一株去除重金属离子的红酵母MF4、菌剂及其应用的制作方法

一株去除重金属离子的红酵母mf4、菌剂及其应用
技术领域
1.本发明涉及环境保护领域，特别是涉及一株去除重金属离子的红酵母mf4、菌剂及其应用。


背景技术：

2.在矿山开采过程中，硫化矿物在空气、水和微生物的作用下，发生溶浸、氧化、水解等一系列物理化学反应，形成ph值较低的硫酸
‑
硫酸高铁溶液，一般为2.5～5.5，在该条件下会溶出矿石中的多种金属离子，如cu
2
、zn
2
、pb
2
、mn
2
及cd
2
等，这些重金属离子毒性较大，不仅会严重污染水资源，影响农作物产量和质量，而且极容易在生物链中富集和扩大，最终在人体的某些器官积累造成慢性中毒，危害人类的健康。因此，根据酸性矿山废水(amd)的污染特点，寻求经济实用的治理方法，消除其危害，保证矿产资源开发可持续性已成为政府及社会各界广泛关注的问题。
3.在众多amd处理方法中，微生物法由于其适用性强、投资低、环境友好、污染小等特点，是应用于amd处理较为广泛的处理技术，目前应用的微生物包括藻类、真菌和细菌，但主要是在中性条件或者偏酸性条件下去除重金属离子，然而在极端酸性环境中筛选获得耐重金属离子的真菌菌株的报道还相对有限。而且，酸性工业废水中，尤其是酸性矿山废水中，一般同时含有多种金属离子，因此，筛选出耐酸的且能够同时去除多种重金属的锰氧化菌十分必要。


技术实现要素：

4.为了解决上述问题，本发明提供了一株去除重金属离子的红酵母mf4、菌剂及其应用。本发明所述菌株能够在低ph的条件下，实现去除多种重金属离子的效果。
5.为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
6.本发明提供了一株去除重金属离子的红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4，所述的红酵母mf4的保藏编号为gdmcc no.61687。
7.本发明提供了一种菌剂，所述菌剂的有效成分包括上述技术方案所述的红酵母mf4的分生孢子或菌体。
8.优选的，当所述菌剂的有效成分为分生孢子时，所述菌剂中红酵母mf4的孢子浓度为1.1
×
106～1.7
×
108个/ml；当所述菌剂的有效成分为菌体时，所述红酵母mf4的菌体浓度为10～20g/l。
9.本发明体提供了上述技术方案所述的红酵母mf4或上述技术方案所述的菌剂在去除重金属离子中的应用。
10.本发明体提供了上述技术方案所述的红酵母mf4或上述技术方案所述的菌剂在去除水中重金属离子中的应用。
11.优选的，所述重金属离子包括fe
3
、al
3
、mn
2
、cu
2
和zn
2
中的一种或几种。
12.优选的，所述水包括废水或地下水。
13.优选的，所述废水包括中性废水或酸性废水。
14.优选的，所述酸性废水包括酸性工业废水；所述酸性工业废水包括酸性矿山废水。
15.有益效果：本发明提供了一株去除重金属离子的红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4，所述的红酵母mf4的保藏编号为gdmcc no.61687。本发明所选菌株是从安徽东部某酸性矿山废水筛选而来，既可以耐受低ph，同时能有效的去除多种重金属离子。而且该菌株在cu
2
浓度为500mg/l的培养条件下不能正常生长，在mn
2
浓度为2000mg/l培养条件下能够正常生长，当mn
2
浓度为50mg/l和100mg/l时，该菌株对mn
2
的去除率分别可以达到33.58％和21.1％。
16.生物保藏说明
17.红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为广东市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省微生物研究所，保藏日期为2021年5月26日，保藏编号为gdmcc no.61687。
附图说明
18.图1为红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4菌落形貌图；
19.图2为红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4菌体形态图；
20.图3为红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4的18srdna的pcr结果图，其中左侧图片为特征图谱，右侧图片为红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4 pcr产物凝胶电泳图；
21.图4为红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4的系统发育树；
