一株具有广谱抗真菌活性的生防黑附球菌的制作方法

本发明属于生物，具体涉及一种可以拮抗多种植物真菌病害的黑附球菌en13的鉴定及其应用。

背景技术：

1、植物真菌病害是农业生产上的第一大病害，每年可造成全球超过30％的产量损失，严重制约着我国重要粮食和经济作物的生产。以木霉菌为代表的生防真菌可以在恶劣环境(如高温、干旱)中存活并通过分泌抗菌代谢产物抑制病原真菌的生长和侵染，可以被制作成生物农药用于植物病害的绿色防治。目前用于真菌病害绿色防控的生防真菌主要是木霉菌，其他种类真菌的研究和应用都较为缺乏，导致生防真菌产品的同质化问题严重，因此新种类生防真菌的挖掘是生防真菌资源开发和利用的重要途径。

技术实现思路

1、本发明目的是提供一株对多种植物病原真菌具有抑菌防病效果的黑附球菌(epicoccum nigrum)en13及其应用。

2、本发明的目的可以通过以下方案实现：

3、本发明提供一种黑附球菌en13，分类命名为epicoccum nigrum，于2025年4月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，菌种保藏号为cgmcc no.41886。

4、本发明所述的黑附球菌en13为从猕猴桃叶片中分离得到。

5、本发明所述的黑附球菌en13的培养可以按照本领域的常规方法制备，在一些实施例中，本发明en13的菌丝和分生孢子可以在多种培养基中培养获得，例如玉米汁培养基(ma)、pda培养基、黄豆浆培养基(ba)、胡萝卜培养基(ca)、黑麦培养基(ra)等。在一种优选的实例中，所述培养基为黄豆浆培养基，具体培养方法为将en13的菌丝接种在黄豆浆培养基上，25～32℃培养，培养5天后en13开始产生分生孢子。黄豆浆培养基可以按照本领域的常规方法配置，在一种实施例中，具体配比为黄豆78～82g/l，葡萄糖18～22g/l，琼脂13～17g/l；更具体为黄豆80g/l，葡萄糖20g/l，琼脂15g/l。

6、本发明还提供所述的黑附球菌en13在抑制病菌中的应用。

7、在一些实施例中，本发明所述的病菌为猕猴桃间座壳菌(diaportheactinidiae)、链格孢菌(alternaria alternata)、尖孢镰刀菌(fusarium oxysporum)或稻瘟病菌(magnaporthe oryzae)中的一种或多种。

8、本发明还提供所述的黑附球菌en13或其菌丝在防控或治疗病菌引起的病害中的应用。在一些实施例中，所述的病菌为猕猴桃间座壳菌(diaporthe actinidiae)、链格孢菌(alternaria alternata)、尖孢镰刀菌(fusarium oxysporum)或稻瘟病菌(magnaportheoryzae)中的一种或多种；在一些实施例中，所述的病害为猕猴桃软腐病、烟草赤星病、大豆根腐病或水稻稻瘟病中的一种或多种。

9、本发明所述的应用，具体为将黑附球菌en13直接施于病菌侵染的位置，使黑附球菌en13直接与病菌接触。

10、本发明的技术方案相对于现有技术的优势：

11、本发明所述的黑附球菌en13在植物体具有更好的定殖能力。en13对多种真菌病害的生长和致病都有显著的抑制能力，是一株广谱抗真菌的生防菌株，可以用于多种植物真菌病害的防控。

1.一株黑附球菌en13，分类命名为epicoccum nigrum，菌种保藏号为cgmcc no.41886。

2.含有权利要求1所述的黑附球菌en13的菌丝或分生孢子。

3.权利要求1所述的黑附球菌en13或权利要求2所述的菌丝或分生孢子在抑制病原真菌中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述病原真菌为猕猴桃间座壳菌、链格孢菌、尖孢镰刀菌、稻瘟病菌中的一种或多种。

5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于，具体为将黑附球菌en13的菌丝直接施于病菌位置。

6.权利要求1所述的黑附球菌en13或权利要求2所述的菌丝或分生孢子在防控和治疗病原真菌引起的病害中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述病原真菌为猕猴桃间座壳菌、链格孢菌、尖孢镰刀菌、稻瘟病菌中的一种或多种。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述病害为猕猴桃软腐病、烟草赤星病、大豆根腐病、稻瘟病中的一种或多种。

9.根据权利要求6～8任一项所述的应用，其特征在于，具体为将黑附球菌en13直接施于病菌位置。

10.权利2所述黑附球菌en13菌丝或分生孢子的培养方法，其特征在于，所用的培养基为黄豆浆培养基；优选的，配比为黄豆78～82g/l，葡萄糖18～22g/l，琼脂13～17g/l；更优选为黄豆80g/l，葡萄糖20g/l，琼脂15g/l。