ABHD12抑制剂及其制造和使用方法与流程

abhd12抑制剂及其制造和使用方法
1.交叉引用
2.本技术要求于2019年5月14日提交的美国临时申请号62/847,804的权益，将该临时申请通过引用以其全文并入本文。


背景技术：

3.含α/β-水解酶结构域12(alpha/beta-hydrolase domain containing 12，abhd12)是由abhd12基因编码的丝氨酸水解酶，其参与中枢神经系统中内源性大麻素神经递质2-花生四烯酸甘油(2-arachidonylglycerol，2-ag)的分解。


技术实现要素：

4.本披露提供了，例如，为abhd12调节剂的化合物和组合物、和它们作为药剂的用途、它们的制备方法、以及包括所披露的化合物作为至少一种活性成分的药物组合物。本披露还提供了所披露的化合物作为用于抑制温血动物(如人类)中的abhd12活性的药物的用途和/或在制造用于抑制温血动物(如人类)中的abhd12活性的药物中的用途。
5.在一个方面中是选自以下的化合物：
6.7.或其溶剂化物、n-氧化物、立体异构体、或药学上可接受的盐。
8.在另一个实施例中是药物组合物，该药物组合物包含本文描述的化合物，或其溶剂化物、水合物、互变异构体、n-氧化物、或药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。
9.在另一个实施例中是治疗有需要的患者的疾病或障碍的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、水合物、互变异构体、n-氧化物、或药学上可接受的盐，其中该疾病或障碍是神经精神障碍、自体免疫性疾病、神经炎性疾病、神经退行性疾病、或癌症。在另一个实施例中是治疗有需要的患者的癌症的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、n-氧化物、立体异构体、或药学上可接受的盐，其中施用该化合物刺激了该患者的免疫系统。在另一个实施例中是治疗有需要的患者的癌症的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、n-氧化物、立体异构体、或药学上可接受的盐，其中施用该化合物引发免疫反应。在另一个实施例中是治疗有需要的患者的癌症的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、n-氧化物、立体异构体、或药学上可接受的盐，其中该化合物是免疫治疗剂。在另一个实施例中是治疗有需要的患者的传染病的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、n-氧化物、立体异构体、或药学上可接受的盐，其中施用该化合物刺激了该患者的免疫系统。
具体实施方式
10.本披露至少部分地涉及abhd12的调节剂或抑制剂。例如，本文提供了能够抑制abhd12的化合物。
11.除非上下文另有明确指示，否则如本文和所附权利要求书中所用的，单数形式“一个/种(a/an)”以及“该(the)”包括复数指代物。因此，例如，提及“一种药剂”包括多种此类药剂，并且提及“该细胞”包括提及一个或多个细胞(或多数个细胞)及其等同物。当范围在本文中用于物理特性(如分子量)或化学特性(如化学式)时，旨在包括范围以及其中的特定实施例的所有组合和子组合。当提及数字或数值范围时，术语“约”意指所提及的数字或数值范围是实验可变性内(或统计实验误差内)的近似值，并且因此该数字或数值范围在所述数字或数值范围的1％与15％之间变化。术语“包含(comprising)”(和相关术语，如“包含(comprise)”或“包含(comprises)”或“具有(having)”或“包括(including)”)不旨在排除在其他某些实施例(例如本文描述的物质的任何组合物、组成、方法、或过程等的实施例)中，可以“由所述特征组成”或“基本上由所述特征组成”的那种。
12.定义
13.除非有相反的规定，否则如说明书和所附权利要求书中所用的，以下术语具有以下所示的含义。
14.在一些实施例中，本文所披露的化合物含有一个或多个不对称中心，并且因此产生对映异构体、非对映异构体、以及其他按照绝对立体化学定义为(r)-或(s)-的立体异构形式。除非另有说明，否则旨在本文所披露的化合物的所有立体异构形式都被本披露考虑。当本文描述的化合物含有烯烃双键时，并且除非另有说明，否则旨在本披露包括e和z几何异构体(例如顺式或反式)两者。同样，也旨在包括所有可能的异构体以及它们的外消旋和光学纯的形式，以及所有互变异构形式。术语“几何异构体”是指烯烃双键的e或z几何异构体(例如顺式或反式)。术语“位置异构体”是指围绕中心环的结构异构体，例如围绕苯环的邻、间和对位异构体。
[0015]“互变异构体”是指以下分子，其中从分子的一个原子到同一分子的另一个原子的质子转移是可能的。在某些实施例中，本文呈现的化合物作为互变异构体存在。在其中互变异构化是可能的情况下，将存在互变异构体的化学平衡。互变异构体的确切比率取决于几种因素，包括物理状态、温度、溶剂和ph。互变异构平衡的一些实例包括：
[0016][0017]“药学上可接受的盐”包括酸加成盐和碱加成盐两者。本文描述的任何一种化合物的药学上可接受的盐旨在涵盖任何和所有药学上合适的盐形式。本文描述的化合物的优选药学上可接受的盐是药学上可接受的酸加成盐和药学上可接受的碱加成盐。
[0018]“药学上可接受的酸加成盐”是指保持游离碱的生物有效性和特性的那些盐，它们不是生物学上或以其他方式不希望的，并且是用无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、氢碘酸、氢氟酸、亚磷酸等形成的。还包括用有机酸形成的盐，这些有机酸如脂肪族单羧酸和二羧酸、苯基取代的烷酸、羟基烷酸、烷二酸、芳香酸、脂肪族和芳香族磺酸等，并且包括例如乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。因此，示例性盐包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、辛酸
盐、异丁酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐等。还考虑了氨基酸盐，如精氨酸盐、葡糖酸盐和半乳糖醛酸盐(参见例如，berge s.m.等人,“pharmaceutical salts[药用盐],”journal of pharmaceutical science[药物科学杂志],66:1-19(1997))。碱性化合物的酸加成盐通过以下方式制备：使游离碱形式与足够量的所希望的酸接触以产生盐。
[0019]“药学上可接受的碱加成盐”是指保持游离酸的生物有效性和特性的那些盐，它们不是生物学上或以其他方式不希望的。这些盐由向游离酸中添加无机碱或有机碱制备。在一些实施例中，药学上可接受的碱加成盐用金属或胺(如碱金属和碱土金属或有机胺)形成。衍生自无机碱的盐包括但不限于，钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、铝盐等。衍生自有机碱的盐包括但不限于以下项的盐：伯胺、仲胺和叔胺，取代胺(包括天然存在的取代胺)、环胺和碱性离子交换树脂，例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、二乙醇胺、2-二甲氨基乙醇、2-二乙氨基乙醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、n,n-二苄基亚乙基二胺、氯普鲁卡因、海巴明(hydrabamine)、胆碱、甜菜碱、乙二胺、亚乙基二苯胺、n-甲基葡糖胺、葡萄糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、n-乙基哌啶、聚胺树脂等。参见berge等人,同上。
[0020]
如本文所用的，“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”或“减轻”或“改善”在本文中可互换使用。这些术语是指获得有益或所希望结果(包括但不限于治疗益处和/或预防益处)的方法。“治疗益处”意指根除或改善正在治疗的潜在障碍。此外，通过根除或改善与潜在障碍相关的一种或多种生理症状获得治疗益处，使得尽管患者仍然患有该潜在障碍，但是在患者中观察到了改善。对于预防益处，将组合物施用至有发展特定疾病风险的患者、或报告疾病的一种或多种生理症状的患者，即使尚未作出该疾病的诊断。
[0021]
化合物
[0022]
本文描述的化合物是abhd12的调节剂。本文描述的化合物以及包含这些化合物的组合物可用于治疗选自以下的疾病或障碍：神经精神障碍、自体免疫性疾病、神经炎性疾病、神经退行性疾病、和癌症。在一些实施例中，本文描述的化合物以及包含这些化合物的组合物刺激患者的免疫系统以治疗疾病。在一些实施例中，疾病是传染病。在一些实施例中，疾病是癌症。
[0023]
在一些实施例中，本文所披露的化合物选自：
[0024]
[0025][0025]
或其溶剂化物、n-氧化物、立体异构体、或药学上可接受的盐。
[0026]
化合物的制备
guide to functional group preparations[综合有机转化：官能团制备指南]”第二版(1999)wiley-vch[威利-vch出版社],isbn：0-471-19031-4；march,j.“advanced organic chemistry：reactions,mechanisms,and structure[高等有机化学：反应、机制和结构]”第四版(1992)john wiley&sons[约翰
·
威利父子出版社],isbn：0-471-60180-2；otera,j.(编辑)“modern carbonyl chemistry[现代羰基化学]”(2000)wiley-vch[威利-vch出版社],isbn：3-527-29871-1；patai,s.“patai's 1992guide to the chemistry of functional groups[帕泰的1992年官能团化学指南]”(1992)interscience isbn：0-471-93022-9；solomons,t.w.g.“organic chemistry[有机化学]”第七版(2000)john wiley&sons[约翰
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威利父子出版社],isbn：0-471-19095-0；stowell,j.c.,“intermediate organic chemistry[中间体有机化学]”第二版(1993)wiley-interscience[威利国际科学出版社],isbn：0-471-57456-2；“industrial organic chemicals：starting materials and intermediates：an ullmann's encyclopedia[工业有机化学品：起始材料和中间体：乌尔曼百科全书]”(1999)john wiley&sons[约翰
