一种治疗脑胶质瘤药物组合物及其制备方法与流程

1.本发明涉及脑胶质瘤药物领域，特别涉及一种治疗脑胶质瘤药物组合物及其制备方法。


背景技术：

2.脑胶质瘤按照细胞形态分类可划分为星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤、室管膜瘤、髓母细胞瘤等。脑胶质瘤的症状表现与肿瘤的大小、位置以及生长速度有关，主要表现为头痛、癫痫、局灶性功能障碍等。随着病情的恶化，患者可出现颅内压升高、认知功能障碍等并发症。引发脑胶质瘤的病因尚不明确，可能与多种危险因素有关，如基因遗传突变、肿瘤、电离辐射、感染、长期接触化学物质等。据目前研究，可确定的危险因素为暴露于高剂量电离辐射与罕见的基因遗传突变两种。脑胶质瘤发病率较高，在我国脑胶质瘤发病率为十万分之五至八，五年内病死亡率在人体全身肿瘤中排名第三，仅次于胰腺癌和肺癌。因此，研发治疗脑胶质瘤药物具有重大意义。


技术实现要素：

3.鉴于此，本发明提出一种治疗脑胶质瘤药物组合物及其制备方法，获得药剂对脑胶质瘤具有显著的抑制效果。
4.本发明的技术方案是这样实现的：一种治疗脑胶质瘤药物组合物，包括以下重量份原料：异莲心碱8
‑
10份、番茄红素12
‑
15份、姜黄素5
‑
8份、海葵毒素ⅱ2
‑
4份、复合海洋多糖15
‑
20份，所述复合海洋多糖由海带多糖、鲍鱼多糖、紫贻贝多糖和扇贝多糖按照质量比5：2
‑
4：6
‑
8：1
‑
3组成。优选地，异莲心碱9份、番茄红素13份、姜黄素7份、海葵毒素ⅱ3份、复合海洋多糖17份，所述复合海洋多糖由海带多糖、鲍鱼多糖、紫贻贝多糖和扇贝多糖按照质量比5：3：7：2组成。
5.进一步的，所述鲍鱼多糖的制备方法包括以下步骤：取鲍鱼粉末，加入40倍纯水，在85℃温度条件下水浴中提取2.8h，过滤，弃去滤渣，离心，收集上清液，减压浓缩，干燥，得到鲍鱼多糖。
6.进一步的，所述紫贻贝多糖的制备方法包括以下步骤：取紫贻贝粉末，加入45倍纯水，在93℃温度条件下4.2h，过滤，弃去滤渣，离心，收集上清液，减压浓缩，干燥，得到紫贻贝多糖。
7.进一步的，所述扇贝多糖的制备方法包括以下步骤：取扇贝粉末，加入40倍纯水，在90℃温度条件下6h，过滤，弃去滤渣，离心，收集上清液，减压浓缩，干燥，得到扇贝多糖。
8.上述药物组合物的制备方法，包括以下步骤：称取异莲心碱、番茄红素、姜黄素、海葵毒素ⅱ、复合海洋多糖总质量9
‑
11倍的纯水，将纯水与异莲心碱、番茄红素、姜黄素混合，在转速100
‑
200r/min、温度30
‑
35℃条件下震荡1
‑
1.5h；再加入复合海洋多糖，在转速500
‑
800r/min、温度50
‑
60℃条件下震荡2
‑
3h；最后加入海葵毒素ⅱ，在转速300
‑
400r/min、温度10
‑
15℃条件下震荡0.5
‑
1h，过滤，灭菌，制得口服液。
9.上述药物组合物的优选制备工艺：称取异莲心碱、番茄红素、姜黄素、海葵毒素ⅱ、复合海洋多糖总质量10倍的纯水，将纯水与异莲心碱、番茄红素、姜黄素混合，在转速150r/min、温度30℃条件下震荡1.2h；
10.再加入复合海洋多糖，在转速600r/min、温度55℃条件下震荡2.5h；
11.最后加入海葵毒素ⅱ，在转速350r/min、温度15℃条件下震荡0.8h，过滤，灭菌，制得口服液。
12.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
13.本发明添加一定量的异莲心碱、番茄红素、姜黄素、海葵毒素ⅱ，与海带多糖、鲍鱼多糖、紫贻贝多糖和扇贝多糖复配的海洋多糖搭配，具有增效作用，制得药物组合物，应用于抑制脑胶质瘤，可有效抑制肿瘤重量增重，对脑胶质瘤具有显著的抑制效果。本发明药物组合物，抑制脑胶质瘤细胞dna合成，诱导脑胶质瘤细胞凋亡，抑制脑胶质瘤生长。而且本发明优选口服液制备工艺，进一步提高原料的增效作用。另外，本发明原料易得，制备工艺简单，适于高效生产。
