制备草药提取物及其组合物的方法与流程

制备草药提取物及其组合物的方法
发明领域
1.本发明涉及一种制备草药提取物的方法，使得在最终草药提取物中获得特定浓度的植物化学物质和树脂的选择性分离。
2.此外，本发明涉及包含所述草药提取物的组合物，所述草药提取物包括浓度分别为1％到90％的植物化学物质和1％到90％的树脂组成，其中所述组合物具有高溶解度、高生物利用度和缓释性。
3.发明背景
4.植物因其广泛的结构多样性和广泛的药理活性而在制药工业中得到认可。植物是化合物和结构多样的生物活性分子的天然储藏库，被称为植物化学物质。大量的研究表明，植物是一种被称为植物化学物质的化合物的丰富来源，具有广泛的生物活性。植物化学物质已被用于科学研究，在许多方面影响医疗保健系统，如治疗癌症和其他几种疾病。
5.植物原料的加工主要是为了优化已知成分的浓度和保持其活性。提取是植物化学加工中从植物原料提取、鉴定和应用植物活性成分的重要环节。选择有利的提取技术对于产品中草药成分的标准化至关重要，因为它用于分离理想的可溶性成分，而不需要借助溶剂。此外，选择合适的提取工艺和优化各种参数对于增加用途至关重要。
6.常用的提取工艺有浸渍法、渗漉法、浸提法、煎煮法和热连续提取法等常规方法。
7.超声辅助溶剂萃取(uase)、微波辅助溶剂萃取(mase)和超临界流体萃取(sfe)等替代方法引起了人们的兴趣。这些绿色提取技术如uase、mase和sfe在药用植物化学加工中的应用迅速增加，因为这些技术与传统方法相比可以快速实现。
8.最终的提取物/产品应具有良好和适当的生物活性，以便将提取物用于治疗目的。
9.虽然植物化学物质具有多种生物活性，但由于其肠道吸收能力差，导致生物利用度低，限制了其应用。有几种策略被用来提高植物化学物质的生物利用度，但效果有限。许多用于提取多种植物化学物质的提取技术都是基于最大限度地提高植物化学物质的回收率/产量。传统的提取方法会导致提取物中活性成分含量较高，但没有任何生物利用度和缓释性。
10.pct no.wo2015/025263公开了一种用于提高姜黄素生物利用度的组合物，包括姜黄素混合物和水提取物，比例为70:30，其中姜黄素混合物包括姜黄素干晶体、挥发油、固定油和乳化剂。wo’263中采用的工艺主要集中于使用姜黄素混合物和水提取物(比例为70:30)以及乳化剂配制/混合标准姜黄素，以提高生物利用度。wo’263的发明人没有提供任何关于在最终草药提取物中选择性分离植物化学物质和树脂的教导。
11.离子交换树脂
‑
药物复合物已被用于制备酸性和碱性药物的缓释制剂。然而，在现有公开技术中没有试图提供包含植物化学物质和天然树脂的草药提取物，使得组合物的所述天然树脂赋予草药提取物的植物化学物溶解性和持续释放性。
12.美国专利no.6,942,881涉及通过重复提取姜黄素类化合物来提高从含姜黄素的原料中提取姜黄素的总产率。本发明不提供含有高溶解性和缓释性的树脂和植物化学物质的草药提取物的提取方法。
13.本领域中可用的草药制剂使用合成聚合物和增溶剂来赋予植物化学物质持续释放性和溶解性/生物利用度。然而，如果在不使用合成乳化剂的情况下实现植物化学物质的持续释放性和溶解度，则对消费者和生产者都非常有利。这种方法的优点是不使用任何辅料来提高植物化学物质的生物利用度和缓释性。
14.有鉴于此，本领域始终需要提供一种方法，以促进植物化学物质与树脂的选择性分离，从而提供具有缓释活性、高溶解度和生物利用度的组合物。
15.文献中可获得的草药组合物包括草药活性物和用于提取草药活性物的方法。到目前为止，没有任何现有技术公开提及在特定范围内选择性地含有活性成分和树脂的提取物，以增强植物化学物质/草药活性物的生物利用度。