22.图5为不同ph对红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4生长的影响；
23.图6为ph4下多种金属离子共存时红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4对于不同金属离子浓度的影响图；
24.图7为ph4下多种金属离子共存时红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4对于不同金属离子的去除情况；
25.图8为ph5.5下多种金属离子共存红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4对于不同金属离子浓度影响图；
26.图9为ph5.5下多种金属离子共存时红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4对于不同金属离子的去除情况；
27.图10为ph3.5红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4对于mn
2
的去除效果；
28.图11为红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4在模拟自然矿山废水环境状态下于不同金属离子浓度的影响图，其中(a)为tfe的浓度变化图，(b)为al
3
的浓度变化图，(c)为mn
2
的浓度变化图，(d)为cu
2
的浓度变化图，(e)为zn
2
的浓度变化图，(f)为cd
2
的浓度变化图；
29.图12为试验流程图，其中amd为酸性矿山废水。
具体实施方式
30.本发明提供了一株去除重金属离子的红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4，所述的红酵母mf4的保藏编号为gdmcc no：61687。
31.本发明所述菌株的生理特性如图1和图2所示：酵母菌细胞的形态多呈球形、卵圆形，比细菌的单细胞个体要大得多，一般为1～5μm或5～20μm，酵母菌无鞭毛，不能游动，菌落大而厚，菌落表面光滑、湿润、粘稠，容易挑起，菌落质地均匀，正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一，菌落为红色。本发明所选菌株是从安徽东部某酸性矿山废水筛选而来，该菌株是在极端酸性条件下筛选得到的，且能够在ph为2的情况下生长(图11)，因此该菌株既可以耐受低ph，还能同时去除重金属，而且相对而言中性条件下去除率更高，本发明所述菌株具有耐受低ph、有效的去除多种重金属离子、去除率高、生物量高和培养成本低的优势。本发明对该菌株进行了分子生物学鉴定，其26srdna的序列优选如seq id no.3所示，具体为：cggaggaaaagaaactaacaaggattcccctagtagcggcgagcgaagcgggaagagctcaaatttataatctggcaccttcggtgtccgagttgtaatctctagaagtgttttccgcgttggaccgcacacaagtctgttggaatacagcggcatagtggtgagacccccgtatatggtgcggacgcccaacgctttgtgatacactttcgaagagtcgagttgtttgggaatgcagctcaaattgggtggtaaattccatctaaagctaaatattggcgagagaccgatagcgaacaagtaccgtgagggaaagatgaaaagcactttggaaagagagttaacagtacgtgaaattgttggaagggaaacgcttgaagtcagacttgcttgccgagcaatcggtttgcaggccagcatcagttttctggggtggataatggtagagagaaggtagcagttccggctgtgttatagctctctgctggatacaccttgggggactgaggaacgcagtgtgccttacggcggatttctcgagatcttcacacttaggatgctggtggaatggctttaaacgacccgtctt，将该菌种的26srdna在ncbi上进行对比，发现与rhodotorula的相似度达到99.88％。
32.而且在《酿酒酵母吸附处理含锰废水》(张凯,王月兴,张建国,等.酿酒酵母吸附处理含锰废水[j].工业安全与环保,2014(10):13
‑
15.)一文中的酿酒酵母在ph3.5下对极低浓度4mg/l mn
2
的去除率仅为50％左右，而本发明所述菌株同等ph50mg/l mn
2
的去除效果(可达33.58％)远优于该株酿酒酵母对mn
2