具体实施方式
14.为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
15.本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
16.本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
17.部分原料厂家
18.序号原料厂家1异莲心碱上海吉至生化科技有限公司2番茄红素上海吉至生化科技有限公司3姜黄素上海吉至生化科技有限公司4海葵毒素ⅱ爱必信(上海)生物科技有限公司5海带多糖上海吉至生化科技有限公司
19.实施例1
‑320.1.1原料制备
21.(1)鲍鱼多糖制备：取鲍鱼粉末，加入40重量倍超纯水，在85℃温度条件下水浴中提取2.8h，过滤，弃去滤渣，离心，收集上清液，减压浓缩，干燥，得到鲍鱼多糖。
22.(2)紫贻贝多糖制备：取紫贻贝粉末，加入45重量倍超纯水，在93℃温度条件下4.2h，过滤，弃去滤渣，离心，收集上清液，减压浓缩，干燥，得到紫贻贝多糖。
23.(3)扇贝多糖制备：取扇贝粉末，加入40重量倍超纯水，在90℃温度条件下6h，过滤，弃去滤渣，离心，收集上清液，减压浓缩，干燥，得到扇贝多糖。
24.1.2药物口服液配方表
[0025][0026][0027]
1.3口服液制备：
[0028]
按照上述配方表称取各原料，将超纯水与异莲心碱、番茄红素、姜黄素混合，在转速150r/min、温度30℃条件下震荡1.2h；再加入复合海洋多糖，在转速600r/min、温度55℃条件下震荡2.5h；最后加入海葵毒素ⅱ，在转速350r/min、温度15℃条件下震荡0.8h，过滤，灭菌，制得口服液。
[0029]
实施例4
[0030]
原料以及口服液配方与实施例1一致，调整口服液制备工艺条件：
[0031]
按照配方表称取各原料，将超纯水与异莲心碱、番红菌素、姜黄素混合，在转速100r/min、温度30℃条件下震荡1.5h；再加入复合海洋多糖，在转速500r/min、温度50℃条件下震荡3h；最后加入海葵多肽毒素，在转速300r/min、温度10℃条件下震荡1h，过滤，灭菌，制得口服液。
[0032]
实施例5
[0033]
原料以及口服液配方与实施例1一致，调整口服液制备工艺条件：
[0034]
按照配方表称取各原料，将超纯水与异莲心碱、番红菌素、姜黄素混合，在转速200r/min、温度35℃条件下震荡1h；再加入复合海洋多糖，在转速800r/min、温度60℃条件下震荡2h；最后加入海葵多肽毒素，在转速400r/min、温度15℃条件下震荡0.5h，过滤，灭菌，制得口服液。
[0035]
对比例1
[0036]
原料制备与实施例1一致，添加等量的莲心碱替换异莲心碱。
[0037]
1.1药物配方：
[0038]
[0039][0040]
1.2口服液制备：
[0041]
按照配方表称取各原料，将超纯水与异莲心碱、番茄红素、姜黄素混合，在转速150r/min、温度30℃条件下震荡1.2h；再加入复合海洋多糖，在转速600r/min、温度55℃条件下震荡2.5h；最后加入海葵毒素ⅱ，在转速350r/min、温度15℃条件下震荡0.8h，过滤，灭菌，制得口服液。
[0042]
对比例2
[0043]
原料制备、口服液制备工艺与实施例1一致，添加等量的番茄红素替换姜黄素。1.1药物配方：
[0044][0045]
1.2口服液制备：
[0046]
按照配方表称取各原料，将超纯水与异莲心碱、番茄红素混合，在转速150r/min、温度30℃条件下震荡1.2h；再加入复合海洋多糖，在转速600r/min、温度55℃条件下震荡2.5h；最后加入海葵毒素ⅱ，在转速350r/min、温度15℃条件下震荡0.8h，过滤，灭菌，制得口服液。
