ANGPTL2反义寡核苷酸及其用途的制作方法

技术特征：
1.一种反义寡核苷酸(aso)，其包含与血管生成素样2(angptl2)转录物内的核酸序列互补的长度为10至30个核苷酸的连续核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的aso，其与所述angptl2转录物内的核酸序列至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％或约100％互补。3.根据权利要求1或2所述的aso，其中所述angptl2转录物选自seq id no:1、seq id no:2、seq id no:196、seq id no:197、seq id no:198、seq id no:199和seq id no:207。4.根据权利要求1至3中任一项所述的aso，其中所述aso能够降低正在表达所述angptl2蛋白的人细胞(例如，sk-n-as细胞)中的angptl2蛋白表达。5.根据权利要求4所述的aso，其中与没有暴露于所述aso的人细胞中的angptl2蛋白表达相比，所述angptl2蛋白表达降低至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％或约100％。6.根据权利要求1至5中任一项所述的aso，其能够降低正在表达所述angptl2转录物的人细胞(例如，sk-n-as细胞)中的angptl2转录物(例如，mrna)表达。7.根据权利要求6所述的aso，其中与没有暴露于所述aso的人细胞中的angptl2转录物表达相比，所述angptl2转录物表达降低至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％或约100％。8.根据权利要求1至7中任一项所述的aso，其中所述aso是gapmer。9.根据权利要求8所述的aso，其中所述aso包含一种或多种核苷类似物。10.根据权利要求9所述的aso，其中所述一种或多种核苷类似物包括2'-o-烷基-rna；2'-o-甲基rna(2'-ome)；2'-烷氧基-rna；2'-o-甲氧基乙基-rna(2'-moe)；2'-氨基-dna；2'-氟-rna；2'-氟-dna；阿拉伯核酸(ana)；2'-氟-ana；二环核苷类似物(lna)；或其组合。11.根据权利要求9或10所述的aso，其中所述一种或多种核苷类似物是增强亲和力的2'糖修饰的核苷。12.根据权利要求11所述的aso，其中所述增强亲和力的2'糖修饰的核苷是lna。13.根据权利要求12所述的aso，其中所述lna选自约束乙基核苷(cet)、2',4'-约束2'-o-甲氧基乙基(cmoe)、α-l-lna、β-d-lna、2'-o,4'-c-乙烯桥联核酸(ena)、氨基-lna、氧基-lna、硫代-lna及其任何组合。14.根据权利要求1至13中任一项所述的aso，其中所述aso包含一个或多个5'-甲基-胞嘧啶核碱基。15.根据权利要求1至14中任一项所述的aso，其中所述aso能够(i)降低sk-n-as细胞中的angptl2 mrna水平；(ii)降低sk-n-as细胞中的angptl2蛋白水平；(iii)减轻、改善或治疗与异常angptl2表达和/或活性相关的疾病或障碍的一种或多种症状；或者(iv)其任何组合。16.根据权利要求15所述的aso，其中与异常angptl2表达和/或活性相关的所述疾病或障碍包括心血管疾病、肥胖症、代谢性疾病、2型糖尿病、癌症或其组合。17.根据权利要求1至16中任一项所述的aso，其中所述连续核苷酸序列与包含以下的核酸序列互补：(i)seq id no:1的核苷酸1-211；(ii)seq id no:1的核苷酸471-686；(iii)
seq id no:1的核苷酸1,069-1,376；(iv)seq id no:1的核苷酸1,666-8,673；(v)seq id no:1的核苷酸8,975-12,415；(vi)seq id no:1的核苷酸12,739-18,116；(vii)seq id no:1的核苷酸18,422-29,875；或者(viii)seq id no:1的核苷酸30,373-35,389。18.根据权利要求1至17中任一项所述的aso，其中所述连续核苷酸序列与包含以下的核酸序列互补：(i)seq id no:1的核苷酸37-161；(ii)seq id no:1的核苷酸521-636；(iii)seq id no:1的核苷酸1,119-1,326；(iv)seq id no:1的核苷酸1,716-8,623；(v)seq id no:1的核苷酸9,025-12,365；(vi)seq id no:1的核苷酸12,789-18,066；(vii)seq id no:1的核苷酸18,472-29,825；或者(viii)seq id no:1的核苷酸30,423-35,339。19.