的去除效果。故在mn
2
去除方面，本发明所述菌株相较于其它菌种具有明显优势。
[0033]
本发明提供了一种菌剂，所述菌剂的有效成分包括上述的红酵母mf4的分生孢子或菌体。在本发明中，当所述菌剂的有效成分为分生孢子时，所述菌剂中活性成分优选为红酵母mf4的裂解液、发酵液或孢子悬液。在本发明中，当所述菌剂中的活性成分优选为红酵母mf4的裂解液、发酵液或孢子悬液时，所述菌剂中红酵母mf4的孢子浓度优选为1.1
×
106～1.7
×
108个/ml，进一步优选为2
×
107～4
×
108个/ml，更优选为3.2
×
108个/ml；当所述菌剂的有效成分为菌体时，所述红酵母mf4的菌体浓度优选为10～20g/l，即1l废水中含10～20g红酵母mf4菌体，更优选为15.21
±
0.36g
·
l
‑1，即1l废水中含15.21
±
0.36g红酵母mf4菌体。本发明所述菌剂中的白地霉mf5能够在其表面吸附重金属或者分泌一些有机酸等活性组分与重金属离子结合以及通过一些运输机制将金属离子送至胞内，达到去除金属离子的作用。因此，利用本发明所述菌剂能够有效去除多种重金属离子，且去除率高。
[0034]
本发明所述菌株具有耐受低ph、有效的去除多种重金属离子、去除率高和培养成本低的优势，因此本发明所述菌株、含有所述菌株的菌剂可以应用于去除重金属离子。
[0035]
本发明提供了上述的红酵母mf4或上述的菌剂在去除重金属离子中的应用，进一步在去除水中重金属离子中的应用，所述重金属离子包括fe
3
、al
3
、mn
2
、cu
2
和zn
2
中的一种或几种；所述水优选包括废水和地下水；所述废水包括优选中性废水或酸性废水；所述中性废水优选包括矿冶、机械制造、化工、电子、仪表等工业生产过程中排出的含重金属的中性废水，进一步优选为盐废水；所述酸性废水优选包括酸性工业废水，更优选包括包括酸性
矿山废水。本发明所述酸性矿山废水优选为矿山开采、道路修建以及其他大型挖掘活动将藏于地下的硫化物矿石暴露出来，经过水、氧气、氧化亚铁硫杆菌及其他因素的共同作用，形成的极端环境的酸性矿山废水(acid mine drainage，简称amd)，其具有低ph、高浓度硫酸根和高浓度重金属离子的特点。
[0036]
本发明所述中性废水中的氯离子的浓度优选为100～3000mg/l，进一步优选为200～2800mg/l，更优选为300～2500mg/l，氮磷的浓度优选为50～2000mg/l，进一步优选为100～1900mg/l，更优选为300～1500mg/l，cod的浓度优选为1000～8000mg/l，进一步优选为2000～7000mg/l，更优选为3000～6000mg/l。
[0037]
本发明所述酸性矿山废水的ph优选为2.5～6.5，进一步优选为3～6，更优选为3.5～5.5；所述酸性矿山废水中硫酸根的浓度优选为500～5000mg/l，进一步优选为1000～4000mg/l，更优选为2000～3000mg/l；所述酸性矿山废水中重金属离子中fe
3
的浓度优选为5～500mg/l，进一步优选为10～90mg/l，更优选为20～80mg/l，最优选为30～70mg/l，al
3
的浓度优选为5～1000mg/l，进一步优选为50～400mg/l，更优选为100～350mg/l，最优选为150～300mg/l，mn
2
的浓度优选为5～1000mg/l，进一步优选为50～400mg/l，更优选为100～350mg/l，最优选为150～300mg/l，cu
2
的浓度优选为5～100mg/l，进一步优选为10～90mg/l，更优选为20～80mg/l，最优选为30～70mg/l，zn
2
的浓度优选为5～100mg/l，进一步优选为10～90mg/l，更优选为20～80mg/l，最优选为30～70mg/l。
[0038]
为了进一步说明本发明，下面结合附图和实施例对本发明提供的一株去除重金属离子的红酵母mf4、菌剂、降解剂及其应用进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
[0039]
按照图12的试验流程图进行下面的试验：
[0040]
实施例1
[0041]
真菌的富集培养：取50ml安徽东部某酸性矿山废水(ph为3.67，硫酸根浓度为3870mg/l，fe
3
的浓度为398.7mg/l，al
3
的浓度为912.3mg/l，mn
2
的浓度为776.2mg/l，cu
2
的浓度为43.9mg/l，zn
2
的浓度为49.21mg/l)，用台式离心机以3000r
·
min