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威利父子出版社],isbn：3-527-29645-x,8卷；“organic reactions[有机反应]”(1942-2000)john wiley&sons[约翰
·
威利父子出版社],超过55卷；以及“chemistry of functional groups[官能团化学]”john wiley&sons[约翰
·
威利父子出版社],73卷。
[0029]
特定的和类似的反应物也通过美国化学学会化学文摘服务编制的已知化学品索引来识别，这些索引在大多数公共图书馆和大学图书馆，以及通过在线数据库(华盛顿特区的美国化学学会(the american chemical society,washington,d.c.))可得。在目录中已知但不可商购的化学品任选地由定制化学品合成公司制备，其中许多标准化学品供应公司(例如上面列出的那些)提供定制合成服务。本文描述的化合物的药用盐的制备和选择的参考文献是p.h.stahl&c.g.wermuth“handbook of pharmaceutical salts[药用盐手册]”,verlag helvetica chimica acta[瑞士化学学报出版社],苏黎世,2002。
[0030]
本文所披露的化合物的另外的形式
[0031]
异构体
[0032]
此外，在一些实施例中，本文描述的化合物作为几何异构体存在。在一些实施例中，本文描述的化合物具有一个或多个双键。本文呈现的化合物包括所有顺式(cis)、反式(trans)、顺(syn)、反(anti)、异侧(entgegen)(e)和同侧(zusammen)(z)异构体及其相应的混合物。在一些情况下，化合物作为互变异构体存在。本文描述的化合物包括在本文描述的式内的所有可能的互变异构体。在一些情况下，本文描述的化合物具有一个或多个手性中心，并且每个中心以r构型或s构型存在。本文描述的化合物包括所有非对映异构体、对映异构体和差向异构体形式及其相应的混合物。在本文提供的化合物和方法的另外的实施例中，由单一制备步骤、组合或相互转化产生的对映异构体和/或非对映异构体的混合物可用于本文描述的应用中。在一些实施例中，本文描述的化合物通过外消旋混合物的手性色谱拆分制备为光学纯的对映异构体。在一些实施例中，通过使化合物的外消旋混合物与光学活性拆分剂反应形成一对非对映异构体化合物，分离非对映异构体并回收光学纯的对映异构体，将本文描述的化合物制备为它们独立的立体异构体。在一些实施例中，可离解的络合物是优选的(例如，结晶的非对映异构体盐)。在一些实施例中，非对映异构体具有不同的物理特性(例如熔点、沸点、溶解度、反应性等)并通过利用这些不同而被分离。在一些实施例
中，非对映异构体通过手性色谱法，或者优选地，通过基于溶解度差异的分离/拆分技术分离。在一些实施例中，然后通过任何不导致外消旋的实际手段，将光学纯的对映异构体与拆分剂一起回收。
[0033]
标记的化合物
[0034]
在一些实施例中，本文描述的化合物以它们的同位素-标记形式存在。在一些实施例中，本文所披露的方法包括通过施用此类同位素-标记的化合物来治疗疾病的方法。在一些实施例中，本文所披露的方法包括通过施用此类同位素-标记的化合物(作为药物组合物)来治疗疾病的方法。因此，在一些实施例中，本文所披露的化合物包括同位素-标记的化合物，其与本文列举的那些相同，但除了以下事实：一个或多个原子被具有不同于自然界中通常发现的原子量或质量数的原子量或质量数的原子所替代。结合到本文描述的化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟和氯的同位素，例如分别为2h、3h、
13
c、
14
c、
l5
n、
18
o、
17
o、
31
p、
32
p、
35
s、
18
f、和
36
cl。含有前述同位素和/或其他原子的其他同位素的本文描述的化合物及其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物、水合物或衍生物都在本发明的范围内。某些同位素-标记的化合物，例如结合了放射性同位素(如3h和
14
c)的那些，可用于药物和/或底物组织分布测定。含氚的(即3h)和碳-14(即
14
c)同位素因其易于制备和可检测而特别优选。此外，用重同位素如氘(即2h)取代产生了由更高的代谢稳定性产生的某些疗法优势，例如体内半衰期增加或剂量要求降低。在一些实施例中，同位素标记的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物、水合物或衍生物通过任何合适的方法制备。
[0035]
在一些实施例中，本文描述的化合物通过其他手段进行标记，包括但不限于使用发色团或荧光部分、生物发光标记、或化学发光标记。
[0036]
药学上可接受的盐
[0037]
在一些实施例中，本文描述的化合物作为它们的药学上可接受的盐存在。在一些实施例中，本文所披露的方法包括通过施用此类药学上可接受的盐来治疗疾病的方法。在一些实施例中，本文所披露的方法包括通过施用此类药学上可接受的盐(作为药物组合物)来治疗疾病的方法。
[0038]
在一些实施例中，本文描述的化合物具有酸性或碱性基团，并且因此与许多无机碱或有机碱以及无机酸和有机酸中的任何一种反应，形成药学上可接受的盐。在一些实施例中，这些盐在本文描述的化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，或者通过使呈其游离形式的经纯化的化合物与合适的酸或碱单独反应，并分离如此形成的盐制备。
[0039]
溶剂化物
[0040]
在一些实施例中，本文描述的化合物作为溶剂化物存在。在一些实施例中是通过施用此类溶剂化物来治疗疾病的方法。本文进一步描述了通过施用此类溶剂化物(作为药物组合物)来治疗疾病的方法。
[0041]
溶剂化物含有化学计量或非化学计量量的溶剂，并且在一些实施例中，在用药学上可接受的溶剂(如水、乙醇等)的结晶过程期间形成。当溶剂是水时形成水合物，或者当溶剂是醇时形成醇化物。本文描述的化合物的溶剂化物在本文描述的过程期间方便地制备或形成。仅举例而言，本文描述的化合物的水合物通过使用有机溶剂(包括但不限于二噁烷、四氢呋喃或meoh)从水性/有机溶剂混合物中重结晶来方便地制备。此外，本文提供的化合物以未溶剂化和溶剂化的形式存在。通常，为了本文提供的化合物和方法的目的，溶剂化的
形式被认为等同于未溶剂化的形式。
[0042]
药物组合物
[0043]
在某些实施例中，本文描述的化合物作为纯化学品施用。在一些实施例中，将本文描述的化合物与在所选施用路径和标准药学实践(如例如在remington：the science and practice of pharmacy[雷明顿:药学科学与实践](gennaro,第21版马克出版公司(mack pub.co.),伊斯顿,宾夕法尼亚州(2005))中所述)的基础上选择的药学上合适的或可接受的载体(在本文中也称为药学上合适的(或可接受的)赋形剂、生理学上合适的(或可接受的)赋形剂、或生理学上合适的(或可接受的)载体)组合。
[0044]
因此，本文提供了药物组合物，其包含至少一种本文描述的化合物，或其立体异构体、药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、或n-氧化物，连同一种或多种药学上可接受的载体。如果载体与组合物的其他成分相容并且对组合物的接受者(即受试者)无害，则一种或多种载体(或一种或多种赋形剂)是可接受的或合适的。
[0045]
一个实施例提供了药物组合物，其包含药学上可接受的赋形剂和本文描述的化合物、或其药学上可接受的盐。
[0046]
另一个实施例提供了药物组合物，其基本上由药学上可接受的赋形剂和本文描述的化合物、或其药学上可接受的盐组成。
[0047]
在某些实施例中，本文描述的化合物是基本上纯的，因为它含有小于约5％、或小于约1％、或小于约0.1％的其他有机小分子，例如，在例如合成方法的一个或多个步骤中产生的污染中间体或副产物。
[0048]
这些制剂包括适用于口服、直肠、局部、颊、肠胃外(例如皮下、肌内、皮内或静脉内)、阴道、经眼或气雾剂施用的那些，尽管在任何给定情况下最合适的施用形式将取决于所治疗病症的程度和严重性以及所使用的特定化合物的性质。例如，所披露的组合物被配制成单位剂量，和/或被配制用于口服或皮下施用。
[0049]
示例性药物组合物以药物制剂的形式使用，例如以固体、半固体或液体形式使用，其包括一种或多种所披露的化合物(作为活性成分，呈与适用于外部、肠内或肠胃外应用的有机或无机载体或赋形剂的混合物)。在一些实施例中，将活性成分例如与用于片剂、丸剂、胶囊、栓剂、溶液、乳剂、悬浮液、以及任何其他适合使用的形式的通常无毒的、药学上可接受的载体配混。活性目标化合物以足以对疾病的进展或状况产生所需效果的量包含于药物组合物中。
[0050]
在用于制备固体组合物(如片剂)的一些实施例中，将主要活性成分与药物载体，例如常规压片成分(如玉米淀粉、乳糖、蔗糖、山梨糖醇、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、磷酸二钙或树胶)，以及其他药物稀释剂(例如水)混合，以形成含有所披露的化合物或其无毒的药学上可接受的盐的均匀混合物的固体预制剂组合物。当将这些预制剂组合物称为均匀的时，意指活性成分均匀地分散在整个组合物中，使得组合物易于细分为同等有效的单位剂型，如片剂、丸剂和胶囊。
[0051]
在用于口服施用的固体剂型(胶囊、片剂、丸剂、糖衣丸、粉剂、颗粒剂等)中，将主题组合物与一种或多种药学上可接受的载体(如柠檬酸钠或磷酸二钙)，和/或以下的任何一种混合：(1)填充剂或增量剂，如淀粉、纤维素、微晶纤维素、硅化微晶纤维素、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、和/或硅酸；(2)粘合剂，例如像羧甲基纤维素、羟丙甲纤维素、藻酸盐、明
胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；(3)保湿剂，如甘油；(4)崩解剂，如交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、淀粉乙醇酸钠、琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐、以及碳酸钠；(5)溶液阻滞剂，如石蜡；(6)吸收促进剂，如季铵化合物；(7)润湿剂，例如像多库酯钠、鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(8)吸收剂，如高岭土和膨润土；(9)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠、及其混合物；以及(10)着色剂。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，在一些实施例中，组合物包含缓冲剂。在一些实施例中，相似类型的固体组合物也用作软填充和硬填充的明胶胶囊中的填充剂，这些胶囊使用如乳糖(lactose或milk sugars)以及高分子量聚乙二醇等的赋形剂。