根据权利要求1至18中任一项所述的aso，其中所述连续核苷酸序列与包含以下的核酸序列互补：(i)seq id no:1的核苷酸87-111；(ii)seq id no:1的核苷酸571-586；(iii)seq id no:1的核苷酸1,169-1,276；(iv)seq id no:1的核苷酸1,766-8,573；(v)seq id no:1的核苷酸9,075-12,315；(vi)seq id no:1的核苷酸12,839-18,016；(vii)seq id no:1的核苷酸18,522-29,775；或者(viii)seq id no:1的核苷酸30,473-35,289。20.根据权利要求1至19中任一项所述的aso，其中所述连续核苷酸序列与包含seq id no:1的核苷酸20,187-20,234的核酸互补。21.根据权利要求1至20中任一项所述的aso，其中所述连续核苷酸序列与包含seq id no:1的核苷酸20,202-20,219的核酸互补。22.根据权利要求1至21中任一项所述的aso，其中所述连续核苷酸序列包含具有一个或两个错配的seq id no:4至seq id no:193。23.根据权利要求1至21中任一项所述的aso，其中所述连续核苷酸序列包含选自图2中的序列(seq id no:4至seq id no:193)的核苷酸序列。24.根据权利要求1至23中任一项所述的aso，其中所述连续核苷酸序列包含seq id no:8、seq id no:20、seq id no:38、seq id no:46、seq id no:79、seq id no:84、seq id no:82、seq id no:88、seq id no:85、seq id no:90、seq id no:89、seq id no:93、seq id no:95、seq id no:97、seq id no:101、seq id no:111、seq id no:116、seq id no:120、seq id no:121、seq id no:122、seq id no:132、seq id no:142、seq id no:141、seq id no:143、seq id no:144或seq id no:146。25.根据权利要求1至23中任一项所述的aso，其中所述连续核苷酸序列包含seq id no:141、seq id no:122、seq id no:8、seq id no:38、seq id no:95、seq id no:88或seq id no:120。26.根据权利要求1至23中任一项所述的aso，其中所述连续核苷酸序列包含seq id no:116、seq id no:118、seq id no:117、seq id no:120、seq id no:119、seq id no:121、seq id no:122或其组合。27.根据权利要求1至26中任一项所述的aso，其具有选自图2中的设计的设计，其中大写字母是糖修饰的核苷并且小写字母是dna。28.根据权利要求1至27中任一项所述的aso，其长度为15至20个核苷酸。29.根据权利要求1至28中任一项所述的aso，其中所述连续核苷酸序列包含一个或多个修饰的核苷间连接。30.根据权利要求29所述的aso，其中所述一个或多个修饰的核苷间连接是硫代磷酸酯
连接。31.根据权利要求29或30所述的aso，其中至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％的核苷间连接被修饰。32.根据权利要求31所述的aso，其中每个所述核苷间连接都是硫代磷酸酯连接。33.一种缀合物，其包含根据权利要求1至32中任一项所述的aso，其中所述aso共价附接至至少一个非核苷酸或非多核苷酸部分。34.根据权利要求33所述的缀合物，其中所述非核苷酸或非多核苷酸部分包括蛋白质、脂肪酸链、糖残基、糖蛋白、聚合物或其任何组合。35.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至32中任一项所述的aso或根据权利要求33或34所述的缀合物，以及药学上可接受的稀释剂、载体、盐或佐剂。36.根据权利要求35所述的药物组合物，其中所述药学上可接受的盐包括钠盐、钾盐、铵盐或其任何组合。37.根据权利要求35或36所述的药物组合物，其还包含至少一种其他治疗剂。38.根据权利要求37所述的药物组合物，其中所述其他治疗剂是angptl2拮抗剂。39.根据权利要求38所述的药物组合物，其中所述angptl2拮抗剂是抗angptl2抗体或其片段。40.一种试剂盒，其包含根据权利要求1至32中任一项所述的aso、根据权利要求33或34所述的缀合物或者根据权利要求35至39中任一项所述的药物组合物以及使用说明。41.一种诊断试剂盒，其包含根据权利要求1至32中任一项所述的aso、根据权利要求33或34所述的缀合物或者根据权利要求35至39中任一项所述的药物组合物以及使用说明。