‑1低速离心去除杂质。移取1ml离心后上清液分别接种到50ml查式液体培养基(硝酸钠3.00g、磷酸二氢钾1.00g、硫酸镁0.50g、硫酸亚铁0.01g、蔗糖30.00g、氯霉素0.10g、蒸馏水1000ml)、改良马丁式液体培养基(蛋白胨5.00g、酵母浸粉2.00g、葡萄糖20.00g、磷酸二氢钾1.00g、硫酸镁0.50g、氯霉素0.10g、蒸馏水1000ml)及沙式液体培养基(蛋白胨10.00g、葡萄糖40.00g、氯霉素0.10g、蒸馏水1000ml)中，在28℃、转速120r
·
min
‑1条件下富集培养72h，隔3d按培养基体积的2％的接种量转培1次，转培2次后备用，选择菌株长势好的改良马丁式培养基进行后面的真菌的分离纯化。
[0042]
真菌的分离纯化：实验前将孟加拉红培养基(葡萄糖10.00g、蛋白胨5.00g、磷酸二氢钾1.00g、硫酸镁(mgso4·
7h2o)0.50g、孟加拉红0.033g、氯霉素0.10g、琼脂20.00g、蒸馏水1000ml)、马铃薯培养基(马铃薯浸出粉10.00g、葡萄糖20.00g、氯霉素0.10g、琼脂13.00g、蒸馏水1000ml)、培养皿、涂布棒、稀释管、纯水等在121℃高温灭菌锅灭菌20min后，在无菌环境下，将孟加拉红培养基和马铃薯培养基分别倒25～30ml于平板中，冷却备用。取1ml3次转培后菌液，在稀释管中按照l0
‑1、10
‑2、10
‑3、10
‑4、10
‑5梯度将培养液依次稀释，无菌环境下分别吸取0.2ml不同梯度的稀释菌液涂布于孟加拉红培养基平板和马铃薯培养基平
板上，倒置培养于28℃恒温培养箱，培养2～3天至平板长出肉眼可见的菌落，选择菌株长势好(浓度梯度为10
‑3的稀释菌液)的孟加拉红平板进行后面的反复划线。
[0043]
选取孟加拉红平板上生长的典型单一菌落，反复划线，直到镜检菌体形态均一后，停止划线分离。将获得的纯菌落接种于保菌管中，作为菌种保藏于4℃冰箱，一天后转到
‑
81℃冰箱保藏，得菌株ⅰ。
[0044]
实施例2
[0045]
形态学鉴定：将实施例1得到的菌株ⅰ用高倍荧光显微镜对菌落、菌丝、孢子等结构进行观察，记录真菌颜色、大小、形状，并参照《真菌鉴定手册》(魏景超，1979)和《中国真菌志》(张中义，2014)，进行鉴定。
[0046]
形态学鉴定结果如图1和图2所示：酵母菌细胞的形态多呈球形、卵圆形，比细菌的单细胞个体要大得多，一般为1～5μm或5～20μm，酵母菌无鞭毛，不能游动，菌落大而厚，菌落表面光滑、湿润、粘稠，容易挑起，菌落质地均匀，正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一，菌落为红色。
[0047]
实施例3
[0048]
分子生物学鉴定：按照上海生物工程股份有限公司提供的ezup柱式真菌基因组dna抽提试剂盒(sk8259)提取实施例1筛选到的菌株ⅰ的dna，对提取dna进行pcr扩增，引物为26srdna通用引物nl1(5'
‑
gcatatcaataagcggaggaaaag
‑
3'，引物f，seq id no.1)，nl4(5'
‑
ggtccgtgtttcaagacgg
‑
3'，引物r，seq id no.2)，pcr扩增体序如表1所示；pcr扩增程序如表2所示。
[0049]
表1 pcr扩增体序
[0050]
反应成分体积(μl)10
×
pcrbuffer dntp(each10mm) taqplusdnapolymerase(5u/μl) 50mmmgso4共12.5引物f(10mm)1引物r(10mm)1template(dna)1ddh2o9.5total25
[0051]
表2 pcr扩增程序
[0052]
温度(℃)时间循环955min 9430s 5730s30cyc7290s 7210min [0053]
采用凝胶电泳法观察pcr扩增结果(1％琼脂糖电泳，150v、100ma 20min电泳观察)，结果如图3所示，在该泳道扩增出来一个条带，可见筛出了一株纯种红酵母。
taiwanensis)mf4的孢子悬浮液，其中孢子悬浮液中的孢子浓度为1.42
×
106个/ml，记为对照组；
[0063]
将实验组和对照组分别置于培养条件为28℃，120r
·
min
‑1的恒温振荡培养箱中连续培养112h，取样后放置于超速低温离心机中，调节转速为8000r
·
min
‑1离心5min，保留上清液用于测定其中fe
3
、al
3
、mn
2
、cu
2
、zn
2
的浓度变化，每组实验重复3次，浓度变化结果见表5和图6，重金属离子去除率如表5和图7所示，菌丝用于测定干重，干重结果如表4所示。
[0064]
表4 ph 4下多种金属离子共存时对红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4生长的影响
[0065] 生物量(g/l)误差对照组9.25631.75％实验组8.78321.56％
[0066]