[0052]
在一些实施例中，片剂通过任选地与一种或多种辅助成分压缩或模制而制成。在一些实施例中，使用粘合剂(例如，明胶或羟丙基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如，淀粉乙醇酸钠或交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂制备压缩片剂。在一些实施例中，模制片剂通过在合适的机器中模制用惰性液体稀释剂弄湿的主题组合物的混合物来制备。在一些实施例中，片剂和其他固体剂型(如糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂)被刻痕或制备有包衣和壳(如肠溶包衣和其他包衣)。
[0053]
用于吸入或吹入的组合物包括在药学上可接受的水性或有机溶剂或其混合物中的溶液和悬浮液，以及粉剂。用于口服施用的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除了主题组合物之外，在一些实施例中，液体剂型还含有惰性稀释剂(例如像水或其他溶剂)，增溶剂和乳化剂(如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇)，油(任选地棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)，甘油，四氢呋喃醇，聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯，环糊精及其混合物。
[0054]
在一些实施例中，除了主题组合物之外，悬浮液还含有悬浮剂，例如像乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇和脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝(aluminum metahydroxide)、膨润土、琼脂、黄蓍胶、及其混合物。
[0055]
在一些实施例中，用于直肠或阴道施用的制剂以栓剂的形式呈现，该栓剂通过将主题组合物与一种或多种合适的非刺激性赋形剂或载体(包括例如可可脂、聚乙二醇、栓剂蜡或水杨酸盐)混合来制备，并且在室温下是固体，但在体温下是液体，并且因此将在体腔中融化并释放活性剂。
[0056]
用于主题组合物经皮施用的剂型包括粉剂、喷雾剂、软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、溶液、贴片和吸入剂。在一些实施例中，将活性组分在无菌条件下与药学上可接受的载体混合，并根据需要与任何防腐剂、缓冲液或推进剂混合。
[0057]
在一些实施例中，除了主题组合物之外，软膏、糊剂、乳膏和凝胶还含有赋形剂，如动物和植物脂肪、油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、硅酸、滑石和氧化锌，或它们的混合物。
[0058]
在一些实施例中，除了主题组合物之外，粉剂和喷雾剂还含有赋形剂，如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉剂，或这些物质的混合物。在一些实施例中，喷雾剂另外含有常规推进剂，如氯氟烃和挥发性未取代烃，如丁烷和丙烷。
[0059]
在一些实施例中，本文描述的化合物被配制成用于经眼施用的滴眼剂。
[0060]
本文所披露的组合物和化合物可替代地通过气雾剂施用。这是通过制备含有该化
合物的水性气雾剂、脂质体制剂或固体颗粒来实现的。在一些实施例中，使用非水性(例如碳氟化合物推进剂)悬浮液。在一些实施例中，使用声波雾化器，因为它们使药剂暴露于剪切下最小化，该剪切导致包含在主题组合物中的化合物降解。通常，水性气雾剂是通过与常规药学上可接受的载体和稳定剂一起配制主题组合物的水溶液或悬浮液制备的。载体和稳定剂随特定主题组合物的要求而变化，但典型地包括非离子表面活性剂(吐温(tweens)、普朗尼克(pluronics)、或聚乙二醇)、无害蛋白质(像血清白蛋白)、脱水山梨糖醇酯、油酸、卵磷脂、和氨基酸(如甘氨酸)、缓冲液、盐、糖或糖醇。气雾剂通常由等渗溶液制备。
[0061]
适用于肠胃外施用的药物组合物包含与一种或多种药学上可接受的无菌等渗水溶液或非水溶液、分散体、悬浮液或乳剂、或无菌粉剂组合的主题组合物，这些无菌粉剂就在使用前现被重构为无菌可注射溶液或分散体，在一些实施例中，这些无菌可注射溶液或分散体含有抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂、溶质(使制剂与预期接受者的血液等渗)或悬浮剂或增稠剂。
[0062]
药物组合物中使用的合适的水性和非水性载体的实例包括水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)及其合适的混合物、植物油(如橄榄油)、和可注射的有机酯(如油酸乙酯)以及环糊精。例如通过使用包衣材料(如卵磷脂)，通过维持所需的粒度(在分散体的情况下)和通过使用表面活性剂来维持适当的流动性。
[0063]
还考虑了肠内药物制剂，其包括所披露的化合物、肠溶性材料、及其药学上可接受的载体或赋形剂。肠溶性材料是指基本上不溶于胃的酸性环境，并且在特定ph下主要溶于肠液的聚合物。小肠是在胃与大肠之间的胃肠道(消化道)部分，并且包括十二指肠、空肠和回肠。十二指肠的ph为约5.5，空肠的ph为约6.5并且回肠末端的ph为约7.5。因此，例如直至约5.0、约5.2、约5.4、约5.6、约5.8、约6.0、约6.2、约6.4、约6.6、约6.8、约7.0、约7.2、约7.4、约7.6、约7.8、约8.0、约8.2、约8.4、约8.6、约8.8、约9.0、约9.2、约9.4、约9.6、约9.8、或约10.0的ph，肠溶性材料是不溶的。示例性肠溶性材料包括乙酸邻苯二甲酸纤维素(cap)，邻苯二甲酸羟丙甲纤维素(hpmcp)，聚乙酸乙烯邻苯二甲酸酯(pvap)，乙酸琥珀酸羟丙甲纤维素(hpmcas)，乙酸偏苯三酸纤维素、琥珀酸羟丙甲纤维素，乙酸琥珀酸纤维素，乙酸六氢邻苯二甲酸纤维素，丙酸邻苯二甲酸纤维素，乙酸马来酸纤维素，乙酸丁酸纤维素，乙酸丙酸纤维素，甲基甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯的共聚物，丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸甲酯和甲基丙烯酸的共聚物，甲基乙烯基醚和马来酸酐的共聚物(gantrez es系列)，甲基丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯-氯三甲铵丙烯酸乙酯共聚物，天然树脂(如玉米蛋白、虫胶和柯巴松脂(copal collophorium))，以及几种可商购的肠溶性分散系统(例如，eudragit l30d55、eudragit fs30d、eudragit l100、eudragit s100、kollicoat emm30d、estacryl 30d、coateric、以及aquateric)。以上材料的每一种的溶解度是已知的，或是易于在体外可测定的。
[0064]
包含至少一种本文描述的化合物的组合物的剂量根据患者(例如人类)的病症，即疾病的阶段、总体健康状态、年龄和其他因素而不同。
[0065]
药物组合物以适合待治疗(或预防)的疾病的方式施用。施用的适当的剂量和合适的持续时间及频率将由如患者的状况、患者疾病的类型和严重性、活性成分的特定形式以及施用方法的此类因素决定。通常，适当的剂量和治疗方案以足以提供治疗和/或预防益处(例如，改善的临床结果，如更频繁的完全或部分缓解，或更长的无疾病期和/或总生存期，
或症状严重性的减轻)的量提供一种或多种组合物。最佳剂量通常使用实验模型和/或临床试验来确定。在一些实施例中，最佳剂量取决于患者的身体质量、重量或血容量。
[0066]
口服剂量典型地范围为从约1.0mg至约1000mg，每天一至四次或更多次。
[0067]
方法
[0068]
本文披露了调节abhd12活性的方法。考虑的方法例如包括将所述酶暴露于本文描述的化合物。在一些实施例中，通过一种或多种前述方法使用的化合物是本文描述的属、亚属或特定化合物中的一种，如本文描述的化合物。在一些实施例中，本文提供了本文描述的化合物，其中该化合物是abhd12抑制剂。在一些实施例中，本文提供了本文描述的化合物，其中该化合物是选择性abhd12抑制剂。本文描述的化合物调节或抑制abhd12的能力通过本领域已知的和/或本文描述的程序来评估。本披露的另一方面提供了治疗患者的与abhd12表达或活性相关的疾病的方法。在一些实施例中，本文提供了本文描述的化合物，其中与抑制其他丝氨酸水解酶相比，该化合物在抑制abhd12方面具有选择性。在一些实施例中，本文提供了本文描述的化合物，其中与抑制其他丝氨酸水解酶相比，该化合物在抑制abhd12方面具有10、100或1000倍的选择性。
[0069]
在另一个实施例中是治疗有需要的患者的疾病或障碍的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、水合物、互变异构体、n-氧化物、或药学上可接受的盐，其中该疾病或障碍是神经精神障碍、自体免疫性疾病、神经炎性疾病、神经退行性疾病、或癌症。在另一个实施例中是治疗有需要的患者的神经精神障碍的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、水合物、互变异构体、n-氧化物、或药学上可接受的盐。在另一个实施例中是治疗有需要的患者的自体免疫性疾病的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、水合物、互变异构体、n-氧化物、或药学上可接受的盐。在另一个实施例中是治疗有需要的患者的神经炎性疾病的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、水合物、互变异构体、n-氧化物、或药学上可接受的盐。在另一个实施例中是治疗有需要的患者的神经退行性疾病的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、水合物、互变异构体、n-氧化物、或药学上可接受的盐。在另一个实施例中是治疗有需要的患者的癌症的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、水合物、互变异构体、n-氧化物、或药学上可接受的盐。
[0070]