[0047]
对比例3
[0048]
原料制备与实施例1一致，添加等量的海带多糖替换复合海洋多糖，
[0049]
1.1药物配方：
[0050][0051]
1.2口服液制备：
[0052]
按照配方表称取各原料，将超纯水与异莲心碱、番茄红素、姜黄素混合，在转速150r/min、温度30℃条件下震荡1.2h；再加入海带多糖，在转速600r/min、温度55℃条件下震荡2.5h；最后加入海葵毒素ⅱ，在转速350r/min、温度15℃条件下震荡0.8h，过滤，灭菌，制得口服液。
[0053]
对比例4
[0054]
原料制备、口服液制备工艺与实施例1一致，调整配方中复合海洋多糖配比。药物配方：
[0055][0056]
对比例5
[0057]
原料以及口服液配方与实施例1一致，调整口服液制备工艺条件：
[0058]
按照配方表称取各原料，将超纯水与异莲心碱、番茄红素、姜黄素、海葵毒素ⅱ、复合海洋多糖全部混合，在转速600r/min、温度25℃条件下震荡4h，过滤，灭菌，制得口服液。
[0059]
试验例
[0060]
1.1毒性试验
[0061]
根据标准方法《急性全身中毒检查法》ybb00042003
‑
2015进行试验：使用氯化钠注射液和棉籽油对试验样品(实施例1
‑
5以及对比例1
‑
5口服液)浸提，使用腹腔注射法给予试验动物。注射后分别立即、4h、24h、48h和72h观察和记录所有小鼠状态和死亡小鼠数。在注
射后24h、48h和72所有小鼠进行称重。试验过程，全部小鼠均未见死亡，也未出现中毒症状，而且小鼠重量均有增加。试验结果表明，实施例1
‑
5以及对比例1
‑
5口服液对试验小鼠无急性全身毒性。
[0062]
1.2对g422脑胶质瘤抑制活性试验
[0063]
选取icr小鼠，约为6周龄(18
‑
22g)，雌雄各半，共120只。无菌条件下，取右腋皮下接种2周左右的g422肿瘤组织，剪碎，研磨并过筛后，1000rpm离心5min，加5倍体积生理盐水将肿瘤细胞重悬，接种于icr小鼠的右腋皮下，0.2ml/只。次日将荷瘤小鼠随机分为模型组(生理盐水)、阳性对照组(环磷酰胺注射液，江苏恒瑞医药股份有限公司生产)、试验组1
‑
10(分别给予实施例1
‑
5以及对比例1
‑
5口服液)，给药量为25mg/kg。每组10只小鼠，雌雄各半。模型组每日给生理盐水灌胃，阳性对照组和试验组1
‑
10采用腹腔注射方式给药，均连续给药10d后，颈椎脱臼处死小鼠，立即完整剥离瘤块，称量瘤块重量(精确到0.01g)，计算各组瘤块平均重量及肿瘤抑瘤率。
[0064]
肿瘤抑瘤率(％)＝[1
‑
(给药组平均瘤重/模型组平均瘤重)]
×
100％。
[0065][0066][0067]
注:与阳性对照组比较，*p<0.05。
[0068]
结果显示，与阳性对照组相比，实施例1
‑
5以及对比例4
‑
5制的口服液对g422脑胶质瘤具有显著的抑制效果。对比例1
‑
3制的口服液对g422脑胶质瘤的抑制效果有所下降。
[0069]
其中，与实施例相比，对比例1使用等量的莲心碱替换异莲心碱，对比例2没有加入姜黄素，而是添加等量的番茄红素替代姜黄素，对比例3添加等量的海带多糖替换复合海洋多糖，对g422脑胶质瘤抑制效果均明显下降，表明本发明口服液配方具有一定的增效作用，有效提高对g422脑胶质瘤抑制作用。
[0070]
对比例4调整配方中复合海洋多糖优选配比，对g422脑胶质瘤抑制效果也有所下
降，表明本发明优选海洋多糖的复配比例，具有一定增效作用。
[0071]
对比例5未采用本发明口服液制备优选工艺，对g422脑胶质瘤抑制率也有所下降，表明本发明优选口服液制备工艺，进一步提高原料的增效作用。
[0072]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。