技术实现要素：

16.本发明的目的之一是提供一种从草药原料中选择性分离和提取高浓度“植物化学物质”和“树脂”的方法。
17.本发明的另一个目的是提供一种生物利用和缓释草药组合物，其包含通过本发明的方法选择性分离和提取的“植物化学物质”和“树脂”，使得植物化学成分具有高溶解度和增强的生物利用度。
18.在一方面，本发明提供一种制备包含植物化学物质和树脂的草药提取物的方法，所述方法包括：
19.(a)将草药原料研磨成细粉(10至120目)；
20.(b)对粉末进行co2/溶剂萃取以获得含有植物化学物质/活性成分、树脂、树胶、蜡、甘油三酯、脂肪酸、活性成分和挥发油的整个草药提取物；
21.(c)将步骤(b)的提取物进行溶剂蒸馏，然后真空蒸发以除去溶剂；
22.(d)将步骤(c)的提取物进行蒸汽蒸馏以除去挥发油；
23.(e)用非极性溶剂萃取步骤(d)的提取物，以去除软树脂、甘油三酯、树胶、蜡和脂肪酸；
24.(f)将步骤(e)的提取物进行溶剂蒸馏和/或真空干燥以去除非极性溶剂并获得干燥薄片；
25.(g)将步骤(f)中的薄片研磨成细粉末，并真空干燥粉末以获得包含植物化学物质和硬树脂的无溶剂低水分提取物；
26.其中，粉末提取物中的植物化学物质和树脂的浓度在1:9到9:1之间。
27.在一个特定方面，本发明提供一种从姜黄中制备草药提取物的方法，所述提取物包含姜黄素类化合物作为植物化学物质和树脂。最终草药提取物中存在的树脂为草药提取物中的植物化学物质提供溶解度/分散性、高生物利用度和缓释特性。
28.在另一方面，本发明提供具有高溶解性/分散性、高生物利用度和缓释特性的草药组合物，其中所述组合物包含通过本方法获得的粉末形式的草药提取物，其包含比例为1:9到9:1的植物化学物质和树脂。
29.在又一方面中，本发明提供具有增强的溶解性/分散性、生物利用度和缓释性的草药组合物，而不添加任何外部生物利用度增强剂。
30.缩写：
31.f
‑
3：姜黄草药提取物
32.c
‑
95：标准姜黄素类化合物95％
33.cp
‑
01：含85％姜黄素的挥发油的姜黄素类化合物
34.olnp
‑
18：本发明组合物/测试项目。
附图说明
35.图1示意了f
‑
3与标准姜黄素类化合物95％(c
‑
95)以及含有85％姜黄素的挥发油的姜黄素类化合物(cp
‑
01)在缓冲液中的溶解度的比较情况。
36.图2示意了如图1所示命名为olnp
‑
18的本发明组合物相对标准姜黄素类化合物95％(c
‑
95)以及含有85％姜黄素的挥发油的姜黄素类化合物(cp
‑
01)的溶解度曲线。
37.图3示意了与参照制剂、标准姜黄素类化合物95％(c
‑
95)和cp
‑
01相比，试验品(olnp
‑
18)中姜黄素的生物利用度显著提高情况。
38.图4示意了与标准姜黄素类化合物95％(c
‑
95)和cp
‑
01相比，试验品olnp
‑
18在24小时内的游离姜黄素的缓释曲线。
具体实施方式
39.现在将结合某些优选和可选实施例来详细描述本发明，以便可以更充分地理解和领会本发明的各个方面。
40.涉及到的术语“植物化学物质”也可推断为涉及术语“草本活性物”或天然活性成分/化合物。
41.生物材料来源：姜黄根茎从例如印度泰米尔纳德邦的统治和蒂鲁内尔弗利等地区的当地市场的供应商/农民处采购。
42.在优选实施例中，本发明提供一种制备包含植物化学物质和树脂的草药提取物的方法，所述方法包括：
43.(a)将草药原料磨成细粉；
44.(b)对粉末进行co2/溶剂萃取以获得含有植物化学物质/活性成分、树脂、树胶、甘油三酯(固定油)、脂肪酸、活性成分、蜡和挥发油的整个草药提取物；
