甲磺酸帕珠沙星原料药的质量控制方法与流程

1.本发明涉及药品的质量控制领域，特别涉及一种甲磺酸帕珠沙星原料药的质量控制方法。


背景技术：

2.甲磺酸帕珠沙星(pazufloxacinmesylate)是喹诺酮类药物中的一种，其化学名称为(s)
‑
(
‑
)
‑
10
‑
(1
‑
氨基环丙基)
‑9‑
氟
‑3‑
甲基
‑7‑
氧代
‑
2,3
‑
二氢
‑
7h
‑
吡啶[1,2,3
‑
de][1,4]苯并噁嗪
‑6‑
羧酸甲磺酸盐，分子式c
16
h
15
fn2o4·
ch4o3s，化学结构式如下：
[0003][0004]
在实际应用中，甲磺酸帕珠沙星左旋异构体具有抗菌活性，为药效的主要活性成分，而右旋异构体则无活性成分，因此在甲磺酸帕珠沙星药物的研制和生产中将右旋异构体作为杂质，对其进行检测，以控制原料药的质量。


技术实现要素：

[0005]
本技术提供了一种甲磺酸帕珠沙星原料药的质量控制方法，以对甲磺酸帕珠沙星原料药中的右旋异构体进行检测。
[0006]
具体技术方案如下：
[0007]
一种甲磺酸帕珠沙星原料药的质量控制方法，通过高效液相色谱法检测甲磺酸帕珠沙星原料药中的右旋异构体；
[0008]
所述方法包括以下步骤：
[0009]
(1)用流动相配制甲磺酸帕珠沙星原料药的供试品溶液，其中甲磺酸帕珠沙星原料药的浓度为900
‑
1100μg/ml；
[0010]
(2)将所述供试品溶液用流动相稀释n倍，得到对照溶液，n为正整数；
[0011]
(3)取甲磺酸帕珠沙星消旋体，用流动相制成250
‑
350μg/ml的溶液，作为对照品溶液；
[0012]
(4)取对照品溶液10
‑
20μl注入液相色谱仪，记录对照品的色谱图，并根据该色谱图甲磺酸帕珠沙星的左旋异构体和右旋异构体的保留时间；
[0013]
(5)分别取所述供试品溶液和所述对照溶液10
‑
20μl注入液相色谱仪，记录所述供试品溶液和所述对照溶液的色谱图；
[0014]
(6)根据步骤4中确定的右旋异构体的保留时间，在所述供试品溶液的色谱图中确定甲磺酸帕珠沙星的右旋异构体的峰面积s
右
；
[0015]
(7)根据步骤4中确定的左旋异构体的保留时间，在所述对照溶液的色谱图中确定
甲磺酸帕珠沙星的左旋异构体的峰面积s
左
；
[0016]
(8)按以下公式确定甲磺酸帕珠沙星原料药中的右旋异构体的含量：
[0017]
s
右
/(s
左
×
n)
×
100％；
[0018]
其中，色谱条件包括：以体积比为23:77的甲醇和l
‑
苯丙氨酸手性溶液的混合物为流动相；
[0019]
所述l
‑
苯丙氨酸手性溶液的ph值为3.5，且包括1.32g/l的l
‑
苯丙氨酸和1.0g/l的硫酸铜。
[0020]
在本技术的一些实施方式中，所述色谱条件还包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相。
[0021]
在本技术的一些实施方式中，所述色谱条件还包括：检测波长为330nm。
[0022]
在本技术的一些实施方式中，所述色谱条件还包括：等度洗脱。
[0023]
在本技术的一些实施方式中，理论塔板数以甲磺酸帕珠沙星峰计算应不低于2000。
[0024]
在本技术的一些实施方式中，步骤(1)中供试品溶液的浓度为1000μg/ml；
[0025]
步骤(2)中对照溶液的浓度为10μg/ml；
[0026]
步骤(3)中对照品溶液的浓度为300μg/ml。
[0027]
在本技术的一些实施方式中，在步骤(4)之前还包括：
[0028]
取对照溶液20μl注入液相色谱仪中，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10～25％。
[0029]
有益效果
[0030]
本技术提供的甲磺酸帕珠沙星原料药的质量控制方法，通过优化色谱条件，能够准确地对甲磺酸帕珠沙星原料药中的右旋异构体的含量进行检测，为甲磺酸帕珠沙星原料药的质量控制提供了依据。
[0031]
同时，本技术以体积比为23:77的甲醇和l
‑
苯丙氨酸手性溶液的混合物为流动相，采用等度洗脱即可得到理想的分离效果，对液相色谱仪的要求不高，且操作简便。
附图说明
[0032]
图1为实施例1中甲磺酸帕珠沙星消旋体的hplc色谱图；
[0033]
图2a为实施例3中甲磺酸帕珠沙星对照品的hplc色谱图；
[0034]
图2b为实施例3中甲磺酸帕珠沙星供试品溶液的hplc色谱图；
[0035]