在另一个实施例中是治疗有需要的患者的癌症的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、n-氧化物、立体异构体、或药学上可接受的盐，其中该化合物是免疫治疗剂。
[0071]
在一些实施例中，本文描述的化合物刺激患者的免疫系统以治疗疾病。在一些实施例中是治疗有需要的患者的疾病的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、n-氧化物、立体异构体、或药学上可接受的盐，其中施用该化合物刺激了该患者的免疫系统。在另一个实施例中是治疗有需要的患者的癌症的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、n-氧化物、立体异构体、或药学上可接受的盐，其中施用该化合物刺激了该患者的免疫系统。在另一个实施例中是治疗有需要的患者的癌症的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、n-氧化物、立体异构体、或药学上可接受的盐，其中施用该化合物引发
免疫反应。
[0072]
在另一个实施例中是治疗有需要的患者的传染病的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、n-氧化物、立体异构体、或药学上可接受的盐，其中该化合物是免疫治疗剂。
[0073]
在另一个实施例中是治疗有需要的患者的传染病的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、n-氧化物、立体异构体、或药学上可接受的盐，其中施用该化合物刺激了该患者的免疫系统。在另一个实施例中是治疗有需要的患者的传染病的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、n-氧化物、立体异构体、或药学上可接受的盐，其中施用该化合物刺激了该患者的免疫系统。在另一个实施例中是治疗有需要的患者的传染病的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文描述的化合物，或其溶剂化物、n-氧化物、立体异构体、或药学上可接受的盐，其中施用该化合物引发免疫反应。
[0074]
在某些实施例中，通过一种或多种前述方法使用的所披露的化合物是本文描述的特定化合物中的一种。
[0075]
将所披露的化合物以将提供最佳药物功效的剂量施用至需要此种治疗的患者(动物和人类)。应当理解，在任何特定应用中使用所需的剂量将因患者而变，不仅随所选择的特定化合物或组合物而变，还随施用路径、所治疗病症的性质、患者的年龄和状况、患者随后遵循的并行用药或特殊饮食、以及其他因素而变，适当的剂量最终由主治医生决定。为了治疗上述临床病症和疾病，本文所披露的所考虑的化合物以含有常规无毒药学上可接受的载体、辅助剂和媒介物的剂量单位制剂口服、皮下、局部、肠胃外、通过吸入喷雾剂或直肠施用。肠胃外施用包括皮下注射、静脉内注射或肌内注射或输注技术。
[0076]
本文还考虑了组合疗法，例如，共施用所披露的化合物和另外的活性剂，作为旨在由这些治疗剂的共同作用提供有益效果的特定治疗方案的一部分。组合的有益效果包括但不限于由治疗剂组合产生的药代动力学或药效动力学共同作用。这些治疗剂以组合施用典型地在限定的时间段(通常是几周、几个月或几年，取决于所选择的组合)内进行。组合疗法旨在涵盖以顺序方式施用多种治疗剂，即其中每种治疗剂在不同的时间施用，以及以基本上同时的方式施用这些治疗剂或这些治疗剂中的至少两种。
[0077]
基本上同时施用是例如通过施用至受试者单一制剂或组合物(例如，具有固定比率的每种治疗剂的片剂或胶囊，或多个每种治疗剂的单一制剂(例如胶囊))来实现的。每种治疗剂的顺序或基本上同时施用通过任何适当的路径实现，这些路径包括但不限于口服路径、静脉内路径、肌内路径和通过黏膜组织的直接吸收。治疗剂通过相同的路径或不同的路径施用。例如，所选组合的第一治疗剂通过静脉内注射施用，而该组合的其他治疗剂口服施用。可替代地，例如，所有治疗剂口服施用或所有治疗剂通过静脉内注射施用。
[0078]
组合疗法还涵盖将如上述治疗剂与其他生物活性成分和非药物疗法进一步组合施用。当组合疗法进一步包括非药物治疗时，该非药物治疗在任何合适的时间进行，只要获得来自治疗剂和非药物治疗的组合的共同作用的有益效果。例如，在适当的情况下，当将非药物治疗暂时从治疗剂的施用中除去时，可能几天或甚至几周，仍然获得有益效果。
[0079]
将组合的组分同时或顺序施用至患者。将理解，这些组分存在于相同的药学上可接受的载体中，并且因此，被同时施用。可替代地，活性成分存在于单独的药物载体中，如被
同时或顺序施用的常规口服剂型。
[0080]
以下实例仅作为各种实施例的说明而提供，并且不应被解释为以任何方式限制本发明。
[0081]
实例
[0082]
缩写列表
[0083]
如上所用的，并且在本发明的整个描述中，除非另有说明，否则以下缩写应理解为具有以下含义：
[0084]
acn或mecn
ꢀꢀꢀꢀ
乙腈
[0085]
bn
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
苄基
[0086]
boc或boc
ꢀꢀꢀꢀꢀ
氨基甲酸叔丁酯
[0087]
cdi
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
1,1'-羰基二咪唑
[0088]
cy
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
环己基
[0089]
dce
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二氯乙烷(clch2ch2cl)
[0090]
dcm
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二氯甲烷(ch2cl2)
[0091]
dipea或diea
ꢀꢀ
二异丙基乙胺
[0092]
dmap
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
4-(n,n-二甲基氨基)吡啶
[0093]
dmf
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二甲基甲酰胺
[0094]
dma
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
n,n-二甲基乙酰胺
[0095]
dmso
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二甲亚砜
[0096]
equiv
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
当量
[0097]
et
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
乙基
[0098]
etoh
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
乙醇
[0099]
etoac
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
乙酸乙酯
[0100]
hatu
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐
[0101]
hplc
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
高效液相色谱法
[0102]
lah
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
氢化铝锂
[0103]
me
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
甲基
[0104]
meoh
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
甲醇
[0105]
ms
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
质谱法
[0106]
nmm
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
n-甲基吗啉
[0107]
nmr
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
核磁共振
[0108]
pmb
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
对-甲氧基苄基
[0109]
tea
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
三乙胺
[0110]
tfa
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
三氟乙酸
[0111]
thf
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
四氢呋喃
[0112]
tlc
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
薄层色谱法
[0113]
i.化学合成
[0114]
除非另有说明，否则试剂和溶剂是按从商业供应商接收的原样使用。无水溶剂和
烘干玻璃器皿用于对水分和/或氧敏感的合成转化。产率没有最佳化。反应时间是近似的并且没有最佳化。除非另有说明，否则在硅胶上进行柱色谱法和薄层色谱法(tlc)。光谱以ppm(δ)给出并且耦合常数(j)以赫兹报告。对于质子光谱，溶剂峰用作参考峰。
[0115]
实例1：1-(吡啶-3-基)-3-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)脲
[0116][0117]
步骤1：(1-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0118][0119]
将2-氟-6-(三氟甲基)吡啶(82mg，0.50mmol，1.00当量)和n-(哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.50mmol，1.00当量)以及k2co3(138mg，1.00mmol，2.00当量)在dmf(3ml)中的混合物在100℃下搅拌1h。将反应用水(20ml)淬灭并且用etoac(3x20ml)萃取。将有机层合并，用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，以提供呈黄色固体的(1-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(155mg，90％)。lcms(esi,m/z)：346[m h]