45.(c)将步骤(b)的提取物进行溶剂蒸馏和/或真空蒸发以去除溶剂残留物；
46.(d)将步骤(c)的提取物进行蒸汽蒸馏以除去挥发油；
47.(e)用非极性溶剂萃取步骤(d)的提取物，以去除软树脂、甘油三酯(固定油)、树胶、蜡和脂肪酸；
48.(f)将步骤(e)的提取物进行溶剂蒸馏或干燥/真空干燥以去除非极性溶剂并获得干燥薄片；
49.(g)将步骤(f)中的薄片研磨成细粉末并真空干燥粉末以获得包含植物化学物质和硬树脂的无溶剂和无水分提取物；
50.其中，所述植物化学物质和树脂的浓度为1:9到9:1的比例。
51.最终提取物中存在的树脂为提取物中的植物化学物质提供溶解度/分散性、生物利用度和缓释特性。
52.更优选地，本发明提供了分别以1:5到5:1的比例提取和分离植物化学物质和树脂
的方法。最优选地，本发明提供一种按1:1比例提取和分离植物化学物质和树脂的方法。
53.在一个实施例中，本发明提供了一种从以下组中选择的草本植物，所述组包括：齿叶乳香树、姜黄属(姜黄)、姜属(生姜)、樟属(肉桂)、万寿菊属(万寿菊)、水飞蓟(奶蓟)、黄根木(黄根)、葱属(大蒜)，胡芦巴属(胡芦巴)、甘蔗属(甘蔗)、洋紫苏属植物(番薄荷)和没药属(没药)、洋蓟(刺菜蓟)、乳香属、没药属(印度没药)、姜黄、齿叶乳香树、假马齿苋、万寿菊、生姜、光果甘草、肉桂属、诃子，黄芩、海松皮、巴西莓、儿茶、水飞蓟、槲寄生、石榴、山茶(绿茶)、青咖啡豆、桂皮、番木瓜、积雪草、桂皮、方茎青紫葛、吊兰、莪术、印尼莪术、余甘果、乌墨蒲桃、长叶芡实、藤黄果、山竹、匙羹藤、木蓝、苦瓜(洋甘菊)、巴戟天、辣木、油麻藤、胡椒、胡椒、叶下珠、龙胆、网状五层龙、绒毛戴星草、心叶黄花稔、万寿菊、罗望子、大麻、黄连素、阿江榄仁树、诃子、蒺藜、胡芦巴、三果宝、南非醉茄、白藜醇、石杉素、愈创木等。圣罗勒、大蒜、洋葱、辣椒、松香树脂、马耳他的国树(桑达拉克树脂)、毛喉鞘蕊花(乳香)、紫胶、松香、蒲公英、紫花苜蓿种子、奶蓟、胡芦巴、水芹、水飞蓟、车前草、辣椒、魔芋、罗勒、亚麻籽、山楂、芹菜、甘蔗、阿魏胶、爵床属、布枯叶油、番荔枝、芹菜、野茶树、肉桂、西决明子、南锥虫、海棠、木槿、西葫芦、番茄、罗勒、海岸松、石榴、蛇纹石萝芙木和钩藤用于提取中草药提取物中的植物化学成分和树脂成分。更优选地，本发明已利用姜黄来获得包含姜黄素类化合物和树脂的草药提取物，其比例分别为1:9到9:1。
54.草药提取物是从根茎、地上部分(如叶、枝、茎、种子、果实、花、分泌物或上述植物的其他部分)中选择的植物部分中提取的。将选定的植物部分研磨成10至120目的细粉末。
55.在另一实施例中，本发明提供用于萃取的第一溶剂，其选自co2、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、1
‑
乙基
‑3‑
(3
‑
二甲氨基丙基)碳二亚胺(edc)及其组合。对本方法步骤(a)的研磨粉末进行溶剂萃取以获得包含植物化学物质/活性成分、树脂、树胶、甘油三酯(固定油)、脂肪酸、活性成分、蜡和挥发油的整个草药提取物；步骤(b)中所述草药提取物的提取过程在高达180℃的温度下进行。
56.此外，溶剂的蒸馏包括在50℃
‑
100℃下步骤(c)进行的蒸馏过程以及在1至50mbars真空和10
‑
80℃温度下进行的真空干燥。
57.此外，挥发油的蒸馏包括本工艺步骤(d)中的蒸汽蒸馏工艺，以去除/减少挥发油。
