一株具有辅助生殖潜力的卷曲乳杆菌及其在阴道微生态制剂中的应用

本发明涉及医学微生物学与生殖医学，尤其涉及一株具有辅助生殖潜力的卷曲乳杆菌及其在阴道微生态制剂中的应用。

背景技术：

1、女性不孕症已成为全球性的卫生与社会问题，影响着全球12.6%-17.5%的育龄女性。在中国，女性不孕症的流行病学趋势同样严峻，育龄人群的患病率约为12.5%至15%，部分最新白皮书数据显示这一比例可能已上升至18.2%。面对日益增长的生育需求，越来越多女性转向体外辅助生殖技术（assistedreproductivetechnology,art）寻求解决方案。尽管现今art在技术层面已趋于成熟，但较低的临床成功率（约50%）仍是该技术面临的重大挑战。近年来研究证据表明，女性生殖道微生态平衡（尤其是阴道和子宫腔内菌群稳态）是影响妊娠结局和提升art成功率中重要因素。

2、阴道菌群结构可根据主导物种的不同划分为五种主要的群落状态类型（communitystatetypes,cst），csti型以卷曲乳杆菌（lactobacilluscrispatus）占主导优势，被认为最健康的阴道微生态结构，与较低的感染风险和良好的妊娠结局相关，该菌主要通过分泌d-乳酸、过氧化氢（hydrogenperoxid,h2o2）及其表面的s层蛋白（surfacelayerproteins,slp）介导的细胞粘附和免疫调节功能发挥保护作用。惰性乳杆菌（lactobacillusiners）在生殖健康中的作用较模糊；

3、该菌虽属于乳杆菌属，但其基因组中缺乏产生d-乳酸的能力、具有合成胆固醇依赖溶细胞素基因且缺乏slp合成的基因序列，因此以该菌占主导的阴道菌群结构—cstiii型，在应对外界病原体入侵时抵抗能力较弱。由于该型易发生菌群失调，故被认为是亚健康状态。而cstiv型则是典型的病理性状态，以阴道加德纳菌（gardnerellavaginalis）等厌氧性致病菌占主导。阴道加德纳菌通过产生唾液酸酶、形成生物膜以及诱导宿主促炎细胞因子释放，严重损害阴道粘膜屏障，还可上行至子宫影响子宫内膜免疫环境，导致子宫容受性降低；

4、目前，已用于临床的阴道微生态制剂选用的菌株多来源于欧美女性，对中国女性生殖道适配性不足。更重要的是，当前女性友好益生菌制剂大多关注于阴道炎等感染性疾病的辅助治疗，尚未针对辅助生殖领域（如提升子宫内膜容受性、改善妊娠结局）的应用潜力进行系统评价，因此，筛选一株具有中国本土化特征且明确具有辅助生殖潜力的优质卷曲乳杆菌菌株，已成为生殖医学与微生物学领域有待解决的科学问题。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了解决现有技术中目前临床用阴道微生态制剂适配性不足、缺乏针对辅助生殖领域专用菌株的问题，而提出的一株具有辅助生殖潜力的卷曲乳杆菌及其在阴道微生态制剂中的应用。

2、为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

3、一株具有辅助生殖潜力的卷曲乳杆菌，包括菌株保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmcc67863。

4、优选地，所述菌株具有以下生物学特性中的至少一种：

5、快速生长特性：12小时内进入对数生长期；

6、强产酸及产过氧化氢能力；

7、强黏附阴道细胞能力：对siha细胞具有较强的粘附能力；

8、强抑制阴道加德纳菌生物膜能力；

9、高水平表达s层蛋白：其mrna表达量显著高于常规卷曲乳杆菌对照菌株。

10、优选地，所述应用包括制备女性友好阴道微生态制剂中的应用。

11、优选地，所述调节效果包括提高健康小鼠、cstiii型或cstiv型阴道菌群结构模型小鼠中卷曲乳杆菌丰度。

12、优选地，所述应用包括制备改善辅助生殖结局的阴道微生态制剂中的应用。

13、优选地，所述改善辅助生殖结局包括提高妊娠率和子宫容受性。

14、优选地，提高子宫容受性是通过上调同源框a10基因、骨桥蛋白基因和白血病抑制因子基因中的至少一种表达水平实现的。

15、优选地，所述上调hoxa10基因表达的效果显著优于现有卷曲乳杆菌对照菌株，其中在cstiii型模型小鼠中hoxa10上调具有统计学显著性（p=0.044），在cstiv型模型小鼠中hoxa10上调呈显著趋势（p=0.061）。

16、一种阴道微生态制剂，所述生态制剂包含所述卷曲乳杆菌的活性成分。

17、优选地，所述制剂用于改善辅助生殖成功率。

18、与现有技术相比，本发明具备以下优点：

19、本发明通过提供了一株从健康孕中期女性阴道分离、筛选得到的卷曲乳酸杆菌lm25v13，保藏编号为gdmcc67863，该菌株具有良好的阴道定植、阴道微生态调节及生殖保护能力，在健康小鼠、cstiii型及cstiv型阴道模型小鼠中能上调hoxa10的表达，有效改善子宫容受性，显著提高小鼠阴道中卷曲乳杆菌丰度，为用于制备改善辅助生殖结局、提高其成功率的女性友好微生态制剂提供潜力菌株。

1.一株具有辅助生殖潜力的卷曲乳杆菌，其特征在于，所述菌株保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmcc67863。

2.根据权利要求1所述的一株具有辅助生殖潜力的卷曲乳杆菌，其特征在于，所述菌株具有以下生物学特性中的至少一种：

3.根据权利要求1所述一株具有辅助生殖潜力的卷曲乳杆菌在阴道微生态制剂中的应用，其特征在于，所述应用包括制备女性友好阴道微生态制剂中的应用。

4.根据权利要求3所述的一株具有辅助生殖潜力的卷曲乳杆在制备在阴道微生态制剂中的应用，其特征在于，所述调节效果包括提高健康小鼠、cstiii型或cstiv型阴道菌群结构模型小鼠中卷曲乳杆菌丰度。

5.一株具有辅助生殖潜力的卷曲乳杆菌在阴道微生态制剂中的应用，应用于权利要求1中一株具有辅助生殖潜力的卷曲乳杆菌，其特征在于，所述应用包括制备改善辅助生殖结局的阴道微生态制剂中的应用。

6.根据权利要求5所述的一株具有辅助生殖潜力的卷曲乳杆菌在阴道微生态制剂中的应用，其特征在于，所述改善辅助生殖结局包括提高子宫容受性。

7.根据权利要求5所述的一株具有辅助生殖潜力的卷曲乳杆菌在阴道微生态制剂中的应用，其特征在于，提高子宫容受性是通过上调同源框a10基因、骨桥蛋白基因和白血病抑制因子基因中的至少一种表达水平实现的。

8.根据权利要求8所述的一株具有辅助生殖潜力的卷曲乳杆菌在阴道微生态制剂中的应用，其特征在于，所述上调hoxa10基因表达的效果显著优于现有卷曲乳杆菌对照菌株，其中在cstiii型模型小鼠中hoxa10上调具有统计学显著性（p=0.044），在cstiv型模型小鼠中hoxa10上调呈显著趋势（p=0.061）。

9.一种阴道微生态制剂，其特征在于，所述生态制剂包含如权利要求1所述卷曲乳杆菌的活性成分。

10.根据权利要求9所述的一种阴道微生态制剂，其特征在于，所述制剂用于改善辅助生殖成功率。