一种用于测定苯并咪唑类兽药残留的萃取材料及其制备方法和应用与流程

本发明涉及磁固相萃取检测，具体涉及一种用于测定苯并咪唑类兽药残留的萃取材料及其制备方法和应用。

背景技术：

1、苯并咪唑类兽药是一类杂环芳香化合物，其特征为苯环与咪唑环稠合，形成苯并咪唑核心骨架。该类化合物具有多种生物活性，包括抗寄生虫、抗病毒、抗真菌、抗肿瘤、抗炎镇痛及抗高血压等作用。在兽药领域，苯并咪唑类兽药主要用作驱虫药，通过靶向寄生虫的微管形成发挥作用。常用的苯并咪唑类兽药包括阿苯达唑、氟苯达唑、甲苯达唑、氧苯达唑和奥苯达唑等。

2、然而，苯并咪唑类兽药在动物健康领域的大量使用引发了对食品中残留问题的关注，因为长期暴露于这些残留物可导致毒性效应，包括胚胎致死、致畸。为降低此类风险，监管机构已对动物源性食品中苯并咪唑类兽药的最大残留限量作出规定。随着食品安全需求的增加，需要更灵敏的检测方法以满足更严格的检测标准。

3、目前，荧光光谱、表面增强拉曼光谱、免疫分析法和生物传感器等检测技术已被用于苯并咪唑类兽药残留的测定。但鉴于食品基质的复杂性及残留水平通常较低，液相色谱-串联质谱（lc-ms/ms）因其高灵敏度、高选择性以及能够区分结构相似类似物的能力，已成为首选方法。尽管如此，开发高效可靠的样品前处理方法分离样品基质并富集目标分析物依旧十分必要。

4、传统样品前处理方法，如溶剂提取和常规固相萃取，目前仍被广泛使用，但存在有机溶剂消耗量大、操作耗时、成本高等缺点。为克服这些局限性，微型化的样品前处理技术，如固相微萃取（spme）、磁性固相萃取（mspe）和quechers法已被越来越多地采用。但是目前的磁性固相萃取中的萃取材料在检测苯并咪唑类兽药残留时吸附效果不好，导致其与液相色谱-串联质谱联用时灵敏度不高，无法精准的检测食物中苯并咪唑类兽药的残留。

技术实现思路

1、为了解决上述技术问题，本发明提供了一种用于测定苯并咪唑类兽药残留的萃取材料及其制备方法和应用，本申请的发明人经过大量实验，找到了一种对苯并咪唑类兽药残留具有萃取能力的磁性复合材料，将制备的磁性复合材料作为萃取剂用于萃取苯并咪唑类兽药残留，并结合lc-ms/ms进行检测，与食品安全国家标准中的检测方案相比，本发明的将检出限降低3个数量级。

2、为此，本发明提供了以下技术方案，

3、第一方面，本发明在可选的实施方式中提供了一种用于测定苯并咪唑类兽药残留的萃取材料的制备方法，包括以下步骤：

4、s1：将磁性sio2/fe3o4粒子分散于混合溶液中，加入氨丙基三乙氧基硅烷搅拌、加热和洗涤，得到aptes/sio2/fe3o4粒子；

5、s2：将所述aptes/sio2/fe3o4粒子分散于乙醇和2,5-二羟基对苯二甲醛的混合物中搅拌，得到dt/aptes/sio2/fe3o4粒子；

6、s3：将所述dt/aptes/sio2/fe3o4粒子分散于乙醇、2,5-二羟基对苯二甲醛和1,3,5-三(4-氨基苯基)苯的混合物中超声分散，然后加入氧化石墨烯和乙酸搅拌、洗涤和干燥，得到所述萃取材料。

7、优选的，在步骤s3中，所述dt/aptes/sio2/fe3o4粒子、1,3,5-三(4-氨基苯基)苯、2,5-二羟基对苯二甲醛和氧化石墨烯的质量比为5：1.4：1：0.8-1.5。

8、优选的，在步骤s1中，所述磁性sio2/fe3o4粒子中sio2和fe3o4的质量比为4：2-2.3；和/或，所述混合溶液为异丙醇和浓氨水的混合溶液，所述异丙醇和浓氨水的体积比为35-40：1；和/或，所述磁性sio2/fe3o4粒子和氨丙基三乙氧基硅烷的质量体积比为2g：1ml；和/或，所述搅拌的温度为30-40℃，时间为0.5-1.5h；和/或，所述加热的温度为80-90℃，时间为5-7h；和/或，所述洗涤采用的溶液为去离子水和乙醇，洗涤的次数为3次。