58.在又一实施例中，本发明提供本方法步骤(e)中用于从步骤(d)的草药提取物中去除软树脂、甘油三酯、树胶、蜡和脂肪酸的非极性溶剂，所述非极性溶剂选自包含非极性溶剂的组合，例如正己烷、己烷、苯、二乙醚，四氯化碳和二氯甲烷等。按照步骤(e)，将非极性溶剂己烷以1:2的比例添加到草药提取物中，并在室温下混合。任选地，加热(高达50℃)以促进从草药提取物中去除软树脂、甘油三酯、树胶、蜡和脂肪酸。
59.通过在真空烘箱中在1至50mbars真空和10至80℃温度下干燥/真空干燥，然后研磨成细粉，最终干燥薄片和粉末以获得最终产品。
60.通过本发明方法选择性分离的植物化学物质选自包含姜黄素类化合物、多酚化合物、生物碱、类黄酮、萜烯、甾体化合物等的组合。
61.在一个特别优选的实施方案中，本发明提供了一种从姜黄中提取包含姜黄素类化合物和树脂的草药提取物的方法，所述方法包括：
62.(a)将干姜黄根茎部位研磨成细粉末；
63.(b)将所述粉末经co2或乙酸乙酯或乙醇或甲醇萃取得到含有姜黄素类化合物、树
脂、树胶、甘油三酯、脂肪酸、蜡、树胶、活性成分和挥发油的整个草药提取物；
64.(c)将步骤(b)的提取物进行溶剂蒸馏、浓缩/真空干燥以除去溶剂；
65.(d)将步骤(c)的提取物进行蒸汽蒸馏以除去挥发油；
66.(e)用非极性溶剂萃取步骤(d)的提取物，以去除甘油三酯(脂肪)、软树脂固定油、蜡、树胶和脂肪酸；
67.(f)将步骤(e)的提取物进行溶剂蒸馏、干燥或真空干燥，除去非极性溶剂，得到干薄片；
68.(g)将步骤(f)中的薄片研磨成细粉末并真空干燥粉末以获得包含姜黄素类化合物和硬树脂的无溶剂、低水分提取物；
69.其中，所述植物化学物质和树脂的浓度为1:9到9:1的比例。
70.其中，最终草药提取物中的总姜黄素类化合物中含有占总姜黄素类化合物重量35％到70％的姜黄素、占总姜黄素类化合物重量10％到40％的脱甲氧基姜黄素和占总姜黄素类化合物重量10％到40％的双脱甲氧基姜黄素。
71.更具体地说，最终草药提取物中的总姜黄素类化合物含有占总姜黄素类化合物重量55％到65％的姜黄素、占总姜黄素类化合物重量20％到30％的脱甲氧基姜黄素和占总姜黄素类化合物重量10％到20％的双脱甲氧基姜黄素。
72.在一个优选实施方案中，本发明提供通过本方法制备的草药提取物，其包含姜黄素类化合物和树脂，比例为1:9到9:1。更优选地，通过本方法制备的草药提取物包含姜黄素类化合物和树脂，比例为1:5到5:1。最优选地，所述草药提取物以1:1的比例包含姜黄素类化合物和树脂。
73.因此，在本发明中留意到，从姜黄制备草药提取物的过程以相等比例产生姜黄素类化合物和树脂。在本发明中示意的具体实施例证明了其相同。
74.在一个具体实施方案中，本发明提供一种粉末形式的草药提取物，其包含草药活性物，即浓度分别为25％至90％的姜黄素类化合物，和浓度为45％至75％的树脂。所述草药提取物的水分活度<0.5，残余挥发油含量<5％。
75.在又一较佳实施例中，本发明提供包含该组合物重量>50％的姜黄素类化合物的草药提取物。在另一实施例中，本发明提供含有草药提取物的姜黄素类化合物，所述草药提取物由浓度范围为所述组合物重量的35％到70％之间的姜黄素，浓度范围为组合物重量的10％到40％的脱甲氧基姜黄素，浓度范围为组合物重量的10％到40％的双脱甲氧基姜黄素组成。
76.更具体地说，最终草药提取物中的总姜黄素类化合物含有占总姜黄素类化合物重量55％到70％的姜黄素、占总姜黄素类化合物重量20％到30％的脱甲氧基姜黄素和占总姜黄素类化合物重量10％到20％的双脱甲氧基姜黄素。
77.在另一优选实施方案中，本发明提供一种生物可利用和缓释草药组合物，其包含浓度分别为1％到90％的植物化学物质和1％到90％的树脂的草药提取物。