。
[0120]
步骤2：1-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)吡啶-4-胺的制备
[0121][0122]
将(1-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(155mg，0.50mmol，1.00当量)在tfa(1ml)和dcm(5ml)中的溶液在室温下搅拌2h。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物用nh3·
h2o中和至ph 9。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化，以提供呈白色固体的1-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-胺(100mg，91％)。lcms(esi,m/z)：246[m h]

。
[0123]
步骤3：1-(吡啶-3-基)-3-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)脲的制备
[0124][0125]
在室温下，在氮气氛下，向1-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-胺(74mg，0.30mmol，1.00当量)和cs2co3(98mg，0.30mmol，1.00当量)在acn(5ml)中的搅拌混合物中分批添加3-异氰基吡啶(36mg，0.30mmol，1.00当量)。将所得混合物在室温下在氮气氛下搅拌
2h。将反应用水(20ml)淬灭并且用etoac(3x20ml)萃取。将有机层合并，用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物(150mg)通过制备型hplc纯化，以提供呈黄色固体的1-(吡啶-3-基)-3-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)脲(19.9mg，18％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)9.32(s,1h),8.33(d,j＝4.8hz,1h),8.26(d,j＝8.4hz,1h),7.89(dd,j1＝8.0hz,j2＝5.6hz,1h),7.69(t,j＝8.0hz,1h),7.05(d,j＝8.8hz,1h),6.96(d,j＝7.2hz,1h),4.37(d,j＝13.2hz,2h),3.95-3.89(m,1h),3.16-3.08(m,2h),2.04(d,j＝11.6hz,2h),1.54(dd,j1＝20.0hz,j2＝11.2hz,2h)。lcms(esi,m/z)：366[m h]