9、优选的，在步骤s2中，所述aptes/sio2/fe3o4粒子与所述2,5-二羟基对苯二甲醛的质量比为100：17；和/或，所述搅拌的时间为0.5-1.5h。

10、优选的，在步骤s3中，所述氧化石墨烯和乙酸的质量摩尔比为1g：0.0798mol，所述乙酸的摩尔浓度为6mol/l；和/或，所述洗涤采用的溶液为乙醇，洗涤的次数为3次；和/或，所述干燥的方式为真空干燥，温度为45-55℃。

11、第二方面，本发明在可选的实施方式中提供了一种用于测定苯并咪唑类兽药残留的萃取材料，采用上述制备方法制备而成。

12、第三方面，本发明在可选的实施方式中提供了一种上述萃取材料在磁性固相萃取测定苯并咪唑类兽药残留中的应用。

13、优选的，所述应用包括：将含有苯并咪唑类兽药残留的样品和权利要求6所述的萃取材料混合后，进行吸附和洗脱，并对洗脱液进行液相色谱-串联质谱分析。

14、优选的，所述苯并咪唑类兽药为奥芬达唑、芬苯达唑、非班太尔、奥芬达唑砜、阿苯达唑、阿苯达唑亚砜、阿苯达唑砜、阿苯达唑-2-氨基砜、噻苯咪唑酯、噻苯达唑、5-羟基噻苯达唑、氟苯达唑、2-氨基氟苯达唑、甲苯达唑、氨基甲苯达唑、羟基甲苯达唑或氧苯达唑中一种或多种；和/或，所述含有苯并咪唑类兽药残留的样品与萃取材料的体积质量比为10-75ml：30mg，优选为75ml：30mg；和/或，所述含有苯并咪唑类兽药残留的样品的ph值为3.5-4.5，优选为4.0；和/或，所述吸附时间为5min。所述洗脱使用的洗脱液为体积分数为1%的甲酸甲醇溶液，所述洗脱液的体积为1ml；和/或，所述洗脱的时间为10min。

15、本发明和现有技术相比，具有如下有益效果之一：

16、1.本申请的发明人经过大量实验，找到了一种对苯并咪唑类兽药残留具有萃取能力的磁性复合材料，将制备的磁性复合材料作为萃取剂用于萃取苯并咪唑类兽药残留，并结合lc-ms/ms进行检测，与食品安全国家标准中的检测方案相比，本发明的将检出限降低3个数量级。

17、2.本发明对磁性固相萃取和相色谱-串联质谱的实验参数进行了详细的研究，并找到可以大幅度提升检测灵敏度的检测条件。

1.一种用于测定苯并咪唑类兽药残留的萃取材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的用于测定苯并咪唑类兽药残留的萃取材料的制备方法，其特征在于，在步骤s3中，所述dt/aptes/sio2/fe3o4粒子、1,3,5-三(4-氨基苯基)苯、2,5-二羟基对苯二甲醛和氧化石墨烯的质量比为5：1.4：1：0.8-1.5。

3.根据权利要求1所述的用于测定苯并咪唑类兽药残留的萃取材料的制备方法，其特征在于，在步骤s1中，所述磁性sio2/fe3o4粒子中sio2和fe3o4的质量比为4：2-2.3；和/或，

4.根据权利要求1所述的用于测定苯并咪唑类兽药残留的萃取材料的制备方法，其特征在于，在步骤s2中，所述aptes/sio2/fe3o4粒子与所述2,5-二羟基对苯二甲醛的质量比为100：17；和/或，

5.根据权利要求1所述的用于测定苯并咪唑类兽药残留的萃取材料的制备方法，其特征在于，在步骤s3中，所述氧化石墨烯和乙酸的质量摩尔比为1g：0.0798mol，所述乙酸的摩尔浓度为6mol/l；和/或，

6.一种用于测定苯并咪唑类兽药残留的萃取材料，其特征在于，采用权利要求1-5任一项所述制备方法制备而成。

7.一种权利要求6所述萃取材料在磁性固相萃取测定苯并咪唑类兽药残留中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述应用包括：

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述苯并咪唑类兽药为奥芬达唑、芬苯达唑、非班太尔、奥芬达唑砜、阿苯达唑、阿苯达唑亚砜、阿苯达唑砜、阿苯达唑-2-氨基砜、噻苯咪唑酯、噻苯达唑、5-羟基噻苯达唑、氟苯达唑、2-氨基氟苯达唑、甲苯达唑、氨基甲苯达唑、羟基甲苯达唑或氧苯达唑中一种或多种；和/或，

10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述洗脱使用的洗脱液为体积分数为1%的甲酸甲醇溶液，所述洗脱液的体积为1ml；和/或，