78.在本发明中已经留意到，通过本方法获得的草药提取物的树脂组分为草药提取物中的植物化学物质提供溶解度/分散性、生物利用度和缓释特性，并且已经在本发明中证明。
79.图1示意了通过本发明方法获得的草药提取物相对于包含姜黄素类化合物和挥发
油的制剂、简单姜黄素制剂的溶解度曲线。与标准配方相比，包含本发明草药提取物的组合物表现出增强的溶解性。
80.此外，图2还示意了在组合物中配制的本发明草药提取物的增强溶解度曲线。
81.图3示意了当前草药提取物
‑
试验品(olnp
‑
18)中姜黄素的生物利用度与参比制剂，姜黄素类化合物
‑
95％(c
‑
95)和cp 01相比显著增加。
82.更重要的是，通过本工艺获得的草药提取物显示出增强的生物利用度。在本技术的实施例6中观察到相同的示例性证明。来自本发明的草药提取物olnp
‑
18被发现具有更好的口服生物利用度，即与包含挥发油的姜黄素类化合物的简单配方(cp
‑
01)相比增加16％；与含有95％姜黄素的标准姜黄素类化合物(c
‑
95)相比增加了134％(图4)。
83.此外，该组合物可包含医药学上及营养学上可接受之载体、赋形剂、乳化剂、滑动剂、防结块剂、黏合剂、聚合物(天然或合成)以增加流动性及调整最终活性物及树脂的浓度。
84.在又一优选实施方案中，本发明提供通过本方法获得的粉末状草药提取物，其形式为片剂、胶囊、树胶、饮料、锭剂、即可饮用的粉末和悬浮液。
85.在一个较佳实施例中，本发明提供该草药提取物，以供作为营养药物组合物、药物组合物及作为草药组合物施用给需要其之个体。
86.实施例：以下示例作为说明给出，因此不应被解释为限制本发明的范围。
87.实施例1：
88.姜黄草药提取物的提取
89.干的姜黄根茎部位被磨成细粉。姜黄粉用乙酸乙酯萃取，得到含有姜黄素类化合物、树胶、蜡、脂肪(固定油)、脂肪酸、挥发油和树脂的粘稠液体提取物。溶剂通过蒸馏从提取物中除去。下一步，通过蒸汽蒸馏从提取物中去除挥发油。为了去除甘油三酯、固定油、软树脂、脂肪、蜡、树胶，向草药提取物中添加非极性溶剂，例如正己烷，混合/回流1至6小时，通过过滤、离心/倾析分离正己烷层，丢弃己烷部分，从而从提取物中去除甘油三酯、固定油、软树脂、脂肪、蜡，树胶。用非极性溶剂重复萃取4
‑
7次，以确保完全去除甘油三酯、固定油、软树脂、蜡、脂肪和树胶。去除提取溶剂后，将草药提取物真空干燥(温度；60℃，真空：12mbars)以获得坚硬/固体干燥薄片。所获得的薄片在交流磨机中研磨成细粉，获得粒度为40至170目的粉末。研磨后的粉末在12mbars的真空下在真空干燥器中真空干燥12小时，以获得低水分的自由流动粉末。草药提取物的粉末形式包含草药活性物，即浓度为25％至90％的姜黄素类化合物和45％至75％的树脂，水活性低于0.5，挥发油低于5％。
90.下文所示的实施例具体展示了以特定浓度提取草药活性物和树脂的方法。
91.实施例2：
92.姜黄草药提取物f2的提取
93.干的姜黄根茎部位被磨成细粉末。粉末中总姜黄素类化合物含量在2
‑
3％之间。姜黄粉用乙酸乙酯萃取，得到含有姜黄素类化合物、脂肪(固定油)、脂肪酸、树胶、蜡、挥发油和树脂的液体提取物。提取液中姜黄素类化合物的含量为≥20％。在75℃至80℃蒸馏，从提取物中除去溶剂。下一步，通过蒸汽蒸馏从提取物中除去挥发油。为了去除提取物中的甘油三酯、固定油、软树脂、脂肪、蜡、树胶，将非极性溶剂己烷以1:2的比例添加到草药提取物中，在室温下混合，通过过滤、离心/倾析分离己烷层并丢弃。该过程重复4至7个周期，从而
