一种流感病毒抑制剂的制作方法

1.本发明属于化学药物领域，具体涉及一种具有帽依赖性核酸内切酶抑制活性的化合物，以及该该化合物在流感治疗方面的应用。


背景技术：

2.流感病毒每年导致一种传染病，全世界有29万至65万人死亡，300万至500万人患有严重疾病。此外，由新出现的重组病毒引起的流行病可能对全球产生毁灭性的影响。因此，有必要继续努力改进疫苗和抗病毒药物作为对策。目前有两类抗病毒药物可供临床使用:神经氨酸酶抑制剂(nais:奥司他韦、扎那米韦、帕拉米韦)和m2离子通道抑制剂(金刚烷胺、金刚乙胺)。然而，目前流行的流感病毒在很大程度上对m2抑制剂s3具有耐药性。此外，nais的抗病毒能力相对较弱，这类药物的另一个担忧是耐药性的出现，就像2008年至2009年耐奥司他韦的h1n1流感流行季节一样。因此，流感病毒感染的治疗和预防需要更有效的抗病毒药物，具有新的作用机制。
3.流感病毒的异三聚体rna依赖性rna聚合酶(rdrp)由pa、pb1和pb2亚基组成。它负责在被感染细胞的细胞核中复制和转录分段的单链病毒rna基因组(vrna)。病毒mrna的转录是通过一种独特的“抢帽”机制进行的。这涉及到通过将初生的封顶转录本与pb2子单元结合，然后在核苷酸处被pa子单元中的依赖于cap的内切酶(cen)切割，从而实现对宿主rna聚合酶的高劫持。由pb1 subunit1的rdrp功能产生的短的、带cap酶的寡聚物作为病毒mrna转录的引物。病毒转录本在模板vrna保守的富集区域被一种机制聚腺苷酸化，以在核输出后转化为功能蛋白。由于抢帽是病毒复制的必要条件，因此cap-binding、endonuclease和rdrp活性都是小分子抑制物的有吸引力的靶点，实际上有几种针对聚合酶的新化合物正在积极的临床开发中。2014年，一种rna合成抑制剂favipiravir(avigan)在日本获得批准，尽管该适应症仅限于治疗对其他药物没有反应的新型流感病毒。pimodivir(jnj-63623872,vx-787)是一种pb2 cap-binding inhibitor，它单独与奥司他韦联合用于简单流感的病毒学疗效，但仅对a型流感病毒有效。因此，仍然需要继续努力发现和开发性能更好的流感药物。