由表4记载的可知，本发明所述菌株在多种重金属离子混合且低ph条件下能够正常生长，并且相较于无重金属条件下，生物量差别不大，为无重金属条件下的94.89％。
[0067]
表5 ph 4下多种金属离子共存时红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4对于不同金属离子浓度影响和去除率
[0068] 起始浓度(mg/l)处理后浓度(mg/l)误差去除率(％)fe
3
10028.9891.3％71.01％al
3
500281.41670.66％43.72％mn
2
500433.82.16％13.24％cu
2
10062.580.64％37.42％zn
2
10077.7610.01％22.24％
[0069]
由表5、图6和图7记载的可知，本发明所述菌株在多种重金属离子共存且低ph条件下，能够有效去除多种重金属离子，尤其是fe
3
,去除率可以达到71.01％，其次是al
3
，去除率可以达到43.72％，相较于其它低ph下处理al
3
废水的方法，用该菌种去除效果明显更优。
[0070]
实施例6
[0071]
向ph为5.5的改良式马丁式培养基中添加fe
3
、al
3
、mn
2
、cu
2
、zn
2
贮备液调节培养基，其中贮备液调节培养基中fe
3
的浓度为50mg
·
l
‑1，al
3
的浓度为50mg
·
l
‑1，mn
2
的浓度为50mg
·
l
‑1，cu
2
的浓度为50mg
·
l
‑1，zn
2
的浓度为50mg
·
l
‑1，再投加100μl红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4的孢子悬浮液，，其中孢子悬浊液中的孢子浓度为1.56
×
106个/ml，记为实验组；向ph为5.5的改良式马丁式培养基中投加100μl红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4的孢子悬浮液，其中孢子悬浊液中的孢子浓度为1.56
×
106个/ml，记为对照组；
[0072]
将实验组和对照组分别置于培养条件为28℃，120r
·
min
‑1的恒温振荡培养箱中连续培养112h，取样后放置于超速低温离心机中，调节转速为8000r
·
min
‑1离心5min，保留上清液用于测定溶液中fe
3
、al
3
、mn
2
、cu
2
、zn
2
的浓度变化，每组实验重复3次，浓度变化如表7和图8所示，重金属离子去除率如表7和图9所示，菌丝用于测定干重，干重结果如表6所示。
[0073]
表6 ph 5.5下多种金属离子共存时对红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4生长的影响
[0074] 生物量(g/l)误差对照组10.77213.01％实验组10.09350.98％
[0075]
由表6记载的可知，本发明所述菌株在多种重金属离子混合且较低ph条件下能够正常生长，并且相较于无重金属条件下，生物量差别不大，为无重金属条件下的93.70％。
[0076]
表7 ph 5.5下多种金属离子共存时红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4对于不同金属离子浓度影响和去除率
[0077][0078][0079]
由表7、图8和图9记载的可知，本发明所述菌株在多种重金属离子共存且较低ph条件下，能够有效去除多种重金属离子，尤其是fe
3
和al
3
，去除率可以达到52.85％％，对于al
3
的去除率也能达到40.05％，相较于其它低ph下处理al
3
废水的方法，用该菌种去除效果明显更优，同时对于低浓度cu
2
去除效果较好，50mg/l时去除率可以达到49.88％。
[0080]
实施例7
[0081]
分别向ph为3.5的改良马丁式培养基添加mn
2
储备液(配制过程如下：准确称取92.1818g一水合硫酸锰，加600ml左右去离子水溶解，转移至1l容量瓶中，继续加去离子水定容至刻度线，摇匀，得到浓度为30000mg/l的mn
2
储备液，备用)至培养基中mn
2
浓度分别为50、100、300、500、1000、2000mg/l，再分别投加100μl红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4的孢子悬浮液，孢子悬浮液浓度为1.2
×
107个/ml，调节ph＝3.5，28℃，120r/min条件下培养112h，取样后放置于超速低温离心机中，调节转速为8000r
·
min
‑1离心5min，离心后样品上清液采用火焰原子吸收法(原子吸收光谱仪aa240fs，var
‑‑
ian，usa)测定mn
2
浓度，每组实验重复3次，浓度变化如表9所示，重金属离子去除率如表9和图10所示，菌丝用于测定干重，干重结果如表8所示。