42.一种抑制或降低细胞中的angptl2蛋白表达的方法，其包括将根据权利要求1至32中任一项所述的aso、根据权利要求33或34所述的缀合物或者根据权利要求35至39中任一项所述的药物组合物施用至表达angptl2蛋白的细胞，其中所述细胞中的angptl2蛋白表达在所述施用后被抑制或降低。43.一种抑制或降低细胞中的angptl2蛋白表达的体外方法，其包括使根据权利要求1至32中任一项所述的aso、根据权利要求33或34所述的缀合物或者根据权利要求35至39中任一项所述的药物组合物与表达angptl2蛋白的细胞接触，其中所述细胞中的angptl2蛋白表达在所述接触后被抑制或降低。44.根据权利要求42或43所述的方法，其中在所述施用后或在所述接触后，所述aso抑制或降低所述细胞中angptl2转录物(例如，mrna)的表达。45.根据权利要求44所述的方法，其中与没有暴露于所述aso的细胞相比，在所述施用后，angptl2转录物(例如，mrna)的所述表达降低至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或约100％。46.根据权利要求42至45中任一项所述的方法，其中与没有暴露于所述aso的细胞相比，在所述施用后，angptl2蛋白的所述表达降低至少约60％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％。47.根据权利要求42至46中任一项所述的方法，其中所述细胞是脑细胞，例如，成神经细胞(例如，sk-n-as细胞)。
48.一种减轻、改善或治疗有需要的受试者的与异常angptl2表达和/或活性相关的疾病或障碍的一种或多种症状的方法，其包括将有效量的根据权利要求1至32中任一项所述的aso、根据权利要求33或34所述的缀合物或者根据权利要求35至39中任一项所述的药物组合物施用至所述受试者。49.根据权利要求1至32中任一项所述的aso、根据权利要求33或34所述的缀合物或者根据权利要求35至39中任一项所述的药物组合物用于制造药物的用途。50.根据权利要求1至32中任一项所述的aso、根据权利要求33或34所述的缀合物或者根据权利要求35至39中任一项所述的药物组合物用于制造用于治疗有需要的受试者的与异常angptl2表达和/或活性相关的疾病或障碍的药物的用途。51.根据权利要求1至32中任一项所述的aso、根据权利要求33或34所述的缀合物或者根据权利要求35至39中任一项所述的药物组合物，其用于疗法中。52.根据权利要求1至32中任一项所述的aso、根据权利要求33或34所述的缀合物或者根据权利要求35至39中任一项所述的药物组合物，其用于有需要的受试者的与异常angptl2表达和/或活性相关的疾病或障碍的疗法中。53.根据权利要求15所述的aso、根据权利要求48所述的方法、根据权利要求50所述的用途或者根据权利要求52所述的用于所述用途的aso，其中与异常angptl2表达和/或活性相关的所述疾病或障碍包括心血管疾病、肥胖症、代谢性疾病、2型糖尿病、癌症或其组合。54.根据权利要求53所述的aso、方法、用途或用于所述用途的aso，其中所述心血管疾病或障碍包括动脉粥样硬化、冠心病、卒中、心力衰竭、高血压心脏病、风湿性心脏病、心肌病、心律失常、先天性心脏病、瓣膜性心脏病心炎、主动脉瘤、外周动脉病、血栓栓塞性疾病、静脉血栓形成或其任何组合。55.根据权利要求54所述的aso、方法、用途或用于所述用途的aso，其中所述心血管疾病或障碍是心力衰竭。56.根据权利要求55所述的aso、方法、用途或用于所述用途的aso，其中所述心力衰竭包括左侧心力衰竭、右侧心力衰竭、充血性心力衰竭、射血分数降低的心力衰竭(hfref)、射血分数保留的心力衰竭(hfpef)、中范围射血分数的心力衰竭(hfmref)、肥厚型心肌病(hcm)、高血压心脏病(hhd)或高血压肥厚型心肌病。57.根据权利要求48和53至56中任一项所述的方法、根据权利要求50和53至56中任一项所述的用途或者根据权利要求52至56中任一项所述的用于所述用途的aso，其中所述受试者是人。58.根据权利要求48和53至57中任一项所述的方法、根据权利要求50和53至57中任一项所述的用途或者根据权利要求52至57中任一项所述的用于所述用途的aso，其中所述aso、所述缀合物或所述药物组合物是心内、口服、肠胃外、鞘内、脑室内、经肺、局部或心室内施用。

技术总结
本公开文本涉及反义寡核苷酸，其靶向细胞中的ANGPTL2mRNA，从而导致降低的ANGPTL2蛋白的表达。ANGPTL2蛋白表达的降低对于某些医学障碍如与异常ANGPTL2表达和/或活性相关的那些，例如心血管相关疾病或障碍的治疗是有益的。的。


技术研发人员：B
受保护的技术使用者：哥本哈根罗氏创新中心
技术研发日：2020.04.02
技术公布日：2022/1/6