不耐热沙雷氏菌核酸酶的制作方法

技术特征：
1.一种不耐热沙雷氏菌核酸酶突变体，包括：seq id no.12所示的氨基酸序列，不含n端的前21个氨基酸，及其保守变体。2.编码如seq id no.12所示的氨基酸序列的dna序列，不含n端的前21个氨基酸，及其保守变体。3.seq id no.11所示的dna序列及其保守变体。4.一种在蛋白质生产后从溶液中去除寡核苷酸的方法，包括：向溶液中加入具有seq id no.12所示的氨基酸序列但不含n端的前21个氨基酸的不耐热粘质沙雷氏菌核酸酶突变体或其保守变体；在保持足以降解溶液中大量dna寡聚体的时间后，通过加热溶液终止粘质沙雷氏菌核酸酶突变体活性。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述时间不足以降解溶液中的大量蛋白质。6.根据权利要求4所述的方法，其中将溶液加热到至少60℃，保持至少20分钟。

技术总结
本发明公开了一种工程化的不耐热粘质沙雷氏菌核酸酶突变体。在相同的缓冲体系中，于60℃保持20min后，野生型粘质沙雷氏菌核酸酶酶活性为12.5％，而本发明提供的不耐热突变体R146D/D156R/D229R/D245R(SEQ ID NO:12，不含N端21个氨基酸的信号肽)仅保留0.39％的活性。该不耐热突变体用于蛋白质纯化时，在目标蛋白质中的大量DNA已经降解一段时间后，且在不需要的降解发生之前，对该不耐热突变体进行热灭活。活。活。


技术研发人员：朱振宇 孙大鹏 米凯拉
受保护的技术使用者：爱博泰克生物（美国）公司
技术研发日：2020.12.08
技术公布日：2022/1/13