。
[0126]
实例2：1-(1-(3-氯-4-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲
[0127][0128]
步骤1：(1-(3-氯-4-碘吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0129][0130]
向烧瓶中装入3-氯-2-氟-4-碘吡啶(2.57g，0.01mol，1.00当量)、吡啶-4-基氨基甲酸叔丁酯(2.00g，0.01mol，1.00当量)、dmf(15ml)和k2co3(2.76g，0.02mmol，2.00当量)。将所得溶液在100℃下搅拌1h，冷却至室温，并倒入100ml冰水中。将固体通过过滤分离并干燥，以提供3.50g(80％产率)呈灰白色固体的(1-(3-氯-4-碘吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯。lcms(esi,m/z)：438[m h]

。
[0131]
步骤2：1-(3-氯-4-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-胺的制备
[0132][0133]
向烧瓶中装入(1-(3-氯-4-碘吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，0.91mmol，1.00当量)、4-氯-3-(三氟甲氧基)苯酚(387mg，1.83mmol，2.00当量)、cui(86.8mg，0.46mmol，0.50当量)、cu(29.2mg，0.46mmol，0.50当量)、cs2co3(890mg，2.73mmol，3.00当量)和dma(5ml)。将所得溶液在150℃下搅拌1h，然后冷却至室温。将所得溶液过滤并通过制备型hplc纯化，以提供200mg(52％产率)呈白色固体的1-(3-氯-4-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-胺。lcms(esi,m/z)：422[m h]

。
[0134]
步骤3：1-(1-(3-氯-4-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲的制备
[0135][0136]
向烧瓶中装入吡啶-3-胺(49.0mg，0.52mmol，2.00当量)、diea(67.2mg，0.52mmol，2.00当量)、cdi(100mg，0.62mmol，2.40当量)和dcm(5ml)。将所得溶液在室温下搅拌3h，然后添加1-(3-氯-4-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-胺(109mg，0.26mmol，1.00当量)和dipea(100.6mg，0.78mmol，3.00当量)。将混合物在室温下搅拌过夜。将所得混合物用dcm(25ml)稀释，并用饱和水性nahco3(3x10ml)洗涤。将有机层在减压下浓缩。将粗产物(100mg)通过制备型hplc纯化，以提供17.3mg(14％产率)呈白色固体的1-(1-(3-氯-4-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)8.57(s,1h),8.16(d,j＝6.0hz,1h),8.10(d,j＝6.4hz,1h),7.98-7.95(m,1h),7.54(d,j＝10.4hz,1h),7.38-7.34(m,2h),7.16-7.13(m,1h),6.59(d,j＝6.0hz,1h),3.85-3.79(m,3h),3.15-3.04(m,2h),2.10(d,j＝8.8hz,2h),1.73-1.70(m,2h)。lcms(esi,m/z)：542[m h]

。
[0137]
实例3：1-(1-(5-乙酰基吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲
[0138][0139]
步骤1：4-(3-(吡啶-3-基)脲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
[0140][0141]
向烧瓶中装入吡啶-3-胺(2.35g，25.0mmol，1.00当量)、dipea(6.46g，49.9mmol，2.00当量)和dcm(100ml)。在0℃下，向反应混合物中添加三光气(2.96g，9.98mmol，0.400当量)的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌2h，然后在减压下浓缩。将残余物溶解于dcm(100ml)中，并在0℃下将dipea(6.46g，49.9mmol，2.00当量)和4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.00g，25.0mmol，1.00当量)的溶液添加至反应中。将反应混合物在0℃下搅拌2h，然后用水(100ml)淬灭。将所得溶液用dcm(3x100ml)萃取并将有机层合并，用盐水(1x100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，以提供4.27g(53％产率)呈黄色油状物的4-(3-(吡啶-3-基)脲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯。lcms(esi,m/z)：321[m h]

。
[0142]
步骤2：1-(哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲的制备
[0143][0144]
向烧瓶中装入4-(3-(吡啶-3-基)脲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.27g，13.3mmol，
1.00当量)、hcl(20ml，在二噁烷中4m)和dcm(100ml)。将反应混合物在室温下搅拌5h。将反应在减压下浓缩以提供3.33g(粗品)呈黄色油状物的1-(哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲。lcms(esi,m/z)：221[m h]

。
[0145]
步骤3：1-(1-(5-乙酰基吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲的制备
[0146][0147]
向烧瓶中装入1-(哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲(150mg，0.681mmol，1.00当量)、1-(6-氯吡啶-3-基)乙-1-酮(96.0mg，0.681mmol，1.00当量)、k2co3(138mg，1.361mmol，2.00当量)和dmf(10ml)。将反应混合物在70℃下搅拌12h，然后用水(20ml)淬灭。将所得溶液用etoac(3x20ml)萃取并将有机层合并，用盐水(1x20ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩。将粗产物通过制备型hplc纯化，以提供52.1mg(17％产率)呈黄色固体的1-(1-(5-乙酰基吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.76(d,j＝2.4hz,1h),8.56(d,j＝2.6hz,1h),8.16(dd,j＝4.8hz,1.5hz,1h),8.06(dd,j＝9.2hz,2.4hz,1h),7.98-7.91(m,1h),7.39-7.31(m,1h),6.88(d,j＝9.1hz,1h),4.46(d,j＝13.5hz,2h),4.14-3.94(m,1h),3.29-3.18(m,2h),2.52(s,3h),2.07(dd,j＝13.1hz,3.7hz,2h),1.57-1.43(m,2h)。lcms(esi,m/z)：340[m h]