从提取物中去除甘油三酯、固定油、软树脂、脂肪、树胶、蜡和脂肪酸。去除萃取溶剂(即己烷)后，将提取物在12mbars的真空下及35℃至60℃下真空干燥12小时，得到坚硬的薄片。然后将获得的薄片在交流磨机中研磨以获得粒径大于40目的自由流动粉末。采用高效液相色谱法对最终产品进行了测试，结果如表1所示。
94.表1：通过hplc测定实施例2(f
‑
2)的总姜黄素类化合物
95.姜黄素类化合物含量克/100克姜黄素29.21双去甲氧基姜黄素8.71去甲氧基姜黄素11.45总姜黄素类化合物49.37
96.实施例2最终产物中总姜黄素类化合物含量为49.37％，其中姜黄素含量为59.17％，去甲氧基姜黄素为23.19％，双去甲氧基姜黄素为17.64％。最终产品中树脂的总含量为50.63％。
97.实施例3：
98.姜黄草药提取物f3的提取
99.干的姜黄根茎部位被磨成细粉。姜黄粉用乙酸乙酯萃取，得到含有姜黄素类化合物、脂肪、树胶、蜡、脂肪酸、挥发油和树脂的液体提取物。在75℃
‑
80℃蒸馏，从提取物中除去溶剂。在下一步中，通过蒸汽蒸馏从提取物中除去挥发油。为了去除甘油三酯、固定油、软树脂、脂肪、树胶和蜡，将己烷以1:2的比例添加到草药提取物中，在室温下混合，并通过过滤分离己烷层并丢弃。该过程重复4至7个周期，从而从提取物中去除甘油三酯、固定油、软树脂、脂肪、蜡和树胶。去除萃取溶剂(即己烷)后，在35℃下12mbars的真空条件下，将萃取物真空干燥12小时，以获得坚硬/干燥的薄片。然后将获得的薄片在交流磨机中研磨以获得粒径为120目的自由流动粉末。采用高效液相色谱法对最终产品进行了检测，结果如表2所示。
100.表2：通过hplc测定实施例3(f
‑
3)的总姜黄素类化合物
101.姜黄素类化合物克/100克姜黄素32.49去甲氧基姜黄素12.75双去甲氧基姜黄素9.88总姜黄素类化合物55.12
102.实施例2最终产物中姜黄素类化合物总含量为55.12％，其中姜黄素含量为58.9％，去甲氧基姜黄素为23.13％，双去甲氧基姜黄素为17.9％。最终产品中树脂的总含量为44.88％。
103.实施例4：
104.来自实施例3的最终产物(f
‑
3)的溶解度：
105.f
‑
3在6.8磷酸盐缓冲液中的溶解度与标准姜黄素类化合物(c
‑
95)和含85％姜黄素的挥发油的姜黄素类化合物(cp 01)(含挥发油的姜黄素类化合物标准化为86％姜黄素类化合物)进行比较。将500mg f
‑
3粉末、标准姜黄素类化合物(c
‑
95)和cp 01各加入500ml的6.8缓冲液中，置于单独的烧杯中。将装有供试品和缓冲液的烧杯置于37℃的水浴中，连
续搅拌。定期(0、1、2、3、4和5小时)采集样品，用whatman滤纸过滤，用紫外分光光度计分析姜黄素含量。试验产品的溶解度曲线如图1所示。
106.实施例5：
107.姜黄草药提取物olnp
‑
18的提取
108.干的姜黄根茎部位被磨成细粉。姜黄粉用乙酸乙酯萃取，得到含有姜黄素类化合物、树胶、蜡、脂肪(固定油)、脂肪酸、挥发油和树脂的粘稠液体提取物。在75℃至85
°
蒸馏，从提取物中除去溶剂，在下一步中，通过蒸汽蒸馏从提取物中去除挥发油。为了去除甘油三酯、固定油、软树脂、脂肪、树胶、蜡、非极性溶剂，将己烷以1:2的比例添加到草药提取物中，在30℃至45℃下混合，通过倾析和过滤分离己烷层，并丢弃己烷部分。用非极性溶剂反复萃取6次，以确保甘油三酯、固定油、软树脂、脂肪、蜡和树胶的完全去除。去除萃取溶剂(即己烷)后，在60℃及12mbars的真空下将提取物真空干燥12小时，以获得坚硬干燥的薄片。然后将获得的薄片在交流磨机中研磨以获得粒径大于120目的自由流动粉末。采用高效液相色谱法对最终产品进行了检测，结果如表3所示。
109.表3:olnp
‑