[0082]
表8 ph 3.5下不同浓度mn
2
对红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4生长的影响
[0083] 生物量(g/l)误差锰离子浓度：50mg/l10.96824.11％锰离子浓度：100mg/l10.74121.78％锰离子浓度：300mg/l10.23122.39％锰离子浓度：500mg/l9.72864.91％锰离子浓度：1000mg/l9.37213.56％锰离子浓度：2000mg/l8.40324.21％
[0084]
由表8记载的可知，本发明所述菌株在低ph条件下，即使在mn
2
达到2000mg/l时也能够正常生长，此条件下，其生物量可达正常生长条件下的76.64％，菌种生物量随着mn
2
浓度升高而降低。
[0085]
表9 ph 3.5下红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4对于不同浓度mn
2
浓度影响和去除率
[0086][0087][0088]
由表9和图10记载的可知，本发明所述菌株在低ph下，对低浓度mn
2
去除效果好，同时对于对高浓度mn
2
也有很好的耐受性，在mn
2
达到50mg/l时，去除率可以达到33.58％，但去除率随着mn2 浓度升高而逐渐降低。
[0089]
实施例8
[0090]
为探究耐酸的红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4对矿山废水的实际处理效果，取60l取自安徽东部某矿山废水(酸性矿山废水重金属含量如表10所示)置于容积为70l的立式反应器中，在改良马丁式培养基的基础上，加入400g葡萄糖，100g蛋白胨以及40g酵母浸粉，并接种500ml浓度为15.21
±
0.36g
·
l
‑1的红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4菌体，即添加红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4菌体后使得1l废水中含15.21
±
0.36g红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4菌体，从而模拟自然矿山废水环境状态下真菌的生长修复效果，实验设计一组空白对照组(即加入500ml去离子水，不加入菌剂)。定期在反应器液面下30cm处取样监测多个重金属等指标的变化情况，重金属浓度变化见图11。
[0091]
表10酸性矿山废水重金属含量
[0092]
指标单位参数ph
‑
3.67tfe(总铁)mg
·
l
‑1432.12mnmg
·
l
‑1776.2cumg
·
l
‑143.9znmg
·
l
‑149.21cdmg
·
l
‑10.27almg
·
l
‑1912.3
[0093]
表11红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4在模拟自然矿山废水环境状态下对tfe、al
3
和mn
2
金属金属离子浓度的影响
[0094]
[0095][0096]
表12红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4在模拟自然矿山废水环境状态下对cu
2
、zn
2
和cd
2
金属离子浓度的影响
[0097]
[0098][0099]
由图11记载的可知，实验组相较于空白对照组各金属离子浓度均有不同程度下降，其中在248天后，总铁去除率达到了80.20％，al
3
去除率达到了46.64％，mn
2
去除率达到了10.62％，cu
2
去除率达到了65.01％，zn
2
去除率达到了88.45％，cd
2
去除率达到了99.11％，说明红酵母(rhodotorula taiwanensis)mf4即使在含有多种重金属离子的酸性矿山废水中，仍然具有很大的生物修复潜力。
[0100]
由上述记载的实施例可知，本发明所选菌株是从安徽东部某酸性矿山废水筛选而来，既可以耐受低ph，同时能有效的去除多种重金属离子。而且该菌株在cu
2
浓度为500mg/l的培养条件下不能正常生长，在mn
2
浓度为2000mg/l培养条件下能够正常生长，当mn
2
浓度为50mg/l和100mg/l时，该菌株对mn
2
的去除率分别可以达到33.58％和21.1％。
[0101]
虽然本发明已以较佳的实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可以做各种改动和修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。