图2c为实施例3中甲磺酸帕珠沙星对照溶液的hplc色谱图。
具体实施方式
[0036]
为使本技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面通过具体实施例将对本技术的技术方案进行清楚、完整地描述。
[0037]
需要说明的是，以下实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0038]
实施例1色谱分离度的考察
[0039]
取甲磺酸帕珠沙星消旋体，用流动相制成300μg/ml的考察溶液。
[0040]
取20μl的考察溶液注入到高效液相色谱仪中，记录色谱图，如图1所示；各组分出峰顺序依次为帕珠沙星的左旋异构体和右旋异构体。
[0041]
色谱条件如下：
[0042]
固定相：十八烷基硅烷键合硅胶，
[0043]
流动相：甲醇
‑
l
‑
苯丙氨酸手性溶液(23:77)，
[0044]
检测波长：330nm。
[0045]
其中，l
‑
苯丙氨酸手性溶液的配置方法如下：
[0046]
取l
‑
苯丙氨酸1.32g，硫酸铜1g，加水1000ml溶解后，用氢氧化钠试液调节ph值至3.5，摇匀，即得。
[0047]
分离度(r)的计算：
[0048]
采用以下公式计算分离度：
[0049]
r＝(t
r2
‑
t
r1
)/[(w1 w2)/2]＝(11.327
‑
8.445)
×
2/(1.100 0.960)＝2.80
[0050]
其中：t
r1
为左旋异构体的保留时间；
[0051]
t
r2
为右旋异构体的保留时间；
[0052]
w1为左旋异构体的峰宽；
[0053]
w2为右旋异构体的峰宽。
[0054]
由此可见，左、右旋异构体之间的分离度大于1.5，分离度符合中国药典的规定。
[0055]
实施例2确定最低检测限
[0056]
取空白基线一段，计算其噪音峰高，采用与实施例1相同的色谱条件将甲磺酸帕珠沙星消旋体溶液用流动相稀释适当浓度进样，使其峰高为噪音峰高的3倍，经试验，此时进样浓度为0.122μg/ml，即最低检出量为2.45ng。
[0057]
实施例3甲磺酸帕珠沙星原料药中的右旋异构体的检测
[0058]
采用本技术提供的方法对公司内部自制的三批次甲磺酸帕珠沙星原料药(内部批号分别为0215、0224、0324)进行检测。
[0059]
具体检测过程如下：
[0060]
将甲磺酸帕珠沙星原料药加流动相制成每1ml中含甲磺酸帕珠沙星原料药1000μg的溶液，作为供试品溶液。
[0061]
精密量取供试品溶液1ml，置100ml的量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
[0062]
另取甲磺酸帕珠沙星消旋体，用流动相制成300μg/ml的溶液，作为对照品溶液。
[0063]
按实施例1的色谱条件进行检测：
[0064]
取对照溶液20μl注入液相色谱仪中，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10～25％。
[0065]
取对照品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，各组分出峰顺序依次为甲磺酸帕珠沙星的左旋体和右旋体，确定各自的保留时间。
[0066]
再分别将供试品溶液和对照溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
[0067]
根据右旋异构体的保留时间，在所述供试品溶液的色谱图中量取甲磺酸帕珠沙星的右旋异构体的峰面积s
右
；
[0068]
根据左旋异构体的保留时间，在所述对照溶液的色谱图中量取甲磺酸帕珠沙星的
左旋异构体的峰面积s
左
；
[0069]
按以下公式确定甲磺酸帕珠沙星原料药中的右旋异构体的含量：
[0070]
s
右
/(s
左
×
100)
×
100％。
[0071]
三批次样品的检测结果如下表1所示，批号0125的样品检测过程中的对照品溶液、供试品溶液和对照溶液的谱图，分别如图2a
‑
图2c所示。
[0072]
表1
[0073][0074]
以上所述仅为本技术的优选实施例而已，并不用于限制本技术，对于本领域中的技术人员来说，本技术可以有各种修改和变化。凡在本技术的主旨和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本技术的保护范围之内。