技术实现要素：

4.本发明的目的，在于提供一种全新的具有帽依赖性核酸内切酶抑制活性的化合物，所述化合物具有如下结构：
[0005][0006]
其中pa为氢、氘或形成前药的取代基团；
[0007]
r选自ch2、o、s或nr1，其中r1独立地为氢、卤素、羟基、羧基、甲酰基、低级烷基、卤代低级烷基、低级烷基氧基、卤代低级烷基氧基、低级烷基氧基低级烷基、低级烷基羰基、低级烷基氧基羰基、低级烷基氨基、低级烷基羰基氨基、低级烷基氨基羰基、低级烷基磺酰基、低级烷基磺酰基氨基。
[0008]
r2各自独立地为氢、氘、卤素、羟基、烷基、卤代烷基、或烷氧基；
[0009]
m为0～2的整数
[0010]
一个优选的实施方案是，本发明所述化合物或其药学上可接受的盐，其中r2优选为卤素，r为n。
[0011]
具体地，本发明涉及具有如下结构的化合物：
[0012][0013]
其中所述pa为氢或形成前药的取代基团。
[0014]
形成前药的取代基团选自如下结构：
[0015]
(1)-c(＝o)-p
r0
、-c(＝o)-l-p
r0
、-c(＝o)-l-o-p
r0
、-c(＝o)-l-o-l-p
r0
；
[0016]
(2)-c(＝o)-o-p
r1
、-c(＝o)-o-l-p
r1
、-c(＝o)-n-p
r1
；
[0017]
(3)-c(p
r2
)2-o-p
r3
、-c(p
r2
)2-o-c(＝o)-o-p
r3
[0018]
所述l为直链或直链状的亚烷基、或者直链或智利安装的亚希基；
[0019]
所述p
r0
为氢或任选被取代基q取代的烷基、任选被取代基q取代的烯基、任选被取代基q取代的碳环基、任选被取代基q取代的杂环基、任选被取代基q取代的烷基氨基、或任选被取代基q取代的烷基硫基；
[0020]
p
r1
、p
r3
各自独立地为氢、氘或被取代基q取代的烷基、任选被取代基q取代的碳环
基、任选被取代基q取代的杂环基、任选被取代基q取代的碳环烷基、任选被取代基q取代的杂环烷基、或任选被取代基q取代的烷基甲硅烷基；
[0021]
p
r2
为氢、氘或烷基；
[0022]
取代基q为氢、氘、氧代基、烷基、羟基烷基、氨基、烷基氨基、碳环基、杂环基、碳环烷基、烷基羰基、卤素、羟基、羰基、烷基羰基氨基、烷基羰基氨基烷基、烷基羰氧基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、烷氧基羰氧基、烷基氨基羰氧基、烷基氨基烷基、烷氧基、氰基、硝基、叠氮基、烷基磺酰基、三烷基甲硅烷基或磷酰基。
[0023]
一个更为优选的实施方案是，所述r1为氢，所述的pr基为：
[0024]-c(＝o)-ch3、-c(＝o)-o-(ch2)
2-o-ch3、-ch
2-o-c(＝o)-ch3、-ch
2-o-c(＝o)-o-ch3、
[0025]-ch
2-o-c(＝o)-o-ch2ch3、-ch(ch3)-o-c(＝o)-o-ch3、
[0026]-ch
2-o-c(＝o)-ch(ch3)-nh-c(＝o)-o-c(ch3)3、ch2c6h5。
[0027]
一个具体的实施例是，涉及到如下结构：
[0028][0029]
更优选的，当其为前药时，pa的具体结构为
[0030][0031]
比如以下几个前药结构
[0032][0033]
本发明还涉及一种药物组合物，包含本发明所述化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。
[0034]
本发明中，除包含本发明所述化合物或其药学上可接受的盐外，还可以包含有其它抗流感病毒类化合物，比如奥司他韦。
[0035]
本发明的又一方面，涉及本发明所述化合物或其药学上可接受的盐在制备具有预防或治疗流感药物中的应用，以及包含本发明所述化合物的组合物在治疗流感方面的应用，组合物中，还可以包含其它抗流感病毒化合物，如奥司他韦。
具体实施方式
[0036]
体外细胞抑制试验
[0037]
如下进行cpe抑制试验以评估测试化合物抑制帽依耐性核酸内切酶活性的效力。
[0038]
将96孔组织培养板中的mdck细胞与测试化合物和a型流感(ifv a/wsn/33(h1n1))在低感染率下于37℃培养72小时，通过添加0.5％甲醛来固定培养板，然后用0.5％结晶紫染色，随后，用微盘分析仪(multiskan ascent,thermo)测波长570nm的吸光值，相对于病毒对照组，测试化合物将病毒诱导的cpe降低50％所需的浓度，表示50％有效剂量(ec
50
),以及cc
50
值。
[0039]
用cpe抑制试验评估各化合物，其中，对ifv a/wsn/33流感病毒，化合物2、3和4的ce50值小于10nm，而化合物6几乎无活性。
[0040]
表1各候选化合物对ifv a/wsn/33的抑制活性
[0041]
cpd no.cpd idec
50
(nm)cc
50
(nm)1kw028-2415.72》10002kw028-257.802》10003kw028-267.502》10004kw028-277.586》1000
5kw028-2131.880》10006kw028-30》1000》1000