。
[0148]
实例4：1-(吡啶-3-基)-3-(1-(4-(4-(三氟甲氧基)苯基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)脲
[0149][0150]
步骤1：1-(1-(4-溴吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲的制备
[0151][0152]
向烧瓶中装入1-(哌啶-4-基)-3(吡啶-3-基)脲 (943mg，4.5mmol，1.5当量)(如实例10，步骤1-2中制备的)、4-溴-2-氟吡啶(500mg，3.0mmol，1当量)、k2co3(789.00mg，6.00mmol，2.00当量)和dmf(5ml)。将反应混合物在70℃下搅拌2h，然后用水(20ml)淬灭。将所得溶液用etoac(3x20ml)萃取并将有机层合并，用盐水(1x20ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩。将粗产物通过c-18柱色谱法纯化，以提供呈白色固体的1-(1-(4-溴吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲(900mg，84％)。lcms(esi,m/z)：376[m h]

。
[0153]
步骤2：1-(吡啶-3-基)-3-(1-(4-(4-(三氟甲氧基)苯基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)脲的制备
[0154][0155]
将1-(1-(4-溴吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲(200.00mg，0.53mmol，1.00当量)、4-(三氟甲氧基)苯基硼酸(131.35mg，0.63mmol，1.20当量)、pd(dppf)cl2(77.79mg，0.10mmol，0.20当量)和k2co3(146.93mg，1.06mmol，2.00当量)在h2o(1.00ml)和二噁烷(4.00ml)中的混合物在80℃下在氮气氛下搅拌2h。将所得混合物用水(10ml)淬灭，用etoac(3x10ml)萃取并将合并的有机层用盐水(2x10ml)洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过c-18柱色谱法和制备型hplc纯化，以提供呈白色固体的1-(吡啶-3-基)-3-(1-(4-(4-(三氟甲氧基)苯基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)脲(12.20mg，5％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.59-8.53(m,1h),8.20-8.12(m,2h),7.99-7.92(m,1h),7.85-7.77(m,2h),7.44-7.37(m,2h),7.41-7.31(m,1h),7.09-7.04(m,1h),6.97-6.91(m,1h),4.34-4.26(m,2h),3.95-3.83(m,1h),3.22-3.10(m,2h),2.11-2.02(m,2h),1.64-1.50(m,2h)。lcms(esi,m/z)：458[m h]

。
[0156]
实例5：1-(1-(3-氯-4-(4-氟-3-(三氟甲氧基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲
[0157][0158]
步骤1：1-(1-(4-溴-3-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲的制备
[0159][0160]
向烧瓶中装入4-溴-3-氯-2-氟吡啶(1.00g，4.76mmol，1.00当量)、1-(哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲(1.15g，5.24mmol，1.10当量)(如实例3，步骤1-2中制备的)、k2co3(1.98g，14.3mmol，3.00当量)和dmf(15ml)。将反应混合物在80℃下搅拌12h，然后用水(30ml)淬灭。将所得溶液用etoac(3x30ml)萃取并将有机层合并，用盐水(1x30ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，以提供750mg(38％产率)呈白色固体的1-(1-(4-溴-3-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲。lcms(esi,m/z)：410[m h]

。
[0161]
步骤2：1-(1-(3-氯-4-(4-氟-3-(三氟甲氧基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲的制备
[0162][0163]
向烧瓶中装入1-(1-(4-溴-3-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲(65.0mg，0.158mmol，1.00当量)、4-氟-3-(三氟甲氧基)苯酚(34.0mg，0.174mmol，1.10当
量)、cs2co3(155mg，0.474mmol，3.00当量)、二甲基甘氨酸(5.00mg，0.0474mmol，0.300当量)、cui(3.00mg，0.0158mmol，0.100当量)和dmf(3ml)。将反应混合物在100℃下在n2下搅拌12h，用etoac(50ml)稀释，并过滤。将滤液用盐水(3x20ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化，以提供7.4mg(9％产率)呈灰白色固体的1-(1-(3-氯-4-(4-氟-3-(三氟甲氧基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.54(d,j＝2.5hz,2h),8.11(t,j＝5.3hz,2h),7.93-7.85(m,1h),7.68-7.55(m,2h),7.33-7.28(m,1h),7.26(dd,j＝8.3,4.7hz,1h),6.51(d,j＝5.6hz,1h),6.43(d,j＝7.7hz,1h),3.75-3.64(m,3h),3.00(t,j＝11.5hz,2h),1.96(d,j＝12.6hz,2h),1.66-1.51(m,2h)。lcms(esi,m/z)：526[m h]

。
[0164]
实例6：1-(1-(3-氯-4-(2-氯-4-乙炔基苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲
[0165][0166]
步骤1：4-(4-溴-2-氯苯氧基)-2,3-二氯吡啶的制备
[0167][0168]
将4-溴-2-氯苯酚(632mg，3.0mmol，1.0当量)和nah(123mg，3.0mmol，1.0当量)在dmf(5ml)中的混合物在室温下搅拌30min，然后添加2,3,4-三氯吡啶(500mg，2.70mmol，0.90当量)。将反应混合物在100℃下搅拌2h，用水(10ml)淬灭，用etoac(3x10ml)萃取并将合并的有机层用盐水(2x10ml)洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过c-18柱色谱法纯化，以提供呈黄色固体的4-(4-溴-2-氯苯氧基)-2,3-二氯吡啶(500mg，46％)。lcms(esi,m/z)：352[m h]

。
[0169]
步骤2：(1-(4-(4-溴-2-氯苯氧基)-3-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0170][0171]
将4-(4-溴-2-氯苯氧基)-2,3-二氯吡啶(300mg，0.84mmol，1.0当量)、n-(哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(510mg，2.54mmol，3.0当量)和cs2co3(443mg，1.35mmol，1.60当量)在dmso(5.00ml)中的混合物在100℃下搅拌过夜并用水(10ml)淬灭。将所得混合物用etoac(3x10ml)萃取并将合并的有机层用盐水(2x10ml)洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过c-18柱色谱法纯化，以提供呈黄色油状物的(1-(4-(4-溴-2-氯苯氧基)-3-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(120.00mg，27％)。lcms(esi,m/z)：516[m h]

。
[0172]
步骤3：(1-(3-氯-4-(2-氯-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0173][0174]
将(1-(4-(4-溴-2-氯苯氧基)-3-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.19mmol，1.00当量)、三甲基甲硅烷基乙炔(190mg，1.93mmol，10.00当量)、pd(pph3)4(45mg，0.039mmol，0.2当量)、cui(7mg，0.039mmol，0.2当量)和et3n(59mg，0.58mmol，3当量)在dmf(2.00ml)中的混合物在100℃下在n2下搅拌过夜。将混合物用水(20ml)稀释并用etoac(3x10ml)萃取，并将合并的有机层用盐水(2x10ml)洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法纯化，以提供呈黄色固体的(1-(3-氯-4-(2-氯-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，97％)。lcms(esi,m/z)：534[m h]

。
[0175]
步骤4：1-(3-氯-4-(2-氯-4-乙炔基苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-胺的制备
[0176][0177]
将(1-(3-氯-4-(2-氯-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.18mmol，1.00当量)和tfa(1ml)在dcm(2ml)中的混合物在室温下搅拌2h。将混合物在减压下浓缩，以提供呈黄色油状物的1-(3-氯-4-(2-氯-4-乙炔基苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-胺(60mg，粗品)。lcms(esi,m/z)：362[m h]

