用于治疗GRN相关成人发作性神经退行性病变的重组腺相关病毒的制作方法

技术特征：
1.一种重组aav(raav)，其包括：(a)来自腺相关病毒1的aav衣壳；以及(b)包装在所述aav衣壳中的载体基因组，所述载体基因组包括aav反向末端重复序列(itr)、人颗粒蛋白前体的编码序列以及引导所述颗粒蛋白前体表达的调控序列。2.根据权利要求1所述的raav，其中所述编码序列对seq id no:1的人颗粒蛋白前体蛋白进行编码。3.根据权利要求1或2所述的raav，其中所述颗粒蛋白前体编码序列是seq id no:3或与其至少95％到99.9％相同的序列。4.根据权利要求1到3中任一项所述的raav，其中所述载体基因组包括启动子、增强子、内含子、人颗粒蛋白前体编码序列和聚腺苷酸化信号。5.根据权利要求1到4中任一项所述的raav，其中所述内含子由鸡β肌动蛋白剪接供体和兔β剪接受体元件组成。6.根据权利要求1到5中任一项所述的raav，其中所述aav反向末端重复序列(itr)是侧接所述颗粒蛋白前体编码序列和所述调控序列的aav2 5'itr和aav2 3'itr。7.根据权利要求1到6中任一项所述的raav，其中所述载体基因组包括：(a)ef1
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a启动子和sv40晚期polya；(b)ubc启动子、内含子和sv40晚期polya；或(c)cb7启动子、嵌合内含子和兔珠蛋白polya。8.根据权利要求7所述的raav，其中所述载体基因组包括seq id no:24的序列。9.一种药物组合物，其包括适合于鞘内施用的水性液体以及适用于治疗由grn单倍型不足引起的神经退行性病变的重组aav(raav)，所述raav包括：(a)来自腺相关病毒1的aav衣壳；以及(b)包装在所述aav衣壳中的载体基因组，所述载体基因组包括aav反向末端重复序列(itr)、人颗粒蛋白前体的编码序列以及引导所述颗粒蛋白前体表达的调控序列。10.根据权利要求9所述的组合物，其中所述编码序列对seq id no:1的人颗粒蛋白前体蛋白进行编码。11.根据权利要求9或10所述的组合物，其中所述颗粒蛋白前体编码序列是seq id no:3或在seq id no:3的至少氨基酸18
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593上与其至少95％到99.9％相同的序列。12.根据权利要求9到11中任一项所述的组合物，其中所述载体基因组包括启动子、增强子、内含子、所述人颗粒蛋白前体编码序列以及聚腺苷酸化信号。13.根据权利要求9到12中任一项所述的组合物，其中所述内含子由鸡β肌动蛋白剪接供体和兔β剪接受体元件组成。14.根据权利要求9到13中任一项所述的组合物，其中aav反向末端重复序列(itr)是侧接所述载体基因组的所述颗粒蛋白前体编码序列和所述调控序列侧翼的aav2 5'itr和aav2 3'itr。15.根据权利要求9到14中任一项所述的组合物，其中所述载体基因组包括：(a)ef1
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a启动子和sv40晚期polya；(b)ubc启动子、内含子和sv40晚期polya；或(c)cb7启动子、嵌合内含子和兔珠蛋白polya。16.根据权利要求15所述的raav，其中所述载体基因组包括seq id no:24的序列。17.根据权利要求9到16中任一项所述的组合物，其中所述组合物包括人工脑脊髓液与
表面活性剂。18.根据权利要求17所述的组合物，其中所述表面活性剂是普朗尼克(pluronic)f
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68。19.根据权利要求1到8中任一项所述的重组aav(raav)或根据权利要求9到18中任一项所述的药物组合物，其在用于治疗患有由grn单倍型不足引起的成人发作性神经退行性病变的患者的方法中使用。20.一种根据权利要求1到8中任一项所述的重组aav(raav)或根据权利要求9到18中任一项所述的药物组合物的用途，其用于制造用于治疗患有由grn单倍型不足引起的成人发作性神经退行性病变的患者的药物。21.根据权利要求19或20所述的用途，其中所述组合物被调配成鞘内施用剂量为1
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gc/g脑质量到3.33
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gc/g脑质量的所述ravv。22.根据权利要求19或20中任一项所述的用途，其中所述患者是成年人并且被施用剂量为1.44
