴离子多糖的加入更加适于制备成百草枯母药或者是百草枯制剂，而且，因为阴离子多糖的作用，能够作为原药使用的百草枯药剂不用担心被哺乳动物误服，也就是在百草枯原药阶段能够避免哺乳动物误服而中毒，即使哺乳动物，例如人或牲畜，误服了上述百草枯原药及由上述原药制备的母药、制剂、药液，其也不会导致马上中毒。
33.优选的，上述百草枯药剂中，所述百草枯药剂为百草枯母药的况下，在制备百草枯母药过程中添加阴离子多糖，或者是制备为母药后添加阴离子多糖，通过添加阴离子多糖实现对百草枯的减毒，添加量根据上文所述，可以添加百草枯重量的0.1-3.0倍的阴离子多糖。这样既不影响百草枯母药的质量，又能够实现阴离子多糖对百草枯的减毒作用。所以，优选的，百草枯母药中百草枯的重量含量为30-45%，阴离子多糖的重量为3-70%。优选的，阴离子多糖的重量为3-45%。
34.优选的，上述百草枯药剂中，所述百草枯药剂为百草枯制剂，可以在制备百草枯制剂的过程中先将百草枯和阴离子多糖进行混合，然后根据剂型的要求添加农用助剂或载体；或者是直接应用上述百草枯原药或母药添加农用助剂或载体制备百草枯制剂。所述百
草枯制剂的剂型为可溶液剂，水溶性粒剂、水溶性颗粒剂、水溶粒剂、水分散性颗粒剂、颗粒剂、泡腾颗粒剂、泡腾片剂、水溶性膏剂、微胶囊悬浮剂中的一种，优选的，百草枯制剂的剂型为可溶液剂或水溶性粒剂。在百草枯制剂中，百草枯的重量含量为5-30%，阴离子多糖的重量含量为0.5-60%，或者，百草枯为可溶液剂，百草枯在可溶液剂中的含量为50-300g/l，阴离子多糖的含量为5-600g/l。
35.优选的，上述百草枯药剂中，所述百草枯药剂为百草枯药液，也就是能够直接喷施到杂草上进行除草的药液，百草枯药液的制备可以通过直接将上述百草枯组合物用水稀释得到百草枯药液，或者将上述通过百草枯组合物制备得到的百草枯制剂用水稀释得到百草枯药液。所述百草枯药液中，上述百草枯组合物占百草枯药剂的重量百分比为10-10000ppm，优选的，所述百草枯药液中百草枯的浓度小于等于5000ppm。优选的，所述百草枯药液中百草枯的浓度为100ppm-5000ppm，所述阴离子多糖的重量含量为百草枯的重量含量的0.1-3.0倍，也就是百草枯药液中阴离子多糖的浓度为10ppm-15000ppm。
36.本发明还提供了阴离子多糖用于制备对哺乳动物减毒的百草枯组合物的用途，所述阴离子多糖具有如下化学式a的结构：a其中rx为c
0-c
10
的烷基，ra
m-为阴离子取代基，m为1、2或3，ru为糖单元或被取代基取代的糖单元，n为糖单元的数量，n为大于6的整数。
37.优选的，上述用途中，所述糖单元ru除了键合ra外，ru糖单元上不被阳离子基团取代，例如-nh
3
，糖单元ru为中性或阴性。
38.优选的，上述用途中，所述糖单元ru为d-葡萄糖、果糖、甘露糖、半乳糖、木糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸，l-岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖中的一种或多种。
39.优选的，上述用途中，所述阴离子取代基为-coo-、-so
42-、-no
3-、-po
33-或-so
32-。
40.优选的，上述用途中，其中rx为c0烷基的时候，所述rx为化学键，也就是ra直接与糖单元连接。
41.优选的，上述用途中，所述阴离子多糖为水溶性，所述水溶性是指阴离子多糖在水溶液中的溶解度大于50g/100ml水，或者阴离子多糖中水不溶物重量占阴离子多糖的重量百分比小于等于1.0%，优选的，小于等于0.5%。