。
[0178]
步骤5：1-(1-(3-氯-4-(2-氯-4-乙炔基苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲的制备
[0179][0180]
在0℃下，在氮气氛下，向3-氨基吡啶(16mg，0.20mmol，1.0当量)和三光气(29mg，0.10mmol，0.60当量)在dcm(5ml)中的混合物中逐滴添加dipea(64mg，0.60mmol，3.0当量)。将反应混合物在0℃下搅拌1h，然后添加1-(3-氯-4-(2-氯-4-乙炔基苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-胺(60.00mg，0.20mmol，1.00当量)在dcm(3ml)中的混合物。将反应混合物在0℃下再搅拌1h并用水(10ml)淬灭。将所得混合物用dcm(3x10ml)萃取并将合并的有机层用盐水(2x10ml)洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过c-18柱色谱法和制备型hplc纯化，以给出呈白色固体的1-(1-(3-氯-4-(2-氯-4-乙炔基苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-(吡啶-3-基)脲(8.20mg，10％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.59-8.54(m,1h),8.19-8.13(m,1h),8.06-8.00(m,1h),8.00-7.93(m,1h),7.72-7.67(m,1h),7.55-7.48(m,1h),7.40-7.32(m,1h),7.22-7.15(m,1h),6.37-6.31(m,1h),3.87-3.77(m,3h),3.69-3.65
(m,1h),3.13-3.02(m,2h),2.14-2.03(m,2h),1.80-1.60(m,2h)。lcms(esi,m/z)：482[m h]

。
[0181]
实例7：1-(吡啶-3-基)-3-(1-(4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)脲
[0182][0183]
步骤1：2,3-二氯-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶的制备
[0184][0185]
向烧瓶中装入4-(三氟甲基)苯酚(402mg，2.48mmol，1.00当量)、nah(60mg，2.48mmol，1.00当量)和dmf(10ml)。将反应混合物在室温下搅拌0.5h。向反应混合物中添加2,3,4-三氯吡啶(406mg，2.23mmol，0.900当量)的溶液。将反应混合物在100℃下搅拌2h，然后用水(30ml)淬灭。将所得溶液用dcm(3x30ml)萃取并将有机层合并，用盐水(1x30ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，以提供500mg(65％产率)呈白色固体的2,3-二氯-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶。lcms(esi,m/z)：308[m h]

。
[0186]
步骤2：(1-(3-氯-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0187][0188]
向烧瓶中装入2,3-二氯-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶(480mg，1.56mmol，1.00当量)、哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯(342mg，1.71mmol，1.10当量)、cs2co3(1.53g，4.68mmol，3.00当量)、cui(29mg，0.156mmol，0.100当量)和1,4-二噁烷(10ml)。将反应混合物在130℃下搅拌48h，然后用水(30ml)淬灭。将所得溶液用dcm(3x30ml)萃取并将有机层合并，用盐水(1x30ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，以提供400mg(54％产率)呈白色固体的(1-(3-氯-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯。lcms(esi,m/z)：472[m h]

。
[0189]
步骤3：(1-(4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0190][0191]
向烧瓶中装入(1-(3-氯-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-氨基甲酸叔丁酯(380mg，0.805mmol，1.00当量)、pd/c(19.0mg，0.161mmol，0.200当量)和meoh
(10ml)。将反应混合物在室温下在h2气氛下搅拌8h。将所得溶液过滤，并将滤饼用etoac(3x10ml)洗涤，将滤液在减压下浓缩，以提供呈黄色油状物的(1-(4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(300mg粗品)。lcms(esi,m/z)：438[m 1]

。
[0192]
步骤4：-(4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-胺的制备
[0193][0194]
向烧瓶中装入(1-(4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-氨基甲酸叔丁酯(300mg，0.686mmol，1.00当量)、tfa(3ml)和dcm(10ml)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。用nahco3将溶液的ph值调节至8-9。将所得混合物用dcm(3x30ml)萃取并将有机层合并，用盐水(1x30ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过反向快速色谱法纯化，以提供100mg(43％产率)呈黄色油状物的1-(4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-胺。lcms(esi,m/z)：338[m h]

。
[0195]
步骤5：1-(吡啶-3-基)-3-(1-(4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)脲的制备
[0196][0197]
向烧瓶中装入吡啶-3-胺(31mg，0.326mmol，1.10当量)和dipea(77.0mg，0.594mmol，2.00当量)(在dcm(2ml)中)。在0℃下，逐滴添加三光气(44.0mg，0.148mmol，0.500当量)在dcm(4ml)中的溶液。然后将混合物在室温下搅拌2小时并在真空下浓缩。向1-(4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-胺(100mg，0.297mmol，1.00当量)在acn(3ml)中的溶液中添加以上残余物，随后添加dbu(181mg，1.19mmol，4.00当量)和dmap(7.00mg，0.0594mmol，0.200当量)。将混合物在室温下搅拌过夜并在真空下浓缩。将所得混合物用dcm(3x20ml)萃取并将合并的有机层用盐水(1x20ml)洗涤，经无水na2so4干燥，在减压下浓缩。将粗产物通过制备型hplc纯化，以提供44mg(33％产率)呈白色固体的1-(吡啶-3-基)-3-(1-(4-(4-(三氟甲基)苯氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)脲。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.57-8.46(m,2h),8.15-8.03(m,2h),7.92-7.84(m,1h),7.80(d,j＝8.4hz,2h),7.35-7.20(m,3h),6.54(d,j＝2.0hz,1h),6.36(d,j＝7.6hz,1h),6.27(dd,j＝5.7,1.9hz,1h),4.12(dd,j＝11.5,7.0hz,2h),3.84-3.65(m,1h),3.12-2.95(m,2h),1.87(dd,j＝13.0,3.8hz,2h),1.45-1.30(m,2h)。lcms(esi,m/z)：458[m h]

。
[0198]
实例8-29：以与实例1-7类似的方式制备实例8-29。
[0199]
[0200]
[0201]
[0202]
[0203]
[0204]
[0205]
[0206][0207]
ii.生物学评价
[0208]
使用以下测定来测试化合物以评估其abhd12活性。
[0209]
基于体外竞争活性的蛋白质谱
[0210]
在37℃下将小鼠脑膜蛋白质组(50μl，总蛋白质浓度为1.0mg/ml)用不同浓度的抑制剂预孵育。30min后，添加fp-罗丹明探针(1.0μl，在dmso中50μm)，并将混合物在室温下孵育30min。将反应用sds上样缓冲液(15μl-4x)淬灭，并且用sds-page凝胶(10％丙烯酰胺)分离蛋白质。凝胶内荧光成像后，通过使用imagej软件测量对应于abhd12的凝胶带的强度来确定酶活性。表1中示出了来自此测定的1μm下的酶抑制百分比和ic
50
数据。
[0211]
表1
[0212]
[0213][0214]
***ic
50
小于或等于100nm；**ic
50
大于100nm并且小于1μm；*ic
50
大于或等于1μm并且小于或等于25μm。
[0215]
a＝％抑制大于或等于75％；b＝％抑制大于或等于50％并且小于75％；c＝％抑制大于或等于25％并且小于50％；d＝％抑制大于或等于0％并且小于25％。