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到4.33
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gc的所述raav。23.根据权利要求19到22中任一项所述的用途，其中所述raav或所述组合物可施用于方案中，所述方案进一步包括以下中的一项或多项：(a)无创评估作为脑病变减少的预测因子的患者视网膜贮积病变减少；(b)进行磁共振成像以评估脑体积；和/或(c)测量所述csf中的颗粒蛋白前体的浓度。24.根据权利要求19到23中任一项所述的用途，其中包括所述颗粒蛋白前体编码序列的所述raav是通过脑室内递送或通过器官实质内递送进行鞘内递送的。25.根据权利要求19到23中任一项所述的用途，其中所述组合物通过计算机断层扫描(ct)引导的枕骨下注射以单剂量施用于小脑延髓池中(小脑延髓池内)。26.根据权利要求19到25中任一项所述的用途，其中所述患者患有颗粒蛋白前体额颞叶痴呆。27.一种治疗患有由颗粒体蛋白(grn)单倍型不足引起的成人发作性神经退行性病变的人类患者的方法，所述方法包括向中枢神经系统(cns)递送具有腺相关病毒1(aav1)的aav衣壳的重组腺相关病毒(raav)，所述raav进一步包括包装在所述aav衣壳中的载体基因组，所述载体基因组包括aav反向末端重复序列、人颗粒蛋白前体编码序列以及引导所述颗粒蛋白前体表达的调控序列。28.一种治疗患有由颗粒体蛋白(grn)单倍型不足引起的成人发作性神经退行性病变的人类患者的方法，所述方法包括向中枢神经系统(cns)施用具有靶向室管膜细胞的腺相关病毒1(aav1)的aav衣壳的重组腺相关病毒(raav)，所述raav进一步包括包装在所述aav衣壳中的载体基因组，所述载体基因组包括aav反向末端重复序列、人颗粒蛋白前体编码序列以及引导所述颗粒蛋白前体在所述室管膜细胞中表达的调控序列。29.一种用于治疗患有与由颗粒体蛋白单倍型不足引起的成人发作性神经退行性病变相关的脑病变的人类患者的方法，所述方法包括向中枢神经系统施用具有腺相关病毒1(aav1)的aav衣壳的重组腺相关病毒(raav)，所述raav进一步包括包装在所述aav衣壳中的载体基因组，所述载体基因组包括aav反向末端重复序列、人颗粒蛋白前体编码序列以及引导所述颗粒蛋白前体表达的调控序列。30.根据权利要求27到29中任一项所述的方法，其中所述患者被施用根据权利要求1到8中任一项所述的raav或根据权利要求9到18中任一项所述的药物组合物。
31.根据权利要求27到30中任一项所述的方法，其中所述患者被鞘内施用剂量为1
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gc/g脑质量到3.33
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gc/g脑质量的所述raav。32.根据权利要求27到30中任一项所述的方法，其中所述患者是成年人并且被施用剂量为1.44
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到4.33
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gc的所述raav。33.根据权利要求27到32中任一项所述的方法，其进一步包括以下中的一项或多项：(a)无创评估作为脑病变减少的预测因子的患者视网膜贮积病变减少；(b)进行磁共振成像以评估脑体积；和/或(c)测量所述csf中的颗粒蛋白前体的浓度。34.根据权利要求27到33中任一项所述的方法，其中包括所述颗粒蛋白前体编码序列的所述raav是通过脑室内递送或通过器官实质内递送进行鞘内递送的。35.根据权利要求27到33中任一项所述的方法，其中所述raav通过计算机断层扫描(ct)引导的枕骨下注射以单剂量施用于小脑延髓池中(小脑延髓池内)。36.根据权利要求27到35中任一项所述的方法，其中所述患者患有颗粒蛋白前体相关的额颞叶痴呆(ftd)。

技术总结
提供了一种适用于治疗由颗粒体蛋白(GRN)单倍型不足引起的成人发作性神经退行性病变，如颗粒蛋白前体(PGRN)相关的额颞叶痴呆(FTD)的重组AAV(rAAV)。所述rAAV包括：(a)腺相关病毒1衣壳；以及(b)包装在AAV衣壳中的载体基因组，所述载体基因组包括AAV反向末端重复序列、人颗粒蛋白前体的编码序列以及引导所述颗粒蛋白前体表达的调控序列。还提供了一种用于治疗患有PGRN


技术研发人员：C
受保护的技术使用者：宾夕法尼亚州大学信托人
技术研发日：2020.02.21
技术公布日：2021/11/25