42.优选的，上述用途中，百草枯组合物的水溶液在百草枯质量浓度为2g/l的情况下的zeta电势小于零；优选的，所述百草枯组合物的水溶液在百草枯质量浓度为2g/l的情况下的zeta电势为-80至0mv，尤其优选的，所述百草枯组合物的水溶液在百草枯质量浓度为2g/l的情况下的zeta电势为-40至-1mv。
43.优选的，上述用途中，所述百草枯组合物稀释到2g/l的情况下，溶液中的粒状体的平均粒径为0.01-100um，优选的，粒状体的平均粒径为10-500nm，尤其优选的，粒状体的平均粒径为10-250nm；优选的，所述粒状体为球囊粒子。
44.优选的，上述用途中，百草枯为1,1-二甲基-4,4-联吡啶二氯化物或1,1-二甲基-4,4-联吡啶双硫酸单甲酯盐。
45.优选的，上述百草枯组合物和上述用途中，所述阴离子多糖为水溶性阴离子多糖，例如，水溶性的海藻酸盐、水溶性的海藻酸盐衍生物、水溶性的阴离子取代的环糊精衍生物的盐、水溶性的阴离子取代的纤维素衍生物的盐、水溶性的阴离子取代的淀粉衍生物的盐、水溶性的阴离子取代的木质素衍生物的盐、水溶性的透明质酸盐、水溶性的透明质酸衍生物的盐、水溶性的可德胶的阴离子基团取代的衍生物的盐、水溶性的黄原胶的盐、水溶性的黄原胶衍生物的盐、水溶性的果胶的盐、水溶性的果胶衍生物的盐等。上述百草枯组合物和上述用途中，所述阴离子多糖为水溶性的海藻酸盐、水溶性的海藻酸盐衍生物、水溶性的阴离子取代的环糊精衍生物的盐。
46.本发明还提供了制备对哺乳动物减毒的百草枯药剂的方法，其特征在于先将阴离子多糖和百草枯混合，形成百草枯组合物，然后将百草枯组合物制备成百草枯原药、百草枯母药、百草枯制剂或百草枯药液。或者，通过常规方法制备对哺乳动物减毒的百草枯药剂，也就是在制备百草枯原药、百草枯母药或百草枯制剂的过程中添加阴离子多糖，或者在制备完百草枯原药、百草枯母药、百草枯制剂后添加阴离子多糖，或者是将百草枯制剂稀释为百草枯药液的过程中添加阴离子多糖，或者是百草枯制剂稀释为百草枯药液后添加阴离子多糖，其中，在百草枯原药、百草枯母药、百草枯制剂和百草枯药液的方法中，阴离子多糖的添加量为百草枯重量的0.1-2.0倍。
47.本发明的有益效果1、本发明发现阴离子多糖与百草枯混合后形成的溶液的zeta电势为负值，也就是zeta电势为负值的情况下，包含阴离子多糖的百草枯组合物对哺乳动物的毒性是降低的，甚至为微毒或无毒。
48.2、本发明发现阴离子多糖与百草枯形成组合物后，组合物稀释后，其能够在水溶液中形成粒状体，实现了百草枯对哺乳动物的毒性降低，使得百草枯组合物被哺乳动物误服后，活性成分百草枯难以从粒状体中释放，也就无法被哺乳动物的肠胃吸收，阻断了百草枯进入哺乳动物血液，从而使得百草枯对哺乳动物无毒或者是微毒。
49.3、本发明在开发减毒百草枯组合物过程中，阴离子多糖能够用于制备对哺乳动物减毒的百草枯组合物，一方面通过对阴离子多糖和百草枯形成的组合物的溶液的zeta电势的性质、溶液中粒状体的状态分析，另一方面，通过动物毒性试验和除草试验验证阴离子多糖能够降低百草枯对哺乳动物毒性的情况下，还能够使得百草枯在除草效果上不降低，甚至能够提高百草枯的除草效果。
附图说明
50.图1为ca01、ca02、ca03和ca04的冷热储试验效果图。
51.图2为ca01的15000倍扫描电镜图。
52.图3为ca01的35000倍扫描电镜图。
53.图4为ca02的3500倍扫描电镜图。