18姜黄素类化合物总含量
110.姜黄素类化合物含量克/100克姜黄素30.36去甲氧基姜黄素12.20双去甲氧基姜黄素8.80总姜黄素类化合物51.36
111.实施例5最终产物中总姜黄素类化合物含量为51.36％，其中姜黄素含量为59.11％，去甲氧基姜黄素为23.75％，双去甲氧基姜黄素为17.13％。最终产品中树脂的总含量为48.64％。
112.实施例6：
113.本发明olnp
‑
18组合物相对于cp
‑
01和标准姜黄素类化合物(c
‑
95％)的生物利用度比较研究
114.cp
‑
01＝含挥发油的姜黄素类化合物
115.标准姜黄素类化合物(c
‑
95％)：标准姜黄提取物
116.在雄性wistar大鼠中实施单次口服管理(500mg/kg体重；相对于姜黄素类化合物)，以将olnp
‑
18与cp
‑
01和标准姜黄素类化合物(c
‑
95％)进行药代动力学比较。给药后，分别于0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、6.00、8.00、10.00、12.00和24.00小时采集每只动物的血液。血浆在在4℃下、3000rpm离心10分钟后在预先标记的小瓶中分离，以及在
–
70℃下储存，直至进行生物分析。采用部分验证的lc
‑
ms/ms法测定大鼠血浆中姜黄素的含量。
117.在实验期间，没有一只大鼠表现出任何毒性迹象。实验期间未观察到死亡率或发病率。
118.研究结果表明，与参照试剂、标准姜黄素类化合物(c
‑
95％)和cp
‑
01(图3)相比，试验品(olnp
‑
18)中姜黄素的生物利用度显著提高。olnp
‑
18比cp
‑
01具有更好的口服生物利用度(16％
↑
)；和与标准姜黄素类化合物(c
‑
95％)相比(134％
↑
)，olnp
‑
18与cp
‑
01和标准姜黄素类化合物(c
‑
95％)相比，分别对于姜黄素，olnp
‑
18的相对生物利用度(aucs)各为116％和234％。与cp
‑
01和标准姜黄素类化合物(c
‑
95％)相比，olnp
‑
18显示游离姜黄素在
24小时内的缓释曲线(图4)。与cp
‑
01相比，其游离姜黄素的auc大约高出3倍，与标准姜黄素类化合物(c
‑
95％)相比，其游离姜黄素的auc大约高出11倍。公开(aucs)以升序排列：olnp
‑
18>cp01>c95。
119.在本实验条件下，olnp
‑
18在雄性wistar大鼠体内提高姜黄素的生物利用度和缓释特性方面优于cp
‑
01和标准姜黄素类化合物(c
‑
95％)。
120.实施例7：
121.olnp
‑
18的释放曲线
122.olnp
‑
18在6.8磷酸盐缓冲液中进行释放研究，并与标准姜黄素类化合物95％(c
‑
95)和姜黄素挥发油制剂(cp
‑
01)进行比较。将500mg olnp
‑
18粉末、95％标准姜黄素类化合物和cp
‑
01分别加入到400ml 6.8缓冲液的各个烧杯中，置于37℃水浴中，连续搅拌。定期(0、1、2、3、4和5小时)采集样品，用whatman滤纸过滤，用紫外分光光度计分析姜黄素含量。试验产品的溶解度曲线如图2所示。
123.本发明的优点：
124.通过本发明的简单方法获得包含植物化学物质和树脂的草药提取物。本工艺不需要常规工艺中通常观察到的分离提取工艺。
125.所得到的包含植物化学物质和树脂(即姜黄素和树脂)的草药提取物具有高溶解性、高生物利用度和缓释性。
126.草药提取物将具有类似姜黄根状茎的姜黄素成分，这是一种天然姜黄素成分。
127.草药提取物不含任何合成乳化剂或生物增强剂，因此口服非常安全。