一种重组蛋白K-S及其制备方法和应用与流程

技术特征：
1.一种重组蛋白k-s，其特征在于：其核苷酸序列如seqidno：1，或者蛋白序列如seqidno：2。2.一种重组蛋白k-s的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)根据已经公布的基因序列mt226610.1，选取s1蛋白的核苷酸序列；(2)在所述s1蛋白的核苷酸序列上，对6个关键位点进行突变构建新序列，突变位点及碱基分别为：g1251t，t1355g，g1450c，a1501t，a1841g和c2042g，编码蛋白后相应的位点为：k417n，l452r，e484q，n501y，d614g和p681r；(3)所述新序列两端加上酶切位点nheⅰ即gctagc和kpnⅰ即ggtacc，连接到真核表达载体pcdna3.1中，利用cho-s细胞进行表达；(4)获取表达后的上清液，进行蛋白纯化得到重组蛋白k-s；所述重组蛋白k-s核苷酸序列或蛋白序列如权利要求1所述。3.重组蛋白k-s的应用，其特征在于：根据权利要求1所述重组蛋白k-s应用于新型冠状病毒免疫。4.根据权利要求3所述重组蛋白k-s的应用，其特征在于：所述免疫方式为皮内免疫。5.根据权利要求3所述重组蛋白k-s的应用，其特征在于：所述重组蛋白k-s与灭活疫苗进行序贯免疫。

技术总结
本发明公开了一种重组蛋白K-S及其制备方法和应用，属于生物技术领域，方案包括在所述S1蛋白的核苷酸序列上，对6个关键位点进行突变，突变位点及碱基分别为：G1251T，T1355G，G1450C，A1501T，A1841G和C2042G，编码蛋白后相应的位点为：K417N，L452R，E484Q，N501Y，D614G和P681R；连接到真核表达载体pcDNA3.1中，利用CHO-S细胞(ThermoFisher)进行表达后纯化得到重组蛋白K-S，该重组蛋白K-S可与灭活疫苗通过皮内序贯免疫新型冠状病毒变异株。皮内序贯免疫新型冠状病毒变异株。


技术研发人员：李琦涵 范胜涛 徐兴丽 李丹丹 赵恒 于丽 蒋国润 廖芸 张莹 王丽春 张晶晶 段素琴 高扬 曾烽原 徐祥雄
受保护的技术使用者：中国医学科学院医学生物学研究所
技术研发日：2021.09.18
技术公布日：2022/1/6