54.图5为ca02的15000倍扫描电镜图。
55.图6为ca03的3500倍扫描电镜图。
56.图7为ca03的10000倍扫描电镜图。
57.图8为ca04的3500倍扫描电镜图。
58.图9为ca04的7500倍扫描电镜图。
具体实施方式
59.下面实施例中所采用的成分，42wt%百草枯母药（百分含量以1,1-二甲基-4,4'-联吡啶二氯化物的质量进行计算）、海藻酸钠、海藻酸钾、磺丁基-β-环糊精钠（钠盐）、羧甲基
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环糊精（钠盐）均为分析级，由市场购买。
60.实施例1：百草枯组合物的制备制备方法1：将百草枯和阴离子多糖按照比例进行混合，加入1000ml水中充分混合溶解，减压旋干水分并烘干，即可得到百草枯组合物。
61.根据制备方法1，按照如下表1的阴离子多糖和百草枯母药的比例配制组合物，制备的百草枯组合物序号、阴离子多糖品种（减毒剂品种）、阴离子多糖质量（减毒剂质量）、百草枯母液用量参见如下表1。
62.表1阴离子多糖和百草枯的组合物按照上述减毒剂品种、减毒剂质量和百草枯母液的质量进行组合物ca01-ca04的配制，在配制过程中未添加其他的助剂，所制备得到的组合物ca01-ca04经过烘干后为干品。将干品溶解为百草枯质量含量为20%的水剂，水剂没有分层也没有沉淀。对配制的水剂进行冷热储试验，在第56天的时候均没有发现分层现象和沉淀现象，说明仅仅用水溶性阴离子多糖配制百草枯制剂就能够实现百草枯制剂的稳定性。
63.例如，将ca01、ca02、ca03和ca04分别溶于水中，形成200g/l的百草枯水剂，对百草枯水剂进行稳定性试验，水剂稳定性试验条件是在54℃、7℃和-25℃下存储56天，然后观察百草枯水剂的稳定性，均为透明液体且没有分层和沉淀。具体结果参见图1，图1中显示通过稳定性试验的四个样品的制剂的外观照片。
64.实施例2百草枯组合物对哺乳动物的毒性试验将表1中的百草枯组合物ca01-ca04用无菌水溶液进行稀释，稀释到百草枯质量浓度为0.5%，作为试验样品，备用。设置对照组，对照组编号为ca05，对照组是将42wt%百草枯母药稀释到百草枯质量浓度为0.5%，作为对照样品备用。设置空白组样品，空白组样品编号为ca06，应用无菌水作为空白组样品。
65.将上述准备好的样品分别进行动物毒性试验，每个样品试验设置三个平行组，每个平行组为3只小鼠，每只小鼠分别注射600μl溶液，注射入胃内。然后观察每天小鼠的死亡数量和存活数量，将小鼠的存活数量进行统计，统计情况参见如下表2。
66.表2百草枯组合物对小鼠的存活率影响情况
在统计过程中，小鼠的死亡确定标准是不再有呼吸活动，只要具有呼吸活动就统计为存活。对于ca01和ca02来说，小鼠的存活质量比较高，到第7天开始出现小鼠的活动活跃度下降，到第12天的时候，存活的小鼠的活跃情况虽然减弱，但是依然能够活动。对于ca03和ca04来说，到第9天的时候开始出现小鼠死亡，到第12天的时候，小鼠依然存活8只和7只。表2的结果说明ca01和ca02对百草枯的减毒效果非常好，ca03和ca04相对于ca05来说减毒效果非常明显，能够保证百草枯中毒的小鼠存活时间在7天以上，而对于ca05来说，由于未添加减毒剂，其存活不会超过5天，在第6天不存在存活的小鼠。
67.实施例3百草枯组合物的除草效果将上述百草枯组合物稀释到如下表3中所示的浓度进行试验，验证添加阴离子多糖的百草枯组合物的除草效果。首先应用ca05的百草枯水剂进行浓度梯度试验，将对照百草枯组合物ca05的百草枯稀释到1000ppm（1mg/ml）、2000ppm（2mg/ml）和5000ppm（5mg/ml）的情况下在林间杂草地进行除草试验（林间地杂草的平均高度为20cm），施药时间为晴天中午，每个浓度设置三个平行，每个平行设置1平方米，施药后15天统计杂草死亡率。
68.其中杂草死亡率（也称作除草率或杂草防效）的计算方法为：对照组合物ca05在2000ppm和5000ppm的除草率为100%以上，1000ppm的百草枯药液的除草效果没有达到100%，为了具有可比性，将ca01-ca04的百草枯组合物稀释到1000ppm进行除草效果试验。试验地与百草枯对照样品相同地块，为林间试验地，每个百草枯的组合物样品的试验地设置三个重复，每个重复1平方米，以苘麻和稗草的杂草死亡率验证除草效果，其中ca06为空白对照，喷施清水，清水喷适量同百草枯药液的喷适量。将ca01-ca06进行林间杂草的除草效果情况参见如下表3。
69.表3含有阴离子多糖的百草枯组合物除草效果
从表3能够看出，在百草枯中加入阴离子多糖不仅不会影响百草枯的活性，而且阴离子多糖能够提高百草枯的除草效果。4个样品ca01-ca04对杂草苘麻和稗草的除草率都在97%以上。在相同的浓度下，相比较于百草枯对照组合物ca05来说，活性提高至少5个百分点，这充分显示了阴离子多糖对百草枯除草活性的稳定和效果的提升。
70.实施例4百草枯组合物的电镜扫描将ca01-ca04分别溶于水中，形成2g/l的百草枯水剂，对百草枯水剂进行电镜扫描，电镜扫描结果参见附图2-图9。图2为ca01的15000倍扫描电镜图，图3为ca01的35000倍扫描电镜图。图4为ca02的3500倍扫描电镜图，图5为ca02的15000倍扫描电镜图，图6为ca03的3500倍扫描电镜图，图7为ca03的10000倍扫描电镜图。图8为ca04的3500倍扫描电镜图，图9为ca04的7500倍扫描电镜图。
71.从图2-9能够看出，阴离子多糖和百草枯的组合物稀释后形成的水剂中，阴离子多糖包裹了百草枯形成粒状体结构。对扫描电镜图中的粒状体粒径进行统计分析，ca01中的粒状体的平均粒径在21.5nm，ca02中的粒状体的平均粒径在231.42nm，ca03中的粒状体的平均粒径在12.24nm，ca04中的粒状体的平均粒径在92.63nm。也就是说，ca01和ca02中海藻酸钠和海藻酸钾包裹百草枯形成的粒状体的平均粒径范围在20nm至250nm范围。ca03和ca04中磺丁基-β-环糊精、羧甲基-β-环糊精包裹百草枯形成的粒状体的平均粒径范围在10nm至100nm范围。
72.从图2-图9还能够看出，阴离子多糖包裹百草枯形成的粒状体为球囊粒子。
73.实施例5百草枯组合物的zeta电势试验将ca01、ca02、ca03、ca04分别溶于水中，形成2g/l的百草枯水剂，对百草枯水剂进行zeta电势测试，测试仪器采用市售的zeta电位仪进行测量，测试结果如下表4所示。
74.表4含有减毒剂的百草枯组合物的水溶液的zeta电势测量结果从表4的zeta电势的测量结果可以看出，具有低毒的百草枯水剂的zeta电势均小于0，ca01、ca02、ca03和ca04的zeta电势在-1至-40mv之间，而针对百草枯ca05进行测量，无法测
量出zeta电势。
75.上述实例仅仅是